Uji Antidiare Ekstrak Etanol Kulit Batang Sikkam (Bischofia javanica Blume) Dengan Metode Defekasi Pada Tikus

(1)

(2)

Lampiran 2. Gambar tumbuhan sikkam (Bischofia javanica Blume)

pohon sikkam

(3)

Lampiran 3. Gambar simplisia dan serbuk kulit batang sikkam (Bischofia

javanica Blume)

Simplisia batang sikkam

(4)

Lampiran 4. Bagan kerja penelitian

1. Pembuatan ekstrak kulit batang sikkam

serbuk simplisia 1,2 kg

dimaserasi dengan etanol 80%

hingga serbuk terendam

maserat

ampas

maserat

diuapkan dengan

rotary evaporator

dikeringkan dengan

freeze dryer

ekstrak kering 112 g

dibiarkan selama 5

hari terlindung dari cahaya

dicuci dengan etanol 80% dan

dibiarkan selama 2 hari

disaring

ampas

(5)

Lampiran 4. (Lanjutan)

2. Pengujian karakterisasi, skrining dan antidiare

Ekstrak kering 112 g

Karakterisasi simplisia

dan ekstrak, meliputi

penetapan:

Skrining fitokimia

simplisia dan ekstrak

meliputi:

Hasil

_Hasil

Uji antidiare, meliputi

parameter:

-

Saat mulai terjadi

diare

-

Konsistensis feses

-

Frekuensi diare

-

Lama terjadi diare

-

Kadar air

larut asam

- alkaloida

-

flavanoida

-

glikosida

-

tanin

-

saponin

(6)

Lampiran 5. Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia dan ekstrak etanol

kulit batang sikkam

1. Penetapan kadar air

% Kadar air =

volume air (ml)

berat (g)

x 100 %

Kadar air simplisia:

1. % Kadar air =

0,2 ml

Kadar air ekstrak:

1. % Kadar air ekstrak =

0,4 ml

simplisia

ekstrak

Simplisia

ekstrak

simplisia

ekstrak

(7)

Lampiran 5. (Lanjutan)

2. Penetapan kadar sari larut air

% Kadar sari yang larut dalam air =

berat sari (g)

berat (g)

x

100

20 x 100 %

Kadar sari larut air simplisia:

1. % Kadar sari yang larut dalam air =

0,1863 g

5,0047 g

x

Kadar sari larut air ekstrak:

1. % Kadar sari yang larut dalam air =

0,3358 g

simplisia

ekstrak

simplisia

ekstrak

simplisia

Ekstrak

1. 5,0047

5,0047

49,5950

51,9458

49,7813

52,2816

2. 5,0042

5,0042

48,0379

49,9262

48,2047

50,2347

3. 5,0022

5,0039

49,6782

46,2146

49,8504

46,5461

% Kadar sari yang larut dalam air =

= 17,49%

(8)

Lampiran 5. (Lanjutan)

3. Penetapan kadar sari larut etanol

% Kadar sari yang larut dalam etanol =

berat sari (g)

berat (g)

x

100

20 x 100 %

Kadar sari larut etanol simplisia:

1. % Kadar sari yang larut dalam etanol =

0,1161 g

3. % Kadar sari yang larut dalam etanol =

0,1230 g

5,0069 g

x

Kadar sari larut etanol ekstrak:

1. % Kadar sari yang larut dalam etanol =

0,2330 g

simplisia ekstrak

Simplisia

ekstrak

simplisia

ekstrak

1. 5,0052

5,0055

49.5842

49,5937

49,7003

49,8267

2. 5,0053 5,0049

48,0292

48,0401

49,1459

48,2802

3. 5.0069

5,039

49,6795

46,3641

49,8025

46,5895

= 11,84%

% Kadar sari yang larut

dalam etanol rata-rata

% Kadar sari yang larut

dalam etanol rata-rata

(9)

Lampiran 5. (Lanjutan)

4. Penetapan kadar abu total

% Kadar abu total =

berat abu (g)

berat (g)

x 100%

Kadar abu total simplisia:

