Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman

Lampiran 4. Data Recorder Pada Uji In Vitro

A. Seri Kadar Agonis (ACh)

D. DMSO + Agonis (ACh)

Lampiran 5. Data Pengaruh Pelarut DMSO Terhadap Kontraksi Otot Polos

Ileum

a. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akibat Pemberian Seri

Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* 1 2 3 4 5 6 Mean SEM -10.0 22.22 11.11 28.57 5.56 5.56 5.56 13.10 2.88 -9.5 22.22 11.11 28.57 5.56 5.56 5.56 13.10 2.88 -9.0 33.33 11.11 42.86 5.56 5.56 5.56 17.33 4.77 -8.5 44.44 22.22 42.86 5.56 5.56 11.11 21.96 5.16 -8.0 55.56 22.22 42.86 5.56 5.56 11.11 23.81 6.06 -7.5 55.56 33.33 42.86 5.56 5.56 11.11 25.66 6.15 -7.0 88.89 33.33 42.86 5.56 16.67 22.22 34.92 8.50 -6.5 88.89 33.33 57.14 22.22 22.22 33.33 42.86 7.48 -6.0 88.89 33.33 57.14 27.78 44.44 55.56 51.19 6.31 -5.5 100.00 44.44 71.43 33.33 72.22 66.67 64.68 6.77 -5.0 100.00 66.67 71.43 66.67 94.44 77.78 79.50 4.17 -4.5 100.00 66.67 85.71 100 100 88.89 90.21 3.79 -4 100.00 88.89 100 100 100 100 98.15 1.31 -3.5 100.00 100 100 100 100 100 100 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

b. Data Pengaruh Pelarut DMSO terhadap Kontraksi Otot Polos ileum akibat

pemberian DMSO + seri kadar Asetilkolin

Log Konsentras i (M) Respon Kontraksi 1 2 3 4 5 6 Mean SEM -10.0 11.11 11.11 14.29 5.56 16.67 5.56 10.71 1.30 -9.5 22.22 11.11 14.29 5.56 16.67 5.56 12.57 1.89 -9.0 22.22 22.22 14.29 11.11 16.67 5.56 15.34 1.88 -8.5 33.33 22.22 28.57 11.11 16.67 5.56 19.58 3.04 -8.0 55.56 33.33 28.57 16.67 16.67 11.11 26.98 4.70 -7.5 66.67 33.33 28.57 16.67 16.67 11.11 28.84 5.86 -7.0 77.78 33.33 28.57 22.22 22.22 22.22 34.39 6.27 -6.5 88.89 33.33 42.86 22.22 33.33 27.78 41.40 7.00 -6.0 88.89 44.44 57.14 22.22 50.00 50.00 52.12 6.24 -5.5 100.00 55.56 57.14 27.78 66.67 55.56 60.45 6.74 -5.0 100.00 66.67 71.43 61.11 72.22 66.67 73.02 3.99 -4.5 100.00 77.78 71.43 83.33 77.78 72.22 80.42 3.04 -4 100.00 88.89 100.00 100.00 100.00 100.00 98.15 1.31 -3.5 100.00 88.89 100.00 100.00 100.00 100.00 98.15 1.31

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos ileum

maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin (kontrol)

Media : Larutan buffer tyrode

Lampiran 6.

Data Pengaruh Alkaloid Lada Piper nigrum Linn. Terhadap

Reseptor ACh Otot Polos Ileum

a. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akbat Pemberian Seri Konsentrasi

Asetilkolin (Kontrol)

