PENETAPAN KADAR METAMPIRON DAN FENILBUTAZON
DALAM SEDIAAN KAPSUL SECARA SPEKTROFOTOMETRI
DERIVATIF DENGAN METODE ZERO CROSSING
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
Mia Anggraini Yusima
NIM 131524092
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
PENETAPAN KADAR METAMPIRON DAN FENILBUTAZON
DALAM SEDIAAN KAPSUL SECARA SPEKTROFOTOMETRI
DERIVATIF DENGAN METODE ZERO CROSSING
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MIA ANGGRAINI YUSIMA
NIM 131524092
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
43
PENGESAHAN SKRIPSI
PENETAPAN KADAR METAMPIRON DAN FENILBUTAZON DALAM SEDIAAN KAPSUL SECARA SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF
DENGAN METODE ZERO CROSSING
OLEH:
MIA ANGGRAINI YUSIMA 131524092
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas FarmasiUniversitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 18 Desember 2015
Medan, Januari 2016
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt. NIP 195401101980032001
Panitia Penguji,
Prof. Dr. Ginda Haro, M.Sc., Apt. NIP 195108161980031002
Pembimbing II
Prof. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. NIP 195006221980021001
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt. NIP 195401101980032001
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt. NIP 195409101983032001
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmaanirrahiim,
Puji syukur kepada Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini, serta shalawat beriring salam untuk Rasulullah Muhammad SAW sebagai suri tauladan dalam kehidupan. Bahan skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan judul “Penetapan Kadar Metampiron dan Fenilbutazon Dalam Sediaan KapsulSecara Spektrofotometri Derivatif dengan Metode Zero Crossing”.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada, Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt. Selaku Pejabat Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Ibu Dra. Tuty Roida Pardede., M.Si., Apt. selaku pembimbing I, serta BapakProf. Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt. selaku pembimbing II yang telah membimbing dan memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya bahan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah mendidik dan memberikan ilmu yang bermanfaat kepada saya selama perkuliahan.
v
tersayang Mufti Apriadi Yusima yang selalu memberi semangat, doa, dan dukungannya tanpa henti.
Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih kepada teman-teman ekstensi farmasi angkatan 2013, dan sahabat-sahabatku yang telah memberikan bantuan dan semangat tak terhingga.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan bahan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan bahan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga bahan skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Januari 2016 Penulis,
vi
PENETAPAN KADAR METAMPIRON DAN FENILBUTAZON DALAM SEDIAAN KAPSUL SECARA SPEKTROFOTOMETRI
DERIVATIF DENGAN METODE ZERO CROSSING
ABSTRAK
Campuran metampiron dan fenilbutazon merupakan salah satu jenis kombinasi dalam sediaan kapsul. Penetapan kadar kapsul metampiron dan fenilbutazon tidak terdapat dalam monografi, baik pada Farmakope Indonesia edisi V (2014) maupun United States Pharmacopeia (USP) edisi XXX (2007) sehingga diperlukan suatu metode analisis yang memenuhi uji validitas pada penetapan kadarnya. Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji validasi metode spektrofotometri derivatif dalam menetapkan kadar campuran metampiron dan fenilbutazon dalam sediaan kapsul.
Metode penelitian yang dilakukan adalah pengambilan sampel secara purposif terhadap campuran metampiron dan fenilbutazon pada sampel sediaan kapsul X serta penetapan kadar secara spektrofotometri derivatif metode zero
crossing dalam pelarut Etanol-HCl 0,1N.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar metampiron pada sediaan kapsul X sebesar 100,57% dan kadar fenilbutazon sebesar 99,08%. Dari hasil analisis penetapan kadar sampel campuran metampiron dan fenilbutazon dalam sediaan kapsul menunjukkan baik metampiron maupun fenilbutazon memenuhi persyaratan kadar untuk sediaan kapsul metampiron tunggal menurut USP edisi XXX (2007) dan fenilbutazon memenuhi persyaratan kadar tunggal menurut Farmakope Indonesia edisi V (2014). Hasil uji validasi yang dilakukan terhadap sediaan kapsul X, diperolehan persen kembali dari metampiron adalah 99,673% dengan simpangan baku relatif (RSD) = 1,33% dan untuk fenilbutazon diperoleh persen perolehan kembali sebesar 99,59% dengan simpangan baku relatif (RSD) =1,23%.
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan, dapat disimpulkan bahwa metode spektrofotometri derivatif dengan pelarut Etanol-HCl 0,1 N dapat diukur pada derivat kedua dengan panjang gelombang analisis 251,20 nm untuk metampiron dan 222,60 nm untuk fenilbutazon. Serta memenuhi persyaratan akurasi dan presisi, dan dapat digunakan untuk menetapkan kadar metampiron dan fenilbutazon pada sediaan kapsul.
