Efektivitas Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata Sebagai Antibakteri untuk Mencegah Perkembangan Bakteri Edwardsiella tardapada Ikan Mas (Cyprinuscarpio L.)

(1)

(2)

Lampiran 1. Proses Ekstraksi

Pengambilankulit batang Pengeringan Penggilingan kulit batang mangrove

Proses perendaman Penyaringan Penguapan

(3)

Lampiran 2. Proses Pengujian Antibakteri

Penimbangan ekstrakPengadukan ekstrak Perendaman kertas cakram ke dalam ekstrak

Perbandingan suspensiPengolesan suspensi bakteri Peletakan kertas cakram dengan Mcfarland 108_{ke dalam media TSA ke dalam suspensi bakteri}

(4)

Lampiran3. Proses Pengujian Toksisitas LC50 48 jam

Pengisian air ke dalam Penimbangan ekstrak Pemberian ekstrak sesuai akuarium konsentrasi

(5)

Lampiran 4. Penginfeksian, Penghitungan Koloni dan Pengobatan Ikan

Pemanenan bakteri Pemindahan ke tabung reaksi Penginfeksian bakteri

Uji biokimia Hasil uji biokimia MR (+) Hasil ujibiokimia positif

VP (-) citrat

(6)

Lampiran 4. Lanjutan

Pengukuran sampel Pengadukan sampel dalam Pengenceran sampel media BFP cair

Penuangan ke media RS Penghitungan koloni bakteri Pemberian ekstrak untuk pengobatan

(7)

Lampiran 5. Perhitungan Konsentrasi untuk Uji Antimikroba

Ekstrak dengan konsentrasi 60% dibuat dengan melarutkan ekstrak sebanyak 0,6 g dalam 1 ml DMSO. Kemudian diencerkan menjadi konsentrasi

diencerkan dengan DMSO sebanyak 166,67 µl sehingga didapatkan konsentrasi 40% sebanyak 0,5 ml

(8)

Lampiran 6. Data Awal Zona Hambat Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata terhadap Bakteri Edwardsiella tarda

Zona hambat pada bakteri Edwardsiella tarda yang diamati selama 24 jam

Ekstrak Ulangan Zona hambat 24 jam (mm)

(9)

(10)

(11)

Lampiran 9. Perhitungan LC50 Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata

Contoh perhitungan persen mortalitas pada ekstrak metanol dengan konsentrasi 30 ppm

Persen mortalitas = Jumlah Ikan yang mati x 100% Jumlah populasi

= 14/30 x 100 % = 46,67 %

Kurva hubungan log konsentrasi versus nilai probit ekstrak etil asetat:

Dari grafik hubungan antara log konsentrasi (sumbu x) dengan nilai probit sumbu y didapatkan persamaan y = 15,36x –19,49 dan R² = 0,7583

Penentuan LC50 (Konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian sebesar

(12)

50% nilai probit (y) = 5 (dilihat dari table probit), x = log konsentrasi. Perhitungan LC50 dari persamaan regresi y = 15,36x –19,49 dan R² =

0,7580 adalah sebagai berikut: 5 = 15,36x–19,49

x = (5 – (-19,49) / 15,36 x = 1,594401042

(13)

Lampiran 10. Data Kelulushidupan Benih Ikan Mas Setelah Diinfeksi

(14)

Lampiran 11. Tabel Analisis ANOVA

Average 10 7 7,333333333 7,333333333 7,916666667

Variance 0 1 0,333333333 0,333333333 1,901515152

Setelah

perendaman

Count 3 3 3 3 12

Sum 30 2 20 30 82

Average 10 0,666666667 6,666666667 10 6,833333333

Variance 0 1,333333333 0,333333333 0 16,15151515

Total

Count 6 6 6 6

Sum 60 23 42 52

Average 10 3,833333333 7 8,666666667

Variance 0 12,96666667 0,4 2,266666667

ANOVA Source of

Variation SS df MS F P-value F crit

Sample 7,041666667 1 7,041666667 16,9 0,000817548 4,493998478

Columns 127,4583333 3 42,48611111 101,9666667 1,21598E-10 3,238871517

Interaction 64,45833333 3 21,48611111 51,56666667 1,90433E-08 3,238871517

Within 6,666666667 16 0,416666667

(15)

(16)