vii
PENDEKATAN BIOINFORMATIKA FORMULASI JAMU
BARU BERKHASIAT ANTIDIABETES DENGAN IKAN
ZEBRA (Danio rerio) SEBAGAI HEWAN MODEL
MIFTHAMI RAMAH NURISHMAYA
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR 2014
ix
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN
SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul Pendekatan Bioinformatika Formulasi Jamu Baru Berkhasiat Antidiabetes dengan Ikan zebra (Danio rerio) sebagai Hewan Model adalah benar karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini.
Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor.
Bogor, Februari 2014
Mifthami Ramah Nurishmaya
xi
Skripsi
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
pada
Departemen Kimia
PENDEKATAN BIOINFORMATIKA FORMULASI JAMU
BARU BERKHASIAT ANTIDIABETES DENGAN IKAN
ZEBRA (Danio rerio) SEBAGAI HEWAN MODEL
MIFTHAMI RAMAH NURISHMAYA
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR 2014
xiii
Judul Skripsi : Pendekatan Bioinformatika Formulasi Jamu Baru Berkhasiat Antidiabetes dengan Ikan Zebra (Danio rerio) sebagai Hewan Model
Nama : Mifthami Ramah Nurishmaya NIM : G44090005
Disetujui oleh
Rudi Heryanto, SSi, MSi Dr Farit Mochamad Afendi Pembimbing I Pembimbing II
Diketahui oleh
Prof Dr Dra Purwantiningsih Sugita, MS Ketua Departemen
xv
ABSTRAK
MIFTHAMI RAMAH NURISHMAYA. Pendekatan Bioinformatika Formulasi Jamu Baru Berkhasiat Antidiabetes dengan Ikan Zebra (Danio rerio) sebagai Hewan Model. Dibimbing oleh RUDI HERYANTO dan FARIT MOCHAMAD AFENDI.
Komposisi jamu umumnya diformulasikan tanpa ketentuan baku seperti
Traditional Chinese Medicine. Kajian terbaru menunjukkan keteraturan pola
melalui kajian statistika pada pangkalan data. Formulasi jamu dalam penelitian ini dibuat dengan Design Expert dan khasiat jamu diprediksi dengan model analisis diskriminan kuadrat terkecil (PLSDA), koefisien PLSDA multiways, dan support
vector machine. Prediksi menunjukkan 4 tanaman yang digunakan adalah
sembung, pare, jahe dan bratawali. Khasiat dibuktikan menggunakan ikan zebra sebagai hewan uji. Hiperglikemia pada ikan zebra diinduksi dengan perendaman menggunakan aloksan 0.1% selama 10 menit, glukosa 1% selama 10 menit, dan akuades selama 60 menit secara berurutan. Uji t satu arah menunjukkan kadar gula darah setelah induksi tidak meningkat signifikan (p>0.05). Hal ini mengonfirmasi bahwa proses induksi belum berhasil meningkatkan kadar gula darah rata-rata. Aplikasi jamu pada ikan zebra dilakukan selama 3 hari setelah proses induksi. Pengamatan statistika atas setiap komposisi jamu menunjukkan kelompok jamu 1 memiliki selisih penurunan paling besar.
Kata kunci: antidiabetes, bioinformatika jamu, ikan zebra, jamu
ABSTRACT
MIFTHAMI RAMAH NURISHMAYA. Bioinformatics Approach of New Antidiabetic Jamu Formulations Using Danio rerio as an Animal Model. Supervised by RUDI HERYANTO and FARIT MOCHAMAD AFENDI.
Jamu composition was formulated without any provision like Traditional
Chinese Medicine. Recent studies showed regularity pattern through statistical database. Jamu formulations in this study were made using Design Expert and its efficacy predicted using models partial least square discriminant analysis (PLSDA), coefficient PLSDA multiways, and Support Vector Machine. The prediction indicated that 4 plants used were sembung, pare, ginger, and bratawali. The efficacy was verified using zebrafish (D. rerio) as an animal test. Hyperglycemia in the fish was induced by soaking them in alloxan 0.1% for 10 min, glucose 1% for 10 min, and distilled water for 60 min in sequence. One-way
t test showed that the increasing blood sugar levels was not significant (p>0.05).
These results confirm that the induction process have not been successful to increase the average blood sugar levels. Application of jamu into the fish was done for 3 days after the induction. Statistical observation for all compositions of
jamu showed that group 1 has the greatest decline difference.
xvii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan juni 2013 sampai November 2013 ini ialah bioinformatika jamu, dengan judul Pendekatan Bioinformatika Formulasi Jamu Baru Berkhasiat Antidiabetes dengan Ikan zebra (Danio rerio) sebagai hewan model.
Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Rudi Heryanto dan Bapak Farit Mochamad Afendi selaku pembimbing. Di samping itu, penghargaan penulis sampaikan kepada Bapak Eman, Aidell Fitri Rachmawati, dan Ira Puspita Andriana yang telah banyak membantu selama pengumpulan data. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada Ayah, Ibu, Kakak, serta seluruh keluarga, atas doa dan dukungannya.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor, Februari 2014
xviii
DAFTAR ISI
DAFTAR TABEL viii
DAFTAR GAMBAR viii
DAFTAR LAMPIRAN viii
PENDAHULUAN 1
Latar Belakang 1
Tujuan 2
Waktu dan Tempat 2
METODE 3
Alat dan Bahan 3
Prosedur Percobaan 3
Pembuatan Model PLSDA dan Pemilihan Kandidat Jamu Baru 3
Formulasi dan Pembuatan Jamu 3
Pembuatan Pakan Jamu 4
Pemeliharaan dan Persiapan Ikan Zebra 4
Pengujian Jamu Baru dengan Ikan Zebra 4
Analisis data 4
HASIL DAN PEMBAHASAN 5
Hasil Prediksi Khasiat dan Formulasi Jamu Baru 5 Ikan zebra sebagai Hewan Model dalam Pengujian Efek Antidiabetes 8 Efek Pemberian Jamu Terhadap Kadar Gula Darah Ikan zebra 12
SIMPULAN DAN SARAN 14
Simpulan 14
Saran 14
DAFTAR PUSTAKA 14
LAMPIRAN 17
xix
DAFTAR TABEL
1 Distribusi jamu berdasarkan 9 kelompok khasiat 2 2 Hasil prediksi kandidat jamu menggunakan metode PLSDA dengan 6
3 Kadar air simplisia penyusun jamu 8
4 Hasil uji coba induksi aloksan 0.1% dalam NaCl 0.45% dengan variasi
waktu 10
5 Hasil uji coba induksi aloksan 0.1% dalam NaCl 0.45% selama 7 hari 10
6 Kadar gula darah normal populasi ikan zebra 11
7 Kadar gula darah setelah induksi dan pemberian pakan jamu 12
DAFTAR GAMBAR
1 Hipotesis struktur jamu oleh Pusat Studi Biofarmaka (PSB) 1
2 Pakan jamu 8
3 Ikan zebra betina (a) dan jantan (b) 9
4 Kurva hubungan waktu induksi dengan kadar gula darah (mg/dL) 11
DAFTAR LAMPIRAN
1 Diagram alir penelitian 17
2 Contoh tabulasi data 18
3 Contoh penggolongan tanaman berdasarkan aktivitas farmakologis 19
4 Kandidat jamu baru 20
5 Desain komposisi formulasi jamu 22
6 Foto serbuk jamu setelah pengeringan 22
1
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Secara tradisional, pemilihan tanaman sebagai penyusun obat hanya berdasarkan pengalaman empiris selama ribuan tahun yang dipercaya secara turun-temurun. Contoh pengobatan tradisional yang sudah ada sejak ribuan tahun yang lalu adalah traditional chinese medicine (TCM) yang berasal dari Cina dan jamu dari Indonesia. Menurut Kardono (2003), TCM memiliki filosofi dan teori pengobatan yang jelas dan lebih mampu mengembangkan diri dengan memanfaatkan perkembangan obat modern, misalnya dengan kajian molekular, sedangkan sistem pengobatan jamu bertahan dengan mengandalkan kekuatan empiris. Jamu umumnya dibuat dengan memilih dan mencampurkan beberapa tanaman yang dipercaya memiliki khasiat tanpa ada ketentuan baku mengenai ukuran dan takaran yang digunakan. Oleh karena itu, diperlukan penelitian dan pengembangan dengan tahapan yang jelas dan sistematis.
