UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA
DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH
PURWOKERTO
SKRIPSI
SKRIPSI
Disusun untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1
OLEH Dwi Astuti 0901070034
PERSEMBAHAN
Karya ini saya persembahkan untuk;
Ayah dan Ibunda tercinta yang selalu memberi kasih sayang serta motivasi dan do’a yang tiada hentinya.
Suamiku tercinta yang selalu memberi do’a, semangat dan dukungan yang
sangat besar untuk Aku menyelesaikan skripsi ini.
MOTO
Hadapi hidup dengan penuh senyuman meski dalam kesedihan
“ Tidak peduli tentang apa, bila sudah mulai mengerjakan dan belum berhasil, maka jangan menyerah “ (William Shakespeare)
Kebahagiaan tidak datang dari luar, tapi tumbuh di dalam hati Anda, yang membibit dari kesyukuran dan berkembang karena ketegasan untuk memilih
UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI
Penelitiaan yang berjudul Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto telah dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi dan Lingkungan sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis bakteri yang ada di udara sekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto serta isolat yang dapat menghasilkan enzim amilase, protease, dan lipase. Metode yang digunakan adalah metode survei, sedangkan isolasi bakteri menggunakan metode piranti benturan padat dan streak kuadran. Pengamatan makroskopis bakteri dilakukan langsung dengan melihat bentuk, elevasi, pigmentasi, tepi, permukaan, dan halus-kasarnya permukaan koloni. Pengamatan mikroskopis bakteri meliputi pewarnaan gram dan uji biokimia (uji indol, uji methyl red, uji fermentasi karbohidrat, uji katalase, uji voges proskaeur). Identifikasi bakteri menggunakan buku identifikasi bakteri dari Holt, dkk. (1994) dalam Bergey’s of determinative Bacteriology 9th. Bakteri yang berhasil diisolasi dari udara sebanyak 10 isolat, yaitu Klebsiella, Phenylobacterium, Serratia, Citrobacter, Azomonas, Alcaligenes, Budvicia, Brucella, Neserria, Echerichia .Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik protease adalah Klebsiella, Serratia, dan Citrobacter. Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik amilase adalah Klebsiella, Brucella, Neiserria ,dan Echerichia. Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik lipase adalah Serratia, Citrobacter, dan Alcaligenes. Hasil dianalisis secara deskriptif analitatif
UCAPAN TERIMAKASIH
Segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT. Karena atas berkah, rahmat, karunia dan ridho-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di Sekitar Kampus
Universitas Muhammadiyah Purwokerto”. Dikesempatan kali ini penulis
mengucapkan terima kasih yang setulus-tulusnya kepada Bapak Drs. Heri Maryanto M.Si. dan Bapak Teguh Julianto M.Si. yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skrpsi dengan baik dan benar.
Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang membangun dan bermanfaat. Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar dapat mencapai tujuan yang diharapkan sesuai dengan kemampuan yang penulis miliki.
Selain itu penulis juga mengucapkan terimakasih kepada:
1. Drs. Ahmad, M.Pd selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto atas fasilitasi kelancaran skripsi.
4. Staf karyawan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan. 5. Staf laboran yang telah memberi bantuan selama penelitian.
6. Bapak dan Ibu yang senantiasa selalu memberikan Do’a dan semangat, beribu-ribu terima kasih untuk semuanya yang tak akan cukup jika diungkapkan dengan kata-kata dan yang tak akan mungkin terbalaskan sampai kapanpun.
7. Suami tercinta yang selalu mendo’akan, memberi semangat dan dukungan serta segala bantuan yang telah diberikan.
8. Keluarga besarku yang telah memberikan dukungan dan do’a.
9. Agun Gunawan rekan kerja di Laboratorium Mikrobiologi, terimakasih atas bantuan dan kerjasamanya selama penulis melaksankan penelitian dan penulisan skripsi ini.
10. Teman-teman seperjuangan di Prodi Pendidikan Biologi 2009 atas kerjasamanya selama ini.
11. Kepada semua pihak yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini.
Semoga amal dan kebaikan amal dan kebaikan yang telah diberikan Bapak dan Ibu dosen serta teman-teman semua kepada penulis mendapat balasan yang setimpal dari Allah SWT. Semoga dapat bermanfaat bagi pembaca.
Purwokerto, ...
