* Corresponding author E-mail: [email protected]
عمج
هیادج‌یگژیو‌نییعت‌و‌یروآ
یهجودنچ‌سوریو‌یناریا‌یاه هتسه
ا
هبنپ‌ۀزوغ‌مرک‌ی Helicoverpa
armigera Single Nucleopolyhedro virus (HearSNPV)
یلپ‌نژ‌یانبم‌رب
(نیرده )Polh
یزابهش‌هلحار
1 و
ییولنسح‌ییلاط‌اضر،2
*
روپردان‌دوعسم،1
رورهم‌یلع،2
3
یجزید‌ربکا،
1
تف‌همطاف‌و 4یحو
1 - هایگ هورگ .جرک ،نارهت هاگشناد یعیبط عبانم و یزرواشک سیدرپ ،یزرواشک یسدنهم و مولع هدکشناد ،یکشزپ
2 - .جرک ،یزرواشک جیورت و شزومآ ،تاقیقحت نامزاس ،لاهن و رذب یهاوگ و تبث تاقیقحت هسسوم
3 - هایگ هورگ ت ،ناجیابرذآ یندم دیهش هاگشناد ،یزرواشک هدکشناد ،یکشزپ .زیرب
4 - نارهت ،ناریا روتساپ وتیتسنا یسفنت یاهیرامیب ریاس و ازنولفنآ تاقیقحت شخب
:تفایرد خیرات(
13 / 03 / -99 :شریذپ خیرات 13
/ 05 / 99 )
هدیکچ
زا هدافتسا شور اه ی نتبم ی سا رب ی ئلکوند ی ک رد اسانش یی و ی سور اه هب لد ی ل راتخاس کچوک مونژ ی نآ اه و توافت اه ی زج یی حطس رد ون دیتوئلک بی ن
ادج ی ه اه ی ا رتسا ی ن اه
، مها زا ی ت ز ی دا ی رادروخرب شهوژپ رد .تسا
رضاح عرازم زا رامیب ای/و هدرم یاهورلا ، هجوگ
گنرف فلتخم قطانم ی
عمج ناریا ییایفارغج یسوریوولوکاب یگدولآ یارب و یروآ
Helicoverpa armigera Single nucleopolyhedrovirus (HearSNPV)
شور اب هب ی هن زاس جارختسا یارب تافلوس لیسدود میدس ساسا رب هدش ی .دندش یسررب ،OBs
جنز شنکاو ی
هر ا ی لپ ی (PCR)زارم زا هدافتسا اب
ود تفج رگزاغآ صاصتخا (Polh-a, Polh-b)ی
حارط ی هدش حان ساسا رب ۀی
تظافح دش ۀ لپ نژ ی رده ی (Polh) ن یارب 26 ادج ۀی تبث هدش زا
سوریو Hear/H. zea-SNPV ا
.دش ماجن گدولآ ی HearSNPV هب اب
ثکت ی ر اهدناب ی فرومونوم ی ک 370 و 790 یدیتوئلکون رد
28 أت ورلا یی د
دش هناسمه . زاس ی عت و یی ن لاوت ی توئلکون ی د ی دناب اه ی ثکت ی
،هدشر قلعت نآ اه نژ هب Polh سوریو هجودنچ ی هتسه ا ی هنوگ اه armigera ی وH.