Dalam perkembangan pengetahuan tentang jamu, studi yang dilakukan Afendi et al. (2010) dan hipotesis Pusat Studi Biofarmaka (PSB) pada tahun 2011 (Gambar 1) berhasil menunjukkan adanya keteraturan pola pada sistem jamu melalui pendekatan pangkalan data statistika jamu. Pola tersebut terdiri atas 1 tanaman utama sebagai penentu khasiat target dan 3 tanaman pendukung dengan aktivitas farmakologis analgesik, antimikrob, dan antiradang. Ketiga aktivitas farmakologis tanaman pendukung bersifat tetap, sedangkan pada tanaman utama bersifat spesifik dan dinamis. Pola jamu selanjutnya digunakan untuk memprediksi khasiat jamu yang digolongkan menjadi 9 kelompok seperti pada Tabel 1. Hasil tersebut kemudian diperkuat Afendi et al. (2012) yang melakukan studi lanjutan dengan tujuan melihat konsistensi penggunaan tanaman dalam jamu melalui model analisis diskriminan kuadrat terkecil parsial (PLSDA). Hasilnya, dari 465 tanaman terdapat 276 tanaman yang konsisten dan penggunaannya sesuai dengan khasiat yang didukung oleh literatur ilmiah.
2
Tabel 1 Distribusi jamu berdasarkan 9 kelompok khasiat
Khasiat Frekuensi jamu
Urinary related problems (URI) 72
Disorders of appetite (DOA) 249
Disorders of mood and behavior (DMB) 22
Gastrointestinal disorders (GST) 980
Female reproductive organ problems (FML) 398
Musculoskeletal and connective tissue disorders (MSC) 840
Pain/Inflammation (PIN) 311
Respiratory diseases (RSP) 107
Wound and skin infections (WND) 159
Sumber: Afendi et al. (2010)
Tahap formulasi jamu menjadi sangat penting karena berkorelasi langsung dengan kesehatan konsumen. Adanya pola dan aturan baku diharapkan dapat menjamin keamanan khasiat dan penggunaan jamu. Akan tetapi, penelitian yang dilakukan Afendi et al. (2010) belum didukung dengan hasil eksperimen.
Analisis pada penelitian ini difokuskan pada jamu komersial di Indonesia yang memiliki khasiat antidiabetes. Data yang digunakan terdiri atas 2748 jamu dan 231 tanaman. Kandidat jamu terpilih diuji di laboratorium menggunakan ikan zebra sebagai hewan uji. Ikan zebra menjadi salah satu hewan yang saat ini banyak digunakan untuk pengembangan penelitian. Ikan zebra memiliki beberapa keunggulan, yaitu ukuran tubuh kecil, kemampuan reproduksinya tinggi, embrio transparan, mampu menyerap bahan-bahan larut air (Amsterdam and Hopkins 2006; Rubistein et al. 2006), dan sebagai hewan bertulang belakang, ikan zebra memiliki kesamaan genetik dan psikologi dengan mamalia (Shin et al. 2012). Dalam penelitian mengenai diabetes, larva ikan zebra digunakan oleh Elo et al. (2007) sebagai hewan model untuk mengamati metabolisme glukosa dan optimasi induksi hiperglikemia dengan aloksan yang dilakukan Shin et al. (2012) membuktikan bahwa ikan zebra dewasa cukup baik digunakan sebagai model diabetes.
Tujuan
Penelitian bertujuan melakukan formulasi jamu baru yang memiliki khasiat antidiabetes dengan kajian bioinformatika pada pangkalan data jamu dan membuktikan kebenarannya melalui eksperimen menggunakan ikan zebra sebagai hewan uji.
Waktu dan Tempat
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kimia Analitik dan Pusat Studi Biofarmaka, Institut Pertanian Bogor pada bulan Juni−November 2013.
3
METODE
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah perangkat lunak R i386 2.15.2, Design
Expert 8.0.7.1, GlucoDr Blood Glucose Test Meter, oven, cawan porselen, neraca
analitik, freeze dryer tipe Martin Christ Gamma 2-16 LSC, akuarium, pompa,
surgical blade, pinset, alat kaca dan trash bag. Bahan-bahan yang digunakan
adalah ikan zebra jenis ekor panjang, daun sembung (Blumea balsamifera), batang bratawali (Tinospora crispa), rimpang jahe (Zingiber officinale), daun pare (Momordica charantia), akuabides, aloksan monohidrat, glukosa 1%, NaCl 0.45%, pakan kering TetraBits complete jumbo, tisu, tepung sagu, es, dan kain blacu.
Prosedur Percobaan
Penelitian dilakukan dengan beberapa tahap, yaitu pembuatan model PLSDA untuk memprediksi khasiat jamu dan pemilihan kandidat jamu baru, formulasi dan persiapan jamu terpilih, pembuatan pakan jamu, pemeliharaan dan persiapan ikan zebra, pengujian jamu baru dengan ikan zebra, dan analisis data.
