Lampiran 1. Ekstraksi Tumbuhan dengan Metode Maserasi (Ginting, 2008)
dicuci
dikeringanginkan
dihaluskan
ditimbang
dimasukkan ke dalam botol
dimaserasi selama ± 3 hari dengan pelarut
etanol dan diaduk
disaring
diulangi 3 kali
dirotarievaporator pada suhu didih etanol
dibuat konsentrasi 5 %,10%, 20% , 40% dan 0% sebagai
kontrol
dilarutkan dalam DMSO
dipipet sebanyak 10 μl
diteteskan pada permukaan cakram kosong
dibiarkan ±1 jam hingga larutan ekstrak berdifusi ke dalam
cakram
Sampel tumbuhan
serbuk
maserat
Filtrat
Residu
Ekstrak kental
Larutan ekstrak
Lampiran 2. Penyiapan Mikroba Uji
disubkultur dengan menggunakan
media miring
dinkubasi pada suhu 37 ºC selama
48-72 jam
disuspensikan dalam larutan NaCl
0,9% steril sehingga diperoleh
kekeruhan standart Mc. Farland
dilakukan pengenceran 10
-2sehingga
diperoleh suspensi 10
6cfu/ml
Isolat Mikroba Uji
Lampiran 3. Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Daun dan Bunga Tahi
Ayam (Tagetes erecta L.) terhadap Pertumbuhan S. mutans, S.
dysenteriae dan C. albicans
dituang ke dalam cawan Petri steril
dibiarkan memadat
diusapkan suspensi biakan dengan
cotton bud
diletakkan cakram yang mengandung
ekstrak tumbuhan uji
diletakkan cakram pembanding
diinkubasi selama 24-72 jam
diamati dan diukur zona bening di
sekitar cakram
Media MHA
Media Uji
Lampiran 4. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Tahi
Ayam terhadap S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-1
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Diameter Zona Hambat (mm) Total (mm) Keterangan: Diameter zona hambat sebesar 6 mm sama dengan diameter cakram sehingga dinyatakan tidak memiliki daya hambat pertumbuhan.
Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Tahi Ayam terhadap
S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-2
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Lampiran 5. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Daun Tahi
Ayam terhadap S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-3
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Diameter Zona Hambat (mm) Total (mm)
Rata-rata (mm)
U1 U2 U3
Streptococcus mutans
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 17,60 12,54 6,00 36,14, 12,05 10 16,61 13,03 16,55 46,19 15,40 20 19,03 18,68 14,08 51,79 17,26 40 18,52 19,52 18,07 56,11 18,70
Shigella dysentriae
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 15,53 17,63 16,52 49,68 16,56 10 16,52 18,02 19,10 53,64 17,88 20 18,55 18,52 19,52 56,59 18,86 40 19,16 19,08 19,52 57,76 19,25
Candida albicans
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 8,52 8,02 6,00 22,54 7,51
Lampiran 6. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Bunga Tahi
Ayam terhadap S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-1
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Diameter Zona Hambat (mm) Total (mm) Keterangan: Diameter zona hambat sebesar 6 mm sama dengan diameter cakram sehingga dinyatakan tidak memiliki daya hambat pertumbuhan.
Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Bunga Tahi Ayam terhadap
S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-2
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Lampiran 7. Pengamatan Zona Hambat (mm) Ekstrak Etanol Bunga Tahi
Ayam terhadap S. mutans, S. dysentriae, dan C. albicans Hari ke-3
Mikroba Uji Konsentrasi Ekstrak (%)
Diameter Zona Hambat (mm) Total (mm)
Rata-rata (mm)
U1 U2 U3
Streptococcus mutans
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 8,02 10,53 13,02 31,57 10,52
10 12,52 13,02 12,58 38,12 12,71 20 15,02 14,11 14,63 43,76 14,59 40 19,52 14,52 15,53 49,57 16,52
Shigella dysentriae
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 6,00 8,02 9,52 23,54 7,85
10 6,00 10,02 10,68 26,70 8,90
20 10,53 10,02 13,02 33,57 11,19 40 12,02 14,02 16,02 42,06 14,02
Candida albicans
0 6,00 6,00 6,00 18,00 6,00
5 12,02 9,02 9,02 30,06 10,02
Lampiran 8.
