REAKSI PEWARNAAN
AgNOR
PADA
KARSINOMA SEL SKUAMOSA
RONGGA MULUT
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi
syarat guna memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Gigi
Oleh :
Michelle Ding
NIM : 100600186
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
Fakultas Kedokteran Gigi
Bagian Biologi Oral
Tahun 2014
Michelle Ding
Reaksi Pewarnaan AgNOR pada Karsinoma Sel Skuamosa Rongga Mulut
xii + 46 halaman
Karsinoma sel skuamosa (KSS) merupakan salah satu jenis kanker yang
ditemukan di rongga mulut. Penyebab KSS adalah multifaktorial. KSS terjadi
akibat dari kerusakan genetik pada kromosom dan gen. Hal ini menyebabkan
perubahan molekular DNA pada nukleolus yang ada pada nukleus sel. Nukleolus
mempunyai bagian kromosom yang dinamakan nucleolar organizer region
(NOR) yang berperan dalam sintesis protein. NOR diamati sebagai titik-titik
hitam di bawah mikroskop cahaya dengan pewarnaan AgNOR. Pada sel normal,
hanya 1-2 titik hitam AgNOR yang diamati. Peningkatan titik-titik hitam AgNOR
mengindikasi perubahan sel normal menuju ke sel displastik/karsinoma dan juga
mencerminkan tingkat keburukan karsinoma. Tujuan penelitian ini adalah untuk
melihat distribusi frekuensi mean AgNOR (mAgNOR) pada nukleus preparat
KSS rongga mulut. Rancangan penelitian ini merupakan deskriptif analitik
dengan pendekatan cross sectional terhadap 30 sampel blok parafin yang
terdiagnosa sebagai KSS rongga mulut yang diperoleh dari Laboratorium
Olympus CX21 terhadap 100 nuklei. Hasil penelitian menunjukkan adanya
perbedaan yang signifikan mAgNOR antara KSS sub-tipe diferensiasi baik dan
diferensiasi sedang (p=0,000), dan tidak ditemukan perbedaan yang signifikan
mAgNOR antara sub-tipe keratinisasi KSS (p=0,124), kelompok umur (p=0,964), jenis kelamin (p=0,053) dan lokasi lesi (p=0,195). Kesimpulan penelitian ini
menunjukkan adanya peningkatan yang signifikan nilai mAgNOR pada KSS
diferensiasi sedang dibandingkan dengan KSS diferensiasi baik, dan tidak
adanya perbedaan yang signifikan nilai mAgNOR antara kelompok sub-tipe
keratinisasi KSS, umur, jenis kelamin dan lokasi lesi.
Kata Kunci: karsinoma sel skuamosa rongga mulut, pewarnaan AgNOR,
diferensiasi KSS
PERNYATAAN PERSETUJUAN
Skripsi ini telah disetujui untuk dipertahankan
di hadapan tim penguji skripsi
Medan, 25 September 2014
Pembimbing: Tanda tangan,
1.Rehulina Ginting, drg., MSi ...
NIP. 19511018 198003 2 001
2.dr. Betty, M.Ked.(PA),Sp.PA ...
TIM PENGUJI SKRIPSI
Skripsi ini telah dipertahankan di hadapan tim penguji
pada tanggal 25 September 2014
TIM PENGUJI
KETUA : Rehulina Ginting, drg., M.Si
ANGGOTA : 1. dr. Betty, M.Ked(PA), Sp.PA
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat dan
karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai salah satu
syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Kedokteran Gigi di Fakultas Kedokteran
Gigi Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Betty, dr., M.Ked. (PA), Sp.PA
selaku dosen pembimbing skripsi yang telah banyak memberikan bimbingan,
motivasi, kritik, saran, serta waktu yang sangat bermanfaat dalam penyelesaian
skripsi ini. Juga tidak lupa ucapan terima kasih kepada Rehulina Ginting, drg., M.Si.,
selaku kepada Departemen Biologi Oral Fakultas Kedokteran Gigi Universitas
Sumatera Utara dan dosen pembimbing skripsi yang juga telah membimbing dan
membantu penulis serta memberikan masukan dalam penyelesaian skripsi ini. Pada
kesempatan ini dengan rendah hati penulis mengucapkan terima kasih kepada yang
terhormat:
1. Prof. Nazruddin, drg., Ph.D., Sp.Ort selaku Dekan Fakultas Kedokteran
Gigi Universitas Sumatera Utara.
2. Sayuti Hasibuan, drg., Sp.PM selaku penasehat akademik yang selama ini
telah banyak memberikan nasehat selama penulis menjalankan pendidikan di Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara.
3. Seluruh staf pengajar dan pegawai Departemen Biologi Oral FKG USU,
Lisna Unita, drg., M.Kes, Minasari, drg., MM., Yendriwati, drg., M.Kes., Dr. Ameta
Primasari, drg., MDSc., M.Kes dan Yumi Lindawati, drg., selaku para staf pengajar
Departemen Biologi Oral. Ngaisah dan Dani Irma Suryani selaku staf pegawai yang
telah membantu dalam penelitian, memberikan saran dan motivasi dalam
penyelesaian skripsi ini.
4. Seluruh dokter dan staff Departemen Patologi Anatomi FK USU/RSUP H.
5. Teristimewa kepada kedua orang tua penulis tercinta yaitu Michael Ding
dan Karen Lee serta adik penulis Jason Ding yang selalu mendoakan, memberikan
dukungan moril maupun materil, serta motivasi hingga penulis dapat menyelesaikan
penulisan skripsi ini.