Pembuatan Model PLSDA dan Pemilihan Kandidat Jamu Baru
Data yang digunakan merupakan hasil penelitian Afendi et al. (2010) yang terdiri atas 2748 jamu, 231 tanaman, dan 9 khasiat. Data ini kemudian dimasukkan ke dalam peranti lunak R i386 2.15.2 untuk dibuat model PLSDA dengan jamu sebagai prediktor dan khasiat sebagai respons. Model PLSDA selanjutnya digunakan untuk memprediksi khasiat dari 50 kandidat jamu baru. Satu kandidat jamu baru dipilih untuk diuji di laboratorium. Kriteria pemilihannya, ialah memiliki khasiat gangguan saluran cerna (GST) berdasarkan prediksi menggunakan model PLSDA, metode support vector machine (SVM), dan koefisien PLSDA multiways, serta ketersediaan di alam.
Formulasi dan Pembuatan Jamu
Kandidat jamu baru terpilih diformulasikan dengan peranti lunak Design
Expert 7.0.0. Pendekatan yang digunakan adalah mixture dengan desain simplex lattice. Selanjutnya, dilakukan pengumpulan tanaman yang diperoleh dari kebun
percobaan Pusat Studi Biofarmaka (PSB) Bogor. Tanaman dibersihkan dengan air mengalir hingga bersih lalu dikeringkan dan dihaluskan menggunakan blender. Kadar air diukur menggunakan metode AOAC (2007).
Jamu dibuat dengan menimbang serbuk tanaman sesuai komposisi hasil desain. Bobot total tiap komposisi jamu adalah 10 g. Setelah itu, jamu dimasukkan ke dalam erlenmeyer 500 mL lalu ditambahkan 200 mL akuabides. Jamu dipanaskan hingga mendidih dan volumenya menyusut menjadi 100 mL. Selanjutnya, jamu disaring dengan kain blacu untuk memisahkan filtrat dengan ampas. Filtrat jamu dikeringkan menggunakan freeze dryer, sedangkan ampas dibuang.
4
Pembuatan Pakan Jamu
Pakan kering dimasukkan ke dalam tabung plastik, lalu disemprot dengan larutan sagu 0.5%. Pakan dihancurkan dan diaduk hingga membentuk adonan. Jamu ditambahkan kedalam adonan sedikit demi sedikit sambil terus diaduk. Proses ini dilakukan hingga jamu tercampur sempurna dengan pakan. Nisbah pakan:ekstrak jamu yang dibuat adalah 1:0.6 (Littleron et al. 2012).
Pemeliharaan dan Persiapan Ikan Zebra
Pemeliharaan dan persiapan ikan zebra sebagai hewan uji mengacu pada Advesh et al. (2012). Sistem sirkulasi akuarium terdiri atas filter canister, karbon, biologi, dan UV. Sistem aerasinya menggunakan pompa dan pipa paralon yang tersambung ke dalam setiap akuarium. Sistem sirkulasi dan aerasi dibuat untuk menjaga kualitas air tetap baik. Selain itu, kondisi akuarium disesuaikan dengan kebutuhan ikan zebra dengan pencahayaan 14 jam terang dan 10 jam gelap. Siklus gelap dilakukan dengan menutup akuarium menggunakan trash bag. Umur ikan yang dipilih sekitar 118 hari dengan ukuran M (1-1.5 in).
Setelah kondisi ruangan dan akuarium siap, ikan zebra ditempatkan dalam 21 akuarium 10𝝬15𝝬100 cm3
masing-masing 25 ekor. Dilakukan masa adaptasi selama 1 minggu. Ikan zebra diberi makan 2𝝬 sehari dengan kombinasi pakan kering dan pakan cacing. Pakan kering diberikan sebanyak 3.5 mg/ekor/hari.
Pengujian Jamu Baru dengan Ikan Zebra
Induksi glukosa pada ikan zebra mengacu pada Shin et al. (2012) dengan modifikasi konsentrasi aloksan dan waktu induksi. Pertama, ikan zebra dimasukkan ke dalam wadah berisi aloksan 0.1% dalam NaCl 0.45% selama 10 menit. Setelah itu, dipindahkan ke dalam wadah lain yang berisi larutan glukosa 1% selama 10 menit. Terakhir, sebelum pengecekan kadar gula darah, ikan zebra dipindahkan ke dalam wadah berisi akuades selama 1 jam untuk selanjutnya dimasukkan kembali ke dalam akuarium. Induksi dilakukan berulang selama 3 hari.
Pengecekan kadar gula dilakukan pada hari ke-4 setelah induksi hiperglikemia. Ikan zebra dipindahkan ke dalam wadah berisi air dingin dengan suhu yang diturunkan secara perlahan dari 17 ᵒC menjadi 12 ᵒC. Tujuannya untuk membuat ikan zebra pingsan. Setelah pingsan, ikan zebra diangkat dan kelebihan air pada sisik dihilangkan menggunakan tisu. Ikan zebra ditimbang, lalu diletakkan di atas alas plastik dalam posisi melintang, darah diperoleh dengan memotong bagian ekor. Contoh darah ditempelkan pada strip GlucoDr Blood
Glucose Test Meter yang akan secara otomatis menyerap darah. Alat akan segera
mengukur kadar gula dalam darah dalam satuan mg/dL. Nilai yang terbaca merupakan kadar gula darah awal (Intine et al. 2013).
Kemampuan jamu sebagai antidiabetes diukur setelah pemberian pakan jamu selama 3 hari. Ritme pemberian pakan sama seperti masa adaptasi, hanya pakan kering diganti dengan pakan jamu. Contoh darah diambil dan diukur setiap hari selama perlakuan. Prosedur pengukuran sama seperti pengecekan kadar gula.
Analisis data
Analisis data dilakukan dengan uji t satu arah untuk mengetahui peningkatan dan penurunan kadar gula darah setelah induksi atau pemberian
5
pakan jamu. Pengaruh komposisi jamu terhadap ikan zebra dianalisis dengan membandingkan selisih penurunan kadar gula darah setiap kelompok jamu.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Prediksi Khasiat dan Formulasi Jamu Baru
Hipotesis struktur jamu menyebutkan bahwa jamu sekurang-kurangnya terdiri atas tanaman pendukung dan utama. Tanaman pendukung berperan sebagai penyelaras serta pengoordinasi formula jamu dan memiliki aktivitas farmakologis tetap, yakni analgesik, antimikrob, dan antiradang. Tanaman utama berperan sebagai penentu khasiat. Aktivitas farmakologis untuk tanaman utama pada penelitian ini adalah hipoglikemik. Hipoglikemia merupakan suatu kondisi seseorang dengan kadar gula darah rendah, yaitu kurang dari 45 mg/dL (2.6 mmol/L) (Indrasanto 2006). Berdasarkan definisi tersebut, hipoglikemik dapat diartikan sebagai aktivitas atau potensi suatu bahan menurunkan kadar gula darah. Oleh karena itu, tanaman yang memiliki aktivitas hipoglikemik diharapkan memiliki potensi sebagai antidiabetes. Menurut Afendi et al. (2012), aktivitas farmakologis hipoglikemik konsisten muncul di antara 54 tanaman penyusun jamu dengan khasiat GST. Berdasarkan hasil tersebut, khasiat jamu yang menjadi target penelitian adalah GST.
