1
رب رذب یگدوسرف و گنیمیارپ ریثات یگژیو
یاه هناوج ینز و ییایمیشویب نژ نایب هعلاطم و
یاه
میزنآ یتنآ یاه شور هب تنادیسکا
RT-PCR
رد ایبول
Phaseolus Vulgaris (L.)
تداعس هبیط یقدص دمحم ،1
2*
یروپ یلق مویقلادبع ، رش دیس فوئر ،3
ی
2یف ولگب خیش هیقر و
4
1 - ققحم هاگشناد ،تعارز دشرا یسانشراک یوجشناد تاتابن حلاصا و تعارز هورگ ،یعیبط عبانم و یزرواشک هدکشناد ،یلیبدرا
2 - یلیبدرا ققحم هاگشناد ،تاتابن حلاصا و تعارز هورگ داتسا
3 - حلاصا و تعارز هورگ رایشناد یلیبدرا ققحم هاگشناد ،تاتابن
4 - ارتکد یوجشناد یلیبدرا ققحم هاگشناد ،
For correspondence: [email protected]
*
هدیکچ هناوج رب رذب )هدش عیرست یریپ( یگدوسرف و گنیمیارپ رثا یسررب روظنم هب یشویب تابیکرت و ینز
ییایم
بلاق رد لیروتکاف تروصب یشیامزآ ایبول رذب و رارکت هس اب یفداصت ًلاماک حرط
12 یگدوسرف حطس هس لماش رامیت
،دهاش(
88 و 88 هناوج دصرد و نیلربیج اب گنیمیارپ ،گنیمیارپ وردیه ،دهاش( گنیمیارپ حطس راهچ و )ینز
دیسا لاس رد یلیبدرا ققحم هاگشناد رد )کیلیسیلاس 1331
جارختسا زا سپ .دش ماجنا تخاس وRNA
cDNA
نژ نایب یسررب زا هدافتسا اب تنادیسکا یتنآ یاه
qRT-PCR
صخاش زا یخرب و ماجنا و یکیژولویزیف یاه
شیب هک داد ناشن جیاتن .دش هدیجنس ییایمیشویب هشیر لوط نیرت
هقاس و هچ نزو ،هچ
هشیر رت هقاس و هچ نزو ،هچ
هشیر کشخ هقاس و هچ
اب گنیمیارپ رامیت زا تافسف ریاخذ نازیم ،هچ .دش لصاح یگدوسرف نودب و نیلربیج
مه هداد زیلانآ نینچ یاه
qRT-PCR
یکاح زا نآ دوب هک نایب حطس و نیلربیج رامیت شیپ رد زادیسکارپ میزنآ نژ
یگدوسرف 88
% شیب میزنآ ریاس نایب زا رت میزنآ نژ نایب یگدوسرف شیازفا اب .دوب اه
هب ،درک ادیپ شهاک اه یروط
مک هک ب نازیم نیرت یگدوسرف حطس و گنیمیارپ نودب رامیت رد زادیسکارپ میزنآ نژ نای
88
% رد .دوب هدافتسا ،لک
یم رامیت نیا زا و دش ایبول فیعض یاهرذب یکیژولویزیف تیوقت بجوم نیلربیج رامیت شیپ زا تهج ناوت
شیازفا
.درک هدافتسا فیعض یاهرذب هینب ناگژاو یدیلک : دیسا
،کیلیسیلاس میزنآ
یاه یتنآ
،تنادیسکا نایب
،نژ ،گنیمیارپ
،نیلربیج یگدوسرف
،
تافسف
، .ایبول
1 . همدقم
ایبول یهایگ هلاسکی زا هریت تلاوقب و یاراد 2n=22 مزومورک
سا ت [ 3 و 22 ] . هک تسا کیژولویزیف هدیدپ رذب یگدوسرف
تشادرب زا سپ هرود رد و رذب یکیژولویزیف یگدیسر زا سپ رد
بولطمان طیارش یرادهگن طیحم
رذب یم زاغآ جیردت هب و دوش
راتخاس بیرخت بجوم وDNA
یموزوبیرRNA
[ 11 ].
