Uji Potensi Ekstrak Daun Sambiloto terhadap Tikus Wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi Alloxan sebagai Terapi Alternatif DM Tipe 2.

(1)

PROPOSAL PROGRAM KREATIVITAS MAHASISWA

JUDUL PROGRAM

Uji Potensi Ekstrak Daun Sambiloto terhadap Tikus Wistar (Rattus

norvegicus) yang diinduksi Alloxan sebagai Terapi Alternatif DM Tipe 2

BIDANG KEGIATAN:

PKM PENELITIAN

DIUSULKAN OLEH :

Erinda Kusuma Wardani NIM: G0014086 / ANGKATAN: 2014 Darma Aulia Hanafi NIM: G0012051 / ANGKATAN: 2012

Ana Erdina NIM: G0013026 / ANGKATAN: 2013

Ni’matul Mufidah NIM: G0013174 / ANGKATAN: 2013 Maygitha Wahyuningtyas NIM: G0014154 / ANGKATAN: 2014

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

(2)

(3)

ii

Daftar Isi ... ii

Daftar Tabel dan Gambar ... iii

Ringkasan ... iv

BAB 1. PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Perumusan Masalah ... 2

1.3 Tujuan ... 2

1.4 Kegunaan ... 2

1.5 Luaran ... 2

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA ... 3

BAB 3. METODA PENELITIAN ... 5

BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN ... 8

4.1 Anggaran Biaya ... 8

4.2 Jadwal Kegiatan ... 8

DAFTAR PUSTAKA ... 9

LAMPIRAN-LAMPIRAN ... vi

Lampiran 1. Biodata Ketua dan Anggota ... vii

Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan ... xvi

Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas ... xvii

(4)

(5)

iv prevalensinya cenderung meningkat setiap tahunnya.WHO memprediksi kenaikan jumlah penyandang DM di Indonesia dari 8,4 juta pada tahun 2000 menjadi sekitar 21,3 juta pada tahun 2030.Jenis DM yang paling banyak diderita adalah DM Tipe 2 yang mencapai angka 90-95% dari keseluruhan penderita. DM tipe 2 disebabkan karena penurunan sekresi insulin oleh sel beta pankreas dan atau ganguan fungsi insulin (resistensi insulin) yang akan menyebabkan hiperglikemia.

Tujuan utama dari terapi DM tipe 2 adalah mencapai angka glikemik normal. Terapi farmakologis DM tipe 2 saat ini dengan menghambat alfa glukosidase, seperti acarbose, voglibose, dan miglitol, bekerja dengan menghambat penyerapan polisakarida di usus halus tanpa menimbulkan hipoglikemia dan kenaikan berat badan. Namun efek samping dari obat ini adalah gangguan gastrointestinal seperti flatulens dan diarrhoea.Salah satu obat tradisional dalam mengatasi DM adalah sambiloto (Andrographis paniculata).

(6)

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Diabetes Melitus adalah penyakit metabolik kronis yang prevalensinya cenderung meningkat setiap tahunnya (Shaw, 2009). WHO memprediksi kenaikan jumlah penyandang Diabetes Melitus (DM) di Indonesia dari 8,4 juta pada tahun 2000 menjadi sekitar 21,3 juta pada tahun 2030. Angka ini menunjukkan adanya peningkatan jumlah penyandang DM sebanyak 2-3 kali lipat pada tahun 2030.

Ada beberapa jenis Diabetes Mellitus yaitu Diabetes Mellitus Tipe I, Diabetes Mellitus Tipe II, Diabetes Mellitus Tipe Gestasional, dan Diabetes Mellitus Tipe Lainnya. Jenis Diabetes Mellitus yang paling banyak diderita adalah Diabetes Mellitus Tipe 2 yang mencapai angka 90-95% dari keseluruhan penderita. DM tipe 2 disebabkan karena penurunan sekresi insulin oleh sel beta pankreas dan atau ganguan fungsi insulin (resistensi insulin) yang akan menyebabkan hiperglikemia (ADA, 2010).

Hiperglikemia pada diabetes meningkatkan resiko kerusakan mikrovaskuler (retinopati, nefropati, dan neuropati). Hal ini berakibat pada penurunan angka harapan hidup, peningkatan angka kematian akibat komplikasi mirovaskuler, dan peningkatan risiko komplikasi makrovaskular (penyakit jantung iskemik, stroke, dan penyakit arteri perier) (WHO, 2006).

