BAB 3. METODE PENELITIAN
3.8 Prosedur Penelitian
3.8.5 Pengambilan Sampel
Pembedahan dilakukan 3 hari sebelum kelahiran perlakuan dengan langkah sebagai berikut:
a. Hewan coba dianastesi secara inhalasi dengan menggunakan chloroform b. Dilakukan pembedahan secara vertikal dari daerah abdomen posterior menuju
anterior dengan membuka daerah rongga perut dan rongga dada.
c. Menghitung jumlah implantasi dan didokumentasi.
d. Ovarium sebelah kanan dan kiri dipisahkan dan difiksasi dalam larutan formalin 10%
e. Hasil yang diperoleh kemudian dikelompokkan berdasarkan kelompok perlakuan.
3.8.6 Pembuatan Preparat Histologi
Pembuatan preparat histologi ovarium dilakukan dengan langkah sebagai berikut : a. Fiksasi
Pada tahap ini, ovarium difiksasi pada larutan formalin 10% selama 1 jam, diulang sebanyak 2 kali pada larutan yang berbeda.
b. Dehidrasi
Pada tahap ini, ovarium yang telah difiksasi kemudian didehidrasi pada larutan ethanol 70 % minimal ± 15 menit, kemudian dipindahkan dalam larutan ethanol 80% selama 1 jam, dilanjutkan kedalam larutan ethanol 95 % selama 2 jam, dimasukan kembali pada ethanol 95% selama 1 jam. Selanjutnya dimasukan dalam ethanol 100% selama 1 jam dilakukan sebanyak 2 kali.
c. Clearing (Penjernihan)
Pada tahap ini, ovarium yang telah didehidratasi kemudian diclearing untuk menarik kadar ethanol dengan menggunakan larutan xylol I selama 1 jam, kemudian dipindahkan dalam larutan xylol II selama 2 jam dan dilakukan sebanyak 2 kali.
Digital Repository Universitas Jember
d. Impregnasi
Proses infiltrasi bahan embedding dalam jaringan pada suhu 56°-60°C, caranya jaringan dibungkus dengan kertas saring yang sudah diberi label untuk menghindari kekeliruan identitas sampel, kemudian dimasukkan ke dalam bahan embedding yaitu parafin dengan titik didih 56°-60°C. Tahapan impregnasi adalah sebagai berikut: parafin (56°-58°C) 2 jam parafin (56°-58°C) 2 jam
parafin (56°-58°C) 2 jam.
e. Embedding
Embedding merupakan proses penanaman jaringan ke dalam bahan embedding, yaitu parafin dengan titik didih 56°-60°C. Tahapan embedding adalah sebagai berikut:
1) mempersiapkan alat cetak blok parafin (besi berbentuk huruf L) dan meletakkannya di tempat yang rata.
2) menuangkan parafin cair (titik didih 56°-60°C) ke dalam alat cetak blok, kemudian memasukkan jaringan yang telah diimpregnas, memberi label sampel dan menunggu sampai parafin beku.
3) parafin blok sudah siap untuk dipotong setelah dilepas dari alat cetak balok.
f. Penyayatan
Persiapan penyayatan meliputi:
1) mengolesi obyek glass dengan meyer egg albumin,
2) menempelkan blok parafin pada blok holder mikrotom dengan bantuan pemanasan.
Proses penyayatan meliputi:
1) penyayatan menggunakan mikrotom, sebelumnya membersihkan pisau mikrotom dengan kasa/kertas saring yang telah dibasahi dengan xylol dengan arah tegak lurus.
2) mengatur ketebalan sayatan mikrotom antara 4-6 µm atau sesuai dengan kebutuhan.
33
3) mengambil sayatan yang telah diperoleh dengan kuas lalu meletakkan di atas permukaan air waterbath dengan temperatur tetap 56°-58°C hingga sayatan mekar.