گنیمیارپ هب
یدادعت زا شور یاه فلتخم دوبهب هدنهد روذب قلاطا یم دوش
2
هک رد یمامت نآ یهدبآ اه لرتنک
هدش رذب لامعا یم دوش [ 3 ] . هب یروط هک روذب هلحرم لوا ( بذج یکیزیف بآ ) و ود م ( عورش
ییایمیشویب یاهدنیآرف و
زیلوردیه اهدنق
) هناوج ینز ار تشپ رس هتشاذگ یلو زا دورو هب هلحرم موس هناوج ینز ( فرصم ق دن طسوت
نینج و دشر هشیر هچ ) زاب یم دنام [ 6 ] . لرتنک تارییغت .تسا لولس رد زاین دروم ینژ هدروآرف رادقم لرتنک عقاو رد نژ رهاظت
یم دوجو هب نآ دیلوت نازیم رد رییغت رطاخ هب میزنآ کی رادیاپ تظلغ رد ینارحب یم رظن هب و دیآ
تبسن هیزجت نازیم هک دسر تباث ًا
تسا [ 1 ] . مه نژ میظنت یارب ناهایگ ییاناوت ،نینچ نیئتورپ لمع و اه
نآ تمواقم ساسارب اه یم اه
دشاب [ 14 ] .
Real Time PCR
یاهدیسا هب طوبرم تاقیقحت رد هدرتسگ روط هب شور نیا .تسا نژ نایب یریگ هزادنا یارب عیرس و ساسح ،دامتعا لباق شور کی یم رارق هدافتسا دروم ینیلاب تاعلاطم و کیئلکون دریگ
[ 8 ] . قیقحت نیا ماجنا زا فده
، ارییغت یسررب زیف ت
ی ییایمیشویب و یکیژولو
.دوب ایبول فیعض یاهرذب تردق دوبهب رد رذب گنیمیارپ شقن و یگدوسرف هب شنکاو رد ایبول رذب مه و
نایب یسررب نینچ نژ
یاه
میزنآ یتنآ یاه یم ایبول روذب رد تنادیسکا
.دشاب
2 . شور و داوم اه
یشیامزآ اب یفداصت ًلاماک حرط بلاق رد لیروتکاف تروصب
هس و رارکت 12 زا یکی هک( یگدوسرف حطس هس لماش رامیت
حطس ود و دهاش ناونع هب و یگدوسرف نودب حوطس 88
و 88 هناوج دصرد ناونع هب رامیت کی( گنیمیارپ حطس راهچ و )ینز
لماش رامیت هس و دهاش :
اب گنیمیارپ ،گنیمیارپ وردیه ،گنیمیارپ نودب ( نیلربیج
22 یلیم کیلیسیلاس دیسا و )رتیل رب مرگ
( 122 یلیم رتیل رب مرگ )
) هاگشیامزآ رد ققحم هاگشناد یعیبط عبانم و یزرواشک هدکشناد تعارز
یلیبدرا لاس رد 1331 ماجنا
دش . یامد ضرعم رد اهرذب هدش عیرست یریپ نومزآ یط 42
هجرد ی یتناس تبوطر اب دارگ یبسن
±2 31
%
، هب نوآ لخاد رد
تدم 11 وسرف( زور د
یگ 88 )دصرد و 1 / 12 یگوسرف( زور 88
.دنتفرگ رارق )دصرد نورد دهاش هارمه هب هدوسرف یاهرذب ،سپس
لولحم تدم هب گنیمیارپ یاه 24
یامد رد تعاس 21
دندش هداد رارق هجرد [
2 ] . هب اهرذب ،گنیمیارپ زا دعب رطقم بآ هلیسو
دندش وشتسش راب نیدنچ .