Tujuan utama dari terapi Diabetes Melitus tipe 2 adalah mencapai angka glikemik normal. Salah satu terapi farmakologis diabetes melitus tipe 2 saat ini adalah penghambat alfa glukosidase seperti acarbose, voglibose, dan miglitol. Obat ini bekerja dengan menghambat penyerapan polisakarida di usus halus tanpa menimbulkan hipoglikemia dan kenaikan berat badan (Nathan, 2009). Namun efek samping dari obat ini adalah gangguan gastrointestinal seperti flatulens dan diarrhoea (Inzucchi, 2012).

(7)

1.2 Perumusan Masalah

Bagaimana potensi ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata) terhadap tikus wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi aloksan sebagai terapi alternatif Diabetes Melitus tipe 2

1.3 Tujuan

Penelitian ini memiliki tujuan untuk mengetahui potensi ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata) terhadap tikus wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi aloksan sebagai terapi alternatif Diabetes Melitus tipe 2.

1.4 Kegunaan

Temuan dalam penelitian diharapkan dapat memperkuat bukti ilmiah tentang potensi potensi ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata) terhadap tikus wistar (Rattus norvegicus) yang diinduksi aloksan sebagai terapi alternatif Diabetes Melitus tipe 2.

1.5 Luaran

(8)

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA

2.1.Diabetes mellitus tipe 2

Diabetes Mellitus Tipe 2 adalah penyakit gangguan metabolik yang di tandai oleh kenaikan gulah darah akibat penurunan sekresi insulin oleh sel beta pankreas dan atau ganguan fungsi insulin (resistensi insulin) (Depkes, 2005).

Sebagian besar DM tipe II diawali dengan kegemukan karena kelebihan makan. Namun Diabetes Mellitus biasa disebut dengan the silent killer karena penyakit ini dapat mengenai semua organ tubuh dan menimbulkan berbagai macam keluhan. (Depkes,2005). Secara patofisiologi, DM tipe II disebabkan karena dua hal yaitu (1) penurunan respon jaringan perifer terhadap insulin, peristiwa tersebut dinamakan resistensi insulin, dan (2) Penurunan kemampuan sel β pankreas untuk mensekresi insulin sebagai respon terhadap beban glukosa.(Unger dan Foster, 1992)

2.2.Daun sambiloto (Andrographis paniculata) Kingdom : Plantae

Spesies : Andrographis paniculata Nees

Dengan mekanisme penghambatan α-glucosidase, dapat menjadi salah satu cara untuk mendapatkan ekstrak daun sambiloto dalam mendukung aktivitas antidiabetes dan menunjukkan bahwa ekstrak daun sambilotopotensial untuk pengelolaan penyakit diabetes mellitus tipe 2 (Subramanian,R et al, 2008). Hal ini didukung dengan kerja dari inhibitor alpha-glucosidase (AGI) dengan menunda penyerapan karbohidrat dari usus halus sehingga dapat menurunkan efek pada glukosa darah postprandial dan kadar insulin.

2.3.Tikus Wistar

Tikus galur wistar merupakan bagian dari spesies Norway Rat (Rattus norvegicus). Tikus wistar adalah hewan yang sering digunakan dalam berbagai penelitian, termasuk penelitian hormon dan pengamatan tingkah laku kopulasi yang berkaitan dengan libido. Berat badan tikus jantan galur wistar antara 200-400 gram, dengan lama waktu hidup 2,5 sampai dengan 3 tahun. Masa pubertas tikus adalah 50±10 hari.

(9)

makanan, minuman, dan lingkungan pada kandang diantaranya temperatur, kelembaban dan intensitas cahaya. Tikus wistar memerlukan asupan makanan sebanyak 5 gram/100 gram berat badan dan konsumsi cairan 8-11 ml/gram berat badan dalam 24 jam. Temperatur kandang untuk perawatan tikus wistar adalah 21-24°C dengan rata-rata kelembaban 40-60%. Intensitas cahaya yang diperlukan adalah 75-125 fc, dengan siklus siang-malam sebanyak 12-12 jam atau 14-10 jam (Nandari, 2006).

2.4.Alloxan

Alloxan merupakan zat kimia diabetagon penginduksi diabetes yang dapat dengan cepat menimbulkan hiperglikemi permanen dalam waktu dua sampai tiga hari. Alloxan secara selektif merusak sel pulau langerhans dalam pankreas yang mensekresi hormon insulin (Suharmiati, 2003).

