ABSTRAK
EFEK ANTIMIKROBA PANDANUS COCOS OIL (PCO) DAN TEA TREE OIL (TTO) TERHADAP
4 SPESIES BAKTERI DAN Candida albicans
Silvyana Dewi Tan, 2008. Pembimbing I : Philips Onggowidjaja, S.Si., M.Si Pembimbing II : Caroline Tan Sardjono, dr., PhD
Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat telah banyak menarik perhatian dunia medis. Pengembangan dan promosi Pandanus Cocos Oil (PCO) di Indonesia dan Tea Tree Oil (TTO) di Australia adalah bukti nyata. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efektivitas penghambatan pertumbuhan 4 spesies bakteri (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli) dan jamur (Candida albicans) oleh Pandanus Cocos Oil (PCO) dan Tea Tree Oil (TTO). Metode penelitian yang digunakan adalah metode Kirby Bauer. Cakram kertas steril sebelumnya ditetesi PCO atau TTO kemudian diuji efek antimikrobanya. Diameter zona inhibisi diukur untuk mengetahui kemampuan inhibisi kedua zat tersebut. Data ditabulasi dengan T test. Hasil penelitian menunjukkan PCO tidak memiliki efek antimikroba terhadap 4 spesies bakteri dan Candida albicans, dimana tidak terbentuknya zona inhibisi yang mengelilingi cakram kertas steril yang ditetesi PCO. Hal yang berbeda ternyata didapatkan pada TTO, yaitu didapatkan efek antimikroba dengan terbentuknya zona inhibisi pada cakram yang ditetesi TTO. Disimpulkan PCO tidak efektif. Setelah dihitung secara statistik, TTO efektif menghambat pertumbuhan keempat spesies bakteri tersebut dan Candida albicans.
Kata kunci: Efek Antimikroba, Pandanus Cocos Oil (PCO), Tea Tree Oil (TTO)
ABSTRACT
ANTIMICROBIAL EFFECT OF PANDANUS COCOS OIL (PCO) AND TEA TREE OIL (TTO) ON
4 SPECIES OF BACTERIA AND Candida albicans
Silvyana Dewi Tan, 2008. 1st Supervisor : Philips Onggowidjaja, S.Si., M.Si 2nd Supervisor : Caroline Tan Sardjono, dr., PhD
Herbal medicine has been attracting much concern in medical world. Develpoment and promotion of Pandanus Cocos Oil (PCO) in Indonesia and Tea Tree Oil (TTO) in Australia are the evident. The aim of this study was to identify the inhibition efficacy of PCO and TTO against 4 species of bacteria (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli) and yeast (Candida albicans). The method used in this study was based on Kirby Bauer method. Sterile paper discs were priorly treated with PCO or TTO then their antimicrobial effect was tested. Diameters of inhibition zone were measured to distinguish the inhibition efficacy of the two agents tested. Data were analysed using T test. The result showed that PCO did not have antimicrobial effect to 4 bacteria species and Candida albicans, where there were no inhibition zone surrounding the discs treated with PCO. Different thing was founded on TTO, which there was antimicrobial effect showed by inhibition zone on TTO treated discs. These findings suggest that PCO is not effective. After statisticaly tested, TTO is effective in inhibiting the growth of 4 species of bacteria and yeast.
