Lampiran 1. Bagan Alur Pelaksanaan Penelitian

(1)

LAMPIRAN

(2)

Lampiran 1. Bagan Alur Pelaksanaan Penelitian

Setrifugasi

Pengenceran Pellet

Pengemasan  Equilibrasi

Pre-freezing  Freezing  Thawing Penampungan

Evaluasi Semen Segar (Makroskopis & Mikroskopis)

Proses Awal Sexing

Semen + BO (1 ml) BSA 5% (2 ml)

BSA 10% (2 ml)

Inkubasi

P1 P2 P3

Pemisahan Sperma X & Y

P2 X Y Pemisahan Sperma X & Y

P1 X Y

Pemisahan Sperma X & Y

P3 X Y Inkubasi pada suhu

35˚C P1 = 45 menit P2 = 60 menit P3 = 75 menit

Setrifugasi dengan 1800 rpm selama 10 menit

Pengenceran 1ml tris kuning telur/tabung

Peubah yang diamati

• Membran Plasma Utuh

• Motilitas Spermatozoa

• Abnormalitas Spermatozoa Cuci tiap tabung pada

setiap perlakuan dengan 3 ml BO/tabung

Evaluasi Peubah

(3)

Lampiran 2. Analisis Data Motilitas Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

---%---

1 37,8 32,8 31,1

2 35,6 33,3 33,3

3 40,5 38,7 26,6

4 38,6 34,6 31,2

5 38,9 33,3 29,7

6 35,9 31,3 25,0

Total 227,3 204,0 176,9

Rata-rata ± SD 37,88 ± 1,87 34,0 ± 2,54 29,48 ± 3,12 Keterangan:

P1 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 45 menit P2 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 60 menit P3 = Perlakuan Lama Inkubasi selama 75 menit Perhitungan:

1. Perhitungan Analisis Sidik Ragam Jumlah Kuadrat

FK = ^{(𝑇𝑖𝑗)}²

𝑝𝑢

= (227,3+204,0+176,9)² 3×6

= 20550,4022 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(37,8)²+ (35,6)²+ …+ (25,0)²} – 20550,4022

= 310,3778 JK Perlakuan = ^𝑌¹²^{+ …..+ 𝑌}^𝑡²

𝑢 – FK

= ^(227,3)²^+(204,0)²^+(176,9)²

6 – 20550,4022

= 212,0811

JK Galat = JK Total – JK Perlakuan

(4)

= 98,2966

Kuadrat Tengah

KT Perlakuan = 𝐽𝐾 𝑃𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛 𝑝−1

= ^212,0811

3−1

= 106,0405 KT Galat = ^{𝐽𝐾 𝐺𝑎𝑙𝑎𝑡}

𝑝(𝑢−1)

= ^98,2966

3(6−1)

= 6,5531 Fhit = 𝐾𝑇 𝑃𝑒𝑟𝑙𝑎𝑘𝑢𝑎𝑛

𝐾𝑇 𝐺𝑎𝑙𝑎𝑡

= ^106,0405

6,5531

= 16,1817

KK = ^{√𝐾𝑇𝐺}

y

x 100%

= ^√6,5531

37,8889 x 100%

= 7,58%

Daftar Sidik Ragam Sumber

Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0.01

Perlakuan (P) 2 212,08 106,04

16,18 3,68 6,36 Galat (G) 15 98,29 6,55

Total 17 310,38

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah

(5)

2. Perhitungan Polinomial Ortogonal

Derajat Polinomial

P1 P2 P3

Jumlah Kuadrat Koefisien

227,30 204,00 176,90

Linier -1 0 1 2

Kuadratik 1 -2 1 6

JK Linier = ((−1×227,30)+(0×204,00)+(1×176,90))² 6×2

= 211,68

JK Kuadratik = ((1×227,30)+(−2×204,00)+(1×176,90))² 6×6

= 0,4011 Fhit Linier = ^{𝐽𝐾 𝐿𝑖𝑛𝑖𝑒𝑟}

𝐾𝑇𝐺

= ^211,68

6,5531

= 32,3022 Fhit Kuadratik = 𝐽𝐾 𝐾𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑡𝑖𝑘

