Artikel di JDP Vol 6 No 1.pdf

PENINGKATAN KANDUNGAN METABOTIT SEKUNDHR TUMBUHAN METALUT PE,NAMBAF{AN PRffi,KUSOR PADA MEDIA KUI ^{UR IN VITRO}

IYIwlna

Silolohi

E - m ail : ^{m arina}

-biouki@ ^{Y aho o'} com

AESTEACT

Secondary metabolites producedplonts ^used

by

humans t'or medicine. Utilization

of

mtedicinal ^plamts

is

retatid

to

the content

of

secondary metabolites owned planh'

ii tn"

intact plantconfains uery low ^leuels

of

secondary metabolites and ^its formation

is

often associated with the ^stage

of

^ptant deuelopment.

In

uitro culture ^is an alterna- tiue considered efficient t'or productng secondary metabolites.

one

technique ^used to increase product'secondary- metabolites

in

uitro culture ^is the ^prouision

of

precursors' precursors ar€ compoundi ^{that are}

at

the beginning

or

in the middle of a secondary praduct biosynthetic pathways ^can affect the tinal product. The oddition of precursors

in

uitra culture will iiduce

tie enzyies

^inuolued

in

secondary metabolism. lncreased enzyrne will ^increase the content

of

secondary metabolites'

Keywords:

precursar,

in

aitro, secondary metabolites

*ENDAHULUAN

sekunder adalah produk yang dihasilkkan dari

Metabolit sekunder yang dihasilkan

tum-

proses metabolisme sekunder.

Fiehn

⁽²⁰⁰²⁾ buhan telah larna

*unriu

^digunukun

sebagai mely{1k9n

bahwa tumbuhan menghasilkan sebagai

obat, ^pewarnu, inritotitiau (Karup-

200.000

lebih

metabolit sekunder' Bebarapa

il;;; ioogt.'salah ^satu

^fungsi

metaborit

^{metaborit sekunder}

vang

^{digunakan sebagai} sekunder yang menonJol bagi mJnusia

adalah

^{obat antara} lain kodein, ephederin, ajmalisin,

p.*rrr"ri"niuuugui

obat.-Badan

kesehatan ^{morfin, ppaperin, kuinin,}

^{reserpin, galanta'}

ir.i,

memperkirakan uukita,

60-80% pen-

min, scopolamine, berberine' kaffein' kapsiin' duduk dunia masih mengantungkan

kesehat

Kolkhisin,

yombin,

pilocarpin, glikosida ^jan-

;il;

^yung Unr"ral dari

iumbuhan

^(Joy

dkk.

^{tung (Wink dkk',} 2005). Hingga saat ini berb- Lggg; Fabrieant and Fiarnsworth 2001;

Tripa-

agai senyawa metabolit sekunder yang dihasil- tni

""a ^rripathi

^{2003), d,an257, obat}

modern ^kan

tumbuhan memiliki ^struktur yang sangat Vung b"rndar diekstraksi langsung dari

tumbu-

kompleks dan tidak bisa dibuat senyawa sinte-

han.

^tisnYa.

Berbagai tumbuhan yang digunakan

se-

^Tumbuhan menghasilkan berbagai ^jenis

bagai

oba"t

adalah pu.ut

dumi-

(Eurycoma

^{metabolit sekunder,} namun kadarnya ^sangat

longifolia Jack), p"sfun

^(Centelia

^asiatica

rendahdanpembentukannyaseringberhubun- L.Urban), kumis

Xu"ini

(Okhosiphon

stamin-

gan dengan tahap perkembangan tumbuhan' eus Benth),

kunyit

(C,ircuma domestica

Val.)

Metabolit sekunder tumbuhan dapat diperoleh dan temulawak (Cuicuma xanthorrhiza

Roxb)

dengan mengekstrak hJmbuhan utuh' Ektraksi

te.r,-ra

dkk 2009t. pe*anfautan

tumbuhan

metabolit sekunder dari tumbuhan utuh, sering

."Uusui

^bahan

obai

selalan dengan

perkem-

menghadi kendala disebabkan keterbatasan

L;;""

^peradapan

^minusia.

^Pada

^{lwalnya jumlah}

^pasokan

^serta

^besanya

^biaya

^yang

manusia menggunakan tumbuhan dalam

dibutuhkan untuk purifikasi'

bentuk utuh ^(segaE simplisia) hingga

senyawa

^Kultur

^{in vitro}

merupakan alternatif yang

V."g ia.n dimulnikan

dianggap efisien untuk memproduksi metabo-

pemanfaatan tumbuhan sebagai obat

lit sekunder. Keuntungan-keuntungan ^tersebut, berhubungan

dengan

^kandungan

metaborit

antara rain ^(a) dengan teknologi kultur jaringan sekunder

yang dimiliki

^tumbuhan.

