Potensi Bakteri Endofit Akar Ubi Jalar Varietas Papua Patippi
dalam Melarutkan Fosfat secara In Vitro
Potency of Endophytic Bacteria Isolated from Sweet Potato’s Roots Var. of Papua Patippi
to Dissolve Phosphate In Vitro
Ana Mariatul Khiftiyah*, Yuliani, Lisa Lisdiana
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Surabaya
* e-mail: ana.khiftiyah@gmail.com ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji kemampuan delapan isolat bakteri endofit yang sebelumnya telah berhasil diisolasi dari akar tanaman ubi jalar varietas Papua Patippi dalam melarutkan fosfat. Penelitian dilakukan selama bulan Februari sampai Juni 2016 di Laboratorium Mikrobiologi dan Laboratorium Fisiologi, Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Negeri Surabaya. Kualitas kemampuan delapan isolat bakteri endofit dalam melarutkan fosfat diketahui dengan cara menghitung solubilizing index (SI) masing-masing isolat bakteri setelah ditumbuhkan pada media Pikovskaya agar yang mengandung trikalsium fosfat sebagai sumber fosfat. Konsentrasi fosfat terlarut yang dapat dilarutkan oleh bakteri diukur dengan metode spektrofotometri pada hari ke-0 dan hari ke-7 waktu inkubasi bakteri pada media Pikovskaya cair. Isolat bakteri endofit yang dapat melarutkan fosfat adalah isolat A2, A3, B1, B3, C1, dan C2 dengan kualitas kemampuan pelarutan fosfat yang terbesar ditunjukkan oleh isolat C2. Konsentrasi fosfat pada hari terakhir inkubasi yang berhasil dilarutkan oleh masing-masing isolat bakteri adalah antara 2,739 ppm sampai 3,962 ppm. Isolat bakteri yang dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi tertinggi adalah isolat bakteri A3.
Kata kunci: bakteri endofit; pelarutan fosfat; solubilizing index (SI)
ABSTRACT
This research aimed to test the ability of eight isolates of endophytic bacteria that had been isolated from the roots of sweet potato var. Papua Patippi in dissolving phosphate. This research was conducted during February to June 2016 in the Microbiology and Physiology Laboratory, Biology Department, Mathematics and Natural Science Faculty, State University of Surabaya. The quality capability of eight isolates of endophytic bacteria in dissolving phosphate determined by calculating the phosphate solubilizing index (SI) after the bacteria had been grown on solid Pikovskaya containing tricalcium phosphate as a source of phosphate for five days. The concentration of dissolved phosphate that could be dissolved by bacteria measured by spectrophotometric method on 0th and 7th day of incubation in broth Pikovskaya. Endophytic bacteria isolates that had ability to dissolve phosphate were isolate A2, A3, B1, B3, C1, and C2. Based on SI, C2 was the isolate that had the best quality to dissolve phosphate.The concentration of phosphate that had been dissolved by each isolates was between 2,739 ppm and 3,962 ppm. The highest concentration of dissolved phosphate was dissolved by A3.
Key words: endophytic bacteria; solubilizing phosphate; solubilizing index (SI)
.
PENDAHULUAN
Fosfor merupakan salah satu kebutuhan
tanaman yang harus dipenuhi supaya
pertumbuhan dan perkembangan tanaman tidak terganggu. Fosfor merupakan makronutrien kedua setelah nitrogen yang paling banyak dibutuhkan oleh tanaman (Sashidhar and Podile, 2010). Meskipun dibutuhkan oleh tanaman dalam jumlah yang banyak, namun sebagian besar fosfor tanah (95-99%) berada dalam bentuk tidak larut sehingga tanaman tidak mampu menyerap unsur tersebut (Ranjan et al., 2013). Tanaman membutuhkan ~30 µmol/L fosfor, sementara fosfor yang tersedia di tanah hanya sekitar 1
µmol/L (Sashidhar and Podile, 2010). Tumbuhan menyerap fosfor dalam bentuk anion monovalen
fosfat H2PO4- dan bivalen fosfat HPO42- (Salisbury
and Ross, 1985). Rendahnya fosfor dalam bentuk yang terlarut disebabkan karena fosfor mudah terikat dengan Al, Fe, dan Ca (Widawati et al., 2008). Fosfat cenderung berikatan dengan Al dan Fe membentuk Al-fosfat dan Fe-fosfat pada tanah dengan pH asam (pH<5), sedangkan pada tanah dengan pH basa (pH>7) fosfat cenderung berikatan dengan Ca membentuk Ca-fosfat (Widawati et al., 2008).