1. % Kadar abu total =

0,0961 g

Kadar abu total ekstrak:

1. % Kadar abu total =

0,0095 g

simplisia

Ekstrak

simplisia

ekstrak

1. 2,0235

2,0812

0,0961

0,0095

2. 2,0128

2,0352

0,0776

0,0118

3. 2,0132

2,0458

0,0731

0,0083

= 4,07%

% Kadar abu total rata-rata

(10)

Lampiran 5. (Lanjutan)

5. Penetapan kadar abu tidak larut asam

% Kadar abu tidak larut asam =

berat abu (g)

berat (g)

x 100 %

Kadar abu tidak larut asam simplisia:

1. % Kadar abu tidak larut asam =

0,0645 g

Kadar abu tidak larut asam ekstrak:

1. % Kadar abu tidak larut asam =

0,0001 g

simplisia

Ekstrak

Simplisia

ekstrak

1. 2,0235

2,0812

0,1306

0,0001

2. 2,0128

2,0352

0,1226

0,0002

3. 2,0132

2,0476

0,1140

0,0003

= 6,06%

(11)

Lampiran 6. Gambar konsistensi feses tikus

Feses tikus normal

Feses tikus lembek

(12)

Lampiran 7

.

Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan

uji (Mulyono, 1984)

Jenis hewan uji

Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian

i.v.

i.m.

i.p.

s.c.

p.o.

(13)

(14)

Lampiran 10. Gambar alat yang digunakan

Spuit dan oral sonde

(15)

Lampiran 11. Perhitungan konversi dosis

1. Perhitungan konversi dosis loperamid HCl (tablet Imodium

®

Dosis manusia (berat 70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari

Dosis tikus (berat 200 g)

= 0,018 x (16 mg) = 0,2 mg

Maka dosis loperamid HCl untuk tikus = 1 mg/kg bb

) dari manusia

ke tikus :

2. Perhitungan konversi dosis EEKBS dari tikus ke manusia :

Dosis yang digunakan dalam penelitian adalah :

-

75 mg/kg bb atau sama dengan 15 mg/200 g bb

-

100 mg/kg bb atau sama dengan 20 mg/200 g bb

-

125 mg/kg bb atau sama dengan 25 mg/200 g bb

-

150 mg/kg bb atau sama dengan 30 mg/200 g bb

Dosis optimal EEKBS pada tikus adalah 25 mg/200 g bb.

Faktor konversi dosis tikus = 56,0

Dosis manusia = dosis pada tikus x faktor konversi

= 25 mg x 56,0

(16)

Lampiran 12. Perhitungan Kadar Loperamid HCl dari Tablet Imodium

®

Dosis manusia (70 kg) = 2-8 mg dan tidak melebihi 16 mg/hari

Dosis tikus (200 g) setelah dikonversikan = 1 mg/kg bb

Tablet Imodium ditimbang sebanyak 20 tablet (berat = 2400 mg)

20 tablet Imodium mengandung Loperamid HCl sebanyak 40 mg

Loperamid HCl yang digunakan = 15 mg

(17)

Lampiran 13. Perhitungan dosis pemberian ekstrak etanol kulit batang sikkam

(EEKBS) dan loperamid HCl (tablet imodium

®

a.

Perhitungan EEKBS dosis 75 mg/kg bb

)

b.

Perhitungan EEKBS dosis 100 mg/kg bb

Konsentrasi EEKBS = 3 % = 3 g/100 ml = 30 mg/ml

c.

Perhitungan EEKBS dosis 125 mg/kg bb

(18)

d.

Perhitungan EEKBS dosis 150 mg/kg bb

(19)

Lampiran 14. Hasil orientasi dosis bahan uji terhadap saat mulai terjadinya diare

setelah pemberian oleum ricini.

