Itik
PEMBENTUKAN TROMBUS PADA ITIK YANG DIINFEKSI
PASTEURELLA MULTOCIDA
WIWIN WINARSIH', HERNomoAm HUMINTo' , BiBIANA W. LAYZ EVA HARLINA', dan BAMBANG P. PRIOSOERYANTO'
tStafLaboratorium Patologi Veteriner Bagian Parasitologi dan Patologi FKH-IPB 2StafLaboratorium Bakteriologi Bagian Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat FKH-IPB
Ksta kunei :Trombus,Pasteurella multocida
ABSTRAK
Seratus ekor itik alabio yang berumur lima minggu dibagi menjadi 4 kelompok berdasarkan rute infeksi yaitu kelompok intravena (IV), intramuskular (IM), intratrakhea (IT) dan kelompok kontrol (K). Kelompok IV, IM dan IT diinfeksi denganPasteurella multocidaisolat lapang dengan dosis 2 x 10 5 efu. Pada 1, 3, 6, 12 dan 24 jam setelah infeksi (pi) itik dinekropsi . Kelompok itik yang diinfeksi yaitu kelompok IV, IM dan IT menunjukkan lesio pada pembuluh darah organ hati dan paru-paru. Lesio yang terjadi pada pembuluh darah kedua organ tersebut adalah pembentukan trombus, hiperemi dan vaskulitis . Terbentuknya trombus dalam pembuluh darah hati dan paru-paru merupakan perubahan yang paling menonjol .
PENDAHULUAN
Penyakit kolera merupakan salah satu penyakit menular pada unggas yang telah lama dikenal. Penyakit yang disebabkan oleh bakteri Pasteurella multocida dapat menyerang baik domestik maupun unggas liar (ADLAM clan RUTrER, 1989; RIMLER dan GLISSON, 1997). Itik merupakan merupakan unggas yang sangat rentan terhadap kolera .
Perubahan patologi pada organ tubuh inang yang ditimbulkan oleh kolera tergantung pada bentuk penyakit yaitu perakut, akut atau kronis dam keparahan penyakit (RIMLER dan GLISSON, 1997). Itik biasanya terserang kolera pada umur 4 mimggu keatas, Serangan kolera pada itik yang berumur muda menyebabkan perubahan makroskopi (patologi anatomi) dan mikroskopi yang lebih parah bila dibandingkan dengan serangan penyakit pada umur yang lebih tua (HUNTER dan WOBESER, 1980).Menurut SNIPES et al. (1987)kolera yang akut merupakan penyakit pada sistem sirkulasi dan organ-organ yang berkaitan dengan sistem tersebut . Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui perubahan patologi pada pembuluh darah pada beberapa organ tubuh itik yang diinfeksi P. multocidaisolat lapang melalui berbagai rute infeksi dalam periode tertentu setelah infeksi .
MATERI DAN METODE
Pada penelitian ini digunakan 100 ekor itik alabio betina yang berumur 5 minggu . Itik dibagi menjadi 4 kelompok berdasarkan rute infeksi yaitu kelompok intravena (IV), intramuskular (IM), intratrakhea (IT) dam kontrol (K) yang tidak diinfeksi. Itik dipelihara berkelompok. Pakan dan air minum diberikan secaraad libitum.
Bakteri P. multocida
Seminar Nasional Peternakan dan Veteriner 2000
Bakteri yang digunakan adalah P. multocida isolat lapang yang berasal dari itik(WINARSIH et al., 1997). Bakteri diisolasi dari darah jantung dan sumsum tulang itik tersebut. Bakteri ditumbuhkan pada media agar darah pada suhu 37°C selama 24 jam. Selanjutnya dilakukan uji biokimia untuk mengidentifikasi bakteri yang berhasil diisolasi.
Infeksi P. multocida
Itik diinfeksi pada saat berumur 5 minggu dengan dosis 2 x 105 colonyforming unit (cfu). Pada kelompok IV bakteri disuntikan pada vena brachialis dan pada kelompok IM bakteri disuntikan pada otot paha. Pada kelompok IT bakteri diinfeksikan ke dalam trakhea.
Pemeriksaan pasea mati dan mikroskopi
Pada 1, 3, 6, 12 dan 24 jam setelah infeksi (si) dilakukan nekropsi pada 5 ekor itik dari setiap kelompok. Kemudian perubahan/lesio makroskopi pada pada organ hati dan paru-paru diamati.
Untuk pemeriksaan mikroskopi hati dan paru-paru dikumpulkan dan difiksasi dalam larutan buffer normal formalin 10%. Kemudian didehidrasi dengan alkohol dan dilakukan proses clearing dengan xylol. Selanjutnya dicetak dalam paraffin dan dipotong dengan ketebalan Spm. Preparat diwarnai dengan pewanaan hematoksilin dan eosin (HE). Pengamatan lesio pada pembuluh darah yang terjadi menggunakan skor berdasarkan keparahan lesio(PRANTNERet al., 1990).
