SKRINING EFEKTIVITAS EKSTRAK: SAMBILOTO (Andrographis paniculata), SERAI (Cymbopogon citrates), dan MENIRAN (Phyllanthus niruri L.) SEBAGAI ANTIVIRUS DENGUE SECARA IN VITRO.

(1)

SKRINING EFEKTIVITAS EKSTRAK: SAMBILOTO (Andrographis paniculata), SERAI (Cymbopogon citrates), dan MENIRAN(Phyllanthus niruri

L.) SEBAGAI ANTIVIRUS DENGUE SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

SARAH LUTHFIANI G0012205

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET

(2)

(...)

Surakarta, ... Ketua Program Studi PENGESARAN SKRlPSI

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dcnganjudul: S..mbiloto

(Antlrog

r

ap

l

ri,p

·

a

11i

c

ul.at

u),

Sera.i

(Cy

m

bo

S

p

k

og

r

1

ip

>

s

1i

t

c

d

l

e

t

r

n

u

g

l

a

c

n

s)

jduadnulM:Seanmirabnilo

(

P

to

h

y

(A

llu

nnd

t

rho

u

g

s

ra

n

p

lr

h

u

is

r

ip

L

an

)

isceublaagtau)i,ASnertiaviirus (Cymbopogon citrates) danDMenein:uireasnec(aPrahy/1ll1an

V

t

i

h

t

r

u

o

s niruriL.)sebagai Antivirus

Dengue secaraIn Vitro

Sa

rah

Luthfi

an

i,

N

IM: 00

012

20

5

,

T

a

b

un:

2

0

1

5

Sarah Luthfiani, NIM: G0012205, Tahun: 2015

T

e

l

ah

diuji

dan

suJah

d

i:.ahk

ao di badapan

Dew

a

n

Peoguji

S

kri

ps

i

Tela1h-'adkiuliitiadsaKnesduodkatherdanisUahnkivaenrsdiitahsaSdeabpealnasDMewaraentSPuemngkuarjtiaSkripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

Pi!d

a hari Jum111, tan

yga

l I

l

Dcsem

bcr 2

015

l'embimbingUtamPaada hari Jumat, tanggal 11 Desember 2015 !lhuna :Rarih DewiVudh11nl, dr.,M.Se.

N

_P

I

_e

P

_mbimbi

:

_n

1

_g

9

8

_U

4

_t

0

_a

7

_m

0

_a

7 200

9

1

2 2

00

2

( ~

.

..

) Nama :Ratih Dewi Yudhani, dr., M.Sc.

P_Ne_Im_P bimbh_:ag₁P₉e₈o₄d₀a₇r₀u₇p₂in₀₀g_{912 2 002}

Na

ma

:

Lell

S

11

ptawa

tl,

dr.,

S

p

.:v!K.

N

_P

T

_e

P

_mbimbi

:

_n

1

_g

97

_P

6

_e

1

_n

22

_d

7

_am

2

_p

0

_i

0

_n

5

_g

012001

Nama :Leli Saptawati, dr., Sp.MK.

(

(.

J

...

:

....

j

...

.

...

/

....

.

...

)

...) P_Ne_In_Pguji Ull_:lm₁₉u_{761227 200501 2 001} _(...·_...)

Na

m

o

:

R.atill

P

u

s

p

i

ta

febrioasMri,dr.,

M.

Sc.

~

N

_{Penguji Utama}

U'

:

19

81

020

8

200

604

2 003

(

)

N

a

I

m

P

a

:

B

1

u

9

d

8

l

1

y

0

o

2

n

0

o

8

,

2

D

0

r

0

s

.

6

,

0

M

4

.

2

S.

003

-

(...

~

..

·

E

...

J

...

:

.

:

.

-

..

:

.

:

.

i;

.

:

.

:

.

:

=

...

.

...

~

...)

P

N_ea_nm_ga_ujt _Pen:_dR_aa_mti_ph_ioP_guspita Febrinasari, dr., M.Sc.

NI

P

:

1

95

80

206 19

8

60

1

I 001

( )

Penguji Pendamping

Nama :Hudiyono, Drs., M.S. NIP : 19580206 198601 1 001

K

etua

T

i

m

S{tipsi

~

Ket

l

ua

[

T

~

im S

f

kripsi

Kusmadewl

F.ka

Damayantt,dr., M.GW

NIP 1

9

8

3

0

509 2

0

080

I

2 005

(3)

PERNYATAAN

l'£.l{NYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah Dengan inimenyatakan bahwa dalam skripsi ini tidakterdapat karya yang pcmah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan

diajukan untuk memperoleh geiar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang

sepaniang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapal yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu

pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang sccara tertulis diacu dal_da_am_lamna_ns_ak_sa_kh_ahd_da_nn_nd_di_is_se_b_u_u_u_t_t_t_k_{k a}_ka_nn_dd_aa_lal_mam_dad_fa_taf_rta_pr_up_stu_as_kt_»a_,ka.