(10)

BAB 3. METODE PENELITIAN

3.1Jenis Penelitian

Penelitian ini adalah eksperimental laboratorik dengan rancangan post test only controlled group design.

3.2Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi FK UNS, Laboratorium Histologi FK UNS dan Balai Penelitian Tanaman Obat (BPTO) Tawangmangu.

3.3Subjek Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada tikus Wistar jantan. Sampel diambil dari populasi yang memiliki kriteria inklusi yaitu: kelamin jantan, golongan Wistar, berat badan sekitar 150-220 gram, dan memiliki kadar gula darah >270 mg/dl setelah diinduksi Alloxan selama 7 hari. Adapun kriteria eksklusinya adalah tikus yang mati setelah diinduksi Alloxan atau diperkirakan tidak dapat bertahan dalam tahap penelitian lebih lanjut (tampak sakit).

3.4Instrumen Penelitian

- Alat: blender, vibrator, sonde per oral, pipet kapiler hematokrit, GlucoDR dan stiknya, timbangan elektrik, gelas ukur 10,0 ml, pinset, kandang, syringe, vaccum rotary evaporator

- Bahan: daun sambiloto, tikus Wistar jantan, pakan tikus, handscoen, alloxan, etanol 99%, larutan glukosa 10%, air suling, kertas whattman 1

3.5Identifikasi Variabel Penelitian

a. Variabel bebas : konsumsi ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata)

b. Variabel terikat : kadar gula darah c. Variabel perancu:

1. Terkendali: Variasi genetik, jenis kelamin, umur, suhu udara, berat badan semuanya diseragamkan.

2. Tidak terkendali: Tingkat stres tikus, sensitivitas subjek terhadap zat yang diberikan.

3.6Definisi Variabel

a. Variabel Bebas : konsumsi ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata)

(11)

pemberiannya (terdapat di cara kerja). Skala penelitian adalah skala ordinal.

b. Variabel Terikat : kadar gula darah

Kadar gula darah diukur dengan mempergunakan alat GlucoDR dengan dilengkapi stik GlucoDR

c. Variabel Perancu

1. Variabel perancu terkendali. Variabel ini dikendalikan melalui homogenisasi

- Variasi genetik : jenis hewan yang digunakan adalah tikus jenis Wistar

- Jenis kelamin : jenis kelamin tikus adalah jantan. - Suhu udara : suhu udara berkisar 25-28 0_C

- Berat badan : berat badan tikus sekitar 150-220 gram 2. Variabel perancu tidak terkendali

- Tingkat stres : Lingkungan yang terlalu ramai, gangguan dari tikus lainnya dapat mempengaruhi tingkat stres tikus.

- Sensitivitas dapat terjadi karena variasi kepekaan tikus terhadap zat yang digunakan.

3.7Cara Kerja

a. Pengkondisian subjek penelitian

(12)

yang telah diinduksi Alloxan sehingga menjadi diabetes mellitus tipe 2 (Putu et al, 2010).

b. Pembuatan ekstrak daun sambiloto (Andrographis paniculata)

Daun sambiloto yang telah kering dipisahkan dari batangnya. Setiap 300 gr daun sambiloto dimasukkan ke dalam labuh ekstrak dan ditambahkan 1 liter ethanol 99%. Dimasukkan ke dalam vibrator selama 2 x 24 jam. Disaring dengan kertas saring. Filtrat yang diperoleh dimasukkan ke dalam vacuum rotary evaporator (suhu 50- 60 0C, tekanan 76 mmHg) sampai pelarut ethanol terevaporasi sehingga diperoleh cairan ekstrak kental cair berwarna hijau tanpa pelarut ethanol. (Putu et al, 2010).

c. Pemberian perlakuan subjek penelitian

Sampel penelitian ini selanjutnya dikelompokkan menjadi 4 jenis perlakuan, di mana masing-masing kelompok tersebut terdiri dari 6 ekor tikus Wistar jantan. yaitu:

S0= tanpa pemberian ekstrak sambiloto (kontrol)

S1= pemberian ekstrak dengan dosis 100 mg dalam takaran 0.1 cc S2= pemberian Daluman dengan dosis 200 mg dalam takaran 0.2 cc S3= pemberian Daluman dengan dosis 300 mg dalam takaran 0.3 cc d. Pemaparan subjek penelitian

