METODE UJI HIPERTENSI PADA HEWAN COBA. Caroline Diana Agustin

(1)

Caroline

Diana Agustin

METODE UJI HIPERTENSI

PADA HEWAN COBA

(2)

• _{Hipertensi pd hewan memiliki banyak kesamaan dengan} hipertensi pd manusia.

• _{Kebanyakan uji hipertensi pd hewan dikembangkan dengan} menggunakan faktor-faktor etiologis yang dianggap berperan dalam hipertensi pd manusia spt asupan garam, hiperaktivitas sistem renin angiotensin-aldosteron dan faktor-faktor genetik. • _{Karena regulasi tekanan darah bersifat multifaktorial, efektivitas}

agen antihipertensi pada suatu model tidak berarti bahwa mekanisme aksi agen tsb dalam model tsb berkaitan dgn patogenesis peningkatan tekanan darah.

(3)

Model hewan yang ideal untuk hipertensi harus memenuhi kriteria sbb:

 Harus dpt dilakukan pd hewan kecil.

 Harus mudah dilakukan dan reprodusibel scr seragam

 Sifat antihipertensi potensial dr agen antihipertensi harus dpt diprediksi

 Harus mengkonsumsi jumlah minimal dr bahan uji

(4)

Tipe-tipe model hewan untuk hipertensi:

1. Renovascular hypertension 2. Dietary hypertension 3. Endocrine hypertension 4. Neurogenic hypertension 5. Psychogenic hypertension 6. Genetic hypertension 7. Other models

(5)

Renovascular hypertension

 Merupakan model hipertensi yang paling umum digunakan.

 Pd hipertensi renovaskular, sistem renin angiotensin-aldosteron berperan penting.

 Scr eksperimental, hipertensi renal diakibatkan oleh konstriksi arteri ginjal, yang mengaktivasi sistem renin

(6)

Metode Induksi Hipertensi Renovaskular

1. Metode Goldblatt

2. Hipertensi diinduksi oleh kompresi eksternal parenkim ginjal 3. Coarctation of aorta

4. Reduced renal mass

(7)

Metode Goldblatt



Two kidney one clip (2K1C) hypertension:

Arteri ginjal dikonstriksi pada satu sisi saja, mengakibatkan peningkatan tekanan darah secara terus-menerus karena

peningkatan aktivitas renin plasma, yg berakibat meningkatkan angiotensin-II yang bersirkulasi, yg mrpkn vasokonstrikstor poten. Pada tahap ini, hipertensi bersifat renin-angiotensin dependent. Setelah 6 minggu, angiotensin-II yang meningkat melepaskan aldosteron dari korteks adrenal menyebabkan retensi garam dan air. Retensi garam dan air mengakibatkan penurunan produksi renin. Pada tahap ini hipertensi bersifat volume dependent. Peningkatan tekanan darah dan aktivitas renin kembali normal dgn melepas klip atau menghilangkan ginjal yang digunakan.

(8)

Cont’d

 One kidney one clip (1K1C) hypertension:

Konstriksi arteri ginjal dilakukan pada satu sisi dan ginjal

kontralateral dihilangkan. Terjadi peningkatan tekanan darah dlm beberapa jam. Karena tidak ada ginjal lainnya, tdk terjadi pressure diuresis dan natriuresis, shg tjd retensi garam dan air dengan

cepat. Aktivitas renin plasma umumnya normal. Hipertensi bersifat volume dependent.

 Two kidney two clip (2K2C) hypertension:

Konstriksi aorta atau tiap arteri ginjal. Terdapat jaringan ginjal iskemik yang mensekresikan renin shg mengakibatkan

(9)

Hipertensi diinduksi oleh kompresi eksternal

parenkim ginjal

a. Page hypertension

b. Grollman hypertension

1. Two kidney one ligature (2K1L) 2. One kidney one ligature (1K1L)

(10)

Page Hypertension

Selembar cellophane diletakkan di sekitar ginjal dan dipertahankan posisinya dengan benang bedah diikatkan secara longgar di sekitar hilus ginjal. Lapisan fibrokolagen terbentuk di sekitar ginjal dalam 3-5 hari krn reaksi thd bahan asing. Lapisan ini menekan parenkim ginjal shg menyebabkan penurunan tekanan vaskuler ginjal. Hal ini menyebabkan membesarnya volume ekstraseluler yg

mengakibatkan peningkatan resistensi perifer dan pd akhirnya meningkatkan tekanan darah.

(11)

Grollman hypertension

Dapat dilakukan pd anjing, kelinci, dan tikus.  Two kidney one ligature (2K1L)

Ligature diaplikasikan pd satu ginjal dan ginjal kontralateral tidak diapa-apakan.

 One kidney one ligature (1K1L)

Ligature diaplikasikan pd satu ginjal dan ginjal kontralateral dihilangkan

(12)

Coarctation of aorta

Koarktasi dpt dilakukan pd atas arteri ginjal, diantara arteri ginjal dan superior mesenteric arteries atau diantara 2 arteri ginjal

dengan arteri kanan diatas dan arteri kiri dibawah lokasi

koarktasi. Peningkatan tekanan darah serupa dg model 2K1C dapat dihasilkan dengan karet pada aorta abdominal bersamaan dengan konstriksi arteri ginjal kanan selama 8 minggu. Koarktasi dpt dilanjutkan dengan nefroktomi unilateral.