Penanganan yang dilakukan untuk
mengatasi keterbatasan fosfor dalam bentuk
terlarut di tanah salah satunya adalah dengan menggunakan bakteri pelarut fosfat (BPF).
Beberapa bakteri yang diketahui dapat
melarutkan fosfat merupakan bakteri endofit (Duangpaeng et al., 2013). Bakteri endofit adalah bakteri yang berada dalam jaringan tumbuhan paling sedikit selama satu siklus hidupnya tanpa menyebabkan penyakit pada tumbuhan inang (Azevedo et al., 2000; Mili t and Buzait , 2011). Bakteri endofit mampu memacu pertumbuhan
tanaman, misalnya meningkatkan
perkecambahan, meningkatkan biomassa,
meningkatkan luas permukaan daun,
meningkatkan jumlah klorofil, meningkatkan jumlah nitrogen yang dapat diserap oleh tanaman, pemanjangan akar dan pucuk tanaman, dan toleransi terhadap tekanan lingkungan (Marella, 2014). Bakteri endofit juga diketahui mampu menghasilkan fitohormon, misalnya hormon IAA (Anggara et al., 2014), melarutkan fosfat (Duangpaeng et al., 2013), dan sebagai agen biokontrol untuk tanaman inang (Resti et al., 2013).
Anggara et al. (2014) telah melakukan isolasi dan karakterisasi bakteri endofit yang dapat memproduksi IAA yang terdapat pada akar ubi jalar varietas Papua Patippi. Isolasi dan karakterisasi tersebut menghasilkan delapan isolat bakteri, yaitu isolat A1, A2, A3, B1, B2, B3, C1 dan C2. Kemampuan dari kedelapan isolat bakteri tersebut dalam melarutkan fosfat belum diketahui. Oleh karena itu dilakukan penelitian untuk mengetahui kemampuan dari kedelapan isolat bakteri hasil isolasi dan karakterisasi Anggara et al. (2014) dalam melarutkan fosfat serta untuk mengetahui konsentrasi fosfat terlarut yang dapat dilarutkan oleh bakteri endofit akar ubi jalar varietas Papua Patippi.
BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan pada bulan Februari-Juni 2016 di Laboratorium Fisiologi dan Laboratorium Mikrobiologi, Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Negeri Surabaya. Bakteri yang digunakan pada penelitian ini merupakan isolat bakteri endofit akar ubi jalar varietas Papua Patippi hasil isolasi dan karakterisasi Anggara et
al. (2014). Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah media Pikovskaya, media
nutrient agar, dan larutan KH2PO4 (larutan standar
fosfat). Media Pikovskaya dibuat berdasarkan komposisi Rao (1982) dalam Atekan et al. (2014).
Uji kemampuan bakteri dalam melarutkan fosfat secara kualitatif dimulai terlebih dahulu dengan meremajakan kedelapan isolat bakteri endofit dalam media nutrient agar (NA), kemudian diinkubasi selama 48 jam dengan suhu
30ºC. Setelah 48 jam, masing masing isolat bakteri endofit ditumbuhkan pada media Pikovskaya agar dalam cawan petri, kemudian diinkubasi pada suhu 30ºC selama lima hari (Aung et al., 2011). Pada hari kelima dilakukan pengukuran terhadap diameter koloni dan diameter halozone di sekitar isolat bakteri menggunakan penggaris.
Halozone yang terbentuk di sekitar isolat bakteri
menunjukkan bahwa terdapat aktivitas pelarutan fosfat (Atekan et al., 2014). Berdasarkan halozone yang terbentuk maka dapat dihitung indeks pelarutan atau solubilizing index (SI). Nilai SI dapat dihitung dengan rumus berikut (Duangpaeng et
al., 2013):
SI=
Pada rumus penghitungan solubilizing index tersebut, yang dimaksud diameter koloni adalah diameter koloni isolat bakteri yang dapat membentuk halozone di sekitar koloni bakteri tersebut, sedangkan diameter halozone merupakan lebar halozone ditambah dengan diameter koloni bakteri (Ulfiyati dan Zulaika, 2015). Bakteri yang dapat membentuk halozone ketika ditumbuhkan pada media Pikovskaya agar akan digunakan
untuk uji kuantitatif untuk mengetahui
konsentrasi fosfat yang dapat dilarutkan oleh bakteri endofit.