Kata kunci: Metampiron, Fenilbutazon, Etanol-HCl 0,1N, Spektrofotometri
vii
DETERMINATION OF METHAMPYRONE AND PHENYLBUTAZONE IN CAPSULES SUPPLY BY DERIVATIVE SPECTROFOTOMETRY
WITH ZERO CROSSING METHOD
ABSTRACT
The compound of methampyrone and phenylbutazone is one of combination in capsule supply. Determination of content of methampyrone and phenylbutazone in capsul did not found in monography, either in the fifth edition Indonesian Pharmacopeia (2014) or United States Pharmacopeia (USP) 30th edition (2007) that requires an analysis method that meets the test of validity in determining the content. The aim of this study was to test the validation of derivative spectrophotometry method in determination the content methampyrone and phenylbutazone in capsule.
The method of this research was done by purposive sampling to methampyrone and phenylbutazone mixture of the sample capsule X content using derivative spectrophotometry with zero crossing technique and determination in Ethanol-HCl 0.1 N.
The research results were obtained the methampyrone and phenylbutazone content of the sample capsule X 100.57% for methampyrone and phenylbutazone 99.08%. Based on the results of analysis determine the sample content of methampyrone and phenylbutazone compound in capsule supply methampyrone fulfilled the requirements in USP 30th edition (2007) and phenylbutazone fulfilled the requirement of capsule in the fifth edition Indonesian Pharmacopeia (2014). The results of validation test on the capsule X, the percent recovery for methampyrone is 99.673%, relative standard deviation (RSD) = 1.33% and for phenylbutazone, the percent recovery is 99.59% with relative standard deviation (RSD) = 1.23%.
Based on the results of research, that derivative spectrophotometry method with Ethanol-HCl 0.1 N and measured at the second derivate with wavelength of 251.20 nm for methampyrone and 222.60 nm for phenylbutazone. And fulfilled the requirements of accuracy and precision and can be used to determinate the content of methampyrone and phenylbutazone in capsule.
Keywords: Methampyrone, phenylbutazone, Derivative Spectrophotometry, Zero
viii DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ... i
HALAMAN JUDUL ... ii
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
ABSTRAK ... vi
ABSTRACT ... vii
DAFTAR ISI ... viii
DAFTAR TABEL ... xii
DAFTAR GAMBAR ... xiii
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xviii
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Perumusan Masalah ... 3
1.3 Hipotesis ... 3
1.4 Tujuan Penelitian ... 4
1.5 Manfaat Penelitian ... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 5
2.1 Uraian Bahan ... 5
2.1.1 Metampiron ... 5
2.1.2 Fenilbutazon ... 6
ix
2.2.1 Hukum Lambert-Beer ... 9
2.2.2 Komponen Spektrofotometer ... 9
2.3 Spektrofotometri Derivatif ... 10
2.4 Validasi Metode Analisis ... 13
2.4.1 Akurasi ... 14
2.4.2 Presisi ... 15
2.4.3 Batas Deteksi (Limit Of Detection, LOD) ... 15
2.4.4 Batas Kuantifikasi (Limit Of Quantification, LOQ) ... 16
BAB III METODE PENELITIAN ... 17
3.1 Jenis Penelitian ... 17
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ... 17
3.3 Alat ... 17
3.4 Bahan ... 17
3.5 Pengambilan Sampel ... 18
3.6 Prosedur Penelitian ... 18
3.6.1 Pembuatan Pelarut ... 18
3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku dan Standar ... 18
3.6.2.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Metampiron ... 18
3.6.2.2 Pembuatan Larutan Induk Baku Fenilbutazon ... 18
3.6.2.3 Pembuatan Larutan Standar Metampiron ... 19
3.6.2.4 Pembuatan Larutan Standar Fenilbutazon .... 19
x
3.6.3.1 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum
Metampiron ... 19
3.6.3.2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Fenilbutazon ... 20
3.6.4 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif ... 3.6.4.1 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Metampiron ... 20