Metabolit

dapat dibentuk ^senyawa bioaktif dalam kondisi

t7

Volume 6, Nomor 1, April 2015 : 17 - ZS

terkontrol dan waktu yang relatif lebih singkat (b) kultur bebas dari kontaminasi mikroUa (.) setiap sel dapat dihasilkan unfuk memperban-

yak

senyawa metabolit sekunder tertentu (4) pertumbuhan sel terawasi dan proses metabo_

lismenya dapat diafur secara rasional) kultur jaringan tidak bergantung kepada kondisi ling_

kungan seperti keadaan geografi,

iklim,

dan musim (lsda

&

Sulianyah 2009).

Kebutuhan senyawa obat semakin tinggi sementara lahan dan plasnra nuffah semakin rRenyusut, oleh karena ifu diperlukan alternatif pernecahan. Teknik kult.rr jaringan _tumbuhan

dapat digunakan untuk

mengatasi _masalah tersebut. Melalui teknik ini, metabolit sekunder yang dihasilkan dalam jaringan tanaman ufuh

{apat

dihasilkan iuga daiam sel-sel yang dipe_

lihara pada medium buatan secara aseptic.

Problem utama dalam produksi metabolit sekunder melalui teknik

in vitrq

konsenhasi produk yang menjadi target masik kecil. Salah safu teknik yang _digunakan untuk meningkat prouk metabolit sekunder pada kulfur

in

vitro

adalah

dengan pemberian prekusor (pandi- angan 2010). Prekusor adalah senyawa yang berada pada posisi awal atau ditengah-tengah

jalur

biosintesis

produk

sekunder _sehinlga dapat mempengaruhi produk akhir.

METODE

Naskah ini ditulis berdasarkan studi litera, tur dari berbagai naskah ilmiah.

METABOLIT SEKUNDER TUMBUHAN

Metabolit yang dimiliki tumbuhan dibeda_

kan

menjadi metabolit primer

dan

sekunder.

Metabolit primer _adalah produk yang dihasil_

kan dari

proses metabolisme

primei

seperti karbohidrat, protein, lemak

dan

asama nuk_

leat. Metabolit sekunder merupakan

hasil

dari

proses metabolisme sekunder. Metabolit sekunder pada fumbuhan kadarnya relatif se_

dikit

dibandingkan dengan metabolit primer namun jenisnya sangat banyak. Fiehn (2002) menyatakan bahwa fumbuhan menghasilkan 200.000 lebih metabolit sekunder.

Pada fumbuhan senyawa

_metabolit

sekunder berfungsi _sebagai fitohormon, pig_

men fotosintesis, pigmen aksesoris, alelopati, adaptasi, penarik polinator, serta pertahanan

dari

herbivore, mikroorganisme

din ^juga

un- tuk pertumbuhan dan perkembangan (Manitto

7992; Hopkins, 1999). Metabolit

sekunder

yang dimiliki fumbuhan digunkan

_manusia sebagai pewarna, kosmetik, insektisida, pe_

nyedap rasa dan juga sebagai obat.

Salah satu

pengelompokan _metabobo-

lit

sekunder tumbuhan dikelompokkan _yang banyak digunakan adalah berdasarkan _{shuk_}

tur kimia dan aktivitas fisiologi (Wiryowidagdo

2000).

Berdasarkan

struktui kimia

_metabolit sekunder dikelompokkan menjadi (1) senyawa

fenol yang di

dalamnya termasuk _{fenilpro_}

paniol _dan flavonoid; (2) senyawa yang men- gandung nitrogen yang

didala.nyu

termasuk alkaloid; (3) terpen dan

terpenoij

(1biz

&

Ze_

inger 2003). pemanfaatan tumbuhan _sebagai

obat

mengelompokkan

fumbuhan

_metabolit sekunder berdasarkan aktivitas fisiologi dan efek terapeutik.

Senyawa metabolit

sekunder

yang

_di-

hasilkan tumbuhan bervariasi dalam jenis dan kuantitasnya. Jenis metabolit

sekuni".

yang dihasilkan sering berassosiasi dengan _Ungkai perfumbuhan. Sebagai contoh anthosianin _{di_}

hasilkan saat fase pembungaan, dan klorofil _{di_}

hasilkan pada daun. Jenis metabolit sekunder yang dihasilkan tumbuhan juga bervariasi an- tara satu organ dengan organ tumbuhan lain- nya. Catharanthus roseus L,(G,) Don menga- kumulasi ajmalisin pada organ akar sedanglLn katharantin dan vinblastin ditemukan dibJgian daun (Verpoorte

&

Van der Heiden _{1991), tri_}

terpenoid (asiatikosida, madekasid, asam asi_

atik) ditemukan pada bagian daun C. asiatica (Zainol dkk,2008).