Tahap ketiga penelitian dilakukan dengan menggunakan 24 ekor tikus Wistar jantan yang telah diinduksi Alloxan sehingga menderita diabetes. Tikus-tikus yang memenuhi kriteria-kriteria inklusi dipilih secara acak sebagai sampel dan dikelompokkan menjadi 4 kelompok seperti yang telah disebutkan. Keempat kelompok tersebut diberikan pakan dengan jumlah yang sama, yaitu sebanyak 15 gram/tikus/hari. Tikus dipuasakan selama 8 jam setelah diberi pakan, kemudian diberikan intervensi dengan dosis tertentu sesuai kelompok. Pengukuran kadar gula darah untuk mengetahui perubahan yang terjadi dilakukan pada hari ke-15 dan hari ke-21. (Putu et al, 2010).

3.8Analisis Data

(13)

BAB 4. BIAYA DAN JADWAL KEGIATAN

4.1 Anggaran Biaya

Tabel 4.1 Ringkasan Anggaran Biaya PKM-P

No. Jenis Pengeluaran Biaya (Rp.)

1 Peralatan penunjang Rp 3.028.750

2 Bahan habis pakai Rp 4.846.000

3 Perjalanan Rp 3.028.750

4 Lain-lain Rp 1.211.500

Jumlah Rp 12.115.000

4.2 Jadwal Kegiatan

Tabel 4.2 Jadwal Kegiatan PKM-P

No. Jenis Kegiatan Bulan

1 2 3 4 5

1 Persiapan Penelitian

a. Registrasi laboratorium

b. Pemesanan alat dan bahan

c. Mengumpulkan kepustakaan

2 Pelaksanaan

a. Pengondisian subjek penelitian

b. Pembuatan ekstrak daun sambiloto

c. Pemberian perlakuan subjek penelitian

d. Pemaparan subjek penelitian

3 Analisis Data dan Penyusunan Laporan

(14)

DAFTAR PUSTAKA

Akowuah, G.A., Zhari I., dan Norhayati I. 2006. HPLC and HPTLC densitometric determination of andrographolides and antioxidant potential of Andrographispaniculata. J Food Comp Anal. 19: 118–126.

American Diabetes Association. 2010 . Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. USA: American Diabetes Association

Cooperstein, S.J. dan Watkins D. 1981. Action of Toxic Drugh on Islet Cell : In SJ Cooperstein, Dudley Watkins (ed) The Islet of Langerhands Biochemistry, Physiology, and Pathology. New York : Academic Press.

Dalimunthe, Aminah. 2009. Interaksi Sambiloto (Andrographis paniculata). Medan: USU Press

Departemen Kesehatan RI. 2005. Pharmaceutical Care untuk Penyakit Diabetes Melitus. Jakarta : Direktor Bina Farmasi Komunitas dan Klinik

Dorlan, W.A.N. 2002. Kamus Kedokteran Dorlan. Edisi 21. Jakarta : EGC. Floris, A., et al. 2005. α-Glucosidase Inhibitors for Patients With Type 2

Diabetes. Journal Diabetes Care , 28.

Hu, C. Q. dan Zhou B. N. 1982. Isolation and Structure of Two New Diterpenoid Glucosides from Andrographis paniculata Nees. Yao Xue Xue Bao. 17(6): 435–440.

Inzucchi, S.E., et al. 2012. Management of hyperglycaemia in type 2 diabetes: a patient-centered approach. Position statement of the American Diabetes Association (ADA) and the European Association for the Study of Diabetes (EASD). USA: Springer-Verlag

Rees, D.A. dan Alcolado, J. C. 2005. Animal Models of Diabetes Mellitus. Diabetic Medicine. 22: 359-370.

R. Nandari. 2006. Pengaruh Pemberian Ekstrak Belimbing Wuluh (averrhoa Bilimbi l.) Terhadap Kadar Testosteron Bebas dan Libido Tikus Jantan Galur Wistar. Tesis. Fakultas Ilmu Biomedik Universitas Diponegoro, Semarang.

Santoso J. dan Saryono. 2008. Penggunaan Rebusan Daging Buah Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) dan Pengaruhnya terhadap Penurunan Glukosa. Tesis. Program Pendidikan Dokter Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto.