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN... ii
SURAT PERNYATAAN... iii
ABSTRAK... iv
DAFTAR GRAFIK... xiii
DAFTAR LAMPIRAN... xiv
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang... 1
1.2 Identifikasi Masalah ... 2
1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian ... 2
1.4 Manfaat Penelitian... 2
1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis... 2
1.6 Metode Penelitian... 3
1.7 Lokasi dan Waktu Penelitian... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Pandanus Cocos Oil (PCO)... 5
2.1.1 Kandungan Senyawa Aktif PCO... 5
2.1.2 Kandungan Asam Lemak PCO... 9
2.1.3 Kandungan Senyawa Lain... 11
2.1.4 Efektivitas PCO sebagai Antimikroba... 13
2.1.5 Manfaat Lain PCO... 16
2.1.5.1 Antioksidan... 16
2.1.5.2 Antidiabetes... 19
2.1.6 Dosis Aman PCO... 19
2.1.7 Toksisitas... 20
2.2 Tea Tree Oil (TTO)... 22
2.2.1 Komposisi TTO... 24
2.2.2 Manfaat TTO... 25
2.2.2.1 Aktivitas Antibakteri... 25
2.2.2.2 Aktivitas Antifungi... 26
2.2.2.3 Aktivitas Antiviral... 26
2.2.2.4 Aktivitas Antiprotozoa... 27
2.2.2.5 Aktivitas Anti-Inflamasi... 27
2.2.2.6 Toksisitas... 27
2.3 Staphylococcus aureus... 28
2.5 Salmonella typhi... 32
2.6 Escherichia coli... 35
2.7 Candida albicans... 37
2.8 Antibiotik... 39
2.8.1 Ampisilin... 39
2.8.2 Kloramfenikol... 39
2.8.3 Tetrasiklin... 41
2.8.4 Nistatin... 41
BAB III ALAT, BAHAN, DAN PROSEDUR KERJA 3.1 Alat... 42
3.2 Bahan... 43
3.3 Prosedur Kerja... 45
3.3.1 Hari Pertama... 45
3.3.1.1 Sterilisasi Alat dan Bahan... 45
3.3.1.2 Pembuatan Medium Agar... 45
3.3.1.2.1 Medium Agar Nutrient (Nutrien Agar, NA)... 45
3.3.1.2.2 Medium Sabouraud Dextrose Agar (SDA)... 45
3.3.1.3 Penanaman Ulang Koloni Pada Medium Agar... 45
3.3.2 Hari Kedua... 46
3.3.2.1 Persiapan PCO, TTO, Minyak Goreng... 46
3.3.2.2 Pembuatan Suspensi Mikroba... 46
3.3.2.3 Inokulasi Suspensi Mikroba Pada Medium Agar... 46
3.3.2.4 Penetesan PCO, TTO, Minyak Goreng Pada Cakram Steril... 47
3.3.2.5 Kontrol Negatif... 47
3.3.2.6 Tes Sensitifitas Antimikroba... 47
3.3.3 Hari Ketiga... 48
3.3.3.1 Pengukuran Zona Inhibisi... 48
3.3.4 Analisis Data... 48
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Staphylococcus aureus... 49
4.2 Bacillus subtilis... 51
4.3 Salmonella typhi... 54
4.4 Escherichia coli... 56
4.5 Candida albicans... 58
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan... 61
5.2 Saran... 61
DAFTAR PUSTAKA... 62
LAMPIRAN... 65
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Perbandingan Kandungan Nutrisi Minyak Buah Merah dan
VCO... 6
Tabel 2.2 Kandungan Nutrisi dan Logam Berat PCO... 8
Tabel 2.3 Perbandingan Kandungan Asam Lemak Minyak Buah Merah dan VCO... 9
Tabel 2.4 Kandungan Asam Lemak PCO... 10
Tabel 2.5 Hasil Uji Penapisan Kimia PCO... 11
Tabel 2.6 Luas Zona Hambat (Cm2) Staphylococcus aureus... 15
Tabel 2.7 Luas Zona Hambat (Cm2) Escherichia coli... 15
Tabel 2.8 Mekanisme Antidiabetes... 19
Tabel 4.1.1 Diameter Zona Inhibisi (mm) PCO dan Antimikroba Terhadap Staphylococcus aureus... 49
Tabel 4.1.2 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO dan Antimikroba Terhadap Staphylococcus aureus... 49
Tabel 4.1.3 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO, PCO dan Antimikroba Terhadap Staphylococcus aureus... 49
Tabel 4.1.4 Hasil Statistik Staphylococcus aureus... 50
Tabel 4.2.1 Diameter Zona Inhibisi (mm) PCO dan Antimikroba Terhadap Bacillus subtilis... 51
Tabel 4.2.2 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO dan Antimikroba Terhadap Bacillus subtilis... 51