Tahap-tahap yang dilaksanakan dalam penelitian dapat dilihat pada Lampiran 1. Data yang terdiri atas 9 kelompok khasiat, 231 tanaman, dan 2748 jamu asal Indonesia ditabulasikan seperti pada Lampiran 2. Pemilihan 4 tanaman untuk 50 kandidat jamu baru dilakukan dengan mengelompokkan terlebih dahulu 225 dari 231 tanaman menjadi 88 kelompok berdasarkan aktivitas farmakologis (Lampiran 3). Hal ini dilakukan untuk mempermudah proses pemilihan. Selain itu, ketersediaan tanaman di alam ditelusur. Tanaman yang sulit diperoleh atau tumbuh sesuai musim dikeluarkan dari kelompok pemilihan. Kandidat jamu baru yang dibuat dapat dilihat pada Lampiran 4. Prediksi khasiat kandidat jamu baru pada penelitian ini dilakukan dengan tiga metode berbeda, yakni PLSDA, koefisien PLSDA multiways, dan SVM. Metode PLSDA menggunakan model persamaan yang telah dibuat Afendi et al. (2010) dengan peranti lunak R i386 2.15.2. Hasil prediksi yang ditampilkan berupa 9 nilai pendugaan khasiat yang berbeda untuk setiap kandidat jamu baru. Nilai pendugaan tertinggi dipilih sebagai hasil akhir prediksi. Pada metode PLSDA multiways (Afendi et al. 2010), setiap tanaman penyusun jamu memiliki nilai koefisien tertentu pada setiap aktivitas farmakologis. Nilai koefisien dijumlahkan sesuai dengan peran setiap tanaman. Jumlah koefisien tertinggi dipilih sebagai hasil akhir prediksi. Berbeda dengan 2 metode sebelumnya, prediksi dengan SVM mengacu pada Fitriawan (2013).
Hasil prediksi kandidat jamu baru ditunjukkan pada Tabel 2. Sebanyak 10 kandidat jamu menunjukkan hasil prediksi GST pada metode model PLSDA, 4 kandidat jamu pada PLSDA multiways, dan 20 kandidat jamu pada SVM. Kandidat jamu baru dengan kode Jb0042 terpilih sebagai formula jamu yang diuji
6
di laboratorium. Hal ini karena Jb0042 memiliki khasiat GST berdasarkan prediksi dengan ketiga metode. Pertimbangan lain dipilihnya Jb0042 adalah tidak terdapat kesamaan susunan tanaman yang digunakan dengan jamu yang telah terdaftar pada pangkalan data dan ketersediaan tanaman penyusunnya melimpah. Jamu Jb0042 terdiri atas pare, sembung, jahe, dan bratawali yang banyak ditemukan di alam. Dari keempat tanaman tersebut, tidak seluruh bagian tanaman digunakan untuk membuat jamu. Misalnya, untuk tanaman pare dan sembung yang digunakan hanya bagian daun, sedangkan jahe bagian rimpangnya. Ketiga tanaman ini berperan sebagai tanaman pendukung yang memiliki aktivitas farmakologis analgesik, antimikrob, dan antiradang. Tanaman keempat, yaitu bratawali hanya digunakan bagian batangnya. Bratawali berperan sebagai tanaman utama yang memiliki aktivitas farmakologis hipoglikemik. Pemilihan bagian tanaman mengacu pada pangkalan data di Kanaya.naist.jp/KNApSAcK_family/.
Tabel 2 Hasil prediksi kandidat jamu menggunakan metode PLSDA dengan peranti lunak R, koefisien PLSDA multiways, dan SVM
Kode jamu Model PLSDA Koefisien PLSDA
multiways SVM Jb0001 GST PIN GST Jb0002 MSC FML MSC Jb0003 MSC FML MSC Jb0004 MSC PIN GST Jb0005 MSC MSC GST Jb0006 MSC MSC MSC Jb0007 MSC WND GST Jb0008 MSC MSC GST Jb0009 PIN PIN GST Jb0010 MSC MSC MSC Jb0011 MSC FML MSC Jb0012 MSC FML MSC Jb0013 PIN PIN FML Jb0014 MSC PIN MSC Jb0015 GST WND MSC Jb0016 RSP WND GST Jb0017 PIN PIN GST Jb0018 GST MSC MSC Jb0019 MSC MSC GST Jb0020 GST PIN MSC Jb0021 FML FML MSC Jb0022 MSC PIN GST Jb0023 MSC DOA MSC Jb0024 GST WND GST
7
Lanjutan Tabel 2
Kode jamu Model PLSDA Koefisien PLSDA
multiways SVM Jb0025 MSC MSC GST Jb0026 PIN WND MSC Jb0027 MSC MSC MSC Jb0028 GST PIN MSC Jb0029 MSC FML MSC Jb0030 WND RSP PIN Jb0031 WND MSC GST Jb0032 WND GST GST Jb0033 MSC WND URI Jb0034 FML MSC WND Jb0035 WND WND GST Jb0036 WND GST FML Jb0037 GST GST WND Jb0038 GST WND GST Jb0039 FML FML WND Jb0040 WND WND FML Jb0041 WND PIN GST Jb0042 GST GST GST Jb0043 URI FML GST Jb0044 FML MSC URI Jb0045 URI FML MSC Jb0046 WND DOA URI Jb0047 WND WND GST Jb0048 WND WND WND Jb0049 WND FML WND Jb0050 GST PIN WND
Tahap preparasi dan pembuatan jamu diawali dengan pengumpulan tanaman penyusunnya. Keempat tanaman diperoleh dari kebun percobaan Pusat Studi Biofarmaka (PSB) Bogor. Tanaman dicuci dan dibersihkan dari pengotor-pengotor yang tertinggal, seperti tanah yang masih melekat atau benda asing yang mungkin masuk selama proses pemetikan. Daun pare dan sembung yang telah dicuci langsung dikeringkan, sedangkan batang bratawali dan rimpang jahe diiris tipis terlebih dahulu untuk mempercepat proses pengeringan. Simplisia yang sudah kering dihaluskan menjadi serbuk menggunakan blender. Penghalusan dilakukan agar proses ekstraksi makin efektif dan efisien (Depkes 2000). Simplisia kering ditentukan kadar airnya dan hasilnya ditunjukkan pada Tabel 3. Menurut Kemenkes (1994), salah satu syarat bahan baku obat tradisional adalah memiliki kadar air kurang dari 10%. Suatu bahan dengan kadar air kurang dari 10% memiliki umur simpan yang panjang karena dapat meminimumkan pertumbuhan mikroorganisme, terutama bakteri dan kapang.