Isolat bakteri endofit yang dapat membentuk
halozone di sekitar koloni bakteri selanjutnya
ditumbuhkan dalam media Pikovskaya cair yang
mengandung 5 g/L Ca3(PO4)2. Sebanyak 1 ml
isolat bakteri endofit pelarut fosfat dengan
konsentrasi 108 CFU/ml yang ditentukan dengan
metode Mc Farland diinokulasikan ke dalam 100 ml Pikovskaya cair steril dalam wadah erlenmeyer 250 ml. Kultur bakteri yang
mengandung 108 CFU/ml bakteri kemudian
diinkubasi dalam shaker incubator selama tujuh hari dengan suhu 37ºC. Pada hari ke-0 dan hari ke-7 sebanyak 1,5 ml sampel diambil untuk disentrifus dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit. Sebanyak 1 ml supernatan digunakan untuk diukur konsentrasi fosfat terlarutnya dengan metode spektrofotometri menggunakan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 830 nm dengan reagen berupa larutan
sodium molybdate dan hydrazine sulphate (Aung et al., 2011). Media Pikovskaya steril (tanpa bakteri)
disediakan sebagai kontrol.
Data yang diperoleh pada penelitian ini berupa nilai SI dan konsentrasi fosfat terlarut pada kultur bakteri. Data yang diperoleh selanjutnya akan dianalisis secara deskriptif.
Kemampuan setiap isolat bakteri dalam
melarutkan fosfat secara kualitatif dan kuantitatif akan dibandingkan.
HASIL
Isolat bakteri endofit yang memiliki kemampuan dalam melarutkan fosfat dapat diketahui secara kualitatif dengan terbentuknya
halozone di sekeliling isolat bakteri yang
ditumbuhkan pada media Pikovskaya agar. Pada penelitian ini isolat bakteri A1 dan B2 tidak menunjukkan halozone di sekitar koloni isolat
setelah inkubasi lima hari, sedangkan enam isolat lainnya yaitu isolat A2, A3, B1, B3, C1, dan C2 dapat membentuk halozone dengan luas yang bervariasi. Berdasarkan halozone yang terbentuk selanjutnya dapat dihitung indeks pelarutan fosfat atau SI dari masing-masing isolat bakteri. Nilai SI masing-masing isolat bakteri ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Nilai solubilizing index (SI) isolat bakteri endofit akar ubi jalar varietas Papua Patippi.
Berdasarkan Tabel 1 diketahui bahwa isolat yang dapat melarutkan fosfat dengan nilai SI tertinggi yaitu isolat C2 sebesar 2,44 sedangkan isolat yang memiliki nilai SI terendah adalah isolat B1 sebesar 2,03. Isolat bakteri yang dapat melarutkan fosfat pada media Pikovskaya agar diukur kemampuan isolat bakteri tersebut dalam
melarutkan fosfat pada media Pikovskaya cair untuk mengetahui konsentrasi fosfat yang dapat dilarutkan oleh bakteri selama masa inkubasi tujuh hari. Hasil pengukuran konsentrasi fosfat terlarut pada awal dan akhir masa inkubasi ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Konsentrasi fosfat terlarut pada hari ke-0 dan ke-7 pada setiap isolat
Berdasarkan Gambar 1 dapat diketahui bahwa konsentrasi fosfat terlarut pada masing-masing isolat bakteri bervariasi. Isolat A2, A3, B1, B3, dan C2 mengalami peningkatan konsentrasi fosfat terlarut yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan peningkatan fosfat terlarut pada kontrol, sedangkan untuk isolat C1 konsentrasi fosfat terlarut mengalami penurunan pada akhir masa inkubasi jika dibandingkan dengan konsentrasi fosfat terlarut pada awal masa inkubasi. Isolat bakteri yang mampu melarutkan fosfat tertinggi
adalah isolat A3 sebanyak 3,962 ppm, sedangkan isolat bakteri yang dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi terendah selama waktu inkubasi adalah isolat B3 sebesar 2,739 ppm.