3.6.4.2 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif Fenilbutazon ... 20
3.6.5 Penentuan Zero Crossing ... 21
3.6.6 Penentuan Panjang Gelombang Analisis ... 21
3.6.7 Pembuatan dan Penentuan Linieritas Spektrum Kalibrasi 21
3.6.7.1 Pembuatan dan Penentuan Spektrum Kalibrasi Metampiron ... 21
3.6.7.2 Pembuatan dan Penentuan Spektrum Kalibrasi Fenilbutazon ... 22
3.6.8 Penetapan Kadar Metampiron dan Fenilbutazon dalam Sediaan Kapsul ... 22
3.6.9 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik... 23
3.6.10 Uji Validasi ... 24
xi
4.3.2 Penentuan Zero Crossing pada Serapan DerivatKedua 30
4.4 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Analisis Metampiron dan Fenilbutazon ... 32
4.5 Hasil Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi ... 36
4.5.1 Kurva Kalibrasi ... 36
4.5.2 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ... 37
4.6 Hasil Penentuan Kadar Metampiron dan Fenilbutazon dalam Sediaan Kapsul ... 37
4.7 Hasil Uji Validasi ... 38
4.7.1 Hasil Uji Akurasi ... 38
4.7.2 Hasil Uji Presisi ... 39
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 40
5.1 Kesimpulan ... 40
5.2 Saran ... 40
DAFTAR PUSTAKA ... 41
xii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Panjang Gelombang Analisis dan Absorbansi Pada Derivat Kedua ... ... 35
4.2 Kadar Metampiron dan Fenilbutazon dalam Sampel Kapsul ... 38 4.3 Hasil Perolehan Kembali Metampiron dan Fenilbutazon Pada
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Struktur Metampiron ... 5 2.2 Struktur Fenilbutazon ... 6 4.1 Spektrum Serapan Maksimum Metampiron Konsentrasi 16
µg/mL... ... 26 4.2 Spektrum Serapan Maksimum Fenilbutazon Konsentrasi 9,5
µg/mL ... 26 4.3 Spektrum Tumpang Tindih Serapan maksimum Maksimum
Metampiron Konsentrasi 16 µg/mL dan Fenilbutazon Konsentrasi 9,5 µg/mL ... 27 4.4 Spektrum Serapan Metampiron Konsentrasi 24 µg/mL ... 28 4.5 Spektrum Serapan Fenilbutazon Konsentrasi 10 µg/mL ... 28 4.6 Spektrum Tumpang Tindih Serapan Metampiron dan
Fenilbutazon ... 28 4.7 Spektrum Serapan Metampiron Konsentrasi 24 µg/mL pada
Derivat Pertama ... 29 4.8 Spektrum Serapan Fenilbutazon Konsentrasi 10 µg/mL pada
Derivat Pertama ... 29 4.9 Spektrum Tumpang Tindih Metampiron dan Fenilbutazon pada
Derivat Pertama ... 30 4.10 Spektrum Serapan Metampiron Konsentrasi 24 µg/mL pada
Derivat Kedua ... 31 4.11 Spektrum Serapan Fenilbutazon Konsentrasi 10 µg/mL pada
Derivat Kedua ... 31 4.12 Zero Spektrum Tumpang Tindih Serapan Metampiron dan
Fenilbutazon pada Derivat Kedua ... 31 4.13 Spekrum Tumpang Tindih Serapan Derivatif Kedua Metampiron
xiv
4.14 Panjang Gelombang Analisis Metampiron λ = 251,20 nm ... 33 4.15 Panjang Gelombang Analisis Fenilbutazon λ = 222,60 nm ... 33 4.16 Spektrum Kalibrasi Metampiron Pada Panjang Gelombang
251,20 nm ... 36 4.17 Spektrum Kalibrasi Fenilbutazon Pada Panjang Gelombang
222,60 nm ... 36
xv
DAFTAR GAMBAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Kotak Kemasan sampel Neo Antidorin® Kapsul ... 43
2. Sampel Neo Antidorin® Kapsul... 43
3. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800) ... 45
4. Neraca analitik (Mettler Toledo) ... 45
5. Sonikator (Branson 1510) ... 45
6. Spektrum serapan metampiron konsentrasi 12 μg/mL ... 52
7. Spektrum serapan metampiron konsentrasi 16 μg/mL ... 52
8. Spektrum serapan metampiron konsentrasi 20 μg/mL ... 52
9. Spektrum serapan metampiron konsentrasi 24 μg/mL ... 53
10. Spektrum serapan metampiron konsentrasi 28 μg/mL ... 53
11. Spektrum serapan fenilbutazon konsentrasi 4 μg/mL ... 53
12. Spektrum serapan fenilbutazon konsentrasi 6 μg/mL ... 54
13. Spektrum serapan fenilbutazon konsentrasi 8 μg/mL ... 54
14. Spektrum serapan derivat konsentrasi 10 μg/mL ... 54
15. Spektrum serapan fenilbutazon konsentrasi 12 μg/mL ... 55
16. Spektrum serapan derivat pertama metampiron konsentrasi 12 μg/mL ... 56