Diameter Zona Hambat (mm) Kloramfenikol dan DMSO
terhadap Pertumbuhan Streptococcus mutans dan Shigella dysentriae
pada
Hari ke-1, 2 dan 3
Mikroba Uji Hari 1 Hari 2 Hari 3
Kloramfenikol DMSO Kloramfenikol DMSO Kloramfenikol DMSO
S. mutans 25,05 6,00 23,89 6,00 22,89 6,00
S. dysenteriae 27,85 6,00 27,02 6,00 25,02 6,00
Keterangan: Diameter zona hambat sebesar 6 mm sama dengan diameter cakram sehingga dinyatakan tidak memiliki daya hambat pertumbuhan.
Diameter Zona Hambat (mm) Nistatin dan DMSO terhadap Pertumbuhan
C.
albicans pada Hari ke-1, 2 dan 3
Mikroba Uji Hari 1 Hari 2 Hari 3
Nistatin DMSO Nistatin DMSO Nistatin DMSO
C. albicans 6,34 6,00 6,34 6,00 6,34 6,00
Lampiran 9. Pengamatan KHM Hari ke-1
Mikroba Uji Ekstrak Konsentrasi (%)
Diameter Zona Hambat
(mm) Total
(mm)
Rata-rata (mm)
U1 U2 U3
S. mutans DTA 1 6,02 7,52 6,52 20,06 6,69
2 7,02 8,02 7,52 22,56 7,52
3 7,02 9,02 7,52 23,56 7,85
4 7,02 11,02 8,02 26,06 8,69
S. dysenteriae DTA 1 6,00 9,02 6,02 21,04 7,01
2 6,00 10,02 6,02 22,04 7,35 3 6,00 11,52 7,02 24,04 8,01 4 6,00 11,52 7,02 24,54 8,18
C. albicans DTA 1 6,02 6,00 7,02 19,04 6,35
2 7,52 8,02 7,02 22,56 7,52
3 8,52 8,02 7,52 24,06 8,02
4 8,52 9,02 9,02 26,56 8,85
S. mutans BTA 1 6,00 6,00 6,52 18,52 6,17
2 6,00 6,02 6,06 18,08 6,03
3 6,00 6,03 6,02 18,05 6,02
4 7,02 6,52 6,02 19,56 6,52
S. dysenteriae BTA 1 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
2 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
3 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
4 6,00 8,02 7,02 21,04 7,01
C. albicans BTA 1 9,52 9,02 7,02 25,56 8,52
Lampiran 10. Pengamatan KHM Hari ke-2
Mikroba Uji Ekstrak Konsentrasi (%)
Diameter Zona Hambat
(mm) Total
(mm)
Rata-rata (mm)
U1 U2 U3
S. mutans DTA 1 6,02 7,52 6,02 19,56 6,52
2 7,02 8,02 7,02 22,06 7,35
3 7,02 9,02 7,02 23,06 7,69
4 7,02 11,02 8,02 26,06 8,69
S. dysenteriae DTA 1 6,00 8,52 6,02 20,54 6,85
2 6,00 10,02 6,02 22,04 7,35 3 6,00 10,02 6,52 22,54 7,51 4 6,00 10,52 7,02 23,54 7,85
C. albicans DTA 1 6,02 6,00 7,02 19,04 6,35
2 7,52 8,02 7,02 22,56 7,52
3 8,52 8,02 7,02 23,56 7,85
4 8,52 8,52 9,02 26,06 8,69
S. mutans BTA 1 6,02 6,00 6,02 18,04 6,01
2 6,02 6,02 6,02 18,06 6,02
3 6,00 6,02 6,02 18,04 6,01
4 7,02 6,52 6,02 19,56 6,52
S. dysenteriae BTA 1 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
2 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
3 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
4 6,00 8,02 7,02 21,04 7,01
C. albicans BTA 1 9,02 9,02 7,02 25,06 8,35
Lampiran 11. Pengamatan KHM Hari Ke-3
Mikroba Uji Ekstrak Konsentrasi (%)
Diameter Zona Hambat
(mm) Total
(mm)
Rata-rata (mm)
U1 U2 U3
S. mutans DTA 1 6,02 7,02 6,02 19,06 6,35
2 7,02 8,02 7,02 22,06 7,35
3 7,02 8,02 7,02 22,06 7,35
4 7,02 10,02 8,02 25,06 8,35
S. dysenteriae DTA 1 6,00 8,52 6,02 20,54 6,85
2 6,00 9,52 6,02 21,54 7,18
3 6,00 10,02 6,52 22,54 7,51 4 6,00 10,02 7,02 23,04 7,68