8
Tabel 3 Kadar air simplisia penyusun jamu Simplisia Kadar air (%) Daun sembung 4.35
Daun pare 4.64
Rimpang jahe 6.08 Batang brotowali 3.70
Komposisi jamu Jb00042 diformulasikan dengan Design Expert 7.0.0, dan menghasilkan 20 kelompok jamu dengan komposisi masing-masing tersusun atas 1, 2, atau 4 jenis tanaman (Lampiran 5). Formulasi dilakukan dengan tujuan mengetahui efek komposisi terhadap khasiat jamu yang ditunjukkan dengan penurunan kadar gula darah. Selanjutnya, 20 kelompok jamu tersebut diekstraksi menggunakan akuabides sebanyak 3 kali. Metode ekstraksi mengikuti cara pembuatan jamu gendong, yaitu digodok hingga volumenya berkurang 50%. Filtrat jamu hasil penyaringan dikeringkan dengan freeze dryer selama 54 jam hingga membentuk serbuk halus berwarna hijau, hijau kecokelatan, atau hitam (Lampiran 6). Jamu diaplikasikan pada ikan zebra dalam media pakan kering. Serbuk jamu dicampurkan dengan pakan hingga membentuk adonan kalis. Adonan kemudian dibentuk menjadi butiran kecil seperti pada Gambar 2. Pakan dengan tambahan jamu disebut pakan jamu.
Gambar 2 Pakan jamu (Sumber: koleksi pribadi)
Ikan zebra sebagai Hewan Model dalam Pengujian Efek Antidiabetes
Ikan zebra dikelompokkan dalam 21 akuarium, masing-masing berisi 25 ekor. Setiap kelompok tidak dipisahkan berdasarkan jenis kelamin atau bobot badan dengan tujuan menghindarkan kondisi stres pada ikan zebra. Jenis ikan zebra yang digunakan ialah ekor panjang, warna abu-abu dengan garis metalik yang melintang sepanjang badan hingga ekor (Gambar 3). Selama masa adaptasi, pemberian pakan dilakukan pada pukul 09.00 dan 15.00 WIB. Waktu pemberian pakan dibuat konsisten untuk membiasakan ikan zebra dengan jenis pakan yang diberikan dan menyeragamkan pola makan. Pemeliharaan ikan zebra dilakukan dengan mengganti filter canister setiap 3 hari dan siklus gelap:terang 10:14 jam. Siklus gelap dilakukan untuk mendekati kondisi hidup ikan zebra di alam liar yang cenderung berdiam dan aktif pada kondisi air yang gelap.
9
Gambar 3 Ikan zebra betina (a) dan jantan (b) (Sumber: koleksi pribadi) Berdasarkan Shin et al. (2012), induksi hiperglikemia pada ikan zebra dewasa dapat dilakukan dengan metode perendaman. Kondisi optimum perendaman yang dihasilkan adalah perendaman dalam aloksan 0.3% selama 30 menit, glukosa 1% selama 30 menit, dan akuades selama 60 menit. Namun, saat dilakukan induksi dengan cara yang sama, ikan zebra mengalami kejang dan mati sesaat setelah dimasukkan ke dalam aloksan 0.3%. Ikan zebra tidak mampu bertahan lebih dari 1 menit. Kematian diduga disebabkan oleh sifat toksik aloksan, khususnya pada sel−β pankreas. Toksisitas disebabkan aloksan berikatan dengan GLUT-2 yang memfasilitasi masuknya aloksan ke dalam sitoplasma sel β pankreas. Depolarisasi pada mitokondria akan meningkat sebagai akibat pemasukan ion Ca2+ yang diikuti penggunaan energi berlebih sehingga terjadi kekurangan energi di dalam sel (Szkudelski 2001). Kekurangan energi ini menjadi awal mula kematian sel. Konsentrasi aloksan 0.3% menyebabkan sel-sel pankreas ikan zebra lebih cepat mengalami kematian dikarenakan ukuran yang jauh lebih kecil dibandingkan hewan yang umumnya diinduksi dengan aloksan seperti tikus, kelinci, atau anjing. Oleh sebab itu, uji coba induksi dilakukan dengan konsentrasi aloksan lebih rendah, yaitu 0.1% dan 0.2% masih dalam NaCl 0.45%. hasil uji coba menunjukkan bahwa aloksan 0.1% mampu meningkatkan kadar gula darah tanpa menyebabkan kematian, sedangkan aloksan 0.2% memiliki efek kematian yang sama dengan aloksan 0.3% sehingga kadar gula darah tidak dapat diukur. Berdasarkan hasil tersebut, aloksan 0.1% dipilih sebagai konsentrasi yang digunakan untuk induksi hiperglikemia.
Hasil induksi hiperglikemia yang diharapkan pada penelitian ini adalah kadar gula darah ikan zebra yang konstan tinggi selama lebih dari 24 jam. Hal tersebut menjadi penting karena aplikasi pakan jamu dan pengukuran kadar gula darah dilakukan keesokan harinya. Uji coba induksi yang dilakukan dengan memvariasikan waktu induksi menunjukkan hasil seperti pada Tabel 4. Saat 0 jam, kadar gula darah tertinggi ditunjukkan oleh perendaman dalam aloksan 0.1% selama 10 menit, dilanjutkan glukosa 1% selama 10 menit, dan akuades selama 60 menit, yaitu 557 mg/dL. Kadar gula darah tersebut tidak konsisten tinggi karena setelah 24 jam turun menjadi 80 mg/dL. Kadar gula darah pada perendaman aloksan 0.1% selama 13, 20, dan 30 menit tidak dapat diukur karena ikan zebra mati. Berdasarkan hasil tersebut, waktu perendaman aloksan 0.1% selama 10 menit yang dilanjutkan dengan perendaman dalam glukosa 1% selama 10 menit, dan dalam akuades selama 60 menit dipilih sebagai waktu terbaik.
10
Tabel 4 Hasil uji coba induksi aloksan 0.1% dalam NaCl 0.45% dengan variasi waktu
Uji ke-
Waktu (menit) Kadar gula darah
(mg/dL) Aloksan 0.1%
dalam NaCl 0.45%
Glukosa 1% Akuades Saat 0 jam Setelah 24 jam
1 10 10 60 557 80
2 13 10 60 67 -
3 20 - - - -
4 30 15 15 240 -
Uji coba selanjutnya dilakukan selama 7 hari untuk melihat waktu induksi yang menghasilkan kadar gula darah konstan tinggi. Tabel 5 menunjukkan perubahan kadar gula darah setelah induksi 7 hari. Pola perubahan kadar gula darah dapat dilihat pada Gambar 6. Peningkatan terjadi pada hari ke-3 tetapi dengan cepat menurun pada hari ke-4. Hari ke-5 atau 6 terjadi peningkatan tapi tidak setinggi hari ke-3. Fluktuasi kadar gula darah diduga karena aloksan tidak merusak sel beta pankreas seluruhnya. Aloksan hanya mampu bertahan pada pH netral dan suhu 37 ᵒC selama 1.5 menit (Lenzen and Munday 1991). Selain itu, ikan zebra dilaporkan memiliki kemampuan regenerasi sel-sel pankreas yang cepat tanpa perlu induksi insulin (Moss et al. 2009). Berdasarkan hasil uji coba induksi hiperlikemia dilakukan selama 3 hari karena menghasilkan peningkatan kadar gula darah tertinggi.
