LAMPIRAN
Lampiran 1. Bagan Alur Pelaksanaan Penelitian
Setrifugasi
Pengenceran Pellet
Pengemasan ο Equilibrasi
Pre-freezing ο Freezing ο Thawing Penampungan
Evaluasi Semen Segar (Makroskopis & Mikroskopis)
Proses Awal Sexing
Semen + BO (1 ml) BSA 5% (2 ml)
BSA 10% (2 ml)
Inkubasi
P1 P2 P3
Pemisahan Sperma X & Y
P2 X Y Pemisahan Sperma X & Y
P1 X Y
Pemisahan Sperma X & Y
P3 X Y Inkubasi pada suhu
35ΛC P1 = 45 menit P2 = 60 menit P3 = 75 menit
Setrifugasi dengan 1800 rpm selama 10 menit
Pengenceran 1ml tris kuning telur/tabung
Peubah yang diamati
β’ Membran Plasma Utuh
β’ Motilitas Spermatozoa
β’ Abnormalitas Spermatozoa Cuci tiap tabung pada
setiap perlakuan dengan 3 ml BO/tabung
Evaluasi Peubah
Lampiran 2. Analisis Data Motilitas Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
---%---
1 37,8 32,8 31,1
2 35,6 33,3 33,3
3 40,5 38,7 26,6
4 38,6 34,6 31,2
5 38,9 33,3 29,7
6 35,9 31,3 25,0
Total 227,3 204,0 176,9
Rata-rata Β± SD 37,88 Β± 1,87 34,0 Β± 2,54 29,48 Β± 3,12 Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (πππ)2
ππ’
= (227,3+204,0+176,9)2 3Γ6
= 20550,4022 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(37,8)2 + (35,6)2 + β¦+ (25,0)2} β 20550,4022
= 310,3778 JK Perlakuan = π12+ β¦..+ ππ‘2
π’ β FK
= (227,3)2+(204,0)2+(176,9)2
6 β 20550,4022
= 212,0811
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 98,2966
Kuadrat Tengah
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 212,0811
3β1
= 106,0405 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 98,2966
3(6β1)
= 6,5531 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 106,0405
6,5531
= 16,1817
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β6,5531
37,8889 x 100%
= 7,58%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 212,08 106,04
16,18 3,68 6,36 Galat (G) 15 98,29 6,55
Total 17 310,38
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah
2. Perhitungan Polinomial Ortogonal
Derajat Polinomial
P1 P2 P3
Jumlah Kuadrat Koefisien
227,30 204,00 176,90
Linier -1 0 1 2
Kuadratik 1 -2 1 6
JK Linier = ((β1Γ227,30)+(0Γ204,00)+(1Γ176,90))2 6Γ2
= 211,68
JK Kuadratik = ((1Γ227,30)+(β2Γ204,00)+(1Γ176,90))2 6Γ6
= 0,4011 Fhit Linier = π½πΎ πΏπππππ
πΎππΊ
= 211,68
6,5531
= 32,3022 Fhit Kuadratik = π½πΎ πΎπ’πππππ‘ππ
πΎππΊ
= 0,4011
6,5531
= 0,0612
Daftar Sidik Ragam
Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01
Perlakuan 2 212,08 106,04 16,18 3,68 6,36 Linier 1 211,68 211,68 32,30(*) 4,54 8,68
Kuadratik 1 0,40 0,40 0,061 4,54 8,68
Galat 15 98,29 6,55
Jumlah 17 552,45 324,67
Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.
