TRANSFORMASI GENETIK TANAMAN ANGGREK DENDROBIUM PADA
BEBERAPA TINGKAT RAPAT OPTIS Agrobacterium tumefaciens
Oleh: Marry Selvawajayanti (01710045) Agronomy
Dibuat: 2006-02-10 , dengan 3 file(s).
Keywords: Transformasi Genetik, Rapat optis, Agrobacterium tumefaciens, Dendrobium sp,. Efisiensi
INTISARI
Manipulasi gen yang semula dilakukan secara acak, dapat diarahkan pada target yang lebih tepat dengan teknik transformasi genetik. Transformasi genetik dengan menyisipkan gen ke dalam genom tanaman dengan menggunakan Agrobacterium tumefaciens sebagai vektor (perantara) dapat dilakukan pada tanaman anggrek Dendrobium sp. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan efisiensi transformasi genetik anggrek Dendrobium pada beberapa tingkat rapat optis A.tumefaciens. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Universitas Muhammadiyah Malang. Bakteri yang digunakan adalah A.tumefaciens galur EHA105 (pCAMBIA1303), yang mempunyai gen penanda terhadap enzim -glucuronidase (GUS). PLB (Plant Likes Bodies) anggrek Dendrobium dikokultivasi 2 malam tanpa cahaya pada medium VW modifikasi Linn 1986 dengan tambahan 100 μM acetosyringone. PLB dipindahkan pada medium antibiotik I (VW + 250 mg/l Cefotaxime) selama 15 hari. PLB resisten medium antibiotik I disubkultur pada media antibiotik II (VW + 100 mg/l Cefotaxime) selama 15 hari. PLB resisten medium antibiotik II disubkultur kembali ke media regenerasi dan sebagian PLB digunakan untuk uji GUS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa daya regenerasi PLB
tertransformasi mampu mendapatkan 69,97% PLB bertunas pada Optical Density (OD) 0,2 – 0,4 dan 11,71% tunas PLB yang berdaun pada OD 0,6 – 0,8. Optical Density (OD) 0,4 – 0,6