Tabel 1. Penfaian lesio mikroskopi pembuluh darah hati dan paru-paru
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada kelompok IV, IM dan IT terjadi pembendungan, pembengkakan, pendarahan dan fokal nekrotik pada organ hati (Tabel 2). Pada kelompok IV, IM dan IT juga ditemukan pembendungan, edema, pendarahan serta pneumonia pada organ paru-paru. Pada kelompok IT juga terjadi pleuritis. Sementara itu, pada kelompok kontrol tidak ditemukan lesio.
Menurut ADLAM dan RuTTER (1989) secara umum lesio makroskopi yang terjadi ' akibat penyakit kolera terdiri dari 2 tipe. Tipe pertama berupa gangguan sirkulasi pada kolera akut yang meliputi hiperemi umum, pendarahan ptekhial atau ekimosa pada jaringan terutama pada epikardium jantung, serosa, mukosa usus, hati dan paru-paru. Tipe kedua adalah lesio yang bersifat lokal dan eksudatif pada kolera kronis. Oleh karena itu berdasarkan perubahan makroskopi yang terjadi pada kelompok IV, IM dan IT maka kolera pada kelompok itik tersebut adalah kolera akut. Kelompok IV menunjukkan pendarahan hati yang paling hebat dan cepat. Sementara itu, pada paru-paru kelompok IT menunjukkan lesio yang paling hebat dan cepat.
Lesio Skor lesio
0 1 2 3 4
Hiperemi Tidak ada 1-5 6-10 11-15 >15 Trombus Tidak ada l-5 6-10 11-15 >15
Tabel 2. Perubshan makroskopi organ hati dan paru-paru itik pasc infeksi
Keterangan : Pn. akut : pneumonia akut ysitu pendarahan dan edema Pn. fibrinopurulen : pneumonia fibrinopurulen S1 - sesudah infeksi
Pada pemeriksaan mikroskopi organ hati dan paru-paru kelompok IV, IM dan IT terjadi hiperemi dan pembentukan trombus dalam pembuluh darah (Tabel 3 dsn 4). Psda pembuluh darah juga ditemukan banyak sel radang dan terjadi kerusakan endotel atau vaskulitis dan edema perivaskuler. Trombus terdiri dari fibrin yang berbentuk seperti benang serta sel-sel darah yang membentuk gumpalan.
Tabel 3. Hssil pengamatan lesio mikroskopi pembuluh darah hati
Keterangan : S1 =Sesudah infeksi
Pada kelompok IV clan IM trombus mulai terjadi pada pembuluh darah hati pada 1 jam si dsn semakin hebat padajam 3, 6, 12 dsn 24 jam si. Sementara iotu, pada kelompok IT trombus pada hati baru teramati pada 3 jam si. Kelbmpok IV menunjukan terbentuknya trombus yang paling cepat dan hebat.
Beberapa peneliti pernah menggambarkan keadaan ini seperti SNIPES et al. (1987), pada penelitiannya melaporkan bahwa infeksi P. multocida secara intravena pada kalkun, pada 1 jam si telah terjadi kerusakan pada hati. Sementara itu, RHOADESdanRIMLER(1993) yang menginfeksikan
P. multocidasecara intratrakheal pada kalkun, lesio pada hati baru terjadi 6 jam si.
554 Lesio SI (Jam) K IV Kelompok IM IT Hiperemi 1 0,2 1,8 1,2 0,8 3 0,2 3,0 1,8 1,2 6 0,2 3,2 2,2 1,8 12 0,4 2,6 2,6 , 2,2 24 0,2 2,4 2,2 2,2 Trombus 1 0,0 0,6 0,2 0,0 3 0,0 1,6 0,8 0,4 6 0,0 2,6 1,8 1,2 12 0,0 3,4 2,6 1,8 24 0,0 3,6 3,2 2,4 Organ SI (Jam) K -Kelompok IV IM IT
Hati 1 Tidsk ada Tidak ada Tidak ada Tidak ada
3 Tidsk ada Pendarahan Pembendungan Tidak ada
6 Tidsk ada Pendarahan Pembendungan Pembendungan
12 Tidsk ada Bengksk Pendarahan Pendarahan
24 Tidsk ada Foksl nekrotik Bengkak Bengkak
Paru-Paru 1 Tidsk ada Tidak ada Tidsk ada Pembendungan
3 Tidsk ada Pembendungan Tidak ada Pn. akut
6 Tidsk ada Pembendungan Pembendungan Pn.fibrinopurulen 12 Tidsk ada Pn. akut Pembendungan Pn.fibrinopurulen
Keterangan:S1=Sesudah infeksi
Seminar Nasional Peternakan dan Veteriner 2000
Tabel 4. Hasil pengamatan lesio mikroskopi pembuluh darah paru-paru
Seperti halnya pada organ hati, pada organ paru-paru itik kelompok IV, IM dan IT ditemukan trombus, vaskulitis dan edema perivaskuler. Kelompok IT memperlihatkan lesio yang paling hebat. Pada kelompok IT trombus dan vaskulitis mulai teramati pada 1 jam si. Sementara itu, pada kelompok IV dan IM perubahan tersebut mulai terjadi pada 3 jam si. Lesio bertambah parah sejalan dengan bertambah lamanya infeksi.