4) mengambil sayatan yang telah mekar dengan obyek glass yang telah diolesi dengan meyer egg albumin dan mengeringkan dengan hotplate dengan suhu sekitar 30°-35°C, minimal selama 12 jam.
g. Staining (Pewarnaan)
Hasil potongan diwarnai dengan hematoxilin eosin (pewarnaan HE) melalui tahapan sebagai berikut :
1) preparat direndam dalam larutan xylol I selama 2-3 menit
2) preparat diambil dari xylol I dan direndam dalam larutan xylol II selama 2- 3 menit
3) preparat diambil dari xylol II dan direndam dalam alkohol 95 % selama 2-3 menit dilakukan sebanyak 2 kali
4) preparat diambil dari alkohol 96% dan direndam dalam alcohol absolut 2-3 menit dilakukan sebanyak 2 kali
5) preparat diambil dari ethanol 50% dan direndam dalam xylol selama 2-3 menit diulang sebanyak 3 kali.
h. Penutupan (mounting) Tahapannya sebagai berikut:
1) memasukkan dalam alkohol 70%, 80%, dan 96% masing-masing sebentar saja.
2) kelebihan xylol dihisap menggunakan kertas filter melalui tepi gelas benda.
3) memasukkan ke xylol minimal 10 menit.
4) menetesi dengan canada balsam, ditutup dengan gelas penutup.
i. Labelling
Pada label dituliskan:
1) nama organ (ovarium)
2) potongan melintang/membujur
Digital Repository Universitas Jember
3) pewarnaan (He) 4) tanggal pembuatan j. Hasil
Inti sel : biru Erytrcyte : merah Sitoplasma : merah
Otot : merah
3.8.6 Pengamatan Preparat
Preparat diamati diamati melalui mikroskop binokuler Nikon E 100 untuk menghitung kepadatan serabut kolagen dan jumlah korpus luteum pada ovarium sebelah kanan dan kiri.
3.8.7 Pengamatan jumlah dan berat anakan mencit
Pengamatan terhadap jumlah dan berat anakan mencit dilakukan pada 8 ekor mencit yang diberi perlakuan hingga melahirkan. Penghitungan tersebut dilakukan segera setelah mencit melahirkan. Perhitungan berat anakan mencit menggunakan timbangan digital.
3.8.8 Pengamatan kepadatan serabut kolagen
Kepadatan serabut kolagen diamati di ovarium baik di dalam folikel maupun diluar. Hasil penelitian data dalam ukuran yang sebenarnya tersebut kemudian dikeluarkan berdasarkan nilai terendah dan nilai tertinggi dan dibagi dalam tiga kriteria yaitu tebal, sedang atau normal.
Keterangan: 1-10= + = 1 (Sedikit) 10-20= ++ = 2 (Sedang) 20-30= +++ = 3 (Padat)
35
3.9 Alur Penelitian
Kel.kontrol Kel. Perlakuan 1 Kel. Perlakuan 2 Kel. Perlakuan 3
1 jantan 1 betina 1 jantan 1 betina 1 jantan 1 betina 1 jantan 1 betina
Dikawinkan Terdapat sumbat vagina
Jantan dan betina dipisah
Tanpa pemberian ekstrak daun pegagan
Ekstrak daun pegagan 50 mg/kg BB
Ekstrak daun pegagan 75 mg/kg BB
Ekstrak daun pegagan 100 mg/kg BB
Diamati hingga beranak dihitung jumlah anakan masing perlakuan 2 ekor 3 hari sebelum melahirkan
dilakukan pembedahan masing perlakuan 2 ekor
Mencit diaklimasi selama 1 minggu
Diamati jumlah implantasi, dan korpus luteum dan kepadatan kolagen
Analisis data
Kesimpulan
Digital Repository Universitas Jember
3.10 Analisis Data
Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun pegagan (Centella asiatica [L.]
Urban) terhadap produktivitas mencit (Mus musculus L.) Strain Balb-C diuji dengan menggunakan analisis varian (ANAVA) dengan tingkat kepercayaan 95% (p<0,05).
Kemudian, jika ada pengaruh maka analisis dilanjutkan dengan uji LSD pada taraf signifikasi 5% dengan menggunakan software SPSS for windows versi 16 (Setyowati, 2008: 28).
BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan yang telah diuraikan, dapat ditarik beberapa kesimpulan yaitu sebagai berikut.
a. pemberian ekstrak daun pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) dapat mempengaruhi produktivitas mencit (Mus musculus L.) Strain Balb-C dengan meningkatkan kepadatan serabut kolagen, berat anakan, jumlah korpus luteum, jumlah anakan, jumlah implantasi, serta memperpendek lama kebuntingan.
b. dosis pemberian ekstrak pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) yang efektif untuk meningkatkan produktivitas mencit (Mus musculus L.) Strain Balb-C adalah pada dosis 100 mg/kg BB.
