AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG
JAHE (
Zingiber officinale
Roscoe) DAN JAHE MERAH (
Zingiber
officinale
Roscoe var.
rubrum
) TERHADAP SEL KANKER
PAYUDARA T47D
SKRIPSI
Oleh :
CAHYA BETTY SULISTYOWATI K 100 070 018
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
ii
AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG
JAHE (
Zingiber officinale
Roscoe) DAN JAHE MERAH (
Zingiber
officinale
Roscoe var.
rubrum
) TERHADAP SEL KANKER
PAYUDARA T47D
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
CAHYA BETTY SULISTYOWATI
K 100 070 018
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
iv
PERSEMBAHAN
Ya Allah, Karya ini hamba persembahkan kepadaMU, semoga Engkau menerimanya sebagai amal
sholeh yang Engkau cintai. Ya Allah, semoga karya ini bermanfaat bagi umatMU . Amin
Ibuku, Ibuku, Ibuku, dan Bapakku atas kasih sayang, bimbingan, arahan, dan cinta yang telah
engkau berikan.
Kakak dan Adik-adikku tercinta.
v
MOTTO
Dan jika mereka beriman dan bertakwa, pahala dari Allah pasti lebih baik, sekiranya mereka tahu.
(Q.S. Al-Baqorah: 103)
Wahai orang-orang yang beriman! Mohonlah pertolongan (kepada Allah) dengan sabar dan salat. Sungguh, Allah beserta
orang-orang yang sabar.
(Q. S. Al-Baqoroh: 153)
vi
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 08 Juli 2011
Peneliti,
vii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya penulisan skripsi yang berjudul UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK
ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE MERAH (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D dapat terselesaikan. Skripsi ini disusun untuk
memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Pelaksanaan dan penulisan skripsi ini tak lepas dari bantuan beberapa pihak. Oleh karena itu dengan kerendahan hati, penulis menyampaikan terima kasih kepada:
1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt. dan Ika Trisharyanti, D.K., M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing dan motivator, yang telah memberikan bimbingan, semangat, dan pengarahan sejak persiapan hingga tersusunnya skripsi ini. 3. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. dan Bapak Peni Indrayudha,
M.Biotech., Apt. selaku penguji selaku penguji skripsi, yang telah memberikan banyak saran dan koreksi.
viii
5. Bapak dan Ibu Dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
6. Keluargaku tercinta, Ibuku Sri Handayani, Bapakku Rubini Handatno yang telah memberikan do’a, kasih sayang, arahan, semangat, dan motivasi.
7. Kakakku Diyan, Adikku Mudrikatun Shodiqoh dan Bayu yang telah memberikan do’a, semangat, harapan, dan keceriaan hingga penelitian selesai.
8. Dina Sudiana yang selalu memberi semangat, keceriaan, bantuan, dukungan, dan kesabarannya.
9. Seseorang yang akan mendampingiku kelak atas semangat dan motivasinya. 10.Teman-teman seperjuangan diantaranya Sholikhah, Anggun, Rika, Iim, Ica,
Tiva, Lia, Nia, Dewi, Florina dan teman-teman tahun angkatan 2007 atas kebersamaan, kerjasama, dan kesabarannya selama penelitian berlangsung “Selalu Semangat dan jaga kekompakan, selamanya kita adalah saudara”.
11.Segenap pihak yang telah membantu dan memberi dukungan yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari sempurna sehingga kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan. Namun, besar harapan penulis semoga sumbangsih yang kecil ini bermanfaat untuk kemajuan ilmu pengetahuan pada umumnya dan ilmu Farmasi pada khususnya.