𝐾𝑇𝐺

= ^0,4011

6,5531

= 0,0612

Daftar Sidik Ragam

(6)

Sumber

Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01

Perlakuan 2 212,08 106,04 16,18 3,68 6,36 Linier 1 211,68 211,68 32,30(*) 4,54 8,68

Kuadratik 1 0,40 0,40 0,061 4,54 8,68

Galat 15 98,29 6,55

Jumlah 17 552,45 324,67

Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.

Perhitungan Persamaan Linier α0 = Ȳ = 227,3+204+176,9

6×3

= 33,79

α1 = (−1×227,3)+(0×204)+(1×176,9) 6×2

= -4,2 P1(T) = λ1 × U

= λ1 × ^𝑋−X

𝐷

= ^𝑋−60

15

Y = α0 + α1. P1(T)

= 33,79 + (-4,2).^𝑋−60

15

= 33,79 – 0,28x +16,8

= -0,28x + 50,59

(7)

Lampiran 3. Analisis Data Motilitas Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

---%---

1 38,7 30,0 32,8

2 33,3 30,0 33,3

3 36,4 32,6 33,3

4 38,9 35,3 27,8

5 37,5 33,3 30,8

6 32,3 30,0 22,9

Total 217,1 191,2 180,9

FK = ^{(𝑇𝑖𝑗)}²

𝑝𝑢

= (217,1+191,2+180,9)² 3×6

= 19286,48 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(38,7)²+ (33,3)²+ …+ (22,9)²} – 19286,48

= 265,06 JK Perlakuan = ^𝑌¹²^{+ …..+ 𝑌}^𝑡²

𝑢 – FK

= ^(217,1)²^+(191,2)²^+(180,9)²

6 – 19286,48

= 115,9633

(8)

= 149,0967

Kuadrat Tengah

= ^115,9633

3−1

𝑝(𝑢−1)

= ^149,0967

3(6−1)

= ^57,9817

9,9398

= 5,8332

y

x 100%

= ^√9,9398

32,7333 x 100%

= 9,63%

Perlakuan (P) 2 115,96 57,98 5,83 3,63 6,36 Galat (G) 15 149,09 9,94

Total 17 265,06

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah

(9)

Derajat Polinomial

P1 P2 P3

217,1 191,2 180,9

Linier -1 0 1 2

Kuadratik 1 -2 1 6

JK Linier = ((−1×217,1)+(0×191,20)+(1×180,90))² 6×2

= 109,2033

JK Kuadratik = ((1×217,1)+(−2×191,20)+(1×180,90))² 6×6

𝐾𝑇𝐺

= ^109,2033

9,9398

𝐾𝑇𝐺

= ^6,76

9,9398

= 1,0316

(10)

Sumber

Keragaman Db JK KT Fhitung F0,05 F0,01

Kuadratik 1 6,76 6,76 1,03 4,54 8,68

Galat 15 149,09 9,94 Jumlah 17

Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap motilitas spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.

Perhitungan Persamaan Linier α0 = Ȳ = 217,1+191,2+180,9

6×3

= 32,77

α1 = (−1×217,1)+(0×191,2)+(1×180,9) 6×2

= -3,02 P1(T) = λ1 × U

= λ1 × ^𝑋−X

𝐷

= ^𝑋−60

15

Y = α0 + α1. P1(T)

= 32,77 + (-3,02).^𝑋−60

15

= 32,77 – 0,2x + 12

= -0,2x + 44,77

Lampiran 4. Analisis Data Keutuhan Membran Plasma Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

(11)

Keterangan:

FK = ^(𝛴^𝑗−𝑗^𝑌^𝑖𝑗⁾

2 𝑝𝑢

= (218,5+193,5+159,5)² 3×6

= 18145,125 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(41,0)²+ (41,5)²+ …+ (23,0)²} – 18145,125