Perbedaan kandungan metabolit sekunder

yang dimiliki

tumbuhan sangat dipengaruhi

oleh

lingkungan

dan

genetik

lDas dan

Mall_

lick 1991).

Beberapa

penelitian

_menunjuk- kan bahwa

C.

asiatica memiliki variasi kand- ungan metabolit _sekunder. Bermawie (2007) menyatakan

bahwa

perbedaaan _keragaman sifat morfologi _seperti warna, ukuran,Lentuk stolon

dan daun

mempengaruhi kandungan asiatikosida.

Halyang

lain ditemukan oleh Ti_

wari dkk(2000) bahwa kandungan triterpenoid

yang tinggi dapat

diperoleh

pada

_C.asiatica yang mendapat cahaya penuh.

Produksi alkaloid dari berbagai kultur sel dan kulfur organ dari spesies Cinchona secara jelas menunjukkan bahwa diferensiasi paralel dengan produksi alkaloid (Sakya, 1995). pem- bentukan metabolit sekunder akan lebih ban-

Martn,. sttolsht, peningkatan Kondungan Metobolit sekunder Tumbuhan

*^i:r:";r:f:'l:;If:{ri:;

vak pada ^saat kalus berdiferensiasi menjadi tu-

ffi il;;;akar

(Staba, 1980)' Keberhasilan

ffi;;;il;n

metabolit sekunder melalui kul-

tr

^{in vitro sangat} tergantung pada faktor-faktor

;; ;;;;;,igu"'hi

Pembentukan metabolit i"rrJbr.rt pada tanaman utuh'

KUI.JTUR

IN ^VITRO

Kultur in ^vitro

^merupakan

^teknik

^pena-

naman

^sel,

jaringan, dan

^organ

^yang

^telah

itit"f,f."" ^iari

lingkungan alaminya

dan

di-

;;il;k;"

pada rnedium buatan vang ^sesuai

;i;

^kondisi

^steril

^{(Staba' 1980;. Dodds}

^&

nJ"to,lg8i)'

^Xuttut

^{in vitro}

^{meliputi kultur}

ffi;; i;*.;

^sel, aggregat.sel'

kultur

akar'

r"'"ri.i".,^rf.ar ^adventii

^{dan kultur organ (Je-}

;i;;k-dkl,

^2004).

^salah

^satu

^tujuan

^dilaku'

kan

kultur in vitro

adalah produksi. metabolit sekunder terutama ^senyawa yang berkhasiat obat.

Kultur

in vitro mulai

diperkenalkan pada akhir

tahun

1960 sebagai alat

lntuk

^mempe-

f.:.ti pt.a"ksi

^metabolit sekunder tumbuhan -fil,rLuilaqut

&

Tsay, 2AO4)' Pemanfaatan kul-

il ;;d;

aiautu*"un oleh teori totipotensi ^sel

;;;;;;"ratakan

^bahwa setiaP sel membawa

iJ.i*"til,"""titt

^vang sama dengan genetik

i"Jof"vr, ^{Hal ini}

berimplikasi bahwa ^tum-

;ffi ^yl"s

^{dikultur s€eara in}

^viko

akan meng-

;;;ild; ^;etabolit

^{sekunder vang.sama den'}

"""

ttrrnUrflan induknya (Jedinak.dkk' 2004)'

"-" il;;t;;;;

kultur in vitro untuk menghasil- t un rnntuUolit sekunder rnempunyai beberapa keuntungan dibandingkan dengan pengunaan

i.ontn"Ji""al.

Keuntungan-keuntungan ^terse-

il;-;;;"

Iain (a) dengan teknologi kultur ja-

i",i*

^{a"pat dibenhrk}

^in'lvu*u

bioaktif dalam

i-iJi.t

i"'tf.ontrol dan waktu yang relatif lebih

;tA; Oi r."rt"t

bebas dari kontaminasi mik- t"U?-Gl

t"tiap

^sel dapat dihasilkan rlntuk mem-

p"rbanyak ,n,,yu*u

metabolit sekunder ^ter-

i*t, t'if

pertumbuhan ^sel terawasi dan ^proses metabolismenya dapat diatur secara rasional)

;;il;ja;;;nun

tiduk'b"rgantung kepada kondi- si lingkungan seperti keadaan geografi' iklim'

J"i ^i'tu.i* (lsda&

Sulianvah' 2009)'

Berbagai

penelitian telah

menggunakan

kultur in vitro ^untuk

menghasilkan metabolit

tr"J"ra"t ^baik

^berskala

^kecil

maup,un besar

iW"til"t

dkk, 2004; Arvati

dkk'