C. albicans DTA 1 6,02 6,00 7,02 19,04 6,35
2 7,02 8,02 7,02 22,06 7,35
3 8,52 8,02 7,02 23,56 7,85
4 8,52 8,02 9,02 25,56 8,52
S. mutans BTA 1 6,02 6,00 6,02 18,04 6,01
2 6,02 6,02 6,02 18,06 6,02
3 6,00 6,02 6,02 18,04 6,01
4 7,02 6,02 6,02 19,06 6,35
S. dysenteriae BTA 1 6,00 6,52 6,00 18,52 6,17
2 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
3 6,00 7,02 6,00 19,02 6,34
4 6,00 8,02 7,02 21,04 7,01
C. albicans BTA 1 8,02 9,02 6,00 23,04 7,68
Lampiran 12. Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Daun Tahi Ayam
terhadap S. mutans
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
S. mutans 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 12,15 b 12,12 b 12,05 b
10% 16,84 b 16,48 b 15,40 b
20% 18,09 bc 18,14 b 17,26 b
40% 19,53 bc 19,71 bc 18,70 bc
kloramfenikol 25,05 c 23,89 c 22,89 c Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (Nilai p > 0,05)
Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Daun Tahi Ayam terhadap S.
dysenteriae
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
S. dysenteriae 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 16,94 b 17,94 b 16,56 b
10% 17,59 b 18,45 b 17,88 b
20% 18,51 c 19,50 bc 18,86 bc
40% 19,49 c 20,16 c 19,25 bc
kloramfenikol 27,85 bc 27,02 bc 25,02 c Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (Nilai p > 0,05)
Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Daun Tahi Ayam terhadap C.
albicans
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
C. albicans 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 7,01 b 8,01 b 7,51 b
10% 12,05 b 11,69 b 10,52 b
20% 13,19 bc 11,85 c 10,52 c
40% 15,02 bc 12,19 c 10,52 c
nistatin 6,34 a 6,34 a 6,34 a
Lampiran 13. Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Bunga Tahi Ayam
terhadap S. mutans
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
S. mutans 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 11,99 b 11,26 b 11,35 b
10% 14,55 bc 13,47 b 11,01 b
20% 16,69 c 15,95 c 15,02 c
40% 17,72 c 17,55 c 16,35 c
kloramfenikol 25,05 d 23,89 d 22,89 d Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (Nilai p > 0,05)
Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Bunga Tahi Ayam terhadap S.
dysenteriae
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
S. dysenteriae 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 9,38 b 8,90 b 7,85 b
10% 10,92 bc 9,92 bc 8,90 bc
20% 13,41 c 12,80 c 11,19 c
40% 16,29 d 15,31 d 14,02 d
kloramfenikol 27,85 e 27,02 e 25,02 e Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang tidak nyata (Nilai p > 0,05)
Analisis Data Pengamatan Esktrak Etanol Bunga Tahi Ayam terhadap C.
albicans
Mikroba Uji
Perlakuan
Hari-1
Hari-2
Hari-3
C. albicans 0% 6,00 a 6,00 a 6,00 a
5% 6,00 a 11,35 b 10,02 b
10% 6,67 a 11,01 b 10,51 b
20% 8,35 b 15,02 bc 14,19 bc
40% 11,52 c 16,35 b 14,20 b
nistatin 6,34 a 6,34 ab 6,34 ab