6. Sahabat-sahabat terbaik penulis May Eng, Su Yong, Sami Abdul-Wahid,
Shanthi Levanita, Arsila, Titin, dan Kelvin Gohan yang telah memotivasi dan
meluangkan waktu dalam membantu penelitian dan penulisan skripsi ini. Serta
senior-senior dan teman-teman stambuk 2010 yang membuat skripsi di Departemen
Biologi Oral yaitu: Kak Anita, Kak Indira, Kak Tellia, Bang Wanda, Bang Rahmat,
Cindy, Beactris, Joseph, Ervi, Swee Fan, May, Aryani, Josua, Colvin dan Roderick
yang memberikan semangat dan motivasi kepada penulis.
7. Teman-teman stambuk 2010, senior dan junior yang tidak dapat disebutkan
satu per satu atas dukungan dan motivasi yang telah diberikan selama penulisan
skripsi.
Akhir kata, penulis mengharapkan saran dan kritik dalam membangun
kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat memberikan sumbangan pikiran
yang berguna untuk bahan bacaan ke fakultas, dan sebagai pengembangan ilmu yang
bermanfaat bagi masyarakat. Akhirnya tiada lagi yang dapat penulis ucapkan selain
syukur sedalam-dalamnya kepada Tuhan Yang Maha Esa.
Medan, 25 September 2014
Penulis,
(………)
Michelle Ding
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...
HALAMAN PERSETUJUAN ...
HALAMAN TIM PENGUJI SKRIPSI ...
KATA PENGANTAR ... iv
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
2.3.1 Nukleolus ... 16
BAB III METODOLOGI PENELITIAN 3.1 Jenis Penelitian ... 25
3.9.1 Pembuatan Sediaan Mikroskopis dari Blok Parafin ……. . 31
3.9.2 Prosedur Pewarnaan Hematoxylin-eosin ……….. 31
3.9.3 Prosedur Pewarnaan AgNOR ……… 32
3.10 Pengolahan Dan Analisis Data ... 32
BAB IV HASIL PENELITIAN 4.1. Karakteristik Umum Sampel yang Diteliti ... 33
BAB V PEMBAHASAN ... 37
BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN ... 42
DAFTAR PUSTAKA ... 43
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
1 Gambaran histopatologi KSS berdiferensiasi baik dengan
pewarnaan Hematoksilin Eosin (HE) ... 7
2 Gambaran histopatologi KSS berdiferensiasi sedang dengan
pewarnaan HE ... 8
3 Gambaran histopatologi KSS berdiferensiasi buruk dengan
pewarnaan HE ... 9
4 Skema ilustrasi p53 checkpoint ... 12
5 Bentuk nukleus ... 15
6 Gambaran mikroskopis mukosa normal rongga mulut dengan
pewarnaan AgNOR (100X) ... 20
7 Gambaran mikroskopis KSS rongga mulut yang berdiferensiasi
baik dengan NORs sedikit pada inti (1000X) ... 21
8 Gambaran mikroskopis KSS rongga mulut yang berdiferensiasi
sedang dengan sebagian ukuran NORs pada inti (1000X) ... 21
9 Gambaran mikroskopis KSS rongga mulut yang berdiferensiasi
buruk dengan jumlah NORs yang banyak dan beragam pada inti
(1000X) ... 22
10 Gambaran mikroskopis KSS rongga mulut yang tidak
berdiferensiasi (undifferentiated) dengan jumlah NORs yang
DAFTAR TABEL
1 Klasifikasi WHO tumor pada kavitas rongga mulut ... 6
2 Sistem penilaian derajat diferensiasi KSS rongga mulut dengan
parameter Bryne ... 10
3 Distribusi frekuensi karateristik umum sampel berdasarkan data
rekam medis sampel yang diteliti ... 33
4 Distribusi frekuensi tampilan mAgNOR pada KSS rongga mulut
berdasarkan jenis sub-tipe keratinisasi ... 34
5 Distribusi frekuensi tampilan mAgNOR pada KSS rongga mulut
berdasarkan jenis diferensiasi ... 35
6 Distribusi frekuensi tampilan mAgNOR pada KSS rongga mulut
berdasarkan umur ... 35
7 Distribusi frekuensi tampilan mAgNOR pada KSS rongga mulut
berdasarkan jenis kelamin ... 35
8 Distribusi frekuensi tampilan mAgNOR pada KSS rongga mulut
DAFTAR SINGKATAN
AgNOR Silver stained Nucleolar Organizer Regions
ARF Alternative Reading Frame
CDK Cyclin-dependent kinases
DNA Deoxyribonucleic acid
EGFR Epidermal growth factor receptor
H&E Hematoxylin & Eosin
IARC International Agency for Research on Cancer
KSS Karsinoma sel skuamosa
NOR Nucleolar organizing region
NORs Nucleolar organizing regions
NPM Nucleophosmin
RNA Ribonucleic acid
rRNA Ribosomal ribonucleic acid
UV Sinar Ultraviolet
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
1 Alur Pikir
2 Ethical Clearance
3 Contoh Formulir Pemeriksaan Patologi Anatomi
4 Gambar Prosedur Kerja
5 Data Hasil Penelitian