هناوج نومزآ رارکت هس رد یذغاک هلوح شور هب ینز
12 یامد رد یرذب 21
هجرد یتناس ی تدم هب دارگ
تفرگ ماجنا زور تفه [
12 ] . هزادنا رظن دروم تافص سپس دندش یریگ
مه و میزنآ یور نژ نایب یسررب نینچ یتنآ یاه
تنادیسکا
زا هدافتسا اب
qRT-PCR
.تفرگ ماجنا
نامز طسوتم هناوج
ینز : هناوج باتش و تعرس زا یصخاش ،صخاش نیا یم بوسحم ینز
لومرف قیرط زا هک ددرگ [
8 ] هبساحم
دش . MGT=ƩD/Ʃn
،نآ رد هک هناوج زور نیلوا زا شرامش زورD
و ینز هناوج رذب دادعتn زور رد هدز
.تساD
قاس لوط ه هشیر و هچ :هچ
یتناس بسح رب جردم شک طخ طسوت یلیم تقد اب و رتم
هزادنا رتم .دش یریگ
نزو رت کشخ و قاس ه هچ و هشیر :هچ مرازه کی تقد اب و یلاتیجید وزارت یور رب هزادنا
.دش یریگ
هزادنا اخذ یریگ :تافسف ری
نازیم دیدرگ صخشم یرتموتف شور هب هنومن رد دوجوم رفسف [
21 ].
هداد رازفا مرن زا هدافتسا اب سنایراو هیزجت ،سپس و دش یسررب ندوب لامرن رظن زا هدمآ تسد هب یاه
SAS9.1
ماجنا
نیگنایم .دیدرگ نومزآ ساسارب اه
نکناد لامتحا حطس رد 1
دصرد هسیاقم .دیدرگ مسر رادومن طوبرم هب هداد یاه
Real time
طیحم ردPCR Excel
.تفرگ تروص
3
3 . جیاتن ثحب و
سنایراو هیزجت لودج قبط لباقتم رثا
یور رب گنیمیارپ و یگدوسرف هناوج تدم نیگنایم یاهرامیت
هچقاس لوط ،ینز ،
نزو هشیر رت هقاس کشخ نزو ،هچ هچ
و هشیر کشخ نزو هچ
هداس رثا و هشیر لوط یاهرامیت یور رب
نزو ،هچ هقاس رت تافسف و هچ
ینعم .دوب راد هناوج تدم نیگنایم نیرتشیب ( ینز
263 / 2 یگدوسرف اب گنیمیارپ نودب ) 88
% مک .دوب هناوج تدم نیگنایم نیرت ینز
( 216 / 2 ) رد .دوب یگدوسرف نودب روذب و نیلربیج رامیت شیپ لامتحا حطس ردMGT
1 ینعم دصرد راد
دوب لودج(
1 ).
هسیاقم رد نیگنایم
تارثا شیب لباقتم هقاس لوط نیرت
( هچ 13 / 111 یلیم رامیت شیپ زا )رتم نودب حوطس و نیلربیج
مک و یگدوسرف هقاس لوط نیرت
( هچ 82 یلیم یگدوسرف اب روذب و گنیمیارپ نودب )رتم 88
% دمآ تسد هب لودج(
1 ) . هداس رثا رد
نیگنایم هسیاقم زین
شیب رت هشیر لوط نی ( هچ
24 / 222 یلیم مک و نیلربیج رامیت شیپ رد )رتم هشیر لوط نیرت
هچ ( 11 / 111
یلیم )رتم دوب گنیمیارپ نودب هشیر لوط یگدوسرف شیازفا اب .
هاتوک هچ شیب )یگدوسرف نودب( دهاش رد هک یروط هب هدش رت نیرت
هشیر لوط ( هچ
36 / 163 یلیم )رتم یگدوسرف رد و 88
% مک نیرت هشیر لوط ( هچ
66 / 132 یلیم )رتم .دش هدهاشم و
حطس ردPL
ینعم دصرد کی لامتحا دوب راد
لودج(
2 و 3 ).