Keterangan:

OR

: oleum ricini

EEKBS

: ekstrak etanol kulit batang sikkam

Grafik hasil orientasi dosis

56,8

Perlakuan

Saat mulai terjadinya diare

(20)

Lampiran 15. Hasil pengamatan saat mulai terjadinya diare setelah pemberian

oleum ricini

Keterangan:

OR

: oleum ricini

(21)

Lampiran 16. Hasil pengamatan konsistensi feses setelah pemberian oleum ricini

EEKBS

: ekstrak etanol kulit batang sikkam

Perlakuan

Diameter serapan

air (cm)

Berat feses

(g)

Perlakuan

Diameter serapan

air (cm)

Berat feses

(g)

Perlakuan

Diameter serapan

air (cm)

(22)

Lampiran 17. Hasil pengamatan frekuensi diare setelah pemberian oleum ricini

Perlakuan

Hewan

Jumlah

Rata-rata

1

2

3

4

5

6 OR + CMC 1% bb

₇

₄₂

_7,0

OR + loperamid

HCl 1 mg/kg bb

3

4

3

2

19 3,17

OR + EEKBS 75

mg/kg bb

5

7

5

6

5

33 5,5

OR +. EEKBS 100

mg/kg bb

5

4

25 4,1

OR + EEKBS 125

mg/kg bb

3

4

3

19 3,17

OR + EEKBS 150

mg/kg bb

2

3

2

3

15 2,5

Keterangan:

OR

: oleum ricini

(23)

Lampiran 18.

Hasil pengamatan lama terjadinya diare setelah pemberian oleum

ricini

Keterangan:

OR

: oleum ricini

EEKBS

: ekstrak etanol kulit batang sikkam

Perlakuan

Hewan

(24)

Lampiran 19. Hasil deskriptif data

Saat mulai terjadi diare

Perlakuan

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max

Susp.Lop HCL1mg/kg

bb 6 1.0067E2 13.26147 5.41397 86.7496 114.5837 87.00 114.00

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 68.1667 14.27469 5.82762 53.1863 83.1470 57.00 88.00

Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 76.8333 13.49691 5.51009 62.6692 90.9975 59.00 87.00

Susp.EEKBS 125

mg/kgbb 6 98.5000 14.03923 5.73149 83.7667 113.2333 89.00 119.00

Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.1867E2 1.50555 .61464 117.0867 120.2466 116.00 120.00

(25)

Lampiran 19. (Lanjutan)

Konsistensi feses (diameter serapan air)

Min Max

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 2.9550 .18960 .07741 2.7560 3.1540 2.70 3.15

Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 2.6083 .14634 .05974 2.4548 2.7619 2.45 2.85

Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 2.2500 .17889 .07303 2.0623 2.4377 2.00 2.45

Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 2.0833 .07528 .03073 2.0043 2.1623 2.00 2.20

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 1.1800 .04517 .01844 1.1326 1.2274 1.13 1.26

Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 1.1133 .03830 .01563 1.0731 1.1535 1.05 1.15

Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 1.0833 .02582 .01054 1.0562 1.1104 1.05 1.10

Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 1.0333 .04082 .01667 .9905 1.0762 1.00 1.10

Total 36 1.1453 .15004 .02501 1.0945 1.1960 1.00 1.60

Konsistensi feses normal

Susp.CMC 1% bb 6 .2333 .05164 .02108 .1791 .2875 .20 .30

Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .1167 .04082 .01667 .0738 .1595 .10 .20

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 .2000 .08944 .03651 .1061 .2939 .10 .30

Susp.EEKBS 100

mg/kg bb 6 .1333 .05164 .02108 .0791 .1875 .10 .20

Susp.EEKBS 125

mg/kg bb 6 .1167 .04082 .01667 .0738 .1595 .10 .20

Susp.EEKBS 150

mg/kg bb 6 .1000 .00000 .00000 .1000 .1000 .10 .10

(26)

Lampiran 19. (Lanjutan)

Konsistensi feses (berat)

Min Max

feses berlendir

Susp.CMC 1%

bb 6 3.1733 .26830 .10953 2.8918 3.4549 2.76 3.50

Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 2.3050 .17604 .07187 2.1203 2.4897 2.09 2.57

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 3.0717 .23575 .09624 2.8243 3.3191 2.77 3.37 feses lembek

