Diuji makroskopik Lampiran 2. Bagan kerja penelitian
Disortasi Basah
Dihaluskan
Rumput laut coklat segar
Simplisia
Serbuk simplisia
Senyawa fukoidan
Identifikasi senyawa fukoidan
Uji sitotoksik
Spektrofotometer UV
Susut pengeringan Spektrofotometer FTIR
Dicuci
Dikeringkan di lemari pengering suhu ±40ºC
Disortasi kering Ditimbang
Dikeringkan dalam oven suhu 50ºC Lampiran 3. Bagan kerja isolasi senyawa fukoidan
Dimasukkan ke gelas beker 1000 ml Ditambah 500 ml HCl 0,1 N
Diesktraksi selama 100ºC selama 4 jam sambil sesekali diaduk
Disaring dan diperas dengan kain flannel
Disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit
Ditambah etanol 96 % sama banyak dengan filtrat
Disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 10 menit 50 g serbuk simplisia
Ampas Filtrat
Endapan Filtrat
Residu Filtrat
Isolat fukoidan 2,27 g
Digerus
Dimasukkan 10 ekor larva
Artemia salina Leach
Ditambah air laut buatan sampai 5 ml Lampiran 4. Bagan kerja uji sitotoksik
Dilarutkan dengan pelarut yang sesuai sampai 5 ml
Dibiarkan dibawah sinar lampu 14 watt selama 24 jam
Dihitung jumlah larva Artemia salina Leach yang mati
50 g fukoidan
Larutan konsentrasi 103 µg/ml
Larutan konsentrasi 103 µg/ml Larutan konsentrasi
103 µg/ml
Larutan konsentrasi 102 µg/ml
Larutan konsentrasi 102 µg/ml
Larutan konsentrasi 10 µg/ml
Lampiran 11. Perhitungan karakteristik isolat fukoidan rumput laut coklat
1. Perhitungan persen rendemen senyawa fukoidan
W0
W
= Berat sampel sebelum diisolasi
1 = Berat hasil isolasi
2. Perhitungan susut pengeringan
W1
W
= botol timbang dan sampel sebelum pengeringan dikurang botol timbang
2 = botol timbang dan sampel setelah pengeringan dikurang botol timbang
Lampiran 11. (Lanjutan)
3.) W1 = 25,242 - 24,2229 = 1,0191
W2
% =
= 25, 0451 - 24,2229 = 0,8222
% 100 x W1
W2 -W1
= x100%
1,0191 0,8222
-1,0191
= 19,32%
% Rata-rata susut pengeringan = 19,32%
3
19,32% 19,59%
19,03%
= +
+
Lampiran 12. Tabel probit Finney
% 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Lampiran 13. Perhitungan persentase kematian larva
Isolat fukoidan Mortalitas larva Artemia salina Leach
Konsentrasi (µg/ml) P1 P2 P3 % Kematian
10 1 1 2 13,33
100 3 2 3 26,67
1000 3 2 5 33,33
Kontrol negatif (air laut) 0 0 0 0
Perhitungan persentase kematian larva yang diberi senyawa isolat fukoidan
rumput laut coklat Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
1. Konsentrasi 10 µg/ml
2. Konsentrasi 100 µg/ml
Lampiran 14. Perhitungan LC x = log konsentrasi
a = Intercept (garis potong)
b = Slope (kemiringan dari garis regresi linier)
( )
( )
( )
0,3450 1,426 x =
Lampiran 14. (Lanjutan)
6 -21,44
-=
= 3,5733
y = a + bx
5 = 3,5733 + 0,3450x 0,3450x = 5 – 3,5733
x = 4,1354