هداس تارثا رد شیب
نزو نیرت قاس رت
ه ( هچ 82 / 12 )مرگ نیلربیج رامیت شیپ رد
مک و نزو نیرت رت
قاس ه ( هچ 61 / 8 )مرگ دهاش رد )گنیمیارپ نودب(
نزو یگدوسرف تدش شیازفا اب .دوب هقاس رت
هب .تفای شهاک هچ
شیب هک یروط نزو نیرت
هقاس رت ( هچ 36 / 12 )مرگ دهاش رد )یگدوسرف نودب(
مک و ( نآ نیرت 33
/ 8 )مرگ یگدوسرف رد 88
% دوب
لودج(
3 و 4 ).
لباقتم تارثا رد مه
شیب نزو نیرت هشیر رت
( هچ 68 / 2 امیت شیپ زا )مرگ نیلربیج ر
و یگدوسرف نودب روذب و
مک نزو نیرت هشیر رت
( هچ 22 / 1 یگدوسرف اب گنیمیارپ نودب )مرگ 88
% .دوب و ینعم دصرد کی لامتحا حطس ردRFW
دوب راد
لودج(
1 ).
شیب لباقتم تارثا رد هقاس کشخ نزو نیرت
( هچ 12 / 1 )مرگ هشیر و ( هچ 22 / 2 نودب روذب و نیلربیج رامیت شیپ زا )مرگ
مک و یگدوسرف هقاس کشخ نزو نیرت
( هچ 86 / 2 و )مرگ مک هشیر کشخ نزو نیرت ( هچ
23 / 2 رامیت زا )مرگ اب گنیمیارپ نودب
یگدوسرف 88
% دوب . لامتحا ردPDW
1 و دصرد ردRDW
ینعم دصرد کی لامتحا دوب راد
لودج(
1 ).
هداس تارثا رد شیب
( تافسف ریاخذ نازیم نیرت 244
/ 2 مرگ رب لوم ورکیم )fw
مک و نیلربیج گنیمیارپ رد نازیم نیرت
( تافسف ریاخذ 231
/ 2 مرگ رب لوم ورکیم )fw
دوب دهاش رد .
نازیم یگدوسرف تدش شیازفا اب ذ
یم شهاک تافسف ریاخ .دبای
هب
یروط شیب ( تافسف ریاخذ نازیم نیرت 243
/ 2 مرگ رب لوم ورکیم )fw
دهاش )یگدوسرف نودب(
مک و تافسف ریاخذ نازیم نیرت
( 234 / 2 مرگ رب لوم ورکیم )fw
یگدوسرف رد 88
% دوب لودج(
2 و 3 ).
4
لودج 1 - نیگنایم هسیاقم یگدوسرف و گنیمیارپ لباقتم رثا
ایبول هچهایگ یکیژولویزیف و ییایمیشویب تافص یور رب
وردیه :P1
،گنیمیارپ دیساP2:
،کیلیسیلاس
،نیلربیج :P3 :P4
،دهاش :A1 ،یگدوسرف نودب یگدوسرف :A2
88
% :A3 ، یگدوسرف 88 .%
شیب نژ یبسن نایب نازیم نیرت میزنآ یاه
یاه یتنآ یگدوسرف حطس و نیلربیج اب گنیمیارپ رامیت رد تنادیسکا 88
% .دوب
شیازفا اب میزنآ نژ نایب یگدوسرف
یتنآ یاه هب .تفای شهاک تنادیسکا
مک هک یروط نآ نازیم نیرت
یمیارپ نودب رامیت رد اه و گن
یگدوسرف 88
% لکش( دوب 1
.)