Tabel 5 Hasil uji coba induksi aloksan 0.1% dalam NaCl 0.45% selama 7 hari Pengulangan
induksi ke-
Kadar gula darah (mg/dL)
Induksi 1 Induksi 2 1 181 100 2 132 106 3 286 211 4 100 48 5 66 70 6 144 65 7 67 64
11
Gambar 4 Kurva hubungan waktu induksi dengan kadar gula darah (mg/dL) ulangan 1 dan ulangan 2 pada ikan zebra
Kadar gula darah normal pada populasi ikan zebra ditampilkan pada Tabel 6. Rerata kadar gula darah tidak jauh dari rentang normal 80-120 mg/dL (Pujiyanto dan Rejeki 2010) dan simpangan baku sebesar 39.32 mg/dL. Simpangan baku menunjukkan terdapat perbedaan sebesar 39.32 mg/dL terhadap nilai tengah kadar gula darah populasi. Perbedaan diduga disebabkan faktor individu seperti; jenis kelamin, bobot badan, asupan pakan, tingkat stres dan pergerakan ikan zebra.
Tabel 6 Kadar gula darah normal populasi ikan zebra Ulangan Kadar gula darah ikan zebra (mg/dL)
1 55 2 78 3 84 4 93 5 97 6 102 7 113 8 124 9 138 10 148 11 149 12 152 13 166 14 167 15 173 16 190 rerata 126.81
12
Efek Pemberian Jamu Terhadap Kadar Gula Darah Ikan zebra
Perubahan kadar gula darah pada kelompok kontrol negatif dan jamu dapat dilihat pada Tabel 7. Hasil uji t satu arah terhadap kadar gula darah normal dan setelah induksi menunjukkan bahwa kadar gula darah tidak mengalami peningkatan signifikan (p>0.05) setelah induksi. Secara statistika dapat dikatakan bahwa proses induksi belum berhasil meningkatkan kadar gula darah rata-rata. Pengobatan diabetes dilakukan dengan pemberian pakan jamu dimulai setelah pengulangan induksi hari ketiga. Pakan jamu yang diberikan sebanyak 3.5 mg/ekor pada pagi dan sore hari. Berdasarkan hasil uji t satu arah, kadar gula darah setelah pemberian pakan jamu tidak mengalami perubahan yang signifikan (p>0.05). Hasil uji tersebut menunjukkan bahwa formula jamu baru belum secara maksimal menurunkan kadar gula darah ikan zebra.
Tabel 7 Kadar gula darah setelah induksi dan pemberian pakan jamu Kelompok
Kadar gula darah (mg/dL)
Setelah induksi Setelah pemberian pakan jamu 1 108 115 131 75 2 79 76 54 238 3 103 113 120 192 4 84 66 52 91 5 105 187 66 235 6 69 100 60 262 7 50 282 88 48 8 91 72 69 92 9 139 139 66 76 10 72 132 51 33 11 75 229 90 119 12 50 241 102 67
13
Lanjutan Tabel 7
Kelompok
Kadar gula darah (mg/dL)
Setelah induksi Setelah pemberian pakan jamu 13 90 73 191 292 14 80 256 82 214 15 75 134 75 174 16 51 117 75 213 17 105 31 84 280 18 54 114 102 135 19 72 258 83 227 20 70 180 82 157 Kontrol negatif 60 397 97 186
Secara statistika formula jamu baru memang belum maksimal menurunkan kadar gula darah, namun diantara 20 kelompok jamu yang diuji terdapat beberapa kelompok yang dapat menurunkan kadar gula darah dalam jumlah kecil. Guna melihat komposisi yang paling baik dalam menurunkan kadar gula darah dilakukan analisis berdasarkan selisih penurunan. Selisih kadar gula darah ikan zebra setelah induksi dan pemberian pakan jamu (Lampiran 7) menunjukkan bahwa kontrol negatif memiliki selisih penurunan yang paling kecil dibandingkan 20 kelompok jamu. Berdasarkan hasil ini diketahui bahwa kelompok jamu masih lebih baik dalam menurunkan kadar gula darah dibandingkan kontrol negatif. Diantara 20 kelompok jamu tersebut kelompok jamu 1 merupakan kelompok yang memiliki selisih penurunan terbesar. Artinya, kelompok jamu 1 cenderung menurunkan kadar gula darah lebih baik dibandingkan 19 kelompok jamu lainnya. Kelompok jamu 1 dibuat dengan nisbah bobot sembung:pare 0.5:0.5. Berdasarkan pangkalan data aktivitas farmakologis tanaman, sembung mampu berperan sebagai analgesik dan pare sebagai antimikrob. Pada komposisi ini tidak menggunakan bratawali dan jahe. Aktivitas hipoglikemik dari tanaman utama yang diharapkan muncul dalam penentuan khasiat nyatanya tidak ikut berperan dalam menurunkan kadar gula darah. Hasil ini sedikit berbeda dengan hipotesis struktur jamu diabetes pada penelitian yang menyebutkan bahwa jamu disusun oleh 4 aktivitas farmakologis antara lain; analgesik, antimikrob, antiradang, dan hipoglikemik. Meski demikian, jamu dengan komposisi dua tanaman masih mampu menurunkan kadar gula darah disebabkan interaksi campuran didalam jamu. Aktivitas hipoglikemik pada jamu diduga muncul karena pare memiliki
14
senyawa inhibitor 𝞪 glukosidase. Senyawa ini berperan menghambat pencernaan karbohidrat komplek menjadi glukosa, sehingga asupan glukosa dari usus kedalam darah dapat dikurangi (Pujiyanto dan Rejeki 2010). Selain itu, Arjadi dan Susatyo (2010) menyebutkan bahwa flavonoid kemungkinan mempunyai kemampuan merangsang pengeluaran insulin dengan meregenerasi sel−β pankreas. Flavonoid juga mampu berperan sebagai antioksidan untuk menangkap radikal bebas seperti O2- dan OH- yang dihasilkan setelah induksi aloksan. Flavonoid yang dilaporkan memiliki aktivitas hipoglikemik pada hewan uji yang diinduksi aloksan adalah quercetin dan chrisyn (Lukacinova et al. 2008).