H. zea اب تهابش ب ی ش زا 6 / 99 دصرد ار ناشن .داد زجت ی ه لحتو ی ل ییازرابت ادج ی ه اه یناریا ی HearSNPV ریاس اب هارمه
ادج ی ه اه ی تبث هدش زا
،ایند رد سوریو نیا ادج
ی ه اه هورگ رد ار یناریا ی وولوکابافلآII
ی سور اه هقبط دنب ییاراک و ی بی
ش رت هعسوت شور هداد
هدش شهوژپ .درک تابثا ار
لوا رضاح ی ن زا شرازگ فرعم
ی و اسانش یی لوکلوم ی ادج ی ه اه ی ا ی نار HearSNPVی هب اب
گراک ی ر ی PCR شور DNAو و ی سور زا اهورلا اب ی
رگرامیب صخشمان تیوه تسا
زا نانیمطا لوصح هب هجوت اب . رثؤم
رد شور نیا ندوب دیفم و لابرغ
رگ ی رس ی ع تارشح یاهورلا رظنزا
هب یگدولآ
و سوریو نیا سررب
ی هرهب ،شیازرابت زا یدنم
شهوژپ رد نآ یم هیصوت هدنیآ یاه
.ددرگ
هژاو
:یدیلک‌یاه
سوریو هجودنچ ی هتسه ا شنکاو ،ی جنز
ی هر ا ی لپ ی زارم Helicoverpa sp. ، ،
لپ ی رده ی ن .
Collecting and partial characterization of Iranian Helicoverpa armigera Single NucleopolyhedroVirus isolates based on Polh gene
Raheleh Shahbazi1,2, Reza Talaei-Hassanloui1,Masoud Naderpour2, Ali Mehrvar3, Akbar Dizaji1 and Fatemeh fotouhi 4
1. Department of Plant Protection, College of Agriculture and Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran. 2. Seed and Plant Certification and Registration Research Institute, Agricultural Research, Education and Extension Organization, Karaj, Iran. 3. Department of Plant Protection, Faculty of Agriculture, Azarbaijan Shahid Madani University, Tabriz, Iran. 4.
Pasteur Institute, Tehran, Iran.
(Received: une 2, 2020 - Accepted: August 3, 2020) ABSTRACT
Nucleic acid-based diagnostic approaches are significant methods in the detection and identification of viruses due to their small genome structures and minimal nucleotide differences among virus isolates or strains. In this study, dead or diseased larvae of Helicoverpa sp. were collected from tomato fields in distinct geographic areas in Iran, and baculovirus infection was assayed by occlusion body extraction using an optimized Sodium Dodecyl Sulphate method. Two sets of specific polymerase chain reaction (PCR) primer pairs (Pol-a and Pol-b) were designed based on the conserved polyhedrin gene region of 26 fully sequenced HearSNPV/HzNPV isolates. Accordingly, infection by HearSNPV was confirmed in 28 out of 34 tested larvae by PCR amplification of monomorphic fragments of about 370 and 790 nucleotides, respectively. Cloning and sequencing of those fragments showed that they belong to the corresponding polyhedron gene from nucleopolyhedriviruses of H. arimegra and H. zea species with 99.6% sequence identity. The phylogeny trees developed for Iranian isolates based on their polyhedron gene sequences showed that they all belong to the Group II Alphabaculovirus and formed one clade with other HearSNPV isolates. This further confirmed the efficiency of the developed method for baculovirus detection and characterization. To our knowledge, this is the first report of introduction and molecular characterization of some HearSNPV isolates, circulating in these pests in Iran, using a robust DNA-based approach. The excellent efficacy of this method in virus detection makes it a valuable tool for rapid screening of insect cadavers for HearNPV infection, phylogenic studies, and virus monitoring in bioinsecticides application.
Keywords: nucleopolyhedrovirus, polymerase chain reaction, Helicoverpa sp., polh gene.
همدقم
رد ب ی ن لرتنک لماوع م
ی بورک ی
، وولوکاب ی سور اه زا
یاهرازبا مهم همانرب اه ی تافآ یقیفلت تیریدم هب
و ی هژ
هیلع ورلا لاب کلوپ ناراد دنتسه حرطم .