PEMBAHASAN
Pada penelitian ini enam dari delapan isolat bakteri endofit yaitu isolat A2, A3, B1, B3, C1,dan C2 yang diuji dapat membentuk halozone di sekitar koloni bakteri, sehingga keenam isolat bakteri tersebut merupakan bakteri pelarut fosfat.
No Isolat SI 1 A2 2,19 2 A3 2,40 3 B1 2,03 4 B3 2,10 5 C1 2,16 6 C2 2,44
Terbentuknya halozone di sekitar isolat bakteri
yang ditumbuhkan pada media yang
mengandung sumber fosfat menunjukkan bahwa bakteri tersebut dapat melarutkan fosfat (Rodríguez and Fraga, 1999). Pada penelitian ini nilai SI isolat C2>A3>A2>C1>B3>B1. Luas
halozone menunjukkan kemampuan bakteri dalam
melarutkan fosfat secara kualitatif, yaitu menunjukkan besar atau kecilnya keamampuan bakteri dalam melarutkan fosfat (Rahayu et al., 2014). Berdasarkan nilai SI isolat bakteri yang memiliki kemampuan terbesar dalam melarutkan
fosfat adalah isolat C2.
Isolat bakteri endofit yang dapat melarutkan fosfat kemudian ditumbuhkan pada media Pikovskaya cair untuk mengetahui konsentrasi fosfat yang dapat dilarutkan oleh bakteri tersebut. Berdasarkan Gambar 1 dapat diketahui bahwa konsentrasi fosfat terlarut pada hari terakhir inkubasi isolat A3>C2>A2>C1>B1>B3. Hasil tersebut tidak berkorelasi dengan uji kualitatif yang ditunjukkan dengan nilai SI isolat C2>A3>A2>C1>B3>B1. Penelitian Duangpaeng et
al. (2013) menunjukkan bahwa isolat BRR3I01
yang memiliki nilai SI 3,9 dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi yang lebih rendah jika dibandingkan dengan isolat CHR2I02 yang memiliki nilai SI 2,7. Isolat lainnya, yaitu isolat CHR4I07 yang memiliki nilai SI 3,2 dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi yang lebih rendah jika dibandingkan dengan isolat CHR2I02 pada akhir masa inkubasi (Duangpaeng et al., 2013).
Berdasarkan Gambar 1 dapat diketahui bahwa isolat A2, A3, B1, B3, dan C2 mengalami peningkatan konsentrasi fosfat terlarut pada hari ke-7 inkubasi jika dibandingkan dengan hari ke-0 inkubasi, peningkatan konsentrasi fosfat terlarut juga sedikit lebih tinggi daripada kontrol. Berbeda dengan kelima isolat bakteri endofit pelarut fosfat sebelumnya, isolat C1 menunjukkan konsentrasi fosfat terlarut pada hari ke-7 inkubasi lebih rendah daripada konsentrasi fosfat terlarut pada awal inkubasi. Pada kultur isolat C1 konsentrasi fosfat terlarut berkurang sebanyak 0,015 ppm. Berkurangnya konsentrasi fosfat terlarut pada kultur isolat C1 dapat terjadi karena fosfat terlarut yang dilarutkan oleh bakteri digunakan sendiri oleh bakteri tersebut. Fosfor yang dihasilkan dari proses pelarutan maupun fiksasi fosfat oleh
mikroorganisme akan digunakan oleh
mikroorganisme tersebut (Saiyad et al., 2015). Todar (2000) menyatakan bahwa fosfor termasuk
elemen utama yang dibutuhkan dalam
pertumbuhan bakteri. Fosfor tersebut penting sebagai penyusunan asam nukleat dan fosfolipid (Todar, 2000).
Pelarutan Ca-fosfat menjadi fosfat terlarut disebabkan karena adanya penurunan pH (Widawati et al., 2008). Pada penelitian Suliasih dan Rahmat (2007) serta Widawati et al. (2008) yang menguji kemampuan bakteri dalam melarutkan fosfat pada media Pikovskaya cair, menunjukkan bahwa proses pelarutan fosfat diiringi dengan penurunan pH media.