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Induksi hiperglikemia pada ikan zebra optimum saat perendaman dalam aloksan 0,1% selama 10 menit, dilanjutkan glukosa 1% selama 10 menit, dan akuades selama 60 menit. Tetapi ikan zebra sebagai hewan uji belum stabil dalam mempertahankan kadar gula darah tetap tinggi setelah induksi. Pengobatan diabetes yang dilakukan dengan pemberian pakan jamu menunjukkan bahwa kelompok jamu 1 cenderung menurunkan kadar gula darah lebih baik dibandingkan kontrol negatif dan 19 kelompok lainnya. Kelompok jamu 1 dibuat dari sembung dan pare dengan nisbah 0.5:0.5. Kesetaraan kelompok jamu 1 dengan hipotesis struktur jamu diduga dihasilkan oleh senyawa flavonoid, senyawa inhibitor 𝞪 glukosidase dan antimikrob dari pare, serta diperkuat aktivitas analgesik dari sembung.
Saran
Perlu dilakukan pengujian terhadap kestabilan ikan zebra sebagai hewan model diabetes dengan induksi hiperglikemia menggunakan Streptozotocin (STZ). Selain itu, perlu juga dilakukan pengujian antidiabetes lebih lanjut pada kelompok jamu 1 secara in vivo dan in vitro menggunakan metode yang sudah stabil untuk mendukung hasil penelitian ini.
DAFTAR PUSTAKA
Adam LS, Seram NP, Hardy ML, Carpenter C, dan Heber D. 2006. Analysis of the interactions of botanical extract combinations against the viability of prostate cancer cell lines. Evid Based Complement Alternat Med. 3(1):117-124.
Advesh et al. 2012. Regular care and maintenance of a ikan zebra (Danio rerio) laboratory: an introduction. J. Vis. Exp. 69(4196):1-8.
15
Afendi et al. 2010. Modelling ingredient of jamu to predict its efficacy. Forum
Statistika dan Komputasi. 5(2).1-9.
Afendi F M, Darusman L K, Fukuyama M, Md. Altaf-Ul-Amin, and Kanaya S. 2012. A Bootstrapping approach for investigating the consistency of assignment of plants to jamu efficacy by PLS-DA model. Malaysian
Journal of Mathematical Sciences.6(2):147-164.
Amsterdam A and Hopkins N. (2006). Mutagenesis strategies in zebrafish for identifying genes involved in development and disease. Trends Genet. 22(9):473-478.
[AOAC] Assosiation of Official Analitycal Chemist. 2007. Official Methods of
AOAC International. Revisi ke-2 Volume ke-1. Maryland: AOAC
International.
Arjadi F dan Susatyo P. 2010. Regenerasi sel pulau Langerhans pada tikus putih (Ratus novergicus) diabetes yang diberi rebusan daging mahkota dewa (Phaleria macrocarp (Scheff.) Boerl.). Efek Antidiabetes Rebusan Mahkota
Dewa. 2(2):117-126.
[DEPKES] Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2000. Parameter Standar
Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta (ID): DEPKES.
Elo B, C M Villano, D Govorko, and L A White. 2007. Larval ikan zebra as a model for glucose metabolism: expression of phosphoenolpyruvate carboxykinase as a marker for exposure to anti-diabetic compounds. Journal
of Molecular Endocrinology. 38:433–440.
Fitriawan A. 2013. Sistem klasifikasi khasiat formula jamu dengan metode support vector machine [Skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Indrasanto D. 2006. Glosarium Data dan Informasi Kesehatan. Jakarta (ID):
DEPKES.
Intine R V, Olsen AS, Sarras MP. A ikan zebra model of diabetes mellitus and metabolic memory. J. Vis. Exp.72(50232):1-7.
Kardono LBS. 2003. Sekilas perbandingan perkembangan obat tradisional dan makanan fungsional Cina dan Indonesia serta kemungkinan dampaknya kedepan. Di dalam: Penggalian, Pelestarian, Pengembangan, dan
Pemanfaatan Tanaman Obat Indonesia. Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXII; 2003 Mar 25-26; Jakarta, Indonesia. Jakarta (ID): Fakultas
Farmasi Universitas Pancasila. hlm 8-20.
[Kemenkes RI] Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. 1994. Persyaratan
Obat Tradisional. Jakarta (ID): KEMENKES.
Lenzen S and Munday R. 1991. Thiol-group reactivity, hydrophilicity and stability of alloxan, its reduction products and its N-methyl derivatives and a comparison with ninhydrin. Biochem Pharmacol. 42: 1385-13.
Littleton RM et al. 2012. Whole plant based treatment of hypercholesterolemia with crataegus laevigata in ikan zebra model. BMC complementary and
alternative medicine. 12:105 Doi: 10.1186/1472-6882-12-105.
Lukacinova A, Mojzis L, Benacka R, Keller J, Maguth T, Kurila P, Vasko L, Racz O, and Nistiar F. 2008. Preventives effect of flavonoids on alloxan-induced diabetes Mellitus in Rats. ACTA VET.BRNO. 77:175-182.
Moss et al. 2009. Regeneration of the pancreas in adult ikan zebra. Diabetes. 58:1844-1851.
16
Pujiyanto S dan Rejeki SF. 2010. Aktifitas inhibitor 𝞪-glukosidase bakteri endofit PR-3 yang diisolasi dari tanaman pare (Momordica charantia).
BIOMA.12(1):1-5.
Rubistein AL. 2006. Zebrafish assay for drug toxicity screening. Toxicol. 2(2):231-240.
Shin E, Hong B N, and Kang T H. 2012. An optimal establishment of acute hyperglicemia ikan zebra model. African Journal of Pharmacy and
Pharmacology. 6(42):2922-2928.
Szkudelski T. 2001. The mechanism of alloxan and streptozotocin action B cells of the rat pancreas. Physiology Res. 50:536-546.