5.2 Saran
a. sebaiknya dilakukan penelitian serupa dengan sampel yang lebih banyak dan rentang dosis yang lebih besar untuk mengetahui dosis yang paling efektif untuk meningkatkan produktivitas mencit (Mus musculus L.) Strain Balb-C.
b. perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui secara jelas zat-zat aktif yang terkandung di dalam ekstrak pegagan, khususnya yang mempunyai efek peningkatan produktivitas mencit (Mus musculus L.) Strain Balb-C.
c. sebaiknya dilakukan penelitian lebih lanjut dengan perlakuan sebelum terjadi fertilisasi.
Digital Repository Universitas Jember
DAFTAR BACAAN
. Buku
Dalimartha, S. 2004. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 4. Jakarta: Puspa Swara.
Eko, T. 2010. Budi Daya 22 Ternak Potensial. Jakarta: Penebar swadaya.
Gunawan, D. 2004. Ramuan Tradisional untuk Keharmonisan Suami Istri. Jakarta:
Penebar Swadaya.
Kartasapoetra. 1996. Budidaya Tanaman Berkhasiat Obat. Jakarta: Rineka Cipta.
Lenny, S. 2006. Senyawa Terpenoida dan Steroida. Sumatera Utara: USU Repository.
Mozes, R. 1977. Fisiologi Reproduksi pada Ternak. Bandung: Angkasa.
Muhlisah, F. 2002. Tanaman Obat Keluarga. Jakarta: Penebar Swadaya.
Newall, A. 1996. Herbal Medicine “A Guide for health-Care Professionals”.
Pharmaceutical Press London.
Parakkasi. A. 1999. Ilmu Nutrisi dan Makanan Ternak Ruminan. UI Press: Jakarta.
Partodihardjo, S. 1980. Ilmu Reproduksi Hewan. Jakarta: Mutiara.
Setyowati, O. 2008. Pengaruh Ekstrak Daun Dewa (Gynura segetum (lour.) Merr.) terhadap Jumlah Limfosit pada RadangLuka Gores pada Mencit (Mus musculus) Strain Balb-C. Tidak Dipublikasikan. Skripsi. Jember: FKIP Uni versitas Jember.
Smith, J. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Jakarta: Universitas Indonesia.
Steenis, V. 1975. Flora untuk Sekolah di Indonesia. Jakarta: PT. Pradnya Paramita.
Swarth, J. 2006. Stres dan Nutrisi. Jakarta: Bumi Asara.
Turner, D. Bagnara, Joseph. 1976. Endokrinologi Umum. Surabaya: Airlangga University Press.
68
Tjitrosoepomo, G. 2005. Taksonomi Tumbuhan Obat-Obatan. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Universitas jember. 2009. pedoman penulisan karya ilmiah. Jember: jember university press.
Winarto. 2003. Khasiat dan Manfaat pegagan Tanaman Penambah Daya Ingat.
Jakarta: Agro Media Pustaka.
Yerliana, T. 2009. Uji Efek Antipiretik Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica [L.]
Urban) pada Tikus Putih. Tidak Dipublikasikan. Skripsi. Jember: Fakultas Farmasi Universitas Jember.
Yatim, W. 1990. Histologi. Bandung: Tarsito
Internet
Abun, 2006. Kebutuhan Vitamin untuk Kuda. http://pustaka.unpad.ac.id/wp content /uploads/2009/10/kebutuhan_vitamin_untuk_kuda.pdf. [10 Juli 2010]
Adnan, Jasri Jangi dan ansar. 2004. Pengaruh Fitosterol Daun Tumbuhan Lamun (Enhalus Acoroides) Terhadap Fungsi Reproduksi Mencit(Mus Musculus) Icr Betina. http://www.scribd.com/doc/56797523 /Perngaruh-Fitosterol- Reproduksi-Mencit-adnan-UNM#fullscreen:on. [4 Agustus 2011].
Amira, F. 2006. Pengaruh Pemberian Jus Pegagan (C. Asiatica L.) Dalam Meningkat kan Kadar Hemoglobin (Hb) Darah Tikus Putih Betina (Rattus norvegicus). http://eprints.umm.ac.id/8883/1/PENGARUH_ PEMBERIAN_
JUS_PEGAGAN.pdf. [4 Agustus 2011].