Pada penelitian ini juga dilakukan uji pH kultur pada awal dan akhir masa inkubasi bakteri endofit pelarut fosfat dalam Pikovskaya cair sebagai data pendukung. Uji pH tersebut menunjukkan bahwa pada sebagian besar kultur isolat bakteri endofit kecuali kultur isolat C2 terjadi penurunan pH. Bakteri pelarut fosfat dapat memproduksi asam organik sehingga dapat menurunkan pH (Arcand and Schneider, 2006). Persamaan yang menunjukkan adanya reaksi substitusi proton melalui asam organik adalah (Goldstein, 1986 dalam Srividya et al., 2009): (Ca2+)m (PO43-)n + (HA) = (H+) (PO43-) + (Ca2+) (A-)
Berdasarkan persamaan tersebut, HA merupakan asam organik yang dihasilkan oleh bakteri dengan jenis yang bervariasi dan jumlah proton yang berbeda (Goldstein, 1986 dalam Srividya et al., 2009).
Berbagai jenis asam organik yang berperan dalam melarutkan fosfat telah banyak diketahui. Mahdi et al. (2011) menyatakan bahwa beberapa jenis asam organik yang ditemukan dalam pelarutan fosfat misalnya adalah asam fumarat, sitrat, 2-ketoglukonat, glukonat, laktat, glioksilat, dan ketobutirat. Selama pelarutan fosfat jenis asam organik yang paling sering ditemukan adalah asam glukonat dan asam 2-ketoglukonat (Krishnaraj and Dahale, 2014). Asam glukonat merupakan asam organik utama yang diproduksi oleh Pseudomonas spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Rhizobium spp., dan Erwinia herbicola (Krishnaraj and Dahale, 2014).
Pada kontrol terjadi peningkatan konsentrasi fosfat terlarut sebesar 0,347 ppm, lebih rendah daripada isolat A2, A3, B1, B3, dan C2. Adanya fosfor terlarut dengan konsentrasi yang lebih sedikit pada kontrol dibandingkan pada kultur isolat bakteri dapat terjadi karena proses sterilisasi dengan menggunakan autoklaf (Keneni et al., 2010). Sterilisasi menggunakan autoklaf dengan suhu yang tinggi dapat memutuskan ikatan Ca-fosfat pada medium secara fisik, sehingga ion
PO43- yang sebelumnya terikat dengan Ca dapat
terlepas dan menjadi bentuk fosfat terlarut (Raharjo et al., 2007; Keneni et al., 2010).
Berbeda dengan isolat A2, A3, B1, B3, dan C1 yang mengalami penurunan pH pada hari terakhir inkubasi, pada isolat C2 tidak terjadi penurunan pH. Pada hari terakhir inkubasi, pH kultur isolat C2 meningkat menjadi 4,4 jika
dibandingkan dengan pH kultur pada hari ke-0 inkubasi yaitu sebesar 4,0. Meskipun pH kultur meningkat namun peningkatan konsentrasi fosfat terlarut pada kultur isolat C2 lebih tinggi jika dibandingkan dengan kontrol, isolat A2, B1, B3, dan C1. Penurunan pH pada media tidak selalu berhubungan dengan pelarutan fosfat (Nautiyal et
al., 2000). Penelitian Atekan et al. (2014) yang
menguji kemampuan beberapa isolat bakteri dalam melarutkan fosfat menunjukkan bahwa dua dari delapan isolat bakteri pelarut fosfat yang diuji, yaitu isolat T-K2 dan T-K5 menunjukkan peningkatan konsentrasi fosfor terlarut pada akhir masa inkubasi, tetapi pH dari kultur kedua isolat tersebut juga mengalami peningkatan pada hari terakhir inkubasi.