Log Konse ntrasi (M) Respon Kontraksi* M E A N S E M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 -10.0 25.00 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 0.00 25.00 4.00 9.09 11.42 2.19 -9.5 25.00 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 0.00 25.00 4.00 9.09 11.42 2.19 -9.0 31.25 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 12.50 25.00 8.00 9.09 13.32 2.17 -8.5 31.25 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 37.50 25.00 16.00 9.09 16.07 2.88 -8.0 43.75 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 37.50 25.00 16.00 9.09 17.11 3.50 -7.5 43.75 21.43 8.33 7.69 15.79 13.33 15.38 22.22 50.00 25.00 16.00 9.09 20.67 3.89 -7.0 56.25 28.57 25.00 15.38 26.32 20.00 23.08 33.33 50.00 25.00 28.00 9.09 28.34 3.83 -6.5 62.50 42.86 33.33 15.38 42.11 33.33 30.77 44.44 50.00 37.50 28.00 18.18 36.53 3.79 -6.0 75.00 64.29 66.67 46.15 52.63 53.33 46.15 66.67 50.00 50.00 32.00 22.73 52.13 4.30 -5.5 75.00 85.71 83.33 61.54 73.68 73.33 69.23 88.89 62.50 75.00 48.00 54.55 70.90 3.59 -5.0 81.25 92.86 100 69.23 89.47 86.67 76.92 100 75.00 75.00 60.00 63.64 80.84 3.83 -4.5 87.50 92.86 100 84.62 94.74 93.33 92.31 100 87.50 100 80.00 86.36 91.60 1.89 -4.0 100 100 100 92.31 100 100 100 100 87.50 100 80.00 100 96.65 1.91 -3.5 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos ileum

maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin (kontrol)

Media : Larutan buffer tyrode

b. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akibat Pemberian Alkaloid Lada

Piper nigrum Linn. 1000 μM + Seri Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* 1 2 3 4 5 6 Mean SEM -10.0 7.69 8.33 7.14 6.67 8.33 7.69 7.64 0.27 -9.5 7.69 8.33 7.14 6.67 8.33 7.69 7.64 0.27 -9.0 7.69 8.33 7.14 6.67 8.33 7.69 7.64 0.27 -8.5 7.69 8.33 7.14 6.67 8.33 15.38 8.93 1.32 -8.0 7.69 8.33 14.29 20.00 16.67 15.38 13.73 1.97 -7.5 15.38 8.33 14.29 20.00 16.67 15.38 15.01 1.56 -7.0 15.38 16.67 28.57 40.00 33.33 38.46 28.74 4.35 -6.5 15.38 33.33 42.86 53.33 50.00 38.46 38.89 5.57 -6.0 23.08 50.00 42.86 66.67 50.00 46.15 46.46 5.75 -5.5 38.46 66.67 71.43 80.00 66.67 61.54 64.13 5.73 -5.0 38.46 91.67 85.71 80.00 83.33 61.54 73.45 8.14 -4.5 69.23 91.67 92.86 100.00 91.67 76.92 87.06 4.71 -4 92.31 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 98.72 1.28 -3.5 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

c. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akbat Pemberian Alkaloid Lada

Piper nigrum Linn. 5000 μM + Seri Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* 1 2 3 4 5 6 Mean SEM -10.0 7.14 7.14 7.69 7.14 7.69 8.33 7.52 0.20 -9.5 7.14 7.14 7.69 7.14 7.69 8.33 7.52 0.20 -9.0 7.14 7.14 7.69 7.14 7.69 8.33 7.52 0.20 -8.5 7.14 7.14 7.69 7.14 15.38 8.33 8.81 1.33 -8.0 7.14 7.14 7.69 7.14 23.08 8.33 10.09 2.60 -7.5 7.14 14.29 7.69 7.14 30.77 33.33 16.73 4.98 -7.0 14.29 14.29 15.38 7.14 38.46 33.33 20.48 5.06 -6.5 28.57 28.57 23.08 35.71 46.15 41.67 33.96 3.59 -6.0 28.57 42.86 46.15 50.00 61.54 58.33 47.91 4.84 -5.5 42.86 57.14 61.54 71.43 61.54 66.67 60.20 4.01 -5.0 64.29 71.43 76.92 85.71 61.54 83.33 73.87 4.04 -4.5 71.43 78.57 92.31 85.71 61.54 91.67 80.20 4.95 -4 85.71 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 97.62 2.38 -3.5 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