= 450,125 JK Perlakuan = ^𝑌¹

2+ …..+ 𝑌_𝑡² 𝑢 – FK

= ^(218,5)

2+(193,5)²+(159,5)²

6 – 18145,125

= 292,3333

= 157,7917

Kuadrat Tengah

---%---

1 41,0 36,5 26,0

2 41,5 34,5 29,0

3 36,5 32,5 24,5

4 33,5 31,0 28,0

5 33,0 31,5 29,0

6 33,0 27,5 23,0

Total 218,5 193,5 159,5

Rata-rata ± SD 36,42 ± 3,97 32,25 ± 3,09 26,58 ± 2,49

(12)

= ^292,3333

3−1

𝑝(𝑢−1)

= ^157,7917

3(6−1)

= ^146,1667

10,5194

= 13,8949

y

x 100%

= ^√10,5194

31,75 x 100%

= 10,22%

Total 17 450,12

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah

(13)

Derajat

Polinomial P1 P2 P3

218,5 193,5 159,5

Linier -1 0 1 2

Kuadratik 1 -2 1 6

JK Linier = ((−1×218,5)+(0×193,5)+(1×159,5))² 6×2

= 290,0833

JK Kuadratik = (1×218,5)+(−2×193,5)+(1×159,5)² 6×6

𝐾𝑇𝐺

= ^290,0833

10,5194

𝐾𝑇𝐺

= ^2,25

10,5194

= 0,2139

(14)

Kuadratik 1 2,25 2,25 0,21 4,54 8,68

Galat 15 157,79 10,52 Jumlah 17 742,45 448,02

Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.

6×3

= 31,72

α1 = (−1×218,5)+(0×193,5)+(1×159,5) 6×2

= -4,92 P1(T) = λ1 × U

= λ1 × ^𝑋−X

𝐷

= ^𝑋−60

15

Y = α0 + α1. P1(T)

= 31,86 + (-4,92).^𝑋−60

15

= 31,72 – 0,33x +19,8

= -0,33x + 51,52

(15)

Lampiran 5. Analisis Data Keutuhan Membran Plasma Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

---%---

1 40,0 32,0 30,5

2 39,0 33,0 32,0

3 34,0 31,0 26,0

4 34,0 31,5 24,5

5 33,5 29,0 25,0

6 36,0 34,5 28,5

Total 216,5 191,0 166,5

Rata-rata ± SD 36,08 ± 2,80 31,83 ± 1.86 27,75 ± 3,08 Keterangan:

FK = ^{(𝑇𝑖𝑗)}²

𝑝𝑢

= (216,5+191,0+166,5)² 3×6

= 18304,2222 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(40,0)²+ (39,0)²+ …+ (28,5)²} – 18145,125

= 312,2778 JK Perlakuan = ^𝑌¹²^{+ …..+ 𝑌}^𝑡²

𝑢 – FK

= ^(216,5)²^+(191,0)²^+(166,5)²

6 – 18145,125

= 208,3611

(16)

= 103,9167

Kuadrat Tengah

= ^208,3611

3−1

𝑝(𝑢−1)

= ^103,9167

3(6−1)

= ^104,1806

6,9278

= 15,0381

y

x 100%

= ^√6,9278

31,8889 x 100%

= 8,25%

Total 17 312,28

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah

(17)

Derajat Polinomial

P1 P2 P3

216,5 191,0 166,5

Linier -1 0 1 2

Kuadratik 1 -2 1 6

JK Linier = ((−1×216,5)+(0×191,0)+(1×166,5))² 6×2

= 208,3333

JK Kuadratik = (1×216,5)+(−2×191,0)+(1×166,5)² 6×6

𝐾𝑇𝐺

= ^208,3333

10,5194

𝐾𝑇𝐺

= ^0,0278

10,5194

= 0,00264

(18)

Sumber

Kuadratik 1 0,03 0,03 0,003 4,54 8,68

Galat 15 103,92 6,93 Jumlah 17 521,24 319,47

Keterangan: Tanda (*) menunjukkan perlakuan berpengaruh sangat nyata terhadap keutuhan membran plasma spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah mengikuti garis linier.