(13)

Reduced Renal Mass

Reduksi jaringan ginjal hingga 5/6 ablasi massa ginjal menyebabkan hipertensi. Pada metode ini, ginjal kanan dihilangkan dan 2-3 cabang arteri ginjal kiri diikat untuk menyebabkan infark sekitar 2/3 ginjal kiri.

(14)

Dietary Hypertension

 Hipertensi asupan tinggi garam dilakukan pd tikus, kelinci dan ayam dengan mengganti air minum dengan 1-2% NaCl selama 9-12 bulan.

 Asupan tinggi garam dengan nefroktomi unilateral

mengakibatkan hipertensi dipercepat dalam 3-4 minggu pd anjing. Air minum diganti dengan salin fisiologis selama 3

(15)

Endocrine hypertension

1. Mineralocorticoid induced hypertension 2. Adrenal regeneration hypertension

(16)

Mineralocorticoid induced hypertension

 Untuk menyebabkan hipertensi, tikus dengan bobot sekitar 100 g diberikan makanan kaya NaCl dan air minumnya diganti dengan larutan 2% NaCl ad libitum. Setelah mencapai bobot 250 g,

diberikan deoxycorticosterone acetate (DOCA) yang dilarutkan dlm minyak biji wijen pada dosis 10 mg/kg, dua kali seminggu selama 43 hari.

 Pada metode lain, dilakukan nefroktomi unilateral, lalu seluruh tikus diberikan injeksi ampicillin (10 mg/kg IM) setiap hari

selama 5 hari dan diberikan neosporin-H scr lokal untuk

mencegah infeksi. Seminggu setelahnya, diinjeksi DOCA (25 mg/kg/minggu, SK selama 5 minggu) yg dilarutkan dalam

minyak biji kapas. Larutan NaCl 1,0% diberikan sbg pengganti air minum secara ad libitum.

(17)

Adrenal regeneration hypertension

 Dilakukan nefroktomi unilateral pd tikus untuk menyebabkan hipertensi, diikuti dgn penghilangan kelenjar adrenal kanan dan enukleasi kelenjar adrenal kiri. Enukleasi dilakukan dengan

membuat insisi kecil pada kapsul kelenjar adrenal dimana massa jaringan glandular diekstrusi dengan tekanan denagan curved forceps. Air minum diganti dengan 1% salin. Hipertensi terjadi saat regenerasi kelenjar adrenal dalam 2 minggu.

(18)

Neurogenic hypertension

 Denervation of sinoaortic baroreceptors:

Merupakan model hipertensi neurogenik yang paling sering digunakan. Pada kelinci, sinus karotid kanan dihilangkan bersama dgn 2 cm segmen saraf simpatis serviks kanan dan saraf depresor sedangkan sinus karotid kiri dapat dihilangkan belakangan.

 Stimulasi elektrik atau kimiawi pd daerah yang berbeda pd otak Menyebabkan tjdnya hipertensi pd tikus.

(19)

Psychogenic hypertension

 Borderline hypertensive rats (BHR)digunakan dlm hipertensi psikogenik. BHR dengan sesi harian stimulasi jet udara dgn durasi pendek (20 menit) maupun durasi panjang (120 menit) mengalami hipertensi dalam 2 minggu dibandingkan dengan kontrol. Hewan uji dgn durasi sesi stress harian 120 menit memiliki tekanan darah sistolik yang lebih tinggi secara

signifikan dibandingakn dengan kelompok dgn durasi sesi stress harian 20 menit.

(20)

Genetic hypertension

 Spontaneous hypertensive rat (SHR) dikembangkan dari

meticulous genetic inbreeding yang secara seragam menghasilkan 100% keturunan dengan hipertensi alami. Pada SHR, tekanan darah meningkat secara bertahap sampai umur 12 minggu. Pada SHR jantan yang tidak dikontrol, tekanan arteri rata2 sekitar

190-200 mmHg dibandingkan dengan 115-130 mmHg pada tikus normal.

(21)

Model lainnya

 Hipertensi terkait obesitas

 Hipertensi yang diinduksi agen kolinomimetik  Hipertensi yang diinduksi Angiotensin-II

 Hipertensi yang diinduksi kadmium

 Hipertensi yang diinduksi inhibisi nitrit oksida kronis  Model tikus transgenik

(22)

Cara pengukuran tekanan darah

 Pada eksperimen akut, hewan uji umumnya dianestesi dan tekanan darah diukur selama eksperimen dengan mengekspos

arteri yang dapat diakses dan memasukkan kanula yang terhubung manometer merkuri atau pressure transducer.

 Anestesi hanya digunakan bila imobilisasi hewan uji diperlukan untuk mengukur tekanan darah.

 Anestesi menyebabkan penentuan tekanan darah lebih mudah dilakukan dan lebih akurat namun penggunaan anestesi

(23)

Cont’d

 Anestesi dilaporkan merubah tekanan darah dan refleks kardiovaskular,

 Tekanan darah dpt diukur dlm keadaan tanpa anestesi, dimana tingkat stress pd hewan uji harus diupayakan seminimal

(24)

REFERENSI

 Badyal, D.K., H. Lata & A.P. Dadhich. 2003. Animal models of hypertension and effect of drugs. Indian Journal of

Pharmacology 35:349-362

 Waleska, C.D. & M.E. Silva. 2011. Animal models for the study of arterial hypertension. Journal of Bioscience 36(4):731-737.  Matthew Barker. 2008. Phenotypic Expression of Hypertension

in Rodent Models through Dietary Manipulation. Research Diets, Inc.