17. Spektrum serapan derivat pertama metampiron konsentrasi 16 μg/mL ... 56
18. Spektrum serapan derivat pertama metampiron konsentrasi 20 μg/mL ... 56
xvi
20. Spektrum serapan derivat pertama metampiron konsentrasi 28 μg/mL ... 57
21. Spektrum serapan derivat pertama fenilbutazon konsentrasi 4 μg/mL ... 57
22. Spektrum serapan derivat pertama fenilbutazon konsentrasi 6 μg/mL ... 58
23. Spektrum serapan derivat pertama fenilbutazon konsentrasi 8 μg/mL ... 58
24. Spektrum serapan derivat pertama fenilbutazon konsentrasi 10 μg/mL ... 58
25. Spektrum serapan derivat pertama fenilbutazon konsentrasi 12 μg/mL ... 59
26. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 12 μg/mL ... 60
27. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 16 μg/mL ... 60
28. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 20 μg/mL ... 60
29. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 24 μg/mL ... 61
30. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 28 μg/mL ... 61
31. Spektrum serapan derivat kedua fenilbutazon konsentrasi 4 μg/mL ... 61
32. Spektrum serapan derivat kedua fenilbutazon konsentrasi 6 μg/mL ... 62
33. Spektrum serapan derivat kedua fenilbutazon konsentrasi 8 μg/mL ... 62
34. Spektrum serapan derivat kedua fenilbutazon konsentrasi 10 μg/mL ... 62
xvii
36. Spektrum serapan derivat kedua metampiron konsentrasi 24 μg/mL pada λ = 251,20 nm ... 64
37. Spektrum serapan derivat kedua fenilbutazon konsentrasi 10 μg/mL pada λ = 222,60 nm ... 64
38. Spektrum serapan derivat kedua campuran metampiron konsentrasi 24 μg/mL dan fenilbutazon konsentrasi 10 μg/mL 65 39. Spektrum overlay serapan derivat kedua metampiron,
fenilbutazon μg/mL dan campuran (fenilbutazon konsentrasi 10 μg/mL dan metampiron konsentrasi 24 μg/mL) ... 65
40. Kurva kalibrasi metampiron pada kurva serapan derivat kedua pada panjang gelombang 251,20 nm ... 90 41. Kurva kalibrasi fenilbutazon pada kurva serapan derivat kedua
pada panjang gelombang 222,60 nm ... 92 42. Spektrum serapan sampel sediaan kapsul X ... 95
43. Spektrum serapan perolehan kembali 120% pada sampel sediaan kapsul X ... 104 44. Spektrum serapan perolehan kembali 100% pada sampel
sediaan kapsul X ... 104 45. Spektrum serapan perolehan kembali 120% pada sampel
xviii
7. Spektrum Serapan Derivat Pertama Baku Metampiron dan Baku Fenilbutazon ... 56
8. Spektrum Serapan Derivat Kedua Baku Metampiron dan Baku Fenilbutazon ... 60
9. Spektrum Serapan Panjang Gelombang Analisis Baku Metampiron dan Baku Fenilbutazon ... 64
10. Data Hasil Pengukuran Derivat Kedua Metampiron dan Fenilbutazon Serta Campuran Metampiron dan Fenilbutazon λ = 200-400 ... 66
11. Data Kalibrasi Metampiron BPFI, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi ... 89
12. Data Kalibrasi Fenilbutazon BPFI, Persamaan Regresi dan Koefisien Korelasi ... 91
13. Perhitungan Batas Deteksi (Limit of Detection, LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantitation, LOQ) Metampiron . 93
14. Perhitungan Batas Deteksi (Limit of Detection, LOD) dan Batas Kuantitasi (Limit of Quantitation, LOQ) Fenilbutazon .. 94
15. Spektrum Serapan Derivat Kedua Sampel ... 95
xix
17. Contoh Perhitungan Kadar Metampiron dan Fenilbutazon dalam Sediaan Kapsul ... 97 18. Perhitungan Statistik Metampiron pada Sampel Kapsul ... 100 19. Perhitungan Statistik Fenilbutazon pada Sampel Kapsul ... 102 20. Spektrum Serapan Sampel kapsul X pada Uji Perolehan
Kembali ... 104 21. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Metampiron pada
Sampel Kapsul ... 106 22. Data Hasil Persen Perolehan Kembali Fenilbutazon pada
Sampel Kapsul ... 107 23. Contoh Perhitungan Persen Perolehan Kembali (%Recovery) 108 24. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar
deviasi Perolehan Kembali Metampiron pada Sampel Kapsul 114 25. Perhitungan Rata-Rata, Standar Deviasi dan Relatif Standar
