Efek Antivirus Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap Virus Dengue In Vitro.

12  10  Download (0)

Teks penuh

(1)
(2)
(3)

ABSTRAK

Natasha Ninda Pramalista, G0013172, 2017. Efek Antivirus Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap Virus Dengue In Vitro.

Latar Belakang: Virus Dengue adalah virus yang dapat mengakibatkan infeksi asimtomatik, sampai dengan manifestasi yang berbahaya seperti Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) dan Dengue Shock Syndrome (DSS). Hingga saat ini penanganan kasus DHF hanya sebatas pada terapi simptomatis dan suportif. Oleh karena itu, perlu dikembangkan strategi untuk mengatasinya, salah satunya dengan bahan alam yang berpotensi sebagai antivirus. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antivirus ekstrak etanol rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap virus Dengue secara in vitro.

Metode Penelitian: Subjek dari penelitian ini adalah virus Dengue serotipe 2 strain New Guinea C (DENV2 NGC) yang diinfeksikan ke da lam cell line Huh-7. Penelitian dibagi dalam 2 uji, yaitu uji daya hambat ekstrak terhadap DENV-2 yang ditentukan melalui nilai Inhibitory Concentration 50 (IC50) dengan metode Focus Forming Unit assay dan uji toksisitas ekstrak terhadap sel Huh-7 yang ditentukan melalui nilai Cytotoxic Concentration 50 (CC50) dengan metode MTT assay.

Hasil Penelitian: Ekstrak etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) memiliki nilai IC50 sebesar 16.08 μg/ml, CC50 sebesar 345.39 μg/ml dan Selectivity Index ekstrak adalah 21.48.

Simpulan Penelitian: Ekstrak etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) diduga dapat menghambat replikasi DENV-2 dan tidak toksik terhadap sel Huh-7 dengan nilai IC50, CC50 dan indeks selektivitas masing-masing sebesar 16.08 μg/ml, 345.39 μg/ml dan 21.48.

(4)

v ABSTRACT

Natasha Ninda Pramalista, G0013172, 2017. Antivirus Effect Ethanol Extracts of Red Ginger Rhizome (Zingiber officinale Linn var. rubrum) against Dengue Virus In Vitro.

Background: Dengue virus is a type of virus that causes various reactions, from asymptomatic infection to harmful manifestations, such as dengue hemorrhagic fever (DHF) and dengue shock syndrome (DSS). To this day, the treatments of DHF cases have been limited to symptomatic and supportive therapies only. Therefore, it is necessary to determine new strategies in facing these cases. One of them is by using natural ingredients with antiviral potential. The aim of this study is to understand the antiviral effects of the ethanol extract of red ginger rhizome (Zingiber officinale Linn var. rubrum) against dengue virus in vitro.

Methods : Subject of this research was Dengue virus serotype 2 strain New guinea C (DENV2 NGC) which was infected into Huh-7. This research conducted in 2 parts. First, inhibition test of the extract against DENV-2 assessed by Inhibitory Concentration 50 (IC50) value with Focus Forming Unit assay method. Second, toxicity test of the extracts in Huh – 7 cells was assessed by Cytotoxic Concentration 50 (CC50) value by MTT assay method.

Results: Ethanol extract of Red Ginger rhizome (Zingiber officinale Linn var. Rubrum) had IC50 value about 16.08 μg/ml, CC50 value about 345.39 μg/ml and Selectivity Index extract is 21.48.

Conclusions: Ethanol extract of Red Ginger rhizome (Zingiber officinale Linn var. Rubrum) is considered capable of inhibiting DENV-2 replication and is not toxic to Huh-7 cell line with IC50 score, CC50 score and Selectivity index are each 16.08 μg/ml, 345.39 μg/ml and 21.48 respectively.

(5)

PRAKATA

Puji syukur penulis kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan penyertaan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Antivirus Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap Virus Dengue In Vitro”. Penyusunan skripsi ini tidak dapat terselesaikan tanpa pengarahan, bimbingan, dan dukungan dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Dr. Hartono, dr. M.Si, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian dalam penyusunan skripsi.

2. Kusmadewi Eka Damayanti, dr., M.Gizi, selaku Ketua Tim Skripsi beserta Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian dalam penyusunan skripsi. 3. Afiono Agung Prasetyo, dr., Ph.D., selaku Pembimbing Utama yang telah

memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.

4. Ratih Dewi Yudhani, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Pendamping yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.

5. Leli Saptawati, dr., Sp.MK., selaku Penguji Utama yang telah berkenan untuk menguji dan memberikan kritik serta saran bagi penyusunan skripsi ini.