Annisa. 2006. Pengaruh Pemberian Ekstrak Air Daun Pegagan (Centella asiatica) terhadap Kemampuan Kognitif dan Kadar Neurotransmiter Monoamin pada Hipokampus Tikus (Rattus norvegikus L.) Galur Wistar Jantan Dewasa.
http://www.sith.itb.ac.id/abstract/s1/2006S1AnnisaRFPengaruh%20Pemberi an%20Ekstrak%20Air%20Daun%20Pegagan%20Terhadap%20Kemampuan
%20Kognitif%20Dan%20Kadar%20Neurotrasmitermonoamin%20Pada%20 Hipokampus%20Tikus%20Galur%20Wistar%20Jantan%20Dewasa.pdf.[09 Juli 2010].
Anonim. 2005. Pegagan (Centella asiatica). www.iptekk.net.id. [09 Juli 2010].
Digital Repository Universitas Jember
Anwar, R. 2005. Biosintesis, Sekresi dan mekanisme kerja Hormon.http://pustaka.
unpad.ac.id/wpcontent/uploads/2010/05/biosintesis_sekresi_dan_mekanisme_
kerja_hormon.pdf. [08 Juli 2010 ].
Amalia, R. 2009. Pengaruh Ekstrak Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) terhadap Efek Sedasi pada Mencit BALB/C.http://eprints.undip.ac.id/8081 /1/Rizki Amalia.pdf. [08 Juli 2010 ].
Amin. 2009. Antanan untuk lancarkan Peredaran Darah http://www.kasundaan.
org/id/index.php?option=com_content&view=article&id=105:centella&cati64 :herbal&itemid=97.[08 Juli 2010].
Fitriani. 2007. Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan terhadap Kadar SPGT dan SGOT mencit(Musmusculus).http://lib.uinmalang.ac.id/files/thesis/fullchapter/04520 020.ps. [1 Juli 2011].
Fitriyah. 2009. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Pegagan (Centella Asiatica (L.) Urban )terhadap Perkembangan Folikel Ovarium Mencit (Mus Musculus).
http://lib.uin-malang.ac.id/files/thesis/fullchapter/05520034.pdf. [4 Agustus 2011].
Henny, D. 2008. Manfaat dan kandungan Pegagan. http:// analisateknisia. blogspot.
com/2008/10/pegagan.html. [08 Juli 2010 ].
Janika, A. 2008. Hubungan Kadar Hormon Estradiol 17-β dan Tebal Endometrium Uterus Mencit (Mus musculus L.) selama satu Siklus Estrus.
http://eprints.undip.ac.id/6192/1/Agung_JS,_hubungan_antar_kadar_horm on_estrogen_dengan_kete%E2%80%A6.pdf. [08 Juli 2010 ].
Januati, M. 2005. Budidaya Tanaman Pegagan.http://forum.upi.edu/v3/index.php?to pic= 12089.0 [09 Juli 2010].
Kadarwati. 2009. Pengaruh Akar Ginseng ( Wild Ginseng ) Dalam Ransum Mencit ( Mus Musculus) Terhadap Jumlah Anak Dan Pertumbuhan Anak Dari Lahir Sampai Dengan Sapih. http://repository.ipb.ac.id/bitstream/handle/ 1234567 89/32699/D06kad_abstract.pdf?sequence=.[4 Agustus 2011].
Lelo. 2011. Kegunaan Asam Amino. http://papaji.forumotion.com/t4400-kegunaan- asam-amino. [26 September 2011].
Lestari, D. 2009. Mengkaji Program Pencapaian Populasi Sejuta ekor sapi Tahun 2013.http://www.mustang89.com/literatur/34-literatur—sapipotong/240meng- kaji-program-pencapaian-populasi-sejuta-ekor-sapi-tahun-2013.[09Juli 2010].
70
Liana, E. 2009. Pegagan : Herbal Awet Muda dan Panjang Umur. http://pembelajar.
com/pegagan-herbal-awet-muda-dan-panjang-umur. [ 07 juli 2010].
Mahendra, C. 2006. Pertumbuhan Mencit (Mus Musculus) Umur 21 Sampai Dengan 42 Hari Yang Mendapatkan Bahan Pakan Tambahan Kemangi (Ocimum Basilicum) Kering. http://repository.ipb.ac.id/bitstream/handle/123456789/4 6098 /D06hcm.pdf?sequence=. [1 Agustus 2011].
Malherbologie. 2008. Centella asiatica (L.) Urban. http://www.malherbologie.com.
[tanggal 9 Juli 2010].