Wassalamu’alaikum warahmatullohi wabarokatuh
Surakarta, 08 Juli2011
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
PERSEMBAHAN ... iv
MOTTO ... v
DEKLARASI ... vi
KATA PENGANTAR ... vii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiv
DAFTAR SINGKATAN ... xv
INTISARI ... xiv
BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang ... 1
B. Perumusan Masalah ... 3
x
BAB II METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian ... 18
1. Identifikaasi Kandungan Kimia Dengan Kromatografi Lapis Tipis 20 a. Uji Kromatografi Lapis Tipis ... 20
xi
2. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe Merah
... 21
f. Uji Aktivitas Sitotoksik Dengan Metode MTT ... 23
g. Analisis Data ... 24
BAB III HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Identifikasi Kandungan Kimia Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe Merah dengan Metode KLT ... 26
B. Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Rimpang Jahe dan Jahe Merah dengan Metode MTT ... 29
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ... 36
B. Saran ... 36
DAFTAR PUSTAKA ... 37
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Nilai Rf Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Dan Jahe Merah ... 28 Tabel 2. Persentase Sel Hidup Dengan Perlakuan Ekstrak Etanol
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Diagram Sinyal Pertumbuhan Sel Pada Sel Mamalia ... 5 Gambar 2. Jahe (Zingiber officinale Roscoe) ... 8 Gambar 3. Struktur Kandungan Kimia dari Jahe (Zingiber officinale
Roscoe) ... 10 Gambar 4. Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) ... 12 Gambar 5. Reaksi Reduksi MTT Menjadi Formazan Oleh Enzim
Suksinat Dehidrogenase ... 15 Gambar 6. Skema Uji Sitotoksik Dengan Metode MTT ... 25 Gambar 7. Kromatrogram Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Dan Jahe Merah
dengan Pembanding Gingerol ... 28 Gambar 8. Kristal Formazan ... 29 Gambar 9. Fotomikroskopik Sel T47D Setelah Perlakuan Dengan
Ekstrak Etanol Rimpang Jahe 5 µg/mL dan 100 µg/mL
dibandingkan dengan kontrol sel ... 30 Gambar 10. Fotomikroskopik Sel T47D Setelah Perlakuan Dengan
Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah 5 µg/mL dan 100 µg/mL
dibandingkan dengan kontrol sel ... 31 Gambar 11. Grafik Hubungan Konsentrasi Dengan Persentase Sel Hidup
T47D ... 31 Gambar 12. Perbandingan Nilai IC50 Doksorubisin, Ekstrak Etanol
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Pembuatan Larutan Stok ... 44
Lampiran 2. Perhitungan Persentase Sel Hidup ... 46
Lampiran 3.Perhitungan IC50 Jahe ... 47
Lampiran 4. Perhitungan IC50 Jahe Merah ... 48
xv
DAFTAR SINGKATAN
ATCC American Type and Culture Collection
Bcl-2 B cell limphoma-2
CDKI Cyclin-Dependent Kinase Inhibitor COX-2 Cyclooxygenase-2
DMBA 7,12-dimethylbenz-(α)anthracene
DMSO Dimeilsulfoksida ER Estrogen Reseptor FBS Fetal Bovin Serum
HER-2 Hormone Estrogen Reseptor-2 IC50 Inhibitory Concentration 50 KLT Kromatografi Lapis Tipis
L2 Loop-2
L3 Loop-3
MPV Mork Disease Virus
MTT (3[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) NK Natural Killer
NO Nitrit Oksida
PBS Phospate Buffer Saline
RPMI Roawall Park Memorial Institute
RSV Rous Sarcoma Virus
xvi
INTISARI
Rimpang Jahe (Zingiber officinale Rosc.) dan jahe merah (Zigiber officinale
Rosc. Var. Rubrum) telah terbukti mempunyai aktivitas antioksidan, antiinflamasi, antikarsinogenik, antimutagenik, dan antikanker. Rimpang jahe dan jahe merah memiliki kemiripan kandungan kimia antara lain zingiberen, kurkumen, shogaol, gingerol, gingerdion, dan betapellandren. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah terhadap sel kanker payudara T47D dan mengetahui kandungan kimia yang terkandung di dalamnya.
Tahapan penelitian meliputi identifikasi kandungan kimia ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah menggunakan metode KLT dengan fase gerak heksan:dietil eter (4:6) dan dideteksi dengan sinar tampak, UV 254 dan 366 nm serta pereaksi semprot vanillin-H2SO4. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT (3[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide) menggunakan ELISA reader dengan 5 seri konsentrasi ekstrak (5, 10, 25, 50, dan 100 µg/mL) dan 5 seri doksorubisin (10, 25, 50, 100, dan 150 nM) sebagai kontrol positif. Aktivitas sitotoksik dapat diketahui dari nilai IC50 yang diperoeh.
Hasil Uji KLT menunjukkan kandungan kimia ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah adalah gingerol. Kontrol poritif yang digunakan adalah doksorubisin dengan nilai IC50 74,06 nM. Uji aktivitas sitotoksik memperlihatkan bahwa ekstrak etanol rimpang jahe dan jahe merah mampu menghambat pertumbuhan sel kanker payudara T47D dengan nilai IC50 36,85 µg/mL dan 22,39 µg/mL.