5000 μM Terhadap Reseptor ACh Otot Polos ileum

a. Polos Ileum Akibat Pemberian Seri Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Kons entra si (M) Respon kontraksi* Mean SEM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 -10.0 7.69 8.33 7.14 7.14 7.14 6.67 7.69 14.29 8.33 15.38 7.69 8.33 8.82 0.83 -9.5 7.69 8.33 7.14 7.14 7.14 6.67 7.69 14.29 16.67 23.08 15.38 16.66 11.49 1.58 -9.0 7.69 8.33 14.29 7.14 21.43 13.33 15.38 14.29 16.67 23.08 15.38 16.66 14.47 1.44 -8.5 7.69 16.67 14.29 14.29 28.57 13.33 15.38 14.29 25.00 23.08 30.77 33.33 19.72 2.35 -8.0 15.38 16.67 14.29 28.57 42.86 26.67 23.08 14.29 41.67 30.77 30.77 41.67 27.22 3.13 -7.5 15.38 16.67 21.43 35.71 50.00 40.00 30.77 14.29 41.67 30.77 46.15 41.67 32.04 3.62 -7.0 15.38 33.33 21.43 50.00 71.43 46.67 38.46 21.43 58.33 38.46 61.54 58.33 42.90 5.16 -6.5 30.77 50.00 28.57 50.00 78.57 60.00 53.85 35.71 75.00 46.15 69.23 66.67 53.71 4.84 -6.0 76.92 66.67 35.71 71.43 78.57 73.33 69.23 64.29 91.67 53.85 76.92 83.33 70.16 4.18 -5.5 84.62 83.33 50.00 78.57 92.86 86.67 92.31 85.71 100 69.23 92.31 83.33 83.24 3.77 -5.0 100 100 71.43 78.57 100 93.33 100 100 100 76.92 92.31 100 92.71 3.11 -4.5 100 100 78.57 100 100 100 100 100 100 84.62 100 100 96.93 2.10 -4 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 0.00 -3.52 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos ileum

maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin (kontrol) Media :

Larutan buffer tyrode

b. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Pada Uji Reversibilitas Alkaloid Lada

Piper nigrum Linn.1000 µM

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* Mean SEM 1 2 3 4 5 6 -10.0 1.00 8.33 7.14 6.67 16.67 23.08 10.48 3.25 -9.5 1.00 8.33 7.14 13.33 16.67 23.08 11.59 3.18 -9.0 7.69 8.33 14.29 13.33 33.33 23.08 16.68 4.02 -8.5 7.69 8.33 21.43 26.67 33.33 30.77 21.37 4.53 -8.0 15.38 16.67 21.43 26.67 41.67 30.77 25.43 4.03 -7.5 15.38 16.67 35.71 40.00 50.00 46.15 33.99 6.03 -7.0 23.08 25.00 64.29 53.33 66.67 46.15 46.42 7.70 -6.5 38.46 41.67 71.43 73.33 83.33 61.54 61.63 7.39 -6.0 61.54 58.33 78.57 86.67 83.33 61.54 71.66 5.14 -5.5 84.62 75.00 92.86 86.67 91.67 69.23 83.34 3.84 -5.0 100.00 83.33 92.86 93.33 100.00 76.92 91.07 3.78 -4.5 100.00 83.33 100.00 100.00 100.00 76.92 93.38 4.27 -4 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00 -3.52 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