Manoi, F. 2009. Pengaruh Konsentrasi Karboksil Metil Selulosa (CMC) terhadap Mutu Sirup Jambu mete (Anacardium occidentale L.). http://balittro.litbang.
deptan.go.id. [07 juli 2010].
Maulida, D. 2010. Ekstraksi Antioksidan ( Likopen ) Dari Buah Tomat Dengan Menggunakan Solven Campuran, N – Heksana, Aseton, Dan Etanol.
http://eprints.undip.ac.id/13454/1/SKRIPSI_EKSTRAKSI_ANTIOKSIDAN_%
28_LIKOPEN_%29_DARI_BUAH_TOMAT_DENGAN_MENGGUNAKAN_S OLVEN_CAMPURAN,_n_%E2%80%93.pdf. [1 Juli 2011].
Nursyam, A. Tanpa Tahun. Perkembangan iptek di bidang reproduksi ternak Untuk meningkatkan produktivitas ternak. http://images.andinursyam.multiply.multi plycontent.com/attachment/0/R7NzpwoKCtMAAE9qIKo1/IPTEK%20REPR ODUKSI%20TERNAK.pdf?nmid=81921461. [18 September 2010].
Padmawar, A. 2009. Centella asiatica. http://www.amrutaherbals.com/specitications/
Centella/detail.htm. [09 Juli 2010].
Rio. 2010. Manfaat Asam Amino Esensial untuk tubuh. http://proy-rio.blogspot. com/
2010/05/manfaat-asam-amino-esensial-untuk-tubuh.html. [26 September 201]
Pusat itelegensi. 2010. Otak dan Stres. http://www.pusat-intelegensia.com.[08 Juli 2010].
Ramdani, D. 2010. Asam Amino Esensial dan Non Esensial. http://dediramdani.blog spot.com/2010/04/asam-amino-esensial-dan-non-esensial.html.[23 September 2011].
Rani, K. 2010. Phytonutrient Profile of gotu Kola (Centella asiatica). http://www.
kamarani.com/plant_phytochemistry.htm?plantid=1039.[ 26 Juni 2010].
Digital Repository Universitas Jember
Rusdiana. 2004. Vitamin. http://file.upi.edu/Direktori/E%20-%20 FPTK /JUR. % 20PEND.%20KESEJAHTERAAN%20KELUARGA/197807162006042%20-
%20AI%20MAHMUDATUSSA%27ADAH/VITAMIN.pdf. [5 Juli 2010]
Rivia, R. 2004. Laju Metabolisme Mencit (Mus musculus) Jantan pada Keadaan Puasa sampai dengan 48 jam. http://iirc.ac.id/jspui/bits tream/123456 789/2112/4/B04rbr.pdf. [29 September 2010].
Sulastry, F. 2009. Uji Toksisitas Akut yang diukur dengan penentuan LD50 Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) terhadap Mencit BALB/C.
http://eprints.undip.ac.id/8068/1/Feni_Sulastry.pdf.[ 15 Juli 2010].
Syifaiyah, 2008. Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Pegagan (Centela Asiatica) terhadap Kadar SGPT dan SGOT Hati Mencit (Mus Musculus) yang Diinduksi dengan Parasetamol. http://lib.uin-malang.ac.id/files/thesis/full chapter/045200204.pdf. [4 Agustus 2011].
Tridjoko. 2009. Perbaikan Mutu Telur dengan Vitamin E pada Pakan Ikan kerapuh bebek.http://www.kampoengternak.or.id/media.php?module=detailberita&id=
197.pdf. [29 September 2010].
Vidyaniati. 2010. Perlindungan Hepatotoksisitas Ekstrak Metanol Pegagan Dibanding Vitamin E pada Tikus Model Hepatitis. http://pustaka .unpad.ac.id /wpcontent/uploads/2010/11/perlindungan_hepatoksisitas_ekstrak_metanol_p egagan.pdf. [5 Juli 2011].
Wirdatul, I. 2009. Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan (Centella Asiatica) Terhadap Spermatogenesis Mencit (Mus Musculus. http://lib.uin-malang.ac.id/files/the sis/fullchapter/ 05520023.pdf. [4 Agustus 2011].
Judul Latar belakang Rumusan Masalah
Variabel Indikator Sumber Data
Metode Penelitian
Analisis Data Pengaruh
ekstrak daun Pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) terhadap Peningkatan Produktivitas Mencit (Mus Musculus L.) Strain Balb-C.