Susp.CMC 1%

bb 6 1.5200 .12554 .05125 1.3883 1.6517 1.39 1.67

Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .8733 .07659 .03127 .7930 .9537 .77 .95

Susp.EEKBS 75

mg/kg bb 6 1.1350 .03271 .01335 1.1007 1.1693 1.09 1.18 feses normal

Susp.CMC 1%

bb 6 .2150 .01871 .00764 .1954 .2346 .19 .24

Susp.Lop

HCL1mg/kg bb 6 .1417 .03430 .01400 .1057 .1777 .11 .19

Susp.EEKBS 75

(27)

Lampiran 19. (Lanjutan)

Waktu defekasi

N Mean

Std.

Min Max

Loperamid 1

mg/kg bb 6 1.0533E2 9.26643 3.78300 95.6088 115.0579 90.00 114.00

Loperamid 1

mg/kg bb 6 1.6992E2 8.86237 3.61805 160.6162 179.2172 159.50 183.50

Loperamid 1

(28)

Lampiran 19. (Lanjutan)

Frekuensi diare

Lama terjadi diare

Perlakuan

Loperamid HCl

1 mg/kg bb 6 3.1667 .75277 .30732 2.3767 3.9567 2.00 4.00

Min Max

Loperamid HCl 1

mg/kg bb 6 1.3883E2 17.52046 7.15270 120.4467 157.2199 120.00 161.00

EEKBS 75 mg/kg

bb 6 2.6333E2 19.92653 8.13497 242.4217 284.2449 241.00 293.00

EEKBS 100 mg/kg

bb 6 1.8500E2 14.22674 5.80804 170.0700 199.9300 168.00 208.00

EEKBS 125 mg/kg

bb 6 1.4133E2 18.59749 7.59239 121.8165 160.8502 116.00 163.00

EEKBS 150 mg/kg

bb 6 97.1667 9.94820 4.06134 86.7267 107.6067 84.00 110.00

(29)

Lampiran 20. Hasil Analisis Statistik Anava

Saat mulai terjadi diare

Konsistensi feses (diameter serapan air)

Konsistensi feses (berat)

Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig.

Konsistensi feses berlendir

Konsistensi feses lembek

Konsistensi feses normal

Within Groups 3826.667 30 127.556

Total 19960.556 35 feses lembek

Between feses normal

Between

Groups .087 5 .017 6.240 .000

Within

Groups .083 30 .003

(30)

Waktu defekasi

Frekuensi diare

Lama terjadi diare

Sum of Squares df

Mean

Square F Sig.

Feses berlendir Between Groups 11896.979 5 2379.396 25.093 .000

Within Groups _2844.708 ₃₀ _94.824

Total 14741.688 35

Feses lembek Between Groups 31879.239 5 6375.848 16.310 .000

Within Groups _11727.730 ₃₀ _390.924

Total 43606.969 35

Feses normal Between Groups 87864.250 5 17572.850 210.160 .000

Within Groups 2508.500 30 83.617

Between Groups 175335.806 5 35067.161 135.328 .000

Within Groups _7773.833 ₃₀ _259.128

(31)

Lampiran 21. Hasil Analisis Statistik Duncan

Saat mulai terjadinya diare

Konsistensi feses (diameter serapan air)

berlendir

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb ₆ _98.5000

Susp.Lop HCL1mg/kg bb ₆ _1.0067E2

Susp.EEKBS 150 mg/kg bb 6 1.1867E2

Sig. _.092 _.194 _.742 _1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

Kelompok N

(32)

normal

Konsistensi feses (berat)

berlendir

Susp.EEKBS 125 mg/kgbb 6 2.3750

Susp.EEKBS 100 mg/kg bb ₆ _2.7217

Susp.EEKBS 75 mg/kg bb ₆ _3.0717

Susp.CMC 1% bb ₆ _3.1733

Sig. .050 .542 1.000 .378

Kelompok N

(33)

normal

Waktu defekasi

berlendir

Kelompok N

(34)

normal

Frekuensi diare

Lama terjadi diare

Kelompok N