Tabel 4.2.3 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO, PCO dan Antimikroba Terhadap Bacillus subtilis... 52
Tabel 4.2.4 Hasil Statistik Bacillus subtilis... 52
Tabel 4.3.1 Diameter Zona Inhibisi (mm) PCO dan Antimikroba Terhadap Salmonella typhi... 54
Tabel 4.3.2 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO dan Antimikroba Terhadap Salmonella typhi... 54
Tabel 4.3.3 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO, PCO dan Antimikroba Terhadap Salmonella typhi... 55
Tabel 4.3.4 Hasil Statistik Salmonella typhi... 55
Tabel 4.4.1 Diameter Zona Inhibisi (mm) PCO dan Antimikroba Terhadap Escherichia coli... 56
Tabel 4.4.2 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO dan Antimikroba Terhadap Escherichia coli... 57
Tabel 4.4.3 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO, PCO dan Antimikroba Terhadap Escherichia coli... 57
Tabel 4.4.4 Hasil Statistik Escherichia coli... 57
Tabel 4.5.1 Diameter Zona Inhibisi (mm) PCO dan Antimikroba Terhadap Candida albicans... 58
Tabel 4.5.3 Diameter Zona Inhibisi (mm) TTO, PCO dan Antimikroba
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Pandanus Cocos Oil (PCO)... 4
Gambar 2.2 Gambar Kandungan Flavonoid Hasil Uji Tapis Kimia PCO.... 12
Gambar 2.3 Gambar Kandungan Steroid/Triterpenoid Hasil Uji Tapis Kimia PCO... 13
Gambar 2.4 Gambar Cakram Hasil Uji Antibiotik Staphylococcus aureus.. 14
Gambar 2.5 Gambar Cakram Hasil Uji Antibiotik Escherichia coli... 14
Gambar 2.6 Gambar Histopatologi Hasil Uji Toksisitas Pada Organ Hati, Ginjal, dan Limpa Mencit... 21
Gambar 2.7 Gambar Tumbuhan Melaleuca alternifolia... 23
Gambar 2.8 Gambar Produk Tea Tree Oil... 24
Gambar 2.9 Staphylococcus aureus, Pewarnaan Gram... 28
Gambar 2.10 Faktor Virulensi Staphylococcus aureus... 29
Gambar 2.11 Bacillus subtilis, Pewarnaan Gram, Sporulasi... 32
Gambar 2.12 Salmonella typhi, Pewarnaan Gram... 33
Gambar 2.13 Salmonella typhi pada Medium DSIA dan MacConkey... 34
Gambar 2.14 Escherichia coli, Mikroskopis, Makroskopis, Medium DSIA.. 36
Gambar 2.15 Candida albicans, Mikroskopis... 37
Gambar 2.16 Candida albicans, Makroskopis... 38
Gambar 2.17 Struktur Kimia Kloramfenikol... 40
Gambar 4.2.1 Hasil Pengaruh PCO terhadap Bacillus subtilis... 51
Gambar 4.2.2 Hasil Pengaruh TTO terhadap Bacillus subtilis... 52
Gambar 4.2.3 Hasil Pengaruh PCO dan TTO terhadap Bacillus subtilis... 52
Gambar 4.3.1 Hasil Pengaruh PCO terhadap Salmonella typhi... 54
Gambar 4.3.2 Hasil Pengaruh TTO terhadap Salmonella typhi... 55
Gambar 4.3.3 Hasil Pengaruh PCO dan TTO terhadap Salmonella typhi... 55
Gambar 4.5.1 Hasil Pengaruh PCO terhadap Candida albicans... 58
Gambar 4.5.2 Hasil Pengaruh TTO terhadap Candida albicans... 59
DAFTAR GRAFIK
Halaman
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Gambar alat dan bahan yang digunakan pada penelitian... 65
Hasil Uji Statistik Staphylococcus aureus... 67
Hasil Uji Statistik Bacillus subtilis... 68
Hasil Uji Statistik Salmonella typhi... 69
Hasil Uji Statistik Escherichia coli... 70
Hasil Uji Statistik Candida albicans... 71
LAMPIRAN
Beberapa Gambar Alat dan Bahan Yang Digunakan Pada Penelitian
Cakram Steril Larutan NaCl 0,9% steril,
Aquades
Pandanus Coccos Oil (PCO)
Jangka Sorong Suspensi, Ose, Cotton
Staphylococcus aureus_TTO
Bacillus subtilis_TTO
1.49833 2.50625 1.02317 -1.13182 4.12848 1.464 5 .203
Salmonella typhi_TTO
GET
FILE='J:\statistik\Salmonella typhi_TTO.sav'. DATASET NAME DataSet1 WINDOW=FRONT.