Perhitungan Persamaan Linier Ξ±0 = Θ² = 227,3+204+176,9
6Γ3
= 33,79
Ξ±1 = (β1Γ227,3)+(0Γ204)+(1Γ176,9) 6Γ2
= -4,2 P1(T) = Ξ»1 Γ U
= Ξ»1 Γ πβX
π·
= πβ60
15
Y = Ξ±0 + Ξ±1. P1(T)
= 33,79 + (-4,2).πβ60
15
= 33,79 β 0,28x +16,8
= -0,28x + 50,59
Lampiran 3. Analisis Data Motilitas Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
---%---
1 38,7 30,0 32,8
2 33,3 30,0 33,3
3 36,4 32,6 33,3
4 38,9 35,3 27,8
5 37,5 33,3 30,8
6 32,3 30,0 22,9
Total 217,1 191,2 180,9
Rata-rata Β± SD 36,18 Β± 2,79 31,87 Β± 2,23 30,15 Β± 4,13 Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (πππ)2
ππ’
= (217,1+191,2+180,9)2 3Γ6
= 19286,48 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(38,7)2 + (33,3)2 + β¦+ (22,9)2} β 19286,48
= 265,06 JK Perlakuan = π12+ β¦..+ ππ‘2
π’ β FK
= (217,1)2+(191,2)2+(180,9)2
6 β 19286,48
= 115,9633
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 149,0967
Kuadrat Tengah
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 115,9633
3β1
= 57,9817 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 149,0967
3(6β1)
= 9,9398 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 57,9817
9,9398
= 5,8332
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β9,9398
32,7333 x 100%
= 9,63%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 115,96 57,98 5,83 3,63 6,36 Galat (G) 15 149,09 9,94
Total 17 265,06
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah
2. Perhitungan Polinomial Ortogonal
Derajat Polinomial
P1 P2 P3
Jumlah Kuadrat Koefisien
217,1 191,2 180,9
Linier -1 0 1 2
Kuadratik 1 -2 1 6
JK Linier = ((β1Γ217,1)+(0Γ191,20)+(1Γ180,90))2 6Γ2
= 109,2033
JK Kuadratik = ((1Γ217,1)+(β2Γ191,20)+(1Γ180,90))2 6Γ6
= 6,76 Fhit Linier = π½πΎ πΏπππππ
πΎππΊ
= 109,2033
9,9398
= 16,6643 Fhit Kuadratik = π½πΎ πΎπ’πππππ‘ππ
πΎππΊ
= 6,76
9,9398
= 1,0316
Daftar Sidik Ragam
Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01
Perlakuan 2 115,96 57,98 5,83 3,63 6,36 Linier 1 109,20 109,20 16,66(*) 4,54 8,68
Kuadratik 1 6,76 6,76 1,03 4,54 8,68
Galat 15 149,09 9,94 Jumlah 17
Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.
Perhitungan Persamaan Linier Ξ±0 = Θ² = 217,1+191,2+180,9
6Γ3
= 32,77
Ξ±1 = (β1Γ217,1)+(0Γ191,2)+(1Γ180,9) 6Γ2
= -3,02 P1(T) = Ξ»1 Γ U
= Ξ»1 Γ πβX
π·
= πβ60
15
Y = Ξ±0 + Ξ±1. P1(T)
= 32,77 + (-3,02).πβ60
15
= 32,77 β 0,2x + 12
= -0,2x + 44,77
Lampiran 4. Analisis Data Keutuhan Membran Plasma Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (π΄πβππππ)
2 ππ’
= (218,5+193,5+159,5)2 3Γ6
= 18145,125 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(41,0)2 + (41,5)2 + β¦+ (23,0)2} β 18145,125
= 450,125 JK Perlakuan = π1
2+ β¦..+ ππ‘2 π’ β FK
= (218,5)
2+(193,5)2+(159,5)2
6 β 18145,125
= 292,3333
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 157,7917
Kuadrat Tengah
---%---
1 41,0 36,5 26,0
2 41,5 34,5 29,0
3 36,5 32,5 24,5
4 33,5 31,0 28,0
5 33,0 31,5 29,0
6 33,0 27,5 23,0
Total 218,5 193,5 159,5
Rata-rata Β± SD 36,42 Β± 3,97 32,25 Β± 3,09 26,58 Β± 2,49
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 292,3333
3β1
= 146,1667 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 157,7917
3(6β1)
= 10,5194 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 146,1667
10,5194
= 13,8949
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β10,5194
31,75 x 100%
= 10,22%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 292,33 146,17 13,89 3,68 6,36 Galat (G) 15 157,79 10,52
Total 17 450,12
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah
2. Perhitungan Polinomial Ortogonal
Derajat
Polinomial P1 P2 P3
Jumlah Kuadrat Koefisien
218,5 193,5 159,5
Linier -1 0 1 2
Kuadratik 1 -2 1 6
JK Linier = ((β1Γ218,5)+(0Γ193,5)+(1Γ159,5))2 6Γ2
= 290,0833
JK Kuadratik = (1Γ218,5)+(β2Γ193,5)+(1Γ159,5)2 6Γ6
= 2,25 Fhit Linier = π½πΎ πΏπππππ
πΎππΊ
= 290,0833
10,5194
= 27,5759 Fhit Kuadratik = π½πΎ πΎπ’πππππ‘ππ
πΎππΊ
= 2,25
10,5194
= 0,2139
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01
Perlakuan 2 292,33 145,17 13,89 3,68 6,36 Linier 1 290,08 290,08 27,58(*) 4,54 8,68
Kuadratik 1 2,25 2,25 0,21 4,54 8,68
Galat 15 157,79 10,52 Jumlah 17 742,45 448,02
Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.