Jumlah penduduk Indonesia yang semakin banyak dan berkembang pesat berakibat pula terhadap perkembangan usaha di sektor peternakan. Peternakan diakui sebagai salah satu komoditas pangan yang memberikan kontribusi yang cukup besar bagi devisa negara dan harus dikembangkan untuk
memenuhi kebutuhan protein hewani. Pada kenyataannya, target kebutuhan protein hewani asal ternak sebesar 6 g/kapita/hari masih jauh dari terpenuhi.. Pembangunan Peternakan 2003 – 2007 tidak tercapai, bahkan terjadi penurunan populasi - 1,51 % sampai - 7,07.
telah banyak alternatif untuk meningkatkan produktivitas ternak yaitu dengan berbagai macam teknologi reproduksi. Teknologi reproduksi tersebut telah terbukti efektif meningkatkan produktivitas ternak, namun terdapat sisi
negatif.oleh karena itu dibutuhkan bahan alami yang banyak
mengandung nutrisi dengan biaya yang murah.
1. adakah pengaruh ekstrak daun pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) terhadap peningkatan produktivitas mencit (Mus Musculus L.) Strain Balb-C.
2. berapa pemberian dosis ekstrak daun pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) yang efektif terhadap peningkatan produktivitas mencit (Mus Musculus L.)Strain Balb- C.
1. Variabel bebas : Ekstrak daun pegagan(Cent ella asiatica (L.) Urban).
2. Variabel terikat : produktivitas mencit (Mus Musculus L.) Strain Balb- C.
Bebas : daun tanaman pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) Terikat : jumlah implantasi, jumlah, korpus luteum, kepadatan serabut kolagen, jumlah anakan, lama kebunting an dan berat anakan
1. Hasil Penelitian 2.Kepusta -
kaan
Rancangan Acak Lengkap (RAL)
(ANAVA) analisis variasi dan analisis probabilitas.
Dengan tingkat kepercayaan 95% (p<0,05).
Kemudian, jika ada pengaruh maka analisis dilanjutkan dengan uji LSD pada taraf signifikasi 5%
dengan menggunakan software SPSS for windows versi 16.
Digital Repository Universitas Jember
Lampiran C. Hasil Perhitungan Kepadatan Serabut Kolagen
Judul Penelitian : Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica [L.]
Urban) terhadap Produktivitas Mencit (Mus musculus) Strain Balb-C.
Nama Peneliti/NIM : Dewi Pramitha Sari/070210103058 Dosen Pembimbing : 1. Drs. Slamet Hariyadi, M.Si
2. Dr. Suratno, M.Si
Fak/Universitas : Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jember Tahun Penelitian : 2011
Kelompok Preparat Jumlah
Rata-rata Rata-rata kanan Rata-rata kiri
K1 1,3 1,3 2,6
K2 1,6 1,6 3,2
50 mg/kg BB 2 2,3 4,3
50 mg/kg BB 2,6 1,6 4,2
75 mg/kg BB 2,6 2,3 4,9
75 mg/kg BB 3 2 5
100 mg/kg BB 1,6 2 3,6
100 mg/kg BB 2 1,6 3,6
Jember, 21 Juli 2011 Mengetahui Penanggung Jawab Pemeriksa Kepala Bagian Lab Histologi
Sri Wahyuningsih, A.Md drg. Nuzulul Hikmah
NIP. 132240434 NIP. 132325926
Lampiran B. Hasil Perhitungan Korpus Luteum
Judul Penelitian : Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica [L.]
Urban) terhadap Produktivitas Mencit (Mus musculus) Strain Balb-C.
Nama Peneliti/NIM : Dewi Pramitha Sari/070210103058 Dosen Pembimbing : 1. Drs. Slamet Hariyadi, M.Si
2. Dr. Suratno, M.Si
Fak/Universitas : Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jember Tahun Penelitian : 2011
Kelompok Preparat Jumlah
Rata-rata Rata-rata kanan Rata-rata kiri
K1 2 2 4
K2 3 3 6
50 mg/kg BB 3 1 4
50 mg/kg BB 3 3 6
75 mg/kg BB 5 2 7
75 mg/kg BB 5 3 8
100 mg/kg BB 5 4 9
100 mg/kg BB 6 4 10
Jember, 21 Juli 2011
Mengetahui Penanggung Jawab Pemeriksa Kepala Bagian Lab Histologi
Sri Wahyuningsih, A.Md drg. Nuzulul Hikmah
NIP. 132240434 NIP. 132325926
Digital Repository Universitas Jember
LAMPIRAN D. HASIL PERHITUNGAN JUMLAH IMPLANTASI, JUMLAH DAN BERAT ANAKAN, LAMA KEBUNTINGAN
Judul Penelitian : Pengaruh Ekstrak Daun Pegagan (Centella asiatica [L.]