لودج 2 - هناوج دصرد یور رب گنیمیارپ هداس رثا نیگنایم هسیاقم هشیر لوط ،ینز
نزو ،هچ هقاس رت ایبول هچهایگ تافسف و هچ
گنیمیارپ هشیر لوط
یلیم( هچ )رتم هقاس رت نزو
)مرگ( هچ نازیم
ریاخذ تافسف
1 fw) (µmolg-
وردیه گنیمیارپ 668b
/ b 138
844 / b 12
233 / 2
دیسا کیلیسیلاس 888b
/ b 142
262 / b 11
238 / 2
نیلربیج 244a
/ a 222
821 / a 12
244 / 2
c دهاش 111 / c 111
616 / c 8
231 / 2
رد نیب یاهرامیت دوبهب
،هدنهد ریثات نیلربیج رتشیب
زا دیسا ،گنیمیارپ وردیه .دوب گنیمیارپ نودب و کیلیسیلاس
تیلاعف عیرست اب گنیمیارپ هناوج یاه
یم بجوم ،ینز هشیر جورخ هک دوش
.دریگ تروص یرتمک نامز تدم رد هچ تلع
یرترب
یاهرذب میارپ هدش هب تبسن میارپ
هدشن رد هنوگ یاه فلتخم یهایگ ار یم ناوت نینچ طابنتسا دومن هک
ًلاوا شیپ رامیت ب رذ اب
هعسوت هلحرم ود هس زا هلحرم هناوج ینز ینعی زا قیرط هاتوک ندرک تدم نامز تخوس و
،زاس ثعاب عیرست هناوج ینز یم دوش [ 16 ]
و ایناث رد یط گنیمیارپ
،رذب لاقتنا داوم هریخذ
،یا لاعف زتنس یزاس میزنآ
،اه دیلوت ردATP
اهرذب زاغآ و هدش زتنس ،نیئتورپ
شیازفاDNA
هتفای و مه نینچ رب یاهدیپیلوفسف لولس
ییاشغ نینج رد ریثات
راذگ یم دشاب [ 6 ] . دراو تراسخ ریمعت یارب رذب
تمسق رگید و ءاشغ هب هدش مه و لولس یاه
یتنآ متسیس ددجم زاغآ نینچ دراد نامز هب زاین شنت زورب زا یریگولج و ینادیسکا
تراسخ نیا میمرت و هناوج دنیآرف لیمکت یارب مزلا نامز تدم نیاربانب ،تسا ریذپ ناکما گنیمیارپ زا سپ طقف اه
رد ینز یاهرذب
یم شیازفا هدوسرف هناوج نامز شیازفا نآ هجیتن هک دبای
تسا ینز [
4 ] . نارگشهوژپ تلع
جورخ عیرس رت هشیر هچ و هقاس هچ رد
اقتم رثا ب ل هناوج تدم نیگنایم )زور( ینز
هقاس لوط یلیم( هچ )رتم هقاس رت نزو )مرگ( هچ
هشیر کشخ نزو )مرگ( هچ
هشیر کشخ نزو )مرگ( هچ
fde A1P1 231 / c 2
222 / b 116
122 / b 2
363 / b 2
116 / 2
fde A1P2 232 / b 2
222 / b 131
186 / b 2
382 / b 2
161 / 2
g A1P3 216 / a 2
133 / a 111
686 / a 2
124 / a 1
224 / 2
c A1P4 241 / fed 2
668 / d 121
133 / dc 1
322 / dc 2
132 / 2
fde A2P1 231 / ed 2
333 / c 128
833 / bc 1
316 / bc 2
141 / 2
de A2P2 231 / c 2
668 / c 118
322 / bc 1
326 / bc 2
141 / 2
f A2P3 228 / b 2
668 / b 128
132 / b 2
361 / b 2
161 / 2
b A2P4 213 / g 2
222 / ef 36
242 / fe 1
822 / fe 2
123 / 2
d A3P1 238 / fg 2
222 / f 33
212 / de 1
841 / dc 2
132 / 2
d A3P2 238 / fed 2
333 / e 121
362 / dc 1
881 / de 2
118 / 2
fe A3P3 232 / cd 2
222 / c 112
342 / dc 1
886 / de 2
118 / 2
a A3P4 263 / h 2
222 / g 82
222 / f 1
863 / f 2
232 / 2
5