SurSakuarratnk,ar1t1a,D1c1""-D'11e1sheerm20bJe5r 2015

cl\

Sarah Luthlinui NIMS.aGr0a0h1L22u0t5hfiani

NIM. G0012205

•

(4)

ABSTRAK

Sarah Luthfiani, G0012205, 2015.

Skrining Efektivitas Ekstrak : Sambiloto

(

Andrographis paniculata

), Serai (

Cymbopogon citrates

) dan Meniran (

Phyllanthus

niruri

L.) sebagai Antivirus Dengue secara

In Vitro

.

Latar belakang:

Infeksi virus Dengue adalah salah satu penyakit infeksi emergensi

di dunia. Angka kesakitan dan angka kematian DBD di Dunia terutama Indonesia

masih tinggi karena belum ada terapi spesifik untuk DBD. Prinsip utama terapi DBD

saat ini adalah terapi suportif, yaitu pemberian cairan pengganti. Indonesia memiliki

beragam tanaman obat yang berpotensi sebagai antivirus Dengue, yaitu sambiloto

(

), serai (

Cymbopogon citrates

) dan meniran (

Phyllanthus

niruri

L.). Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui efektivitas ekstrak sambiloto

(

Andrographis paniculata

), serai (

Cymbopogon citrates

) dan meniran (

Phyllanthus

niruri

L.) sebagai antivirus Dengue secara

in vitro

.

Metode Penelitian:

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium

dengan subjek penelitian adalah virus Dengue serotipe 2

strain

New Guinea C

(DENV2 NGC) yang diinfeksikan ke dalam

cell line

HuH-7. Penelitian dibagi dalam

2 uji. Pertama, uji daya hambat ekstrak terhadap DENV2 yang dinilai melalui

persentase infektivitas dengan metode

Focus Forming Unit assay

. Kedua, uji

toksisitas ekstrak terhadap sel HuH-7 yang dinilai melalui persentase viabilitas

dengan metode MTT

assay

. Ekstrak herbal yang efektif sebagai antivirus Dengue

secara

in vitro

adalah ekstrak dengan rata-rata persentase infektivitas



20% dan

rata-rata persentase viabilitas > 50%.

Hasil Penelitian:

Ekstrak sambiloto, serai, dan meniran memiliki rata-rata persentase

infektivitas berturut-turut: 53,8%; 114,4%; 51,9%. Rata-rata persentase viabilitas

ketiga ekstrak herbal tersebut berturut-turut: 105,9%; 95,7%; 98,6%.

Simpulan:

Ekstrak sambiloto (

), serai (

Cymbopogon

citrates

) dan meniran (

Phyllanthus niruri

L.) memiliki efektivitas yang rendah

sebagai antivirus Dengue secara

in vitro

.

Kata kunci:

Andrographis paniculata, Cymbopogon citrates, Phyllanthus niruri L.,

(5)

ABSTRACT

Sarah Luthfiani, G0012205, 2015.

Screening Effectiveness of The Extract of

Sambiloto (Andrographis paniculata), Serai (Cymbopogon citrates) and Meniran

(Phyllanthus niruri L.) as Dengue Antiviral In Vitro. Mini Thesis. Faculty of

Medicine, Sebelas Maret University, Surakarta.

Background:

Dengue virus infection is one of the emergency infectious diseases in

the world. Morbidity and mortality of Dengue fever in Indonesia was high. There is

no specific therapy for Dengue infection. The main treatment principle of Dengue

infection is supportive therapy such as replacement of body fluids. Indonesia has

natural product which can be potential as an antiviral for Dengue therapy, such as

sambiloto (Andrographis paniculata), serai (Cymbopogon citrates) and meniran

(Phyllanthus niruri L.). The aim of this research is to determine the effectiveness of

the extract of sambiloto (Andrographis paniculata), serai (Cymbopogon citrates) and

meniran (Phyllanthus niruri L.) as Dengue antiviral in vitro.

Methods:

This study was a laboratory experimental research using Dengue virus

serotype 2 strain New guinea C (DENV2 NGC) which was infected into Huh-7 cell

line as the subject of the research. This research conducted in 2 parts. First , inhibition

test of the extract against DENV2 assessed by the percentage of infectivity with

Focus Forming Unit assay method . Second , toxicity test of the extracts in HuH - 7

cells was assessed by the percentage of viability by MTT assay method. Effective

herbs extract as a Dengue antiviral was an extract that has average percentage of

infectivity



20% and average percentage of viability > 50%.

Results:

The extracts of sambiloto, serai, and meniran had average percentage of

infectivity respectively: 53.8%; 114.4%; and 51.9%. While the average percentage of

viability were: 105.9%; 95.7%; and 98.6%.

Conclusion:

The

extracts

of

sambiloto

(Andrographis paniculata),

serai

(Cymbopogon citrates), and meniran (Phyllanthus niruri L.) are not effective as

Dengue antiviral in vitro.