Perhitungan Persamaan Linier Ξ±0 = Θ² = 218,5+193+159,5
6Γ3
= 31,72
Ξ±1 = (β1Γ218,5)+(0Γ193,5)+(1Γ159,5) 6Γ2
= -4,92 P1(T) = Ξ»1 Γ U
= Ξ»1 Γ πβX
π·
= πβ60
15
Y = Ξ±0 + Ξ±1. P1(T)
= 31,86 + (-4,92).πβ60
15
= 31,72 β 0,33x +19,8
= -0,33x + 51,52
Lampiran 5. Analisis Data Keutuhan Membran Plasma Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
---%---
1 40,0 32,0 30,5
2 39,0 33,0 32,0
3 34,0 31,0 26,0
4 34,0 31,5 24,5
5 33,5 29,0 25,0
6 36,0 34,5 28,5
Total 216,5 191,0 166,5
Rata-rata Β± SD 36,08 Β± 2,80 31,83 Β± 1.86 27,75 Β± 3,08 Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (πππ)2
ππ’
= (216,5+191,0+166,5)2 3Γ6
= 18304,2222 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(40,0)2 + (39,0)2 + β¦+ (28,5)2} β 18145,125
= 312,2778 JK Perlakuan = π12+ β¦..+ ππ‘2
π’ β FK
= (216,5)2+(191,0)2+(166,5)2
6 β 18145,125
= 208,3611
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 103,9167
Kuadrat Tengah
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 208,3611
3β1
= 104,1806 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 103,9167
3(6β1)
= 6,9278 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 104,1806
6,9278
= 15,0381
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β6,9278
31,8889 x 100%
= 8,25%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 208,36 104,18 15,04 3,68 6,36 Galat (G) 15 103,92 6,93
Total 17 312,28
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah
2. Perhitungan Polinomial Ortogonal
Derajat Polinomial
P1 P2 P3
Jumlah Kuadrat Koefisien
216,5 191,0 166,5
Linier -1 0 1 2
Kuadratik 1 -2 1 6
JK Linier = ((β1Γ216,5)+(0Γ191,0)+(1Γ166,5))2 6Γ2
= 208,3333
JK Kuadratik = (1Γ216,5)+(β2Γ191,0)+(1Γ166,5)2 6Γ6
= 0,0278 Fhit Linier = π½πΎ πΏπππππ
πΎππΊ
= 208,3333
10,5194
= 19,8046 Fhit Kuadratik = π½πΎ πΎπ’πππππ‘ππ
πΎππΊ
= 0,0278
10,5194
= 0,00264
Daftar Sidik Ragam
Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01
Perlakuan 2 208,36 104,18 15,04 3,68 6,36 Linier 1 208,33 208,33 19,80(*) 4,54 8,68
Kuadratik 1 0,03 0,03 0,003 4,54 8,68
Galat 15 103,92 6,93 Jumlah 17 521,24 319,47
Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.