روذب میارپ هدش ار هب هدزاب رتشیب بذج بآ و یکیلوباتم تیلاعف رد
هرود هناوج ینز تبسن هداد دنا [ 11 ] . [ 13 ] ( لاس رد 2223 )
میزنآ نازیم هک ،دندرک شرازگ هچهایگ هشیر و هقاس رد زاتنیس زراکاس و زلایمآ یاه
یم ادیپ شیازفا هدش میارپ یاه فا .دنک
شیاز
میزنآ نینچ یم یاه
دناوت هشیر لوط شیازفا لیلاد زا هقاس و هچ
.دشاب هدش میارپ یاهرذب هچ گنیمیارپ
اب ریثأت رب دشر م روح
نینج و ومن ی هچهایگ وم بج شیازفا یکیرتکلا تیاده هدش
و اب ندادرارق ریثأت تحت یاهدنیآرف
کیژولویزیف و
یکیلوباتم هایگ
هچ
بجوم شیازفا بذج بآ و شیازفا نزو رت هشیر هچ و هقاس یم هچ ددرگ [ 1 ].
لودج 3 - هناوج دصرد یور رب یگدوسرف هداس رثا نیگنایم هسیاقم هشیر لوط ،ینز
نزو ،هچ هقاس رت و هچ ایبول هچهایگ تافسف
یگدوسرف هشیر لوط
هچ یلیم(
)رتم نزو
هقاس رت )مرگ( هچ نازیم
ریاخذ تافسف
1 fw) (µmolg-
دهاش a
368 / a 163
363 / a 12
243 / 2
یگدوسرف 88 b %
318 / b 146
822 / b 12
238 / 2
یگدوسرف 88 c %
668 / c 132
331 / c 8
234 / 2
لکش 1 - نژ نایب نازیم تارییغت میزنآ
یتنآ یاه
،یگدوسرق و گنیمیارپ رامیت لامعا زا یشان تنادیسکا ،دهاش :P1
وردیه :P2
،گنیمیارپ ،کیلیسیلاس دیسا :P3
،نیلربیج :P4 ،یگدوسرف نودب :A1
یگدوسرف :A2 88
% ، یگدوسرف :A3 88
% .
[ 18 ] هقاس کشخ نزو شهاک هچهایگ هچ
هدش هدوسرف روذب زا لصاح یاه ریاخذ زا هدافتسا ییاراک شهاک زا یشان ار
هتسناد .دنا لاعف قیرط زا گنیمیارپ میزنآ زتنس و یزاس
کشخ نزو شیازفا هجیتن رد و رذب ییاذغ ریاخذ کرحت بجوم یدیلک یاه
هقاس یم هچ دوش [ 12 ] . یم و تسا رذب گنیمیارپ تبثم رثا رگنایب دهاش هب بسن تافسف نازیم شیازفا ا بجوم دناوت
شیازف تبسن
هبATP
.داد دهاوخ شیازفا ار رذب رد دوجوم یژرنا حطس رما نیا هک دوشADP
شیامزآ زا لصاح جیاتن
RT-PCR
هک داد ناشن
نژ یبسن نایب نازیم میزنآ یاه
یتنآ یاه یشیازفا دنور کی زا هدش لرتنک هب تبسن گنیمیارپ اب هدش رامیت روذب رد تنادیسکا
0 0.5 1 1.5 2 2.5
SOD POX CAT
Gene expression
6
یم یوریپ هب .دنک
میزنآ نیا نژ نایب گنیمیارپ نودب رامیت رد هک یروط مک اه
یم اراد ار رادقم نیرت تحت ،شهوژپ نیا رد .دنشاب
میزنآ نژ یبسن نایب هب تبسن زادیسکارپ نژ یبسن نایب نیلربیج اب گنیمیارپ ریثات گ مشچ و لااب رایسب رگید یاه
شیازفا و دوب ری
لأامتحا نژ نیا نایب یم هگن لااب ،یگدوسرف اب هلباقم یارب ار زادیسکارپ نژ نایب حطس رذب هک تسا بلطم نیا دیوم
ناوت و دراد
.دراد ار یگدوسرف یلماوع راهم نایب
کدنا هدهاشم نژ هدش میزنآ یاه یتنآ یاه
رگنایب ،)دهاش( گنیمیارپ نودب رامیت رد تنادیسکا
نژ نیا شقن هیوناث مسیلوباتم رد اه
یم دشاب . اریز رد طیارش یزاین ،یعیبط هب
ریداقم یلااب نایب نژ یاه یعافد یمن اب دش [ 18 ].