Selain asam organik dan proton, faktor lain
yang berperan penting dalam pelarutan
trikalsium fosfat oleh mikroba adalah
eksopolisakarida (EPS) (Yi et al., 2008). Yi et al. (2008) menyatakan bahwa eksopolisakarida memiliki peran tidak langsung dalam pelarutan trikalsium fosfat. Pada penelitian Yi et al. (2008), isolat bakteri AzHy-510, memiliki pH kultur
4,69±0,05, dapat melarutkan P sebesar
229,03±15,23 ppm, konsentrasi P terlarut tersebut lebih tinggi jika dibandingkan dengan isolat bakteri EnHy-402 yang mengandung konsentrasi P terlarut sebesar 111,73±8,07 ppm dan memiliki pH kultur yang lebih rendah yaitu sebesar 4,51±0,02. Isolat AzHy-510 diketahui dapat memproduksi EPS dengan konsentrasi 1,24 g/L sedangkan isolat EnHy-402 tidak memproduksi EPS.
Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan bahwa bakteri endofit isolat A2, A3, B1, B3, C1, dan C2 dapat melarutkan fosfat. Di antara keenam isolat bakteri tersebut, isolat A3 merupakan isolat yang dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi
tertinggi meskipun kemampuan dalam
melarutkan fosfat secara kualitatif terbesar adalah isolat C2, sehingga aplikasi bakteri endofit yang telah diisolasi oleh Anggara et al., (2014) dari akar ubi jalar varietas Papua Patippi yang dapat melarutkan fosfat dapat dilakukan pada daerah yang kekurangan fosfat.
SIMPULAN
Terdapat enam isolat dari delapan isolat bakteri endofit yang diisolasi dari akar ubi jalar varietas Papua Patippi yang mampu melarutkan fosfat (Trikalsium fosfat) yaitu isolat A2, A3, B1, B3, C1, dan C2. Bakteri yang memiliki kemampuan dalam melarutkan fosfat dari yang terbesar adalah isolat C2, A3, A2, C1, B3, dan B1. Konsentrasi fosfat pada hari terakhir inkubasi isolat A2 adalah 3,315 ppm, A3 sebanyak 3,962
ppm, B1 sebanyak 2,801 ppm, B3 sebanyak 2,739 ppm, C1 sebanyak 2,892 ppm, dan C2 sebanyak 3,676 ppm. Isolat yang dapat melarutkan fosfat dengan konsentrasi tertinggi adalah isolat A3.
DAFTAR PUSTAKA
Anggara BS, Yuliani dan Lisdiana L, 2014. Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Endofit Penghasil Hormon
Indole Acetic Acid dari Akar Tanaman Ubi Jalar. LenteraBio. 3(3): 160-167.
Arcand MM and Schneider KD, 2006. Plant- and Microbial-Based Mechanisms to Improve The Agronomic Effectiveness of Phosphate Rock: A Review. Annals of The Brazilian Academy of Sciences. 78(4): 791-807.
Atekan, Nuraini Y, Handayanto E and Syekhfani, 2014. The Potential of Phosphate Solubilizing Bacteria Isolated from Sugarcane Wastes for Solubilizing Phosphate. Journal of Degraded and Mining Lands
Management. 1(4): 175-182.
Aung TN, Nourmohammadi S, Sunitha EM and Myint M, 2011. Isolation of Endophytic Bacteria From Green Gram and Study on Their Plant Growth Promoting Activities. International Journal of
Applied Biology and Pharmaceutical Technology. 2(3):
525-537.
Azevedo JL, Maccheroni Jr W, Pereira JO and Araújo WL, 2000. Endophytic Microorganisms: A Review on Insect Control and Recent Advances on Tropical Plants. Electronic Journal of Biotechnology. 3(1): 40-65.
Duangpaeng A, Phetcharat P, Chanthapho S and Okuda N, 2013. Screening of Endophyte Bacteria for Phosphate Solubilization from Organic Rice.
Proceeding- Science and Engineering: 61-66.
Keneni A, Assefa F and Prabu PC, 2010. Isolation of Phosphate Solubilizing Bacteria from The Rhizosphere of Faba Bean of Ethiopia and Their Abilities on Solubilizing Insoluble Phosphates. J.
Agr. Sci. Tech. 12: 79-89.
Krishnaraj PU and Dahale S, 2014. Mineral Phosphate Solubilization: Concepts and Prospects In Sustainable Agriculture. Proc Indian Natn Sci Acad. 80(2): 389-405.