Peradangan fibrinus pada organ tubuh dan adanya trombus dalam pembuluh darah merupakan kerusakan yang selalu ditemukan pada infeksi P.multocida(RIMLER dan GLISSON, 1997). Kerusakan atau nekrose pada sel endotel pembuluh darah akan menarik trombosit dan fibrinogen untuk melekat pada tempat kerusakan tersebut dan memacu terbentuknya trombus (JONES et al., 1997). Terbentuknya trombus ataudisseminated intravacular clotting(DIC) pernah dilaporkan terjadi pada ayam yang diinfeksi P. multocida (ADLAM dan RUTTER, 1989). Trombus ini dapat menyumbat arteriol, kapiler dan vena pada ayam. Paru-paru merupakan organ yang paling sering dan paling banyak ditemukan trombus dibandingkan organ lainnya. Pada itik trombus ditemukan pada paru-paru, limpa dan otak (HUNTER dan WOBESER, 1980). Trombus atau DIC diduga merupakan tahap terminal atau akhir dari kolera akut.
Pada kelompok kontrol selain hiperemi tidak ditemukan perubahan pada pembuluh darah hati dan paru-paru. Hiperemi yang terjadi dengan skor 0,2 - 0,4. Menurut JONES et al. (1997) hiperemi merupakan perubahan pada pembuluh darah yang dapat bersifat fisiologi atau patologi. Dengan demikian hiperemi yang terjadi pada kelompok kontrol diduga bersifat fisiologi karena tidak ditemukan perubahan patologi pada pembuluh darah dan lesio/perubahan makroskopi pada organ tubuh.
KESIMPULAN
Infeksi bakteri P. multocidasecara intravena, intramuskular dan intratrakhea pada itik alabio dapat menyebabkan pembendungan, pendarahan, bengkak dan fokal nekrotik. Pada paru-paru menyebabkan pembendungan, edema, pendarahan dan pneumonia serta pleuritis. Infeksi bakteri tersebut juga menyebabkan perubahan mikroskopik pada pembuluh darah hati dan paru-paru. Berupa hiperemi, trombus, vaskulitis dan edema perivaskular.
555 Lesio SI (Jam) K Kelompok IV IM IT Hiperemi 1 0,4 1,6 1,2 2,2 3 0,2 2,4 2,0 2,6 6 0,4 2,6 2,4 3,2 12 0,4 2,8 2,6 2,6 24 . 0,2 2,6 2,4 2,4 Trombus 1 0,0 0,0 0,0 0,2 3 0,0 0,2 0,0 0,8 6 0,0 1,4 0,8 1,6 12 0,0 1,8 1,4 2,4 24 0,0 2,0 1,6 3,0
DAFTAR PUSTAKA
ADLAM, C. andR. RUTTER. 1989. Pasteurella and Pasteurellosis. Academic Press, Harcout Brace Jovanovich, Publisher London:
HUNTER, B. and G.WoBEsER. 1980. Pathology of experimental avian cholera in mallard ducks. Avian Dis. 24:403-414.
JoNEs, T.C., D. HUNT, and N. W.KING. 1997. Veterinary Pathology. Williams And Wilkins, Baltimore. pp. 1392.
PRANTNER,M. M., B. G.HARmoN, J. R. GLISSON,and E. A.MAHAFFEY. 1990. The pathogenesis of Pasteurella multocida serotype a:3,4 infection in Turkeys: A comparison of two vaccine strains and a field isolate. Avian Dis. 34:260-266.
RHoADEs, K. R.and R.B. RIWff.ER. 1990. Pasteurella multocida colonization and invasion in experimentally exposed Turkey poults. Avian Dis. 34:381-383 .
RHoADEs,K. R.and R.B. RIwaER. 1993. Pasteurella multocida virulence factors : Selection of fowl cholera inducing and non inducing strains. Avian Dis. 37:1071-1073.
RIMLER, R. B. and J. R. GLtssON. 1997. Pasteurellosis. In: Calnek B. W., H. J. Barnes, C.W. Beard, L.R. McDougald and Y. M. Saif(eds). Diseases ofPoultry. Iowa State University Press, Ames. pp. 143-149. SNim, K. P., G. Y. GHAZIKHANIAN, and D. C. HIRSH. 1987. Fate of Pasteurella multocida in the blood
vascular system of turkeys following intravenous inoculation: Comparison of an encapsulated virulent strain with its avirulent, acapsular variant. Avian Dis 31 :254-259 .