2005; Kiong )OOS; Pandiangan, 2010)' Usaha untuk meng- hasilkan senyawa metabolit sekunder melalui

pembentukkan pada berbagai tumbuhan telah

lanyuk

dilakukan, antara

lain

senyawa glu- t

ottlpu"otin dari

Tiopaeolum

majry

^(Wiel-

anek'&

^Urbanek, 7gg9\, senyawa solasodine dari Solanum aviculare Forst (Kittipongpatana

JU.., tggg)

dan Solanum nigrum

L'

^(Subroto

dkk,

^{1998), senyawa ajmalisin (Yuyun. dkk''} iOOr

a

^siidarri, 2010) dan katarantin dari C' roseus (Pandiangan, 2010)'

Keberhasilan

kultur in vitro untuk

^men- gahsilkan metabolit sekunder dipengaruhi oleh Ierbagai faktor antara lain, jenis media dan ^zat

p"ngiut

hrmbuh. Medium yang umum digu'

;;t;.

pada penelitian

kultur in vitro

^adalah medium MS iMurashige-Skoog) dan

85'

Me- dium MS digunakan secara luas untuk tujuan mikropropagasi

baik

morfogenesis langsung (Raghu

af*"

^ZOOZ), maupun morfogenesis ti- Juk"tunetung ^(Aziz

dkk',

2006), da-n-produksi tnut"Uoiit sefunder (Kiong dkk', 2005)' ^Pemili- han medium yang digunakan dalam kultur in uit o yung tepat dapat menentukan keberhasi-

lan

pertumbuhan

dan

perkembangan suatu kultur. Pada

C.

roseus kultur yang ^dipelihara pada medium 85 menghasilkan ajmalisin yang i.Utf, iinsgidibandingkan dengan medium MS'

purtirinUutan din

perkembangan kultur juga dipengaruhi oleh penambahan ^zat penga-

't i t""iUr[, ^Aukin

dan sitokinin ^merupakan dua macam zat pengatur tumbuh yang ^digu-

iu[un

^{secara luas}

untuk kultur'

^{Syahid dan} t-t"tnuni (2001) menyatakan bahwa pada kul- tur kalus O' Aristatus pada penambahan 2'4-D

ii,+-ai"fo-fenoksi

^acetat acid) mengakibatkan

kJu.

,nnrnmah dengan kandungan ^sinestesin

V"tg t".a"h

^sedangkan

^pada

^penambahan

Z,q-"O dan BAP ^{(benzyl amino} purine) ^secara bersamaan akan membentuk kalus relatif lebih

kompak

dengan kandungan sinestesin yang

i"Uit,

tinggi'

Zao dkk', ⁽²⁰⁰¹⁾

^menvatakan

buh*u ttirktut

^kalus

C'

^roseus berhubungan

dengan

kemampuannya mensintesis ^indol uif.uioia. Kalus

ktmpak C'

roseus menghasil-

U" inaof"

alkaloid

lebih

^{tinggi sebesar}

1'9

^-

Zi i"ti

dibandingkan dengan kalus meremah

tii". ^afrf., 2001)' Hal

vang sama ditunjuk-

i.un

ofnft Siluluni (2010),

yaitu

bahwa kultur kalus C. ^roseus yang dipelihara pada medium

Zlnk

uku.t membentuk kalus kompak' berwar-

na

^{coklat dengan kandungan} ajmalisin yang tinggi.--Pemanfaatan

kultur in vitro

^{untuk mem-}

PREKUSOR

Produl.rsi metabolit _sekunder dapat digu- nakan dengan menggunakan kultur kalus, kul_

tur

suspensi sel, kultur aggregat maupun kul_

fur

organ. Hingga saat

ini

salah safu kendala yang dihadapi untuk memproduksi metabolit sekunder melalui kultur _in vitro kadar yang di_

hasilkan masih rendah. Beberapa penelitian juga memperlihatkan kultur in

viko

kehilangan kemampuannya untuk menghasilkan _{metabo_}

lit

yang diinginkan setelah mengalami _{beber_}

apa

kali pemindahan media. Endress

(lgg4)

mengemukakan bahwa dalam

kulfur in

vitro aktivitas biosintesis metabolit sekunder berva_

riasi berhubungan dengan perfumbuhan _sel.

Berbagai metode telah diterapkan unfuk me-

ningkatkan kandungan metabolit

sekunder pada kulfur

in vitro

diantaranya melalui elisi_

tasi

dan

penambahan prekusor (Kiong _dkk., 2005). Elisitasi adalah penambahan _{efisi-tor ke_}

dalam kultur in vitro. Konsep elisitasi berkem_

bang dari adanya fenomena alam

_bahwa

Jenis prekusor yang digunakan akan _{mem_}

pengaruhi kadar metabolit sekunder. _{Metabo_}

lisme _sekunder

dalam

tanaman

juga

_sangat

dipengaruhi oleh perubahan ekspre.iJuri g"n-

_g_en pengatur (Edwards dan Gatehouse, 19b9).