Urban) terhadap Produktivitas Mencit (Mus musculus) Strain Balb-C.
Nama Peneliti/NIM : Dewi Pramitha Sari/070210103058 Dosen Pembimbing : 1. Drs. Slamet Hariyadi, M.Si.
2. Dr. Suratno, M.Si.
Fak/Universitas : Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Jember Tahun Penelitian : 2011
Kelompok Jumlah Implantasi
Jumlah Anakan
Berat Anakan
(gr)
Lama Kebuntingan
(hr)
K1 7 4 0,52 35
K2 8 5 0,50 36
50 mg/kg BB 9 7 1,50 32
50 mg/kg BB 10 8 1,70 34
75 mg/kg BB 10 8 1,42 28
75 mg/kg BB 10 9 1,32 29
100 mg/kg BB 11 10 1,20 22
100 mg/kg BB 11 10 1,07 28
Jember, 21 Juli 2011 Mengetahui,
Penanggung Jawab Analis Lab. Biomedik
Agusmurdojohadi Putrajaka, A.Md.
NIP. 197208181999031002
76
LAMPIRAN E. FOTO PENELITIAN E.1 Foto Alat dan Bahan Penelitian
Gambar E.1.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Pegagan; (a) Daun pegagan; (b) Serbuk daun pegagan; (c) Proses maserasi; (d) Proses penyaringan; (e) Maserat yang sedang di Rotary Evaporatory;
Gambar E.1.2 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Pegagan; (a) Serbuk CMC ; (b) Aquades (c) ekstrak daun pegagan; (d) Dosis Ekstrak daun pegagan
a b c
d e
b
a
c d
Digital Repository Universitas Jember
Gambar E.1.3 Bahan untuk Perawatan Mencit; (a)Pakan Mencit jenis Turbo B521; (b) Air minum mencit ; (c) Sekam dan kandang mencit
Gambar E.1.4 Bahan untuk Dekaputasi dan Pengawetan Ovarium; (a)Gelas ukur; (b) Formalin ; (c) Chloroform
a b
c
a
b c
78
Gambar E.1.5 Foto Bahan untuk Pembuatan Preparat Ovarium (1) Xylol; (2) Parafin ; (3) Etanol/alkohol; (4) Eosin; (5) Entellan/balsam canada; (6) Hematoxylin Hydrate; (7) Cover Glass (24x60 mm); (8) Object Glass
Gambar E.1.6 Kondisi tempat penelitian dilaboraturium
Digital Repository Universitas Jember
Gambar E.1.7 Alat untuk Pembuatan Dosis Ekstrak Daun Pegagan; (a)Timbangan Digital; (b) Blender ; (c) Beaker glass; (d) Gelas ukur; (e) Aquades; (f) Bulbs pipet; (g) Spatula
Gambar E.1.8 Alat Pembuatan Ekstrak dan Dosis; (a) Rotary Evaporator; (b) Kompor Listrik
Gambar E.1.9 Alat Bedah ; (a) Jarum Pentul; (b) Pinset; (c) Gunting; (d) Speed; (e) Silet; (f) Hand Scoon; (g) Botol Dekaputasi; (h) Alat sonde
a
b c
d
e
f g
a
b
a b c
d e f
f
g h
80
Gambar E.1.10 Alat Pembuatan Preparat Ovarium; (a)Alat Proses (Tissue-Tek VIP 5 JR); (b) Alat Pewarnaan (Tissue-Tek DRS); (1) Sliding Mikrotom (Yamato Japan);
(2) Slide Warmer (Tissue-Tek); (3) Water Bath (Memmert)
Gambar E.1.11 Mikroskop (Olympus)
a
b
Digital Repository Universitas Jember
E.2 Foto Kegiatan Penelitian
Gambar E.2.1 Proses Pembuatan stok ekstrak dilaboraturium Biologi
Gambar E.2.2 Pengamatan preparat ovarium dilaboraturium Histologi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember
82
Gambar E.2.3 Proses penyondean ekstrak pegagan oleh analis Biomedik
Gambar E.2.4 Proses pembedahan mencit hamil 3 hari sebelum melahirkan
Digital Repository Universitas Jember
LAMPIRAN H. PEMBUATAN LARUTAN DOSIS
1 Pembuatan larutan stok
10 gr eksrtak daun pegagan dilarutkan dalam 10 ml CMC 1% sehingga diperoleh larutan stok dengan konsentrasi 1000 mg/ml.