6×3

= 31,89

α1 = (−1×216,5)+(0×191,0)+(1×166,5) 6×2

= -4,17 P1(T) = λ1 × U

= λ1 × ^𝑋−X

𝐷

= ^𝑋−60

15

Y = α0 + α1. P1(T)

= 31,89 + (-4,17).^𝑋−60

15

= 31,89 – 0,28x +16,8

= -0,28x + 48,69

Lampiran 6. Analisis Data Abnormalitas Primer Spermatozoa Fraksi Atas Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

(19)

---%---

1 2,5 2,0 3,0

2 3,5 4,0 2,0

3 1,5 2,0 1,5

4 2,5 1,5 1,5

5 2,0 3,5 3,5

6 1,5 2,5 2,5

Total 13,5 15,5 14,0

FK = ^{(𝑇𝑖𝑗)}²

𝑝𝑢

= (13,5+15,5+14,0)² 3×6

= 102,7222 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(2,5)²+ (3,5)²+ …+ (2,5)²} – 102,7222

= 11,2778 JK Perlakuan = ^𝑌¹²^{+ …..+ 𝑌}^𝑡²

𝑢 – FK

= ^(13,5)²^+(15,5)²^+(14,0)²

6 – 102,7222

= 0,3611

= 10,9167

Kuadrat Tengah

(20)

= ^0,3611

3−1

𝑝(𝑢−1)

= ^10,9167

3(6−1)

= ^0,1806

0,7278

= 0,2481

y

x 100%

= ^√0,7278

2,3889 x 100%

= 35,71%

Total 17 11,28

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi tidak berpengaruh nyata terhadap abnormalitas primer spermatozoa fraksi atas Kambing Peranakan Etawah

(21)

Lampiran 7. Analisis Data Abnormalitas Primer Spermatozoa Fraksi Bawah Kambing Peranakan Etawah Post Thawing

Ulangan

Perlakuan

P1 P2 P3

---%---

1 3,0 3,5 4,5

2 2,5 2,5 2,5

3 2,5 2,0 2,0

4 1,5 2,0 2,0

5 2,5 2,5 4,0

6 2,5 1,5 3,0

Total 14,5 14,0 18,0

FK = ^{(𝑇𝑖𝑗)}²

𝑝𝑢

= (14,5+14,0+18,0)² 3×6

= 120,125 JK Total = 𝛴 𝑌_𝑖𝑗² – FK

= {(3,0)²+ (2,5)²+ …+ (3,0)²} – 120,125

= 10,625 JK Perlakuan = ^𝑌¹²^{+ …..+ 𝑌}^𝑡²

𝑢 – FK

= ^(14,5)²^+(14,0)²^+(18,0)²

6 – 120,125

= 1,5833

(22)

= 9,0417

Kuadrat Tengah

= ^1,5833

3−1

𝑝(𝑢−1)

= ^9,0417

3(6−1)

= ^0,7917

0,6028

= 1,3134

y

x 100%

= ^√0,6028

2,5833 x 100%

= 10,22%

Perlakuan (P) 2 1,58 0,79 1,31 3,68 6,36

Galat (G) 15 9,04 0,60

Total 17 10,62

Kesimpulan: Perlakuan lama inkubasi tidak berpengaruh nyata terhadap abnormalitas primer spermatozoa fraksi bawah Kambing Peranakan Etawah

(23)

Lampiran 8. Dokumentasi Penelitian

Penampungan Semen

Menggunakan AV Evaluasi Semen Segar

Proses Separasi

Spermatozoa Filling dan Sealing

Freezing Straw Semen Sexing

(24)

Thawing Straw Semen

Sexing Pengamatan Peubah

(25)