Wh.itmer dkk. (ZOO2) menyatakan bahwa aku_

mulasi terpenoid indol alkaloid (TIA) paJa kul- fur sel C. roseus lebih tinggi pada _saat pemberi- an loganin dibandingkun

a"ngun,ekotofanin,

Volume 6, _{Nomor 1,} April 2013 : 17 - 23

produksi metabolit sekunder telah berkembang dengan pesat, namun demikian kulfur invitro memiliki eberapa kelemahan diantaranya kan- dungan metabolit _sekunder

yang

_diinginkan rendah. Hanstein

(1985)

menyatakan _untuk

memproduksi metabolit sekkunder

_melalui teknik invitro diperlukan langkah-langkah _{seb_}

agai berikut: (L) pemilihan tanamun yung

-"-

milki produksi metabolit sekunder yang tinggi;

(2) pembuatan kultur in vitro dari sel tJnaman

terpilih; (3)

pengembangan medium perfum_

buhan

optimum; (4)

pengembangan metode

unfuk

menginduksi pembentukan _metabolit yang diinginkan

dan

(S) pengembangan me- dium produksi yang optimum.

Endress (7994) menyatakan bahwa pola perfumbuhan dan produksi metabolit sekunder

dikelompokkan menjadi ;(1)

pembentukan metabolit sekunder terjadi pada

ikhir

fase lag, misalnya produksi antrakuinon pada kultur sus- pensi selMorinda; (2) pembentukan metabolit sekunder terjadi pada fase akselerasi, misalnya produksi asam sinamatpada kultur Daucus; i3) pembentukan metabolit sekunder sejalan den- gan pertumbuhan _sel, misalnya produksi niko_

tin pada kulfur suspensi sel Nicotiana tabacum;

(4) produksi metabolit sekunder pada _{fase sta-} sioner misalnya produksi sikonin pada _kulfur sel Lithospermun erythorhizon.

ifgksi

patogen pada tumbuhan akan mengin- duksi pembenfukan metabolit

s"kunJ".

_karena danya cekaman (Hanstein 19SS)- penarnba- han _elisitor pada mediu

tumbuh'kultur in

vi-

tro tumbuhan

_ternyata

cukup efektif

unfuk meningkatkan kandungan metabolit sekunder (Yuyun dkk 2001;

Silalihi

2OlO &eandiangan 2077), namun _elisitasi tersebut

*"ngukibutkun

penurunan pertumbuhan dan mengakibatkan kematian sel.

Kandungan

metabolit

_{sekunder melalui} teknik in vitro dapat ditingkatkan dengan cara optimasi media baik internal

maupui

ekster- nal.(Zhao dkk., 2001), _dengan *"nggunuLun prekurs.or (Sulistiyanti

lggT;

Xim

jki.,

_2004;

Kiong dkk. 2005; Kim dkk., Z0OZ). Keberhasi- lan penambahan prekusor terhadap

-naiu

^mt_

fur ditentukan pengetahuan jalur metabolisme senyawa metabolit

yang diinginkan

(Karup_

pusamy,2009),

r_,

^Reaksi kimia.yang terjadi pada yang _{me_}

tabolisme _sekunder ditenfukan

oleh

keterse_

iiu-?l

prekusor (Karuppusamy, 2009). Fowler

&

Warren

(l9gZ)

melaporkan

bahwa

enzim_

en3im yang terlibat dalam proses metabolisme sekunder menjadi

tidak maksi*u*

-uLtiuitu.- nya dikarenakan konsentrasi prekusor sangat sedikit. Prekusor adalah senyawa _VunS U"ruau

pada

posisi

awal atau

ditengah_ieng"ah jalur biosintesis

produk

_sekunder

-srt

ingiu

_dapat

mempengaruhi produk akhir (Endrer.-, tqg4).

Penelitian penggunaan

prekusor

_unfuk

meningkatkan _{metabolit sekunder}

mulai berkembang

pada tahun

1970_an. Berbagai ie.ns ^nreklso.r yang _digunakan

hiftopan

_dan hiptamin (Doller dkk., 197g); asam amino (Mi- sawa 1994); metionin (Rumondor dkk, 2013),

triftofan

(Aryati

2005 &

pandiangan'iOtO), kiptopan, tryrptamin, loganin _dan

icologanin (Whitoner dkk.,

2OOZ). penambahan' bagi prekusor ke dalam kultur

mJia Lrbukti

Unr_

m?mpu

meingkatkan

kandungan

_metabolit

sekunder.

20

Msrlna$llolqfti, Peningkatan Kondr.rngon Metabotitsekunder Tumbuhan melalui Penambahan Prekusor, pada M edia Kultur ln Vitro

sedangkan pemberian triftamin

dan

tripiofan tia"f.