2 Pembuatan larutan dosis
Volume penyuntikan ekstrak daun pegagan (Centella asiatica [L.] Urban) adalah 0,1 ml untuk 10 g BB mencit atau 10 ml/kg BB mencit. Dosis yang digunakan dalam penelitiaan yaitu 50 mg/kg BB, 75 mg/kg BB, dan 100 mg/kg BB. Dalam setiap penyuntikan dibutuhkan 1 ml. Untuk menentukan dosis tersebut maka digunakan rumus C1.V1=C2.V2.
a. Dosis 50 mg/kg BB C1=1000 mg/kg
C2=50 mg/kg=50mg/10 ml= 5 mg/ml V1=……….?
V2= 1 ml maka
C1.V1=C2.V2
1000 mg/ml.V1= 5 mg/ml. 1 ml V1=5 mg/ml. 1 ml
1000 mg/ml V1= 0,005 ml
Jadi, untuk membuat 1 ml larutan dengan dosis 50 mg/kg BB diperlukan 0,005 ekstrak daun pegagan dari larutan stok dan ditambahakn dengan CMC 1 % sampai volume menjadi 1 ml.
102
b. Dosis 75 mg/kg BB C1= 1000 mg/kg
C2= 75 mg/kg = 75 mg/10 ml= 7,5 mg/ml V1=……….?
V2= 1 ml maka
C1.V1=C2.V2
1000 mg/ml.V1= 7,5 mg/ml. 1 ml V1= 7,5 mg/ml. 1 ml
1000 mg/ml V1= 0,0075 ml
Jadi, untuk membuat 1 ml larutan dengan dosis 75 mg/kg BB diperlukan 0,0075 ekstrak daun pegagan dari larutan stok dan ditambahakn dengan CMC 1 % sampai volume menjadi 1 ml.
c. Dosis 100 mg/kg BB C1= 1000 mg/kg
C2= 100 mg/kg = 100 mg/10 ml= 10 mg/ml V1=……….?
V2= 1 ml maka
C1.V1=C2.V2
1000 mg/ml.V1= 7,5 mg/ml. 1 ml V1= 10 mg/ml. 1 ml
1000 mg/ml V1= 0,01 ml
Jadi, untuk membuat 1 ml larutan dengan dosis 100 mg/kg BB diperlukan 0,01 ekstrak daun pegagan dari larutan stok dan ditambahakn dengan CMC 1 % sampai volume menjadi 1 ml.
Digital Repository Universitas Jember
F.2 Foto Histologi Kepadatan Serabut Kolagen
Gambar F.2.1 Kepadatan serabut kolagen Perlakuan kontrol (sedikit); (L) Limfosit;
(PNM) Poly Morfo Nukleat; (M) Makrofag; (St) Sel telur; dengan Perbesaran 9990 x
Gambar F.2.2 Kepadatan serabut kolagen Peerlakuan 50 mg/kg BB (agak padat); (L) Limfosit; (F) Fibroblas; (Ji) Jaringan Ikat; (St) Sel telur; (Sk) Serabut Kolagen; (M) Makrofag; dengan Perbesaran 8600 x
St
L PNM
M
St
Ji
Sk F
M
L
86
Gambar F.2.3 Kepadatan Serabut Kolagen Perlakuan dosis 75 mg/kg BB (padat); (L) Limfosit; (F) Fibroblas; (Ji) Jaringan Ikat; (St) Sel telur; (Sk) Serabut Kolagen; (M) Makrofag; (PNM) Poly Morfo Nukleat; dengan Perbesaran 8600 x
Gambar F.2.4 Kepadatan Serabut Kolagen Perlakuan Dosis 100 mg/kg BB (Sedang);
(L) Limfosit; (PNM) Poly Morfo Nukleat; (Ji) Jaringan Ikat; (St) Sel telur; dengan Perbesaran 9000 x
St Ji F L
PNM
Sk
St
Ji L
PNM
F