6. Beti Ernawati D, S.si., Ph.D. dan Hidayati Desti yang telah memberikan kesempatan untuk melakukan penelitian kolaborasi uji antivirus Dengue in vitro di Departemen Mikrobiologi FK UI.

7. Keluarga. Papa, Drs. Joko Pramono dan Mama, Dra. Lilis Sugiarti serta Icha dan Celline atas segala doa dan dukungan yang selalu diberikan setiap waktu. 8. Anindya Tama Teja Diputri, teman seperjuangan satu tim skripsi yang selalu

memberikan motivasi dan dukungan dalam menghadapi segala kendala sehingga dapat menyusun skripsi ini dengan baik.

9. Dwitia Ayu Iswari dan Yani Dwi Pratiwi, teman satu tim skripsi dan asisten mikrobiologi yang luar biasa.

10.Yudhistira, yang selalu menemani disaat suka dan duka serta selalu memberikan doa dan dukungan dalam penyusunan skripsi ini.

11.Laila Ninda, Oktania Imas, Novi Arizha, Gloria Permata dan Claudia Gita atas dukungan dan doa selama penyusunan skripsi.

Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam skripsi ini, oleh karena itu kritik dan saran sangat penulis harapkan dalam penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi pembaca serta menjadi sumbangan bagi ilmu kedokteran selanjutnya

Surakarta, Januari 2017

(6)

vii

4. Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) ... 10

a. Taksonomi ... 10

b. Habitat Jahe Merah ... 11

(7)

d. Kandungan Kimia dan Efek Farmakologis Rimpang Jahe Merah 11

e. Ekstraksi Bahan Alam dengan Pelarut Etanol ... 12

f. Kultur Virus Dengue ... 13

B. Kerangka Pemikiran ... 15

BAB III METODE PENELITIAN... 16

A. Jenis Penelitian ... 16

B. Lokasi Penelitian dan Waktu Penelitian ... 16

C. Subjek Penelitian ... 16

D. Identifikasi Variabel Penelitian ... 17

1. Variabel Bebas ... 17

2. Variabel Terikat ... 17

3. Variabel Luar Terkendali ... 17

4. Variabel Luar Tidak Terkendali ... 17

E. Definisi Operasional Variabel Penelitian ... 17

1. Variabel Bebas ... 17

2. Variabel Terikat ... 18

a. Daya Hambat Ekstrak Herbal terhadap Replikasi Virus Dengue 18 b. Daya Toksik Ekstrak Herbal terhadap Sel Huh-7 ... 19

3. Variabel Luar Terkendali ... 21

4. Variabel Luar Tidak Terkendali ... 21

F. Rancangan Penelitian ... 22

(8)

ix

2. Mapping 96 Well Flat Bottom Plate – Uji Fokus ... 24

3. Percent Viability... 25

4. Mapping 48 Well Flat Bottom Plate-Uji MTT ... 27

G. Alat dan Bahan ... 28

H. Prosedur Penelitian... 30

1. Tahap Persiapan DENV ... 30

a. Isolasi Virus Dengue ... 30

b. Perbanyakan Virus Dengue ... 30

c. Focus Forming Unit Assay... 31

2. Tahap Pengujian Toksisitas dan Penghambatan DENV ... 32

a. Persiapan Sel ... 32

A. Penentuan Nilai Inhibitory Concentration 50 Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum)………. 40

B. Penentuan Nilai Cytotoxic Concentration 50 Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn Var. Rubrum) ………. 42

(9)

BAB V PEMBAHASAN ... 46

A. Inhibitory Concentration 50 (IC50) ... 46

B. Cytotoxic Concentration 50 (CC50) ... 48

C. Selectivity Index (SI) ... 50

D. Kelemahan Penelitian... 51

BAB VI PENUTUP ... 52

A. Simpulan ... 52

(10)

xi

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1. Persentase Infektivitas Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) Terhadap Replikasi

DENV-2 ... 41 Tabel 4.2. Persentase Viabilitas Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah

(11)

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Zingiber officinale Linn. var. rubrum ... 10 Gambar 3.1. Uji Focus Forming Unit (FFU) ... 22 Gambar 3.2. Mapping 96 Well Flat Bottom Plate – Uji FFU ... 24 Gambar 3.3. Uji 3-(4,5-dimetilthiazol-2-il) 2,5-difenil tetrazolium

bromide ... 25

Gambar 3.4. Mapping 48 Well Flat Bottom Plate – Uji MTT ... 27 Gambar 4.1. Rata – Rata Persentase Infektivitas Ekstrak Etanol Rimpang

Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) ... 42 Gambar 4.2. Rata – Rata Persentase Viabilitas Ekstrak Etanol Rimpang

Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) terhadap

(12)

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Figur

Memperbarui...

Referensi

Memperbarui...