Shaw, J.E., R.A. Sicree, dan P.Z. Zimmet. 2009. Global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030. Australia: Elsevier

(15)

Suharmiati. 2003. Pengujian Bioaktivitas Anti Dibetes Melitus Tumbuhan Obat. Badan Penelitian Pengembangan Kesehatan. Pusat Penelitian dan Pengembangan Pelayanan dan Teknologi Kesehatan. Surabaya: Departemen Kesehatan RI.

Szkudelski, T. 2001. The Mechanism Of Alloxan And Streptozotocin Action In β Cells Of The Rat Pancreas. Physiology Research. 50: 536-54.

Unger, R.H. dan Foster, D.W. 1992. Diabetes Mellitus, In Wilson, J.D. and Foster, D.W. Endocrinology. 1255-1317.

Weino, L. 1995. Andrographis, in-depth review. http://www.altcancer.com. World Health Organization. 2006. Definition and Diagnosis of Diabetes Mellitus

(16)

(17)

vi

Nama Institusi SDN Jember Lor III

SMPN 2 Jember SMAN 1

Jember

Jurusan - - IPA

Tahun Masuk 2000-2006 2006-2009 2009-2012

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

No. Nama Pertemuan Ilmiah /

Seminar

Seminar Judul Artikel Ilmiah

Waktu dan Tempat

1 AMSW FK UNAIR

(18)

(19)

(20)

(21)

(22)

xi Biodata Dosen Pembimbing

A. Identitas Diri

1 Nama Lengkap (dengan gelar) Setyo Sri Rahardjo, dr., M.Kes

2 Jenis Kelamin L

3 Program Studi Ilmu Lingkungan minat Kesehatan

Lingkungan (Toksikologi

4 NIDN 0018076503

5 Tempat dan Tanggal Lahir Surakarta, 18 Juli 1965

6 E-mail toifarmakouns@yahoo.co.id

7 Nomor Telepon/HP 0271 71836 / 08122989781

B. Riwayat Pendidikan

S1 S2 S3

Nama Institusi Universitas Sebelas Maret

Tahun Masuk-Lulus 1992 2004 Sedang Studi

C. Pemakalah Seminar Ilmiah (Oral Presentation)

(23)

xii 2

Seminar Nasional

Tumbuhann Obat Indonesia XXIX

Daya Anti Bakteri Sari Buah Merah (Pandaus

Tumbuhann Obat Indonesia XXX

Seminar Nasional Tanaman Obat dan Obat Tradisional

Efek Ekstrak Kulit Mendapat Diet Tinggi

(24)

xiii 6

Seminar Nasional

POKJANAS Tumbuhann

Obat Nasional XXXIV

Efek Hepatoprotektor

Simposium PERHIPBA XV dan Konggres TOI IV

Efek Ekstrak Daun Krokot (Portulaca oleracea L.) sebagai Anti Oksidan Alami terhadap Kadar Alanin Transaminase (ALT)

dan Gambaran

Histologi Sel Hepar Tikus Putih (Rattus novergicus L.) yang diberi Minyak Goreng Deep Frying

Simposium Penelitian Bahan Alami ke XVI Muktamar Nasional PERHIPBA XII Tahun 2014

Pengaruh Pemberian

Topikal Daun

(25)

(26)

xv Lampiran 2. Justifikasi Anggaran Kegiatan

1. Peralatan penunjang (15-25%)

Material Justifikasi

2. Bahan Habis Pakai (30-40%)

(27)

xvi

4. Lain-lain (administrasi, publikasi, seminar, laporan, lainnya, maks 10%)

Material Justifi

Administrasi laboratorium 4 1 Rp 250.000 Rp 1.000.000

Pembuatan laporan 1 5 Rp 42.300 Rp 211.500

SUB TOTAL (Rp) Rp 1.211.500

(28)

xvii Lampiran 3. Susunan Organisasi Tim Peneliti dan Pembagian Tugas

No Nama / NIM Program

Kedokteran Kedokteran 7 jam / minggu

- Mengkoordinasikan tim - Menyusun rancangan dan

hasil akhir dari gagasan - Mengumpulkan data

2 Darma Aulia Hanafi G0012051

- Membantu ketua tim - Mengumpulkan data

3 Ana Erdina G0013026

4 Ni’matul Mufidah G0013174

5 Maygitha Wahyuningtyas G0014154

(29)