Keywords:

Andrographis paniculata, Cymbopogon citrates, Phyllanthus niruri L.,

(6)

PRAKATA

Puji syukur penulis kepada Allah SWT atas berkah dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Skrining Efektivitas Ekstrak : Sambiloto (Andrographis paniculata), Serai (Cymbopogon citrates) dan Meniran (Phyllanthus niruri L.) sebagai Antivirus Dengue secara In Vitro”. _Penyusunan

skripsi ini tidak dapat terselesaikan tanpa pengarahan, bimbingan, dan dukungan dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Dr. Hartono, dr. M.Si, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian dalam penyusunan skripsi.

2. Kusmadewi Eka Damayanti, dr., M.Gizi, selaku Ketua Tim Skripsi beserta Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian dalam penyusunan skripsi. 3. Ratih Dewi Yudhani, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Utama yang telah

memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.

4. Leli Saptawati, dr., Sp.MK, selaku Pembimbing Pendamping yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.

5. Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc., selaku Penguji Utama yang telah berkenan untuk menguji dan memberikan kritik serta saran bagi penyusunan skripsi ini.

6. Hudiyono, Drs., M.S., selaku Penguji Pendamping yang telah berkenan untuk menguji dan memberikan kritik serta saran bagi penyusunan skripsi ini.

7. Briandani Subariyanti, dr. selaku Penguji Ke-5 yang telah memberikan saran dan kritik yang berguna untuk melengkapi kekurangan dalam skripsi ini. 8. Beti Ernawati Dewi, S.si., Ph.D. dan Kak Desti yang telah memberikan

kesempatan untuk melakukan penelitian kolaborasi uji antivirus Dengue in vitrodi Departemen Mikrobiologi FK UI.

9. Ayahanda, Sudarman dan Ibunda, Dyah Prihmawati atas segala doa, dukungan dan semangat yang selalu diberikan setiap waktu.

10. Hutami SU dan Agya GF, teman satu tim skripsi yang luar biasa.

11. Asticha ES, Anggita D, Fatmanisa L, Utari NA, Raka A, Zakka Z, M Natsir, atas segala bantuan selama proses penyusunan skripsi.

12. Donni P atas segala dukungan dan bantuan selama proses penyusunan skripsi. 13. KKN Jambangan: Donni, Zulfika, Norma, Ratih, Novita, Friska, Dwi atas

dukungan dan doa kepada penulis

14. Semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.

Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam skripsi ini, oleh karena itu kritik dan saran sangat penulis harapkan dalam penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi pembaca serta menjadi sumbangan bagi ilmu kedokteran selanjutnya.

(7)

DAFTAR ISI

PRAKATA ……….…….. vi

DAFTAR ISI……….…... vii

DAFTAR TABEL……….…... ix

DAFTAR GAMBAR ………... x

DAFTAR LAMPIRAN ……… xi

BAB I PENDAHULUAN ………...…….… 1

A. Latar Belakang Masalah……….. 1

B. Rumusan Masalah ……… 4

C. Tujuan Penelitian ………. 4

D. Manfaat Penelitian ……… 5

BAB II LANDASAN TEORI………... 6

A. Tinjauan Pustaka………. 6

1. Virus Dengue... ………. 6

a. Deskripsi...………. 6

b. Siklus Hidup………. 7

c. Manifestasi Klinis……… ………. 8

2. Bahan Alam………... 11

a.Sambiloto………..………. 11

b. Serai……… ………... 15

c. Meniran... ……….. 19

3. Ekstraksi dengan MetodeMaserasi………. ….. 22

4. Kultur VirusDengue……….. 24

5. HuH-7Cell Line………. 25

B. Kerangka Pemikiran ……… 26

C. Hipotesis ……….. 27

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ……….. 28

A. Jenis Penelitian ……… 28

B. Lokasi dan Waktu Penelitian ……….. 28

(8)

D. Identifikasi Variabel Penelitian ………. 28

E. Definisi Operasional Variabel Penelitian………. 29

F. Alat dan Bahan ……….…………. 41

G. Prosedur Penelitian ………. 41

H. Teknik Analisis Data………. 55

BAB IV HASIL PENELITIAN ………... 56

BAB V PEMBAHASAN ……….. 59

BAB IV PENUTUP ……….. 67

A. Simpulan……….... 67

B. Saran………... 67

DAFTAR PUSTAKA………

LAMPIRAN

(9)

DAFTAR TABEL

(10)

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Andrographis paniculata ... 14

Gambar 2.2 Cymbopogon citrates ... 17

Gambar 2.3 Phyllanthus niruri L ... 21

Gambar 2.4.Skema KerangkaPemikiran……….. 26

Gambar 3.1 Single Dose-UjiFocus Forming Unit(FFU)…... 35

Gambar 3.2.Mind Map96Well Flat Bottom Plate-UjiFFU………38

(11)

DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Ethical Clearance

Lampiran 2. Perhitungan Volume DENV2 NGC yang Diambil dari Stok Lampiran 3. Perhitungan Ekstrak yang Diambil dari Stok

Lampiran 4. Foto 48Well Flat Bottom Platedan 96Well Flat Bottom Plate Lampiran 5. Hasil Perhitungan Fokus dan Pembacaan Absorbansi Sel pada

ELISAReader