یکشزپ یژولویزیف دشرا یسانشراک کردم ذخا تهج همان نایاپ
ناونع
شیپ رثا یسررب یزاس یطرش
لولس رب نژیسکا اب یناسنا یبرچ تفاب یمیشنازم یداینب یاه
"
رد اهنآ یاقب نازیم
طیارش رد یسکوپیاه و ویتادیسکا سرتسا زا یشان بیسآ ربارب رب
نو "ینت رب و
"
زا یشان یویلک بیسآ
یمکسیا -
ییارحص شوم لدم رد نژویفرپیر
"
امنهار داتسا
نایلوسر مارهب رتکد
رواشم داتسا
رتکد یهوژپ رصان
رتکد دنودمحا نسح
شراگن
یدمحا مارهش
رویرهش هام
1397
: تبث هرامش
- a
113
هدیکچ :همدقم لولس ریثکت و ءاقب شیازفا تهج یدایز تاعلاطم نونکات
اه یداینب ی هک تسا هتفرگ تروص
لولس نیا یاقب رد یبسن دوبهب مغریلع .دنراد ءاقترا هب زاین رتشیب ینیلاب یاهدربراک یارب زونه اهراکهار ،اه
رثا یسررب هعلاطم نیا زا فده شیپ
م رب نژیسکا اب یزاس یطرش لولس یاقب نازی
طیارش رد یداینب یاه
نورب نورد و ینت یم ینت
.دشاب
شور :اه سررب ی نورب شخب ود رد قوف نت
ی نورد و نت ی .دش ماجنا روک وسود تروص هب و لولس
یاه
یداینب ( یناسنا یبرچ تفاب زا نایب و یبرچ و ناوختسا هب زیامت اب اهنآ ندوب یداینب و دش یزاسادج )
ASCsیاهرکرام لولس حطس
نورب طیارش رد .تفرگ رارق دییات دروم یرتموتیاسولف شور اب یداینب یاه شور اب ینت
نیئتورپ نایب یسررب تهج تلاب نرتسو شور زا و دش یسررب زوتپوپآ نازیم
MTTیاه ،
Bax BCL-2 وCaspase3
نورد طیارش رد .دش هدافتسا شوم یور ینت
رد رن ییارحص یاه 4
هورگ 8 لماش ییات هورگ )فلا :
یمکسیا )ب مش -
( هیلک هتعاس کی نژویفرپیر )ج )
IRقیرزت +
IR)د
ASCsقیرزت +
IR ASCsشیپ مرس نینیتارک سنریلک و نینیتارک ،هروا یاهروتکاف تیاهن رد و دش ماجنا نژیسکا اب هدش یزاس یطرش
میزنآ و نولام ،نویتاتولگ یاه ید
،زادیسکارپ نویتاتولگ ،زلاتاک ،دیهدلا کیرتین و زاتومسید دیاسکارپوس
هزادنا دیاسکا گنر .دش یریگ
یزیمآ
H & E
زا هدافتسا اب .تفرگ تروص یژولوتاپ و ماجنا هیلک تفاب یور
یلولس بایدر هنلا سنسروئلف پوکسورکیم و
DiIینیزگ .دش یسررب
ASCsهتفای :اه جیاتن شیپ رثا
MTTاقم رد زوتپوپآ نازیم شهاکرب ار یزاس یطرش ناشن لرتنک هورگ اب هسی
داد (
P<0.0001
.) نورب طیارش رد تلاب نرتسو شیپ رثا ینت
نیئتورپ نازیم شهاک رب یزاس یطرش یاه
Bax
Caspase3 و
شیازفا و
BCL-2
ار ( داد ناشن
P<0.001
نورد طیارش رد .) قیرزت هچرگا ینت
ثعاب
ASCsینعم شهاک یلوبوت داح زورکن و مرس نینیتارک و هروا راد
( دش
P<0.05
ینعم توافت یلو ) هورگ نیب یراد
شیپ شیپ مدع هورگ اب یزاس یطرش میزنآ جیاتن .دشن هدهاشم یزاس یطرش
یتنآ و نادیسکا یاه نادیسکا
ینعم توافت قیرزت هورگ ود نیب یراد
.دادن ناشن
ASCsهجیتن :یریگ یور ام هعلاطم جیاتن یلک روطب شیپ
یزاس یطرش کا اب یناسنا
ASCsداد ناشن نژیس
شیپ لدم نیا هچرگا نورب طیارش رد یزاس یطرش
ینعم دوبهب ثعاب ینت یاقب راد
رد
ASCsبیسآ ربارب
یم ویتادیسکا سرتسا زا یشان نورد طیارش رد یلو دوش
یناویح لدم رد و ینت رب یرادانعم ریثات یویلک
IR.درادن یویلک درکلمع دوبهب نآ عبت هب و یلولس یاقب شیازفا
یدیلک یاه هژاو لولس :
یلولس یاقب ،ویتادیسکا سرتسا ،نژیسکا ،یبرچ تفاب ،یمیشنازم یداینب یاه
Abstract:
Introduction: Many studies conducted, so far, intended to increased viability and proliferation of mesenchymal stem cells (MSCs), however, despite of progresses achieved, strategies concerned has to be improved toward clinical implementation of the same cells.
The current study aimed to evaluate the effects of hyperoxia preconditioning on viability of MSCs viability in either in vitro or in vivo circumstances.
Methods: This randomized, double-blind study was carried out in both in vitro and in vivo conditions. Human adipose-derived stem cells (ASCs) isolated from lipoaspiarte and their stemness were approved through multipotency for differentiating to adipocytes and osteocytes as well as expression of the cell surface markers using flow cytometry analysis.
The MTT – assay was used to determine the apoptosis rate and western blood analysis was applied to assess the expression of Bax, BCL-2 and Caspase 3 proteins in in vitro conditions.
In in vivo trial, 32 male rats were used in for groups (of 8 animals each) consisting a) shame operated control animals, b) positive control group or IR animals, c) IR+ ASCs injected animals, and d) IR+ ASCs injected animals, and d) IR+ hyperoxia preconditioned-ASCs injected animals. The response in renal function were evaluated using data collected onserum concentration of Urea, creatinine, malondialdehyde, nitic oxide, serum creatinine clearance and glutathione peroxidase, catalase, super oxide dismutase enzymes activity. Pathological evidences in renal tissue performed on H&E stained specimens microscopically. To evaluate the transplanted AsCs, CM-Dil labeled ASCs in the prepared sections were viewed by fluorescence microscopy.
Results: The results from MTT and western blot analyses showed deceased apoptosis rate in hyperoxia treated ASCs compared with control cells (P<0.001). Based on Western blood analysis hyperoxia preconditioning resulted in deceased expression of Bax, BCL-2 and Caspase 3 proteins in in vitro conditions (P<0.001).
Conclusion: it was concluded that hyperoxia preconditioning led to increased viability of ASCs against oxidative stress- induced damages under in vitro condition, however, the same treatment showed no promising effect on renal function and ASCs viability in an IR- AKI animal model in in vivo condition.
Key words: Mesenchymal stem cell, Adipose tissue, Oxygen, Oxidative stress, Cell viability
A Thesis Presented for the Master of Art Degree
Medical physiology
The effect of oxygen preconditioning of human adipose tissue mesenchymal stem cells on “viability of them against oxidative stress and hypoxic injureis”
and on “Ischemia-Reperfusion induced renal injury in rat model”
By: Shahram Ahmadi
Supervisor: Dr. Rasoulian
Advisor: Dr. Ahmadvand Dr. Pajoohi
2018/08/28