4 . یلک یریگ هجیتن نیا دوجو اب شهوژپ نیا زا لصاح جیاتن هب هجوت اب هناوج هب تسناوت کیلیسیلاسدیسا هک
هچهایگ دشر و ینز یاه
هدوسرف
نیا زا رتشیب نیلربیج دربراک ریثات اما ،دنک کمک یم ایبول هدوسرف یاهرذب رد ،نیاربانب .دوب نومروه
امیت شیپ زا ناوت دیسا ر
.درک هدافتسا رذب تردق تیوقت تهج کیلربیج
5 . عبانم
1 م ،هداز یلو ،.ب ،یدمص یدزی . 1386.
زا کیتنژ. ،نارهت هاگشناد تاراشتنا ،یلوکلوم هاگدید 448
.
ص2. Alivand, R., Tavakol Afshari, R., Sharifzade, F. 2012. Effect of gibberellin, salicylic acid and ascorbic acid on seed germination characteristics in deteriorated rape seed. Iranian Journal of Field Crop Science. 43(4): 561-571.
3. Anonymous. 2008. Food Outlook, Global Market Analysis. http://www.fao.food outlook.com.
4. Bailly, C., Benamer, A., Cornineau, F., Come, D. 2000. Antioxidant systems in sunflower (Helianthus annuus L.) seeds as affected by priming. Seed Science Reasearch. 10: 35-42.
5. Basra, A. S., Farooq, M., Afzal, I., and Hussain, M. 2006. Influence of osmopriming on the germination and early seedling growth of coarse and fine rice. International Journal of Agriculture Biology. 8: 19-21.
6. Bradford, K. J. 1995. Water relations in seed germination. In "Seed Development and Germination" (J. Kigel and G. Galili, Eds.), pp: 351-396. Marcel Dekker Inc., New York.
7. Driscol, LO. 2011. Gene Expression profiling- Methods and Protocols, 2ndEdition. Humana Press. Springer protocols, P27.
8. Ellis, R. H., Roberts, E. H. 1981. The quantification of aging and survival in arthodox seeds. Seed Science Technology. 9:
377- 409.
9. Farooq, M., Basra, S. M. A., Warraich, E. A., Khaliq, A. 2006 b. Optimization of hydropriming techniques for rice seed invigoration. Journal of Seed Science Technology. 34: 529-534.
10. FU, J. R., LU, X. H., Chen, R .Z., Zhang, B.Z., Lin, Z. S., Li, Z. S., Cai, D. Y. 1988. Osmoconditiong of peanut (Arachis hypogea L.) seeds with PEG to improve vigour and some biochemical activities. Seed Science Technology. 16: 197-212.
11. Hopper, N. W., Overholt, J. R., Martin, J. R. 1979. Effect of cultivar, temperature and seed size on the germination and emergence of soybeans (Glycine max (L.) Merr sp.). Annals of Botany. 44: 301-308.