Mahdi SS, Hassan GI, Hussain A and Faisul-ur-Rasool, 2011. Phosphorus Availability Issue- Its Fixation and Role of Phosphate Solubilizing Bacteria in Phosphate Solubilization. Research Journal of
Agricultural Sciences. 2(1): 174-179.
Marella S, 2014. Bacterial Endophytes in Sustainable Crop Production: Applications, Recent Developments and Challenges Ahead.
International Journal of Life Sciences Research. 2(2):
46-56.
Mili t I and Buzait O, 2011. IAA Production and Other Plant Growth Promoting Traits of Endophytic Bacteria from Apple Tree. Biologija. 57(2): 98-102.
Nautiyal CS, Bhadauria S, Kumar P, Lal H, Mondal R and Verma D, 2000. Stress Induced Phosphate Solubilization In Bacteria Isolated From Alkaline Soils. Federation of European Microbiological Societies
Raharjo B, Suprihadi A dan Agustina DK, 2007. Pelarutan Fosfat Anorganik oleh Kultur Campur Jamur Pelarut Fosfat Secara In vitro. Jurnal Sains
dan Matematika. 15(2): 45-54.
Rahayu F, Mastur dan Santoso B, 2014. Potensi beberapa Isolat Bakteri Pelarut Fosfat Asal Lahan Tebu di Jawa Timur berdasarkan Aktivitas Enzim Fosfatase. Buletin Tanaman Tembakau, Serat dan
Minyak Industri. 6(1): 23-31.
Ranjan A, Mahalakshmi MR and Sridevi M, 2013. Isolation and Characterization of Phosphate-Solubilizing Bacterial Species from Different Crop Fields of Salem, Tamil Nadu, India. International
Journal of Nutrition, Pharmacology, Neurological Diseases. 3(1): 29-33.
Resti Z, Habazar T, Putra DP dan Nasrun, 2013. Skrining dan Identifikasi Isolat Bakteri Endofit untuk Mengendalikan Penyakit Hawar Daun Bakteri pada Bawang Merah. J. HPT Tropika. 13(2): 167-178.
Rodríguez H and Fraga R, 1999. Phosphate Solubilizing Bacteria and Their Role In Plant Growth Promotion. Biotechnology Advances. 17: 319-339. Salisbury FB and Ross CW, 1985. Plant Physiology. Third
Edition. California: Wadsworth Publishing Company.
Saiyad SA, Jhala YK and Vyas RV, 2015. Comparative Efficiency of Five Potash and Phosphate Solubilizing Bacteria and Their Key Enzymes Useful for Enhancing and Improvement of Soil
Fertility. International Journal of Scientific and
Research Publications. 5(2): 1-6.
Sashidhar B and Podile AR, 2010. Mineral Phosphate Solubilization By Rhizosphere Bacteria and Scope for Manipulation Of The Direct Oxidation Pathway Involving Glucose Dehydrogenase.
Journal of Applied Microbiology. 109: 1-12.
Srividya S, Soumya S and Pooja K, 2009. Influence of Environmental Factors and Salinity on Phosphate Solubilization by A Newly Isolated Aspergillus
niger F7 from Agricultural Soil. African Journal of Biotechnology. 8(9): 1864-1870.
Suliasih dan Rahmat, 2007. Aktivitas Fosfatase dan Pelarutan Kalsium Fosfat oleh beberapa Bakteri Pelarut Fosfat. Biodiversitas. 8(1): 23-26.
Todar K, 2000. Nutrition and Growth of Bacteria. http://lecturer.ukdw.ac.id/dhira/NutritionGrow th/introduction.html. Diunduh tanggal 28 Juni 2016.
Ulfiyati N dan Zulaika E, 2015. Isolat Bacillus Pelarut Fosfat dari Kalimas Surabaya. Jurnal Sains dan Seni
ITS. 4(2): 2337-3520.
Widawati S, Nurkanto A dan Sudiana IM, 2008. Aktivitas Pelarutan Fosfat oleh Aktinomisetes yang diisolasi dari Waigeo, Kepulauan Raja Ampat, Papua Barat. Biodiversitas. 9(2): 87-90. Yi Y, Huang W and Ge Y, 2008. Exopolysaccharide: A
Novel Important Factor In The Microbial Dissolution Of Tricalcium Phosphate. World J