T-TEST
Escherichia coli_TTO
GET
FILE='J:\statistik\Escherichia coli_TTO.sav'. DATASET NAME DataSet5 WINDOW=FRONT.
DATASET ACTIVATE DataSet4.
Candida albicans_TTO
GET
FILE='J:\statistik\Candida albicans_TTO.sav'. DATASET NAME DataSet3 WINDOW=FRONT.
T-TEST
RIWAYAT HIDUP
Nama : Silvyana Dewi Tan Nomor Pokok Mahasiswa : 0310150
Tempat dan Tanggal Lahir : Tasikmalaya, 18 Agustus 1985 Alamat : Jl. Letkol R.E.Djaelani, Ruko No.20 Tasikmalaya 46122
Riwayat Pendidikan :
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
“Back to Nature” itulah moto dunia pengobatan sekarang ini. Akhir-akhir ini
industri herbal medicine berkembang pesat dengan ditemukannya berbagai
macam obat-obat herbal yang berkhasiat mengatasi penyakit yang disebabkan
oleh berbagai miroorganisme. Akhir-akhir ini, Tea Tree Oil (TTO) banyak
digunakan di Australia dan Pandanus Cocos Oil (PCO) mulai dipromosikan di
Indonesia dengan efek antimikroba yang efektif dalam melawan berbagai
mikroorganisme.
Tea Tree Oil (TTO) diperoleh dari destilasi uap daun Melaleuca alternifolia,
yaitu tumbuhan yang secara native berasal dari Australia yang menurut beberapa
artikel dikatakan memiliki sifat antibakteri, antifungi, antivirus, anti-inflamasi,
dan memiliki efek analgetik. Sejak 100 tahun yang lalu, penduduk asli Australia
(Aborigin) menggunakan TTO untuk mengobati infeksi kulit yang kebanyakan
disebabkan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Melalui berbagai
penelitian di Australia, didapati bahwa TTO adalah antiseptik yang tepat, yang
dapat menghambat pertumbuhan bakteri MRSA (Methycillin Resistant
Staphyalococcus aureus) (May, Chan, King, Williams, French, 1999).
Selain TTO, akhir-akhir ini Pandanus Cocos Oil (PCO) yang merupakan
paduan antara buah merah Pandanus conoideus Lam. dan Virgin Coconut Oil
(VCO) diklaim berkhasiat sebagai panasea (obat segala penyakit) dan yang secara
ilmiah terbukti memiliki khasiat antimikroba (Ahkam Subroto, 2005).
Dengan mengetahui efektifitas PCO dan TTO terhadap mikroorganisme yang
paling sering menimbulkan masalah kesehatan di Indonesia, seperti
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli, dan
Candida albicans dan tentunya akan banyak membantu praktisi kesehatan dalam
2
1.2 Identifikasi Masalah
Apakah PCO dan TTO dapat menghambat pertumbuhan keempat spesies
bakteri (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia
coli) dan Candida albicans?
1.3 Maksud dan Tujuan
Maksud penelitian yaitu untuk mengetahui pengaruh PCO dan TTO terhadap
keempat spesies bakteri tersebut dan Candida albicans. Tujuan penelitian yaitu
untuk mengetahui efektivitas penghambatan pertumbuhan keempat spesiesbakteri
tersebut dan Candida albicans olehPCO dan TTO.
1.4 Manfaat Penelitian
Manfaat Penelitian adalah:
1. Menjadi masukan bagi praktisi kesehatan dalam mengatasi infeksi
keempatspesiesbakteri tersebut dan Candida albicans.