*"*plngaruhi

^{kandungan TIA'}

Penambahan prekusor pada kultur invitro

ut un

**nginduksi

enzim-enzim yang terlibat

;;; _t.;es

metabolisme sekunder' Sebagai

.o"i"n'p""ingkatan

kandungan TIA pada kul-

t ;;;;p;.ti

^{sJ C' roseus} berhubungan dengan

o"nlnntrrun

kadar enzitn triptofan dekarboksi-

[.u-tfiint,trer

^dkk, 2A02)" Distr"ibusi dari tran-

rf.*tt

^mRNA

,

^enzim dan prekusor biosintesis

*"*pd ^un

^komponen

^yang

^{sangat penting}

dalam regulasi proses metabolit sekunder tum-

ffi;;. -Fnn**L*han

prekursor

pada

^media

irttut *

*ui.ipun clapat ^{rn en in} gkatkan produksi

*"t"Utfit

^s*kundna

^tapl

^{dapat pula mengaki-}

["tf.", ,"rtumbuhan

^{selnya rendah (Pandia-}

.g;.,

^2'OfO). Penambahan asam amino pada

ffikt; *.pnnti

^{sel C'} asiatica akan meningkat- kun L.ndtrngan asitikosida (Kiong dkk' 2005)'

KESIMPULAN

i.--r-nltrU"lit

^{sekunder vang}

^dimiliki

^tumbu- han digunkan manusia sebagai pewarna' t

or*u[t,

insektisida, penyedap rasa dan obat.

2. Berdasarkan struktur kimia

^metabolit

tJrta"t

dikelompokkan menjadi (1) ^se-

;;;

^fenol Yang

di

dalamnYa. termasuk fenilpropaniol dan flavonoid; (2) senyawa yang mengandung ^{nitrog^en} yang didalam-

'nyr-tu.-uiuk

_alkaloid; (3) terpen dan ter- penoid.

3. kultur in viko

meliputi kultur kalus' ^sus- pensi sel, aggregat sel,

kultur

^{akar' meri-} stem, akar adventif dan kultur organ'

4. ^{Frnku.o, adalah}

^senyawa yang. berada

pada ^posisi awal atau

ditengah-tengah jalur bi,csintesis produk sekundet.sehingga

dapat

*"rnput'j'ruhi

produk akhir' Berb-

ugui:""it

piuktrsot yang digunakan trifto-

pln

dun triptamin, asam amino' metionin' kiftofan, triptopan, tryptamin' loganin dan secologanin.

ACUAN PUSTAKA

Achmad,

^S.

A., dkk'

(2009)' Ilmu kimia ^dan kegunaan tumbuh-tumbuhan obat Indone-

siJita

^I" InstitutTeknologi Bandung' band- ung

viii +

^{353 hlm'}

ntyuii ^H.,

Anggarwulan,

E' &

Solichatun'

(2005).

Pengaruh penambahan Dl--hip-

iofan terhadip pertumbuhan kalus

^dan

produksi

alkaloid-reserpin

pule

^pandak

iRauvolfia serpentina (L') Bentham ^e-x Kurz' ]

.".uru

In Vitro. Biofarmasi

3 {2):52-56'

Aziz, 2.A., Davey, M.R., Lowe, K'C

&

^P.ower'

J.B. ^(2006)'

^Isolation

^and

^culture

of

pro- toplasts

from the

^medicinal

plant

Centella asiatica" Revista Brasileira Plant Medicina ^8:

2006.

Bermawie,

N. &

^Kristina,

^N'N'

^{(2003)' Peny-}

impanan

in vitro

^tanaman

^obat

^potensial

perkembangan. Teknologi

tropika'

^15(1):

1-10.

Das, A .

&

Mallick,

R.

(1991)' Correlation bet-

ween

^genomic

diversity and

asiaticoside

conteniin

Centella asiatica (L') Urban' Bo- tanical Bulietin Academia Sinica 32:

L'8'

Doller,

G.,

Alfermann, A"W',

&

^{Reinhard' E'}

(1976). Produktion

von

Indolalkaloiden in callus-kulfuren

von

Catharanthus ^roseus' Plant Cell ReP. 1'2:

702'705'

Dodds, J.H. & L.W. Roberts'1982' Experiment in plant ^tissue culture' Cambridge University Press, Cambridge:xiii

*

^{178 hlm'}

Edwards, R.

&

Gatehouse,

J'A'

^{(1999)' Sec-}

-

ondary metabolism.

In

Lea,

PJ'

and R'C' Leegood ^(eds.) Plant Biochemistry and Mo-

luc,ilut

Biology. Second

edition'

^London:

John ^WileY and Sons Ltd'

Endress,

n. ^(tqg+).