12. International Seed Testing Association (ISTA). 2012. International Rules for Seed Testing. 2012 edn. Bassersdorf, Switzerland: The International Seed testing Association (ISTA).
13. Kaur, S., Gupte, A. K., Kaur, N. 2003. Priming of chickpea seeds with water and mannitol overcomes the effect of salt stress on seedling growth. International Chickpea and Pigeonpea Newsletter. 10: 18-20.
14. Lan Zhong., Yan- hao, X. u., Jian-bo Wang. 2009. DNA- methylation changes induced by salt stress in wheat triticum aestivum, African Journal of Biotechnoligy. 18(22): 6201-6207.
15. MacDonald, M. B. 1999. Seed deterioration: physiology, repaired and assessment. Seed Science and Technology. 27: 177- 237.
16. Nelson, C. P. 2000. Water potential: The key to successful seed priming. Decagon Devices, Inc. AN4101-10.
17. Nims, E., Dubois, C. P., Roberts, S. C., and Walker, E. L. 2006. Expression profiling of genes involved in paclitaxel biosynthesis for targeted metabolic engineering. Metabolic Engineering. 8: 385-394.
7
18. Soltani, A., Gholipoor, M., Zeinali, M. E. 2006. Seed reserve utilization and seedling growth of wheat as affected by drought and salinity. Environmental and Experimental. Botany. 55: 195-200.
19. -Van Schoonhoven A, Voysest, O .1991. Common Beans: Research for Crop Improvement. Wallingford: CAB International, in association with CIAT, 980p.
20. Warraich, E. A., Basra, S. M. A., Ahmad, N., Ahmad, R., Aftab, M. 2002. Effect of Nitrogen on Grain Quality and Vigour in Wheat (Triticum aestivum L.). International Journal of Agriculture & Biology. 4(4): 517- 520.
8
EFFECT OF SEED PRIMING AND AGING ON GERMINATION, BIOCHEMICAL TRAITS AND ANTIOXIDANT ENZYME GENE EXPRESSION IN COMMON BEAN
(Phaseolus Vulgaris L.)
b, Seyed Sharifi , Raouf
, Abdolghayoum Gholipouric
, Mohammad Sedghi*b
Tayebeh Saadata
Roghayyeh Sheykhbagloud
a: M.Sc. Student in Agronomy ,University of Mohaghegh Ardabili, Faculty of Agriculture and Natural Resources, Department of Agronomy and Plant Breeding; b: Prof. Department of Agronomy and Plant Breeding, University of Mohaghegh Ardabili;c: Assoc. Prof. Department of Agronomy and Plant Breeding, University of Mohaghegh Ardabili; d: Ph.D. student, University of Mohaghegh Ardabili; * For correspondence: [email protected]
ABSTRACT
In order to investigate the effect of priming and aging on seed germination and biochemical constituents of common bean seed a factorial experiment conducted based on completely randomized design with three replications using 12 treatments in including aging (control without aging, 88% and 78% of germination of control) and priming (control, hydro-priming, priming by gibberellin and salicylic acid) in the University of Mohaghegh Ardabili in 2016. After RNA extraction and cDNA synthesis, gene expression of antioxidant enzymes was studied using qRT- PCR and some of physiological and biochemical traits were measured. The results showed that the longest radicle and plumule, the highest radical and plumule fresh and dry weight and the highest phosphate reserves was related to gibberellin priming and non-aged seeds. Also, peroxidase gene expression was higher than the other antioxidant enzymes. With increasing the aging there was a reduction trend in the gene expression and the lowest expression observed for peroxidase in non-primed seeds in 78% of germination. In conclusion, priming with gibberellin caused to invigoration of weak bean seeds.
Keywords:Salicylic acid, antioxidant enzymes, gene expression, priming, gibberellin, aging, phospha, common bean.