2. Menjadi acuan bagi peneliti selanjutnya untuk meneliti hal-hal yang
berhubungan dengan PCO dan TTO.
1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis
Kerangka Pemikiran
PCO dan TTO menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus,
Salmonella typhi, Escherichia coli, dan Candida albicans yang
ditunjukkan dengan terdapatnya zona inhibisi pada kultur bakteri (Ahkam
Subroto, 2005; Anonymous-1).
Zona inhibisi bakteri Staphylococcus aureus, Salmonella typhi,
Escherichia coli, dan jamur Candida albicans timbul pada media yang
diberi PCO dan TTO dan zona inhibisi tidak timbul pada media yang tidak
diberi kedua zat tersebut (Ahkam Subroto, 2005; Anonymous-1).
Pandanus Cocos Oil (PCO) mengandung beberapa zat aktif yang
3
aureus, Salmonella typhi, Escherichia coli, dan jamur Candida albicans
(Ahkam Subroto, 2005).
TTO mengandung beberapa zat aktif yang menimbulkan zona inhibisi
terhadap bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan jamur
Candida albicans (Anonymous-1).
Hipotesis penelitian
Berdasarkan kerangka pemikiran tersebut, dapat disusun hipotesis sebagai
berikut:
PCO dan TTO efektif dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus
aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli dan Candida
albicans.
1.6 Metode
Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik. Metode yang digunakan
adalah metode Kirby Bauer (Imam Masduki, 1996). Cakram kertas steril ditetesi
PCO dan TTO, kemudian diuji efek antimikrobanya terhadap biakan keempat
spesies bakteri tersebut dan Candida albicans. Diameter zona inhibisi yang
terbentuk diukur. Hasil-hasil dibandingkan dengan kontrol positif (cakram berisi
antibiotik rujukan), diuji dengan T test menggunakan SPSS for windows versi
15.0.
1.7 Lokasi dan Waktu
Penelitian dilaksanakan pada bulan April–Agustus 2007 di Laboratorium
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan:
1. Tea Tree Oil (TTO) efektif menghambat pertumbuhan Staphylococcus
aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli dan Candida
albicans, yang ditunjukkan dengan adanya zona inhibisi yang relatif lebih
besar daripada obat rujukan.
2. Pandanus Coccos Oil (PCO) tidak efektif menghambat pertumbuhan
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia
coli dan Candida albicans, yang ditunjukkan dengan tidak adanya zona
inhibisi yang terbentuk pada medium.
5.2 Saran
Saran-saran untuk selanjutnya:
1. Perlu dilakukan penelitian lanjutan mengenai sifat antimikroba zat aktif
dalam PCO dan TTO.
2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan untuk mengetahui aktivitas PCO dan
TTO dengan menggunakan sumur.
3. Penelitian lanjutan untuk meneliti efek antimikroba berbagai jenis buah
DAFTAR PUSTAKA
Buku Rujukan
Ahkam Subroto. 2005. PCO (Pandanus Coccos Oil). Jakarta: Penebar Swadaya.
Hal. 5-6, 9-10, 13-16, 25-31, 44-61.
Brooks, G.F., Butel, J.S., Morse, S.A. 2005. Mikologi Kedokteran. Dalam: Dripa
Sjabana. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Penerbit Salemba Medika. Hal.
323-345, 352-353, 358-359.
I Made Budi, Rudi Hartono, Isna Setyanova. 2005. Tanya Jawab Seputar Buah
Merah. Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 6, 25, 29.
Sugiono, Eri Wibowo. 2004. Statistika untuk penelitian dan aplikasinya dengan
SPSS 10.0 for windows. Edisi 4. Bandung: Alfabeta.
Tim penelitian dan pengembangan wahana computer. 2001. Pengolahan data
statistic dengan SPSS 10.0. Edisi 1. Jakarta: Salemba Infotek.
Tortora, G.J., B.R. Funke, and C.L. Case. 1997. Microbiology An Introduction,
6th ed. New York: Addison Wesley Longman Inc. 302.