Piper nigrum Linn. 5000 µM

Log Konsentrasi (M) Respon Konraksi* Mean SEM 1 2 3 4 5 6 -8.0 7.14 7.14 15.38 7.14 15.38 8.33 10.09 1.69 -7.5 7.14 7.14 15.38 7.14 15.38 16.67 11.48 1.95 -7.0 21.43 7.14 15.38 14.29 15.38 16.67 15.05 1.89 -6.5 21.43 14.29 23.08 14.29 30.77 16.67 20.09 2.61 -6.0 28.57 14.29 23.08 14.29 30.77 33.33 24.05 3.38 -5.5 35.71 28.57 23.08 21.43 53.85 33.33 32.66 4.81 -5.0 35.71 35.71 30.77 28.57 53.85 50.00 39.10 4.24 -4.5 42.86 42.86 46.15 42.86 61.54 58.33 49.10 3.49 -4.0 42.86 50.00 61.54 57.14 61.54 75.00 58.01 4.50 -3.5 50.00 71.43 76.92 78.57 76.92 91.67 74.25 5.57 -3.0 64.29 78.57 92.31 92.86 84.62 100.00 85.44 5.19 -2.5 78.57 78.57 100.00 100.00 100.00 100.00 92.86 4.52 -2 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00 -1.52 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos ileum

maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin (kontrol) Media

: Larutan buffer tyrode

Lampiran 8. Data Pengaruh Atropin Terhadap Reseptor ACh Otot Polos Ileum

a. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akbat Pemberian Atropin 100 + Seri

Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* MEAN SEM 1 2 3 4 5 6 -10.0 25.00 14.29 5.26 6.67 12.50 0.00 10.62 3.56 -9.5 25.00 14.29 5.26 6.67 12.50 0.00 10.62 3.56 -9.0 25.00 14.29 5.26 6.67 12.50 0.00 10.62 3.56 -8.5 25.00 14.29 5.26 6.67 12.50 0.00 10.62 3.56 -8.0 31.25 14.29 5.26 6.67 12.50 12.50 13.74 3.79 -7.5 31.25 14.29 5.26 6.67 12.50 12.50 13.74 3.79 -7.0 31.25 14.29 10.53 6.67 12.50 25.00 16.70 3.84 -6.5 37.50 35.71 10.53 6.67 25.00 25.00 23.40 5.17 -6.0 37.50 35.71 26.32 13.33 25.00 25.00 27.14 3.57 -5.5 56.25 92.86 42.11 26.67 50.00 62.50 55.06 9.10 -5.0 75.00 92.86 57.89 46.67 62.50 87.50 70.40 7.30 -4.5 100.00 100.00 84.21 80.00 75.00 87.50 87.79 4.22 -4.0 100.00 100.00 100.00 100.00 75.00 100.00 95.83 4.17 -3.5 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

Seri Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* MEAN SEM 1 2 3 4 5 6 -10.0 8.33 7.69 0.00 11.11 8.00 9.09 7.37 1.56 -9.5 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 9.09 8.65 0.54 -9.0 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 9.09 8.65 0.54 -8.5 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 9.09 8.65 0.54 -8.0 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 18.18 10.17 1.69 -7.5 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 18.18 10.17 1.69 -7.0 8.33 7.69 7.69 11.11 8.00 18.18 10.17 1.69 -6.5 16.67 7.69 7.69 11.11 16.00 22.73 13.65 2.41 -6.0 25.00 7.69 7.69 11.11 16.00 22.73 15.04 3.07 -5.5 41.67 7.69 7.69 22.22 20.00 27.27 21.09 5.24 -5.0 50.00 23.08 15.38 33.33 28.00 59.09 34.81 6.79 -4.5 66.67 30.77 30.77 55.56 44.00 68.18 49.32 6.86 -4.0 100.00 69.23 61.54 88.89 60.00 100.00 79.94 7.61 -3.5 100.00 100.00 76.92 100.00 100.00 100.00 96.15 3.85

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos

ileum maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin

(kontrol) Media : Larutan buffer tyrode

c. Data Persentase Kontraksi Otot Polos Ileum Akbat Pemberian Kontrol Atropin +

Seri Konsentrasi Asetilkolin (Kontrol)