Perhitungan Persamaan Linier Ξ±0 = Θ² = 216,5+191+166,5
6Γ3
= 31,89
Ξ±1 = (β1Γ216,5)+(0Γ191,0)+(1Γ166,5) 6Γ2
= -4,17 P1(T) = Ξ»1 Γ U
= Ξ»1 Γ πβX
π·
= πβ60
15
Y = Ξ±0 + Ξ±1. P1(T)
= 31,89 + (-4,17).πβ60
15
= 31,89 β 0,28x +16,8
= -0,28x + 48,69
Lampiran 6. Analisis Data Abnormalitas Primer Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
---%---
1 2,5 2,0 3,0
2 3,5 4,0 2,0
3 1,5 2,0 1,5
4 2,5 1,5 1,5
5 2,0 3,5 3,5
6 1,5 2,5 2,5
Total 13,5 15,5 14,0
Rata-rata Β± SD 2,25 Β± 0,76 2,58 Β± 0,97 2,33 Β± 0,82 Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (πππ)2
ππ’
= (13,5+15,5+14,0)2 3Γ6
= 102,7222 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(2,5)2 + (3,5)2 + β¦+ (2,5)2} β 102,7222
= 11,2778 JK Perlakuan = π12+ β¦..+ ππ‘2
π’ β FK
= (13,5)2+(15,5)2+(14,0)2
6 β 102,7222
= 0,3611
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 10,9167
Kuadrat Tengah
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 0,3611
3β1
= 0,1806 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 10,9167
3(6β1)
= 0,7278 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 0,1806
0,7278
= 0,2481
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β0,7278
2,3889 x 100%
= 35,71%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 0,36 0,18 0,25 3,68 6,36 Galat (G) 15 10,92 0,73
Total 17 11,28
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi tidak berpengaruh nyata terhadap abnormalitas primer spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah
Lampiran 7. Analisis Data Abnormalitas Primer Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing
Ulangan
Perlakuan
P1 P2 P3
---%---
1 3,0 3,5 4,5
2 2,5 2,5 2,5
3 2,5 2,0 2,0
4 1,5 2,0 2,0
5 2,5 2,5 4,0
6 2,5 1,5 3,0
Total 14,5 14,0 18,0
Rata-rata Β± SD 2,42 Β± 0,49 2,33 Β± 0,68 3,0 Β± 1,05 Keterangan:
P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:
1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat
FK = (πππ)2
ππ’
= (14,5+14,0+18,0)2 3Γ6
= 120,125 JK Total = π΄ πππ2 β FK
= {(3,0)2 + (2,5)2 + β¦+ (3,0)2} β 120,125
= 10,625 JK Perlakuan = π12+ β¦..+ ππ‘2
π’ β FK
= (14,5)2+(14,0)2+(18,0)2
6 β 120,125
= 1,5833
JK Galat = JK Total β JK Perlakuan
= 9,0417
Kuadrat Tengah
KT Perlakuan = π½πΎ πππππππ’ππ πβ1
= 1,5833
3β1
= 0,7917 KT Galat = π½πΎ πΊππππ‘
π(π’β1)
= 9,0417
3(6β1)
= 0,6028 Fhit = πΎπ πππππππ’ππ
πΎπ πΊππππ‘
= 0,7917
0,6028
= 1,3134
KK = βπΎππΊ
y
x 100%
= β0,6028
2,5833 x 100%
= 10,22%
Daftar Sidik Ragam Sumber
Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01
Perlakuan (P) 2 1,58 0,79 1,31 3,68 6,36
Galat (G) 15 9,04 0,60
Total 17 10,62
Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi tidak berpengaruh nyata terhadap abnormalitas primer spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah
Lampiran 8. Dokumentasi Penelitian
Penampungan Semen
Menggunakan AV Evaluasi Semen Segar
Proses Separasi
Spermatozoa Filling dan Sealing
Freezing Straw Semen Sexing
Freezing Straw Semen Sexing
Thawing Straw Semen
Sexing Pengamatan Peubah