15
LAMPIRAN
Lampiran 1 Diagram alir penelitianPrediksi khasiat
Tanaman 1 Tanaman 2 Tanaman 3 Tanaman 4 Formula jamu
terpilih
Pengelompokan tanaman berdasarkan aktivitasfarmakologis
Pemilihan kandidat formula jamu baru
Penentuan kompisisi jamu (Design Expert 8.0.7.1) Pengukuran kadar air, freezedrying Preparasi ekstrak jamu Pemeliharaan dan adaptasi ikan zebra Pakan Jamu Induksi hiperglikemia Ikan zebra diabetes aloksan Pengukuran kadar gula Analisis data
16
Lampiran 2 Contoh tabulasi data Kode
Jamu Khasiat E01 E02 E03 E04 E05 E06 E07 E08 E09 P0001 P0002 P0003 P0004 P0006 .. P0465
J00001 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00002 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00003 8 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 1 0 0 J00004 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00005 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 J00006 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00007 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00008 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00009 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00010 2 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00011 2 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00012 9 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 J00013 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00014 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00015 5 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 J00016 6 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ... J02748 4 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 . . 0 18
18
Lampiran 3 Contoh penggolongan tanaman berdasarkan aktivitas farmakologis
Kode Nama Tanaman Abortifikasi Analgesik Antasid Anti asma Antimikrob .... Masalah kewanitaan P0001 Foeniculum vulgare √ √ - - √ - P0002 Clausena anisum-olens - - - - √ - P0003 Litsea chinensis - - - - P0004 Glycyrrhiza uralensis - √ √ √ √ - P0006 Imperata cylindrica - - - - √ - P0007 Phellodendron chinense - - - - √ - P0008 Zanthoxylum acanthopodium - √ - - - - P0013 Elaeocarpus grandiflora - - - - P0020 Garcinia atroviridis - - - - √ - P0021 Tamarindus indica - √ - - - - ... P0465 Alisma orientalis - - - ... - 19
18
Lampiran 4 Kandidat jamu baru
Kode Jamu Kode Tanaman P0033 P0096 P0115 P0120 P0123 P0139 P0140 P0181 P0183 P0185 P0187 P0198 P0201 P0206 P0223 P0277 P0282 P0329 P0334 P0345 P0390 P0438 Jb0001 1 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 Jb0002 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 Jb0003 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 Jb0004 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 Jb0005 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 1 0 0 0 Jb0006 1 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Jb0007 1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 Jb0008 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 1 1 Jb0009 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 1 0 0 Jb0010 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 Jb0011 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 Jb0012 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 Jb0013 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 Jb0014 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 Jb0015 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 Jb0016 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 1 0 Jb0017 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 Jb0018 1 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 Jb0019 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 Jb0020 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 Jb0021 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 1 0 0 0 0 0 Jb0022 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 Jb0023 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 0 Jb0024 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 Jb0025 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 Jb0026 1 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 20
19 Lanjutan Lampiran 4 Kode jamu Kode tanaman P0033 P0096 P0115 P0120 P0123 P0139 P0140 P0181 P0183 P0185 P0187 P0198 P0201 P0206 P0223 P0277 P0282 P0329 P0334 P0345 P0390 P0438 Jb0027 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 1 1 0 0 0 Jb0028 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 Jb0029 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 1 0 0 0 Jb0030 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 Jb0031 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 Jb0032 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 Jb0033 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 Jb0034 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 Jb0035 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 1 Jb0036 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 1 Jb0037 1 0 1 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Jb0038 1 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 Jb0039 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 Jb0040 1 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Jb0041 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 Jb0042 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 1 Jb0043 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 Jb0044 1 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 Jb0045 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 Jb0046 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 0 1 Jb0047 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 0 0 0 0 0 Jb0048 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 Jb0049 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 1 0 Jb0050 0 0 1 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 21
22
Lampiran 5 Desain komposisi formulasi jamu
Lampiran 6 Foto serbuk jamu setelah pengeringan
Ekstrak Tanaman 1 2 3 4 1 0.500 0.500 0.000 0.000 2 0.625 0.125 0.125 0.125 3 0000 0.000 0.000 1.000 4 0.000 0.000 1.000 0.000 5 0.000 0.000 1.000 0.000 6 0.125 0.125 0.125 0.625 7 0.000 0.000 0.500 0.500 8 0.500 0.000 0.500 0.000 9 0.500 0.500 0.000 0.000 10 0.000 1.000 0.000 0.000 11 1.000 0.000 0.000 0.000 12 0.000 0.500 0.000 0.500 13 0.250 0.250 0.250 0.250 14 1.000 0.000 0.000 0.000 15 0.000 1.000 0.000 0.000 16 0.000 0.500 0.500 0.000 17 0.125 0.625 0.125 0.125 18 0.000 0.000 0.000 1.000 19 0.500 0.000 0.000 0.500 20 0.125 0.125 0.625 0.125 Jb0001 Jb0002 Jb0003 Jb0004 Jb0005 Jb0006 Jb0007 Jb0008
23
Lampiran 7 Perubahan kadar gula darah ikan zebra (mg/dL)
Kelompok
Kadar gula darah (mg/dL)
Setelah induksi Rata-rata setelah induksia Setelah pemberian pakan jamub Selisih perubahan kadar gula darahc Rata-rata selisih perubahan kadar gula darahd 1 108 119.5 115 4.5 24.5 131 75 44.5 2 79 66.5 76 -9.5 -90.5 54 238 -171.5 3 103 111.5 113 -1.5 -41 120 192 -80.5 4 84 68 66 2 -10.5 52 91 -23 5 105 85.5 187 -101.5 -125.5 66 235 -149.5 6 69 64.5 100 -35.5 -116.5 60 262 -197.5 Jb0009 Jb0010 Jb0011 Jb0012 Jb0019 Jb0018 Jb0017 Jb0016 Jb0015 Jb0020 Jb0014 Jb0013
24
Lanjutan Lampiran 7
Kelompok
Kadar gula darah (mg/dL)
Setelah induksi Rata-rata setelah induksia Setelah pemberian pakan jamub Selisih perubahan kadar gula darahc Rata-rata selisih perubahan kadar gula darahd 7 50 69 282 -213 -96 88 48 21 8 91 80 72 8 -2 69 92 -12 9 139 102.5 139 -36.5 -5 66 76 26.5 10 72 61.5 132 -70.5 -21 51 33 28.5 11 75 82.5 229 -146.5 -91.5 90 119 -36.5 12 50 76 241 -165 -78 102 67 9 13 90 140.5 73 67.5 -42 191 292 -151.5 14 80 81 256 -175 -154 82 214 -133 15 75 75 134 -59 -79 75 174 -99 16 51 63 117 -54 -102 75 213 -150 17 105 94.5 31 63.5 -61 84 280 -185.5 18 54 78 114 -36 -46,5 102 135 -57 19 72 77.5 258 -180.5 -165 83 227 -149.5 20 70 76 180 -104 -92.5 82 157 -81 Kontrol negatif 60 78.5 397 -318.5 -213 97 186 -107.5
25
Contoh perhitungan: Kelompok jamu 1
26
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Sumedang pada tanggal 4 April 1992 dari ayah Enche Wachyudin, Spd dan ibu Emay Sukmayati. Penulis adalah putri ketiga dari tiga bersaudara. Tahun 2009 penulis lulus dari SMA Al-Ma’soem Jatinangor dan pada tahun yang sama penulis lulus seleksi masuk Institut Pertanian Bogor (IPB) melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB dan diterima di Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis menjadi asisten praktikum Spektroskopi dan Aplikasi Kemometrik pada tahun ajaran 2012/2013, asisten praktikum Kimia Dasar pada tahun ajaran 2012/2013, asisten Statistika untuk Kimia Program Diploma 3 pada tahun ajaran 2012/2013, dan asisten praktikum Kimia Bahan Alam pada tahun ajaran 2013/2014. Penulis juga pernah aktif menjadi bendahara Departemen Pengembangan Sumber Daya Mahasiswa Ikatan Mahasiswa Kimia (IMASIKA) IPB. Bulan juli-Agustus 2012 penulis melaksanakan Praktik Lapangan di Balai Besar Veteriner (Bbalitvet) Bogor dengan judul Aplikasi Sandwich Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Untuk Mendeteksi Aflatoksin B1 Pada Pakan dan Bahan Baku Pakan.