Log Konsentrasi (M) Respon Kontraksi* M E A N S E M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 -10.0 25.00 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 0.00 25.00 4.00 9.09 11.42 2.19 -9.5 25.00 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 0.00 25.00 4.00 9.09 11.42 2.19 -9.0 31.25 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 12.50 25.00 8.00 9.09 13.32 2.17 -8.5 31.25 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 37.50 25.00 16.00 9.09 16.07 2.88 -8.0 43.75 14.29 8.33 7.69 10.53 6.67 15.38 11.11 37.50 25.00 16.00 9.09 17.11 3.50 -7.5 43.75 21.43 8.33 7.69 15.79 13.33 15.38 22.22 50.00 25.00 16.00 9.09 20.67 3.89 -7.0 56.25 28.57 25.00 15.38 26.32 20.00 23.08 33.33 50.00 25.00 28.00 9.09 28.34 3.83 -6.5 62.50 42.86 33.33 15.38 42.11 33.33 30.77 44.44 50.00 37.50 28.00 18.18 36.53 3.79 -6.0 75.00 64.29 66.67 46.15 52.63 53.33 46.15 66.67 50.00 50.00 32.00 22.73 52.13 4.30 -5.5 75.00 85.71 83.33 61.54 73.68 73.33 69.23 88.89 62.50 75.00 48.00 54.55 70.90 3.59 -5.0 81.25 92.86 100 69.23 89.47 86.67 76.92 100 75.00 75.00 60.00 63.64 80.84 3.83 -4.5 87.50 92.86 100 84.62 94.74 93.33 92.31 100 87.50 100 80.00 86.36 91.60 1.89 -4.0 100 100 100 92.31 100 100 100 100 87.50 100 80.00 100 96.65 1.91 -3.5 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 0.00

Keterangan * : % Respon kontraksi dihitung berdasarkan kontraksi otot polos ileum

maksimal yang dicapai oleh seri konsentrasi asetilkolin (kontrol) Media :

Larutan buffer tyrode

Reseptor ACh

1. Perhitungan Parameter Antagonis (PA2) Alkaloid Lada Piper nigrum Linn. Terhadap

Reseptor ACh

No. PERLAKUAN pD2 A or A' A'/A x-1 log(x-1)

Kons M _Log M (uM) 1 Kontrol 4.735 0.000018 2 (+)Alkaloid Lada Piper nigrum Linn. 100 3.892 0.00012 6.666667 5.666667 0.753328 1000 0.001 -2 3 (+)Alkaloid Lada Piper nigrum Linn.500 3.940 0.00011 6.111111 5.111111 0.708515 5000 0.005 -1 y = -0.0448x + 0.6637 R² = 1 0.7050.71 0.7150.72 0.7250.73 0.7350.74 0.7450.75 0.7550.76 -2.5 -2 -1.5 -1 -0.5 0

Lampiran 10. Hasil Uji Statistik Pada Uji Pengaruh Pelarut DMSO Terhadap

Kontraksi Otot Polos Ileum

a. Hasil Uji Statistik Pada Uji Pengaruh Pelarut DMSO terhadap Kontraksi Otot

Polos Ileum yang Diinduksi Asetilkolin.

Lampiran 12. Hasil Uji Statistik Pada Uji Pengaruh alkaloid lada Piper nigrum

Linn. dan asetilkolin terhadap Kontraksi Otot Polos ileum yang

diinduksi atropin.

Lampiran 13. Hasil Skor Docking Pada Reseptor ACh M3

1. Validasi Docking Ligan Asli (Tiotropium) Pada Reseptor ACh M3

2. Validasi Docking Senyawa Uji Alkaloid Lada Piper nigrum Linn. Pada

Reseptor ACh M3

3. Validasi Docking Senyawa Pembanding (Atropine Sulfate) Pada

Reseptor ACh M3