1. Pembuatan Media Tumbuh Bakteri
Menyiapkan alat dan bahan
Mensterilisasi menggunakan alkohol 70%
Menyalakan bunsen
Membuka media tumbuh yang ada di erlenmeyer
Memanaskan cawan petri menggunakan bunsen
Membuka sedikit cawan petri
Memasukkan media ke dalam cawan petri sebanyak ½ cawan atau 1/3 cawan
Menutup segera cawan petri
Memanaskan pinggiran cawan petri
Menutup dengan seal dan melabeli cawan petri 2. Pembuatan Ekstrak Bahan Alami Daun Sirih Hijau
Menyiapkan alat dan bahan
Memisahkan daun sirih hijau dari tangkai atau batang
Menghaluskan daun sirih menggunakan chopper
Melarutkan ke akuades 100 ml kemudian mengaduk hingga merata
Menyaring menggunakan kertas saring kemudian menutup dengan alumunium foil dan wrap seal
3. Pembuatan Ekstrak Bahan Alami Bawang Putih
Memisahkan bawang putih dengan kulitnya
Menghaluskan bawang putih 100 gram menggunakan parut
Melarutkan dengan akuades 100 ml lalu mengaduk hingga merata
Menyaring dengan kertas saring dan menutup menggunakan alumunium foil dan wrap seal
4. Pembuatan Larutan Antibiotik
Menimbang oksitetrasiklin sebanyak 0,001 gram menggunakan timbangan analitik
Mengukur akuades sebanyak 500 ml
Melarutkan oksitetrasiklin ke dalam akuades hingga tercampur merata
Menyaring menggunakan kertas saring
Mengambil sebanyak 100 ml
Menutup dengan menggunakan alumunium foil dan wrap seal
5. Uji Penghambatan Bakteri Aeromonas hydrophila
Menyiapkan 1 ose bakteri Aeromonas hydrophila dan media agar miring
Memasukkan 1 ose bakteri Aeromonas hydrophila ke dalam media TSB, selanjutnya diinkubasikan selama 18-24 jam
Mengukur OC (absorbansi) menggunakan spektofotometer.
Langkah kerja spektofotometer:
a. Memasukkan akuades lalu memasukkan TSB kosong b. Memasukkan TSB yang telah berisi bakteri
Setelah diketahui absorbansinya, memasukkan bakteri sebanyak 100 ml kedalam media TSA 100 ml. Sebelum diisi bakteri sebelumnya juga media dipanaskan hingga mendidih dan ditunggu sampai hangat-hangat kuku (suhu ± 55 C)
Menuangkan media TSA yang telah berisi bakteri ke dalam cawan petri dan menginkubasi selama 24-48 jam
Setelah media TSA padat kemudian melubangi media menggunakan sedotan sebanyak 5 lubang. Sebelum melubangi sterilisasi alat dan tangan
Mengambil mikropipet lalu mengambil tip dan mengambil antibiotik (kloramfenikol dan oksitetrasiklin) dan bahan alami (bawang putih dan daun sirih hijau) serta akuades untuk dimasukkan pada setiap lubang
Memanaskan cawan petri yang telah diisi tadi lalu membungkus dengan wrap seal
Memberi tanda dengan label pada setiap sumuran yang ada di cawan petri lalu menginkubasi selama 24-48 jam
Menghitung indeks penghambatan dengan rumus IP
ACARA 34
1. Menyiapkan alat dan bahan.
2. Menyiapkan ikan yang akan diinfeksi bakteri.
3. Menginfeksi ikan dengan bakteri.
4. Menyiapkan alat dan bahan guna pemberian antibiotik dan bahan alami.
5. Menyiapkan bahan alami dan antibiotik di ember yang berbeda dengan berisi air yang sudah ditentukan.
6. Merendam 5 ikan pada masing masing perlakuan secara bergantian 7. Membilas ikan dengan menggunakan air bersih.
8. Meletakkan ikan pada akuarium yang sudah disediakan.
9. Memberikan label pada setiap akuarium Mendokumentasikan setiap kegiatan.