Plant cell biotechnology' Springer-Verlag' Berlin p: 17 3-225

Ersam,

{

^(ZOO+)' Nuunggulan biodiversity hu-

tan tropika

^Indonesia

dalam

^merekayasa

model molekul alami'

^{Seminar Nasional}

Kimia VI:1-16'

Fabricant, D.S.

&

Farnsworth,

N'R'

^(2001)'

The value of plant used medicine

for

drug discovery. Enviromental Health Perspective' 109(1): 69-75.

Fiehn,

'O.

ZOOZ. Metabolomics:

the link

^be-

tween

^genotypes

and

phenotypes' Plant Mol

Biol 48

151"L71'

Fowler, M.W.

&

^Warren'

^{G'S' (1992)'}

^Plant

bioiechnology:

Comprehensive ^bioctech-

nology, second supplement'

^Pergamon

Press Plc. England'

Heinstein, PH (1985)' Future approach

to

the formaton

of

secndary natural products ⁱⁿ

cell

suspension cultures'

Journal

^Natural product 48:1-8

Hopkins, W.G. 1999'

Introduction

to

^plant

Volume 6, Nomor 1, April ZAfi : 17 ^_ 23

physiology.

2nd ed. John

Wiley

&

Sons, Inc., New York:

xv +

512 hlm

Jedin6k

A., J.

Faragd,

I.

^p$en6kov6

&

Tibor Maliar. 2004. Apprr:aches to flavonoid pro_

duction in plani

tissue cultures Biologia.

Bratislava.5 9 (6) : 692 -T L0

Karppinen, K., et al. (2002). Biosynthesis of hy_

perforin and adhyperforin from amino acid precursors

in

shoot _cultures

of

Hypericum perforatum. Phytoctrem. 68: 103g-1045.

Karuppusamy. S.

(2009)" A

review on trends

in production of

seeondary metabolites from higher plants

by

in vitro tissue, organ and cell culfures Journal of Medicinal plants Research. 3(13) : LZZZ-LZSZ.

Kiong, A.L., et

al.

(2005). Effects of precursor supplementation

on

the production

of

trit- erpenes

by

Centella asiatica callus culture.

Pak. J. Biol. Sci. 8 : 1150-1169.

Kittipongpatana, N., Hock, R.S.

&

^porter, J.R.

(1998). Production

solasodine

by

hairy root, callus, and cell suspension culfures

of

Solanum aviculare Forst. plant _{Cell, Tissue} and Organ Culture E2:

lB3-143.

Joy, P P, Thomas, J., Matheq S. & Skaria, B.p (1998). Medicinalplants" Kerala: Kerala Ag- ricultural University. p10 hlm.

Isda, M,N,

&

Sulianyah, L

(2009).

_Induksika- lus Centella asiatica melalui aplikasi

aukin

dan sitokinin. Jerami Z(g)

:L6i-165,

Manitto,

P

^(7992). Biosintesis

produk

_alami.

Ter1.

dari

Biosynthesis

of

nafural product

oleh

Koensoemardiyah.

IKIP

Semarang Press, Semarang:

vi +

597 hlm.

Misawa, M. (7994). Flant tissue culture: An al_

ternative

for

production

of

useful metabo_

lites of useful metabolices. Bio International Inc. Canada.

Mulabagal,

V

and Tsay, H.S. (2004). plant _cell culfures - An alternative and efficient source for the production of biologically important secondary metabolites. Internationul _{Jorr_}

1a! of ^Applied

^Science

and

Engineering.

2(l):29-48

Pandiangan.

D,

Pengaruh pemberian _preku-

sor triptofan

terhadap pertumbuhan _dan kandungan tr<atarantin

kulfur

aggregat sel tapak dara (Catharanthus L. G.

Don.lalam

erlemeyar dan bioreaktor

airlift.

[Disertasi]

Program Pasca Sarjana Universitas ^padjala_

ran. Bandung,

xviii +

220 hlm.

Pandiangan,

D.

(2071). peningkatan produksi

katarantin melalui teknik elisitasi pada kul_

tur agregat sel Catharanthus _roseus. Jurnal Ilrniah Sains.

ll

⁽²⁾

Patil,

D.A. (Z0ll).

Ethnomedicine

to

modern medicine: genesis through ages. Journal Of Experimental Science: _{2(B) : ZS_ZT.}

Syahid, S.E

&

Hernani (2004). ^pengaruh _zat pengafur

fumbuh

terhadap pembenfukan

dan pertumbuhan serta kandungan

si_

nensetin dalam kalus pada tanaman kumis kucing (Orthosiphon stamineus, Jurnal _{Lit_}

tri

7 (4):99-103.