DAFTAR ISI
2.3.4 Pengaruh Faktor Lingkungan pada Pertumbuhan Bakteri ... 10
2.4 Mikrobiologi Udara ... 14
2.4.2. Udara di Luar (Atmosfer) ... 14
2.5. Enzim ... 15
2.5.1. Enzim Protease ... 16
2.5.2. Enzim Amilase... 16
2.5.3. Enzim Lipase ... 16
BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian ... 18
3.2. Alat dan Bahan yang digunakan ... 18
3.2.1. Alat ... 18
3.2.2. Bahan ... 18
3.3. Metode Penelitian... 19
3.4. Prosedur Penelitian... 19
3.4.1. Pengambilan Sampel ... 19
3.4.2. Pembuatan Media ... 19
3.4.3. Isolasi Bakteri ... 22
3.4.4. Pengamatan Karakteristik Bakteri ... 24
3.5. Identifikasi Bakteri ... 27
3.6. Pengujian Potensi Enzim ... 28
3.6.1. Pengujian Penghasil Protease ... 28
3.6.2. Pengujian Penghasil Amilase ... 28
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil ... 29
4.1.1. Hasil Isolasi Bakteri ... 29
4.1.2. Hasil Pengamatan Makroskopis Isolat Bakteri ... 29
4.1.3. Hasil Pengamatan Karakteristik Mikroskopis ... 30
4.1.4. Hasil Uji Biokimia ... 31
4.1.5. Hasil Identifikasi ... 35
4.1.6. Hasil Uji Potensi Bakteri ... 51
4.2. Pembahasan ... 54
4.2.1. Jenis Bakteri... 54
4.2.2. Hasil Pewarnaan Gram ... 59
4.2.3. Hasil Uji Biokimia ... 60
4.2.4. Hasil Uji Potensi ... 64
BAB V KESIMPULAN 5.1. Simpulan ... 71
5.2. Saran ... 71
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Tabel Halaman
Tabel 4.1. Kode isolat bakteri yang berhasil diisolasi dari udara yang ada di sekitar
kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto ... 29
Tabel 4.2. Hasil pengamatan karakteristik mikroskopis ... 30
Tabal 4.3. Hasil uji biokimia ... 31
Tabel 4.4. Hasil pengamatan karakteristik makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia genus Klebsiella ... 36
Tabel 4.5. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Phenylobacterium ... 38
Tabel 4.6. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Serratia ... 39
Tabel 4.7. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Citrobacter... 41
Tabel 4.8. Hasil Pengamatan makroskopi, mikroskopi, dan uji biokimia pada genus Azomonas ... 42
Tabel 4.9. Hasil pengmatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Alcaligenes ... 44
Tabel 4.10. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Budvicia ... 45
Tabel 4.11. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Brucella ... 47
Tabel 4.12. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Neisseria ... 48
Tabel 4.13. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Echerichia ... 50
Tabel 4.14. Hasil pengamatan potensi bakteri ... 51
Tabel 4.15. Tabel isolat bakteri yang telah diidentifikasi ... 54
Tabel 4.16. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik protease ... 64
Tabel 4.17. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik amilase ... 66
DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Gambar Halaman
Gambar 4.1. Hasil pengamatan karakteristik makroskopisbakteri... 30
Gambar 4.2. Hasil uji fermentasi karbohidrat ... 32
Gambar 4.3. Hasil uji indole ... 33
Gambar 4.4. Hasil uji katalase ... 33
Gambar 4.5. Hasil uji voges proskauer ... 34
Gambar 4.6. Hasil uji methyl red ... 35
Gambar 4.7. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-1 ... 37
Gambar 4.8. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-2 ... 38
Gambar 4.9. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-3 ... 40
Gambar 4.10. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-4 ... 41
Gambar 4.11. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-5 ... 43
Gambar 4.12. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-6 ... 44
Gambar 4.13. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-7 ... 46
Gambar 4.14. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-8 ... 47
Gambar 4.15. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-9 dan UD-11 49 Gambar 4.16. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-10 ... 50
Gambar 4.17. Hasil pengamatan uji enzim protease ... 52
Gambar 4.18. Hasil pengamatan uji enzim amilase ... 53
Gambar 4.19. Hasil pengamatan uji enzim lipase ... 54
Gambar 4.20. Reaksi penguraian trytophan oleh enzim trytophanase ... 61
Gambar 4.21. Persamaan reaksi penguraian H2O2 oleh enzim katalase ... 62
Gambar 4.22. Persamaan reaksi fermentasi karbohidrat ... 62
Gambar 4.23. Persamaan reaksi perubahan warna pada medium uji Voges Proskaue... 63
DAFTAR LAMPIRAN
Nomor Judul Lampiran Halaman
Lampiran 1. Kode isolat untuk masing-masing bakteri ... 77
Lampiran 2. Hasil identifikasi isolat-isolat bakteri ... 78
Lampiran 3. Pengamatan mikroskopis bakteri ... 80