Sumber Internet
Anonymous-1. Tea tree oil uses 100% Pure pharmaceutical grade tea tree oil
(Melaleuca alternifolia). http//www.teatreeoiluses.com, diakses 3 Mei 2007.
Anonymous-2. 2007. http://www.thursdayplantation.com/cmsv1/index.php?option =com_content&task=view&id=22&Itemid=53, diakses 4 November 2007.
Anonymous-3. 2006. Designed for health, essential nutrition information.
http://home.gci.net/~designed/tea_tree_oil.htm#top, diakses 25 November 2006.
Anonymous-4. 2007. Bacteria. http://users.rcn.com/jkimbal.ma.ultranet/
BiologyPages/E/Eubacteria.html, diakses 5 November 2007.
Anonymous-5. Gram negative bacilli. http:// education.med.nyu.edu/courses/old/
microbiology/courseware/infect-disease/ Gram_Neg_Bacilli5.html#MAC,
Carson, C.F., Hammer, K.A., Riley, T.V. 2006. Melaleuca alternifolia (Tea Tree) Oil: a Review of antimikrobial and other medicinal properties.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/redirect3, diakses 3 May 2007.
Cathy, Wong. 2007. Alternative medicine. http:///altmedicine.about.com/od/
herbsupplementguide/a/TeaTreeOil.htm, diakses 3 May 2007.
Eleonor A. Tendencia Aquaculture Department Southeast Asian Fisheries
Development Center Philippines. 2001. Disk diffusion method, Chapter 2,
http://rfdp.seafdec.org.ph/publication/manual/antibiotics/chapter2.html, diakses 1 November 2007.
http://overcomingcandida.com, diakses 1 November 2007.
http://student.ccbcmd.edu/courses/bio141/labmanua/lab1/copwrt.html, diakses 1 November 2007.
http://www.Life.umd.edu, diakses 1 November 2007.
http://www.teatreefarm.com, diakses 5 Desember 2006.
Imam Masduki. 1996. Efek antibakteri ekstrak biji pinang (Areca catechu)
terhadap S.aureus dan E.coli in vitro. http://www.kalbe.co.id, diakses 1
November 2007.
Kenneth Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology.
2005. Salmonella and salmonelosis. http://www.textbookofbacteriology.
net/salmonella.html. 4 November 2007.
_______. 2005. Staphylococcus. http://www.textbookofbacteriology.net/
staph.html, diakses 4 November 2007.
May, J., Chan, C.H., King, A., Williams, L., French, G.L. 1999. Time-kill studies
of tea tree oils on clinical isolates. http://www.teatreeking.com/timekill. html, diakses 25 November 2006.
Ramsey, Annette. 2002. Health & fitness tea tree oil. http://www.socal.com,
diakses 3 Mei 2007.
Wikimedia-1. 2007. http://en.wikipedia.org/wiki/Tea_tree_oil_%28melaleuca_ oil%29, diakses 3 Mei 2007.
Wikimedia-2. 2007. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus.
Wikimedia-3. 2007. Bacillus subtilis. http://en.wikipedia.org/wiki/ Bacillus_subtilis, diakses 26 Oktober 2007.
Wikimedia-4. 2007. E.coli. http://en .wikipedia.org/wiki/Escherichia_coli, diakses
26 Oktober 2007.
Wikimedia-5. 2006. Candida albicans. http://en.wikipedia.org/wiki/
Candida_albicans, diakses 5 Desember 2006.
Wikimedia-6. 2007. Antibiotik. http://id.wikipedia.org/wiki/Antibiotik, diakses 1
November 2007.
Wikimedia-7. 2007. Ampicillin. http://en.wikipedia.org/wiki/ampicillin, diakses 1
November 2007.
Wikimedia-8. 2007. Chloramphenicol. http://en.wikipedia.org/wiki/
chloramphenicol, diakses 1November 2007.
Wikimedia-9. 2007. Tetracycline. http://en.wikipedia.org/wiki/tetracycline,
diakses 1 November 2007.
Wikimedia-10. 2007. Nystatin. http://en.wikipedia.org/wiki/Nystatin, diakses 31