Raghu,

A.V, Martini G., priya, V.,

Geetha,

S.P &

Balachandran,

I. (iOOl).

_{Low cost} alternatives

for

micropropagation

of

Cen- tella asiatica. Journal of planiSci _{ences 2(6):}

592_599.

Rumondor

M.J. , ^J.

^Mandang

&

W. Rotinsu_

lu. (2013).

peningkatan sulforafan brokoli (Brassica oleraceae

L. var

italica) _dengan modifikasi media pada kultur jaringan. _{Ju_}

-

^rnalMipa Unsrat Online Z

(tl

OO_Oi

Sakya, A.T. 1995. produksi metabolitsekunder melalui pengembangan _sel tanaman. _{Cara_}

ka Thni L7: T-LZ.

Silalahi. M. (2010). Flisitasi peningkatan _{ajma_}

lisin pada kultus kalus Citharul.,thu, _roseus

^

^L. (G.) Don. Berita Biologi

Staba,

E,J. (1980), plant tirru,

Culture as

a

Source

of

Biochemistry.

London:

CRC Press, Inc.

Subroto, M.A., et al. ⁽ 199g). produksi solasodin dari kulfurakar hasil regenerasi daun tana- man transgenik Solanum nigrum _{secara in} vitro. Jurnal Biosains 3(2): 46_50.

Taiz, L.

&.

Zeiger, E .(2002). plant physiology,

3 rd.

Publisher, Sinauer Assosiate-s

:

^423_

460.

Tiwari, K.N.,

_Sharma,

N.C., Tiwari, V &

Singh, B.D.

(2000). Micropropagation

of

Centella asiatica (L.), _a valuabL iredicinal herb. Plant cell, tissue and organ culture 63:

179-785.

Tiipathi,

L. &

^Tiipathi, J.N.

biotechnology

in

medicinal Journal

of

Pharmaceutica 243-253.

(2003). Role of plant. _Tropical Research. 2(2):

Verpoorte,

R &

Van

der

Heiden,

R.

^(1991).

Plant biotechnology

for the

produciion of alkaloids: present stafus and prospect. The Alkaloid 40 :87-142. Leiden iJniversity.

Wardani,

D.P,

Solichatun,

&

Setyawan, a.O.

22

Ntortnasttalohl peningkotan Kandungon Metabolit sekunder Tumbuhan

^'l:rff2f,::l:;If:tr;;

(2004). Pertumbuhan dan produksi saponin

ffit;'

^{kalus Talinum} paniculatum^Gaertn' pada variasi

penambihan

^asam

2'4-

dik-

t:iotnnot .i

Asetat (2,4-D) dan kinetin' ^Bio- farmasi 2 (1):35-43'

Wfrit*"i,

S., van der Heijden' ^R' &Verpoorte'

"'i{.

Bbod).

^Effect

of

precursor feeding on

;il;[iJ;.cumulation ^bv

^a trvptophan ^de- carboxylase over-expressing hansgenic ^cell

ti"iizof

Catharanthus ^roseus Journal of Biotechnolo ^gV

96:

1"93'203'

w#;;k;M.

&-Urbanek,

H'

(1?99)' Glucotro-

'-'iu"olin

and myrosinase production in hairy

I;;, *iil; oittopu"tum

majus' Plant

cell'

nr*u

^{and Organ} bulture 57(1):39-45'

wi[i;; ^{i.e'o. [zoool'}

Ethnomedicine' Jour-

""f

West Indian Med 55(4): 215'.

wiil:

^It'i

;t

"1.

(2005)' Sustainable bioproduc-

";;

oiphytochemicals by plant in vitro cul' tures: anticancer agents' Plant Genetic ^Re- sour.3: 90-100'

Yuyun, R.

Iregar,

A.H',

^{Rizkita, R'E'}

_.2001'

-P"r,guruh

pemberian elisitor esktrak khamir Saciharomyces cerevisiae Hansen terhadap kandungan ajmalisin dalam kuktur aggregat sel CatGranih.r.

tot"us

^(L')

G'

Don' Berita Biologi. 5(4); 349-355'

zn"o,l.izhu,

^fu.,

^Hu,

^Q.,

^&

^{Guo' Y', (2001)'}

- Co.pu"t

callus cluster suspension cultures o{ Citharanthus ^Roseus with enhanced In- dole alkoaloid Biosinthesis

J'

In

Vitro

Cel- tutar

A

Developmental

Biology

^{Plant (37)}

(7):68'72.

Zuliriimi,

Suwirmen &

Netty,

W'

(2002)Surya

-

Pertumbuhan dan

uji

Kualitatif kandungan metabolit sekunder ^kalus katang (Spilanthes acmelta

Murr')

dengan Penambahan PEG

untuk

Menginduksi Cekaman Kekeringan'

Jurnal Biologi.

Universitas

Andalas'

^1(1):

1-8.