Lampiran 3. Gambar tumbuhan segar dan simplisia Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard.
Tumbuhan Segar Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
Lampiran 4. Gambar serbuk simplisia dan isolat fukoidan Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
Serbuk simplisia Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
Lampiran 5. Bagan prosedur kerja
Rumput laut coklat segar
Rumput laut coklat kering
Uji Makroskopik Dihaluskan Serbuk
Isolat senyawa Fukoidan Isolasi Fukoidan
IR dan UV
Identifikasi fukoidan
Susut pengeringan
Lampiran 6. Bagan kerja isolasi senyawa fukoidan
50 g serbuk simplisia
Dimasukkan ke dalam beker gelas 1000 ml
Ditambahkan 500 ml HCl 0,1N Diekstraksi pada suhu 1000C selama 4 jam sambil diaduk
Disaring / peras (pakai kain flanel)
Filtrat Ampas
Disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 3000 rpm
Diambil filtrat
Filtrat
Ditambahkan etanol 96% sama banyak dengan filtrat Disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit
Diambil endapan Endapan
Dikeringkan dalam oven pada suhu 500C Digerus dan dimasukkan kedalam botol Isolat Fukoidan
Lampiran 7. Bagan kerja antiinflamasi
Sebelum pengujian tikus dipuasakan selama 18 jam (tetap diberi minum)
Diberi tanda pada bagian ekor dan kaki kanan tikus dan ditimbang beratnya
Kaki kanan tikus dimasukkan ke dalam sel yang berisi cairan pada alat pletismometer
Dicatat angka pada monitor Volume telapak kaki
tikus mula-mula (Vo)
K (-) D I D II D III K (+)
Diberi suspensi bahan uji secara oral sesuai dengan kelompoknya
Satu jam kemudian, telapak kaki tikus disuntik secara intraplantar 0,05 ml larutan λ- karagenan 1%
Dilakukan pengukuran setiap 30 menit selama 360 menit dengan cara mencelupkan telapak kaki tikus pada sel pletismometer yang berisi cairan khusus Dicatat perubahan volume angka pada monitor. Volume telapak kaki
Lampiran 8. Telapak kaki tikus sebelum dan sesudah diinduksi λ- karagenan
Telapak kaki tikus sebelum diinduksi λ -karagenan
Lampiran 9. Perhitungan karakteristik senyawa isolat fukoidan yang diperoleh dari Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
1. Perhitungan % rendemen senyawa fukoidan
2. Perhitungan susut pengeringan
Lampiran 10. Konversi dosis
Tabel 3. Konversi Dosis Antara Jenis Hewan Dengan Manusia
Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis
1. Perhitungan Senyawa Fukoidan Rumput Laut Coklat
- Dosis suspensi senyawa fukoidan rumput laut coklat yang akan dibuat adalah 100 mg/kg bb, 200mg/kg bb dan 400 mg/kg bb. Berarti dosis 100 mg, 200 mg dan 400 mg tersebut diberikan untuk hewan dengan 1 kg berat badan. Karena 1 kg = 1000 g = 10 ml. Maka tiap dosis dilarutkan dalam 10,0 ml suspensi Na-CMC.
- Volume suspensi isolat senyawa fukoidan rumput laut coklat yang diberikan kepada tikus adalah volume pemberian 1% dari bb tikus
Misal bb tikus = 200 g
Maka suspensi yang diberikan 200 g = 2 ml 2. Perhitungan Dosis Natrium Diklofenak
- Tiap tablet natrium diklofenak mengandung 50 mg natrium diklofenak - Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 25 – 50 mg
- Konversi dosis manusia (70 kg) kedosis hewan uji tikus dikali 0,018 Pemberian larutan natrium diklofenak
Konversi dosis untuk tikus = 25 mg x 0,018 = 0,45 mg
Maka dosis natrium diklofenak yang digunakan adalah 0,45 mg untuk tikus 200 g, sehingga dosis dalam mg/kg bb adalah :
Volume pemberian 1% dari bb tikus Misal bb tikus = 200 g
Lampiran 12. Contoh perhitungan persen radang dan persen inhibisi radang
1.Persen Radang
dimana: Vt = volume radang setelah waktu t
Vo = volume awal kaki tikus
Misalnya: Senyawa fukoidan rumput laut coklat dosis 100mg/kg bb pada menit ke-30
2. Persen Inhibisi Radang
Dimana : a = Persenradang rata-rata kelompok kontrol
b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan yang mendapat bahan uji atau obat pembanding
Persen peredaan radang senyawa fukoidan rumput laut coklat dosis 100 mg/kgb
Persen Radang =
Persen Radang =
Lampiran 13. Hasil analisis persen radang metode duncan efek antiinflamasi suspensi senyawa fukoidan rumput laut coklat
Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-30
Menit ke-60
Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-120
Menit ke-150
Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-210
Menit ke-240
Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-300
Menit ke-330
Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-30
Menit ke-60
Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-120
Menit ke-150
Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-210
Menit ke-240
Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-300
Menit ke-330