داوناخ ة
Baculoviridae
ی ک زا هورگ و ی سور اه ی صاصتخا ی
اپدنب ی نا مونژ اب ود DNA
هتشر ا ی وقلح ی و زادنا ة
غتم ی ر زا 80 ات 180 رازه تفج زاب .تسا
یاهدیسپکوئلکون م
ی هل ا ی لکش نویریو نورد اه
رد
تورپ لاتسیرک ی
ینی یهجودنچ مسج مان هب 1
طاحم
( )OB
یم رارق 2
دنریگ سنج راهچ نیب زا . هداوناخ
،هدیریوولوکاب طقف
سنج ود افلآ
- و اتب - وولوکاب ی سور
هب روط هدرتسگ یراجت
هدش هضرع رازاب هب و دنا
(
Christian et al., 2001; Baillie and Bouwer, 2011; Hasse et al., 2015; Ikeda et al. 2015
.)
شهوژپ اه ی دج ی د ب ی ش رت مزرد ی ن ۀ تسیز یسانش
لوکلوم ی ا ی ن و ی سور اه و هب و ی هژ رد اتسار ی غت یی ر
تیفرظ هرشح شک ی و ی سور ازفا اب ی ش نازیم ینیگآرهز
نآ اه تسا هدش زکرمتم .
وولوکاب ی سور اه مه نچ ی ن
هب ناونع لماح اه ی نژ نامرد ی مولع رد پ
ز یکش
هجوتدروم ( دنتسه
Woo et al., 2006; Kost et al.,
.)2005
پ ی تفرش و هعسوت رد ا ی ن مز ی هن تخانش هب زاین
زج ی ی تا زا یگژیو یاه امتم ی هدننکز وولوکاب ی سور اه
،
اخذ ی ر سو ی ع تنژ ی ک ی و وتحم ی عونت رد ب ی ن عمج ی ت اه
دراد کرد فده اب . بی
ش رت رتهب و دپ ی هد اه یتشگرف ی
وولوکاب ی سور اه و مه نچ ی ن یاهراکوزاس لوکلوم
ی
تنوفع از یی و زاساتمه ی نآ اه
، لاوت ی ی با ی مونژ
وولوکاب ی سور اه ی فلتخم طسوت یددعتم نارگشهوژپ
ماجنا تفای ه ( تسا
Zhang et al., 2005; Chen et al.,
2002; Ogembo et al., 2007; Arrizubieta et al., 2013; Zhang et al., 2014; Costa et al., 2019
.) اب
دوجو دادعت ز ی دا وولوکاب ی سور اه بط رد ی
،تع اهنت
کچوک شخب ی
زا نآ اه زج اب ی ی تا هعلاطم هدش دنا .
ز دادعت ی دا ی یهجودنچ سوریو هتسه
ا ی
(3NPV)
رد
ند رسارس ی
ا زا هنوگ یاه سنج
Helicoverpa
زاسادج ی هدش دنا ا . ی ن ریوولوکاب سو زوغ مرک تفآ ة
1.Polyhedron (pl.: Polyhedra)
2. Occlusion body 3.Nucleopolyhedrovirus
ویم مرک ای هبنپ ة
هجوگ گنرف ی
H. armigera
دروم ار
رارق هلمح م
ی دهد (
(Ogembo et al., 2005;
Mehrvar 2011
. اهورلا هیذغت هب هجوت اب نورد
م ی هو اه
هب تمواقم شرتسگ ،نابزیم هایگ یاهرذب و هرشح شک اه ،تسا شیازفا هب ور تنرد
ی هج تفآ لرتنک
اب ار شلاچ اه یی هجاوم هدرک .تسا ازا ی ن ور
، زا هدافتسا
لرتنک لماوع یتسیز
هب و ی هژ شخبدیون ،اهرگرامیب
بوسحم یتافآ نینچ لرتنک م
ی دوش . صوت ی ف تنژ ی ک ی
ادج ی ه اه ی
Helicoverpa armigera
nucleopolyhedrovirus
کاح ی عونت زا نورد هنوگ ا ی
سب ی را لااب و روضح تونژ ی پ اه ی ازجم اب لاعف ی ت
هرشح شک ی توافتم تسا (
Ogembo et al., 2007;
Wang et al., 2003; Mehrvar et al., 2006
) ؛ اربانب ی ن
عت یی ن و ی گژ ی و باختنا تونژ ی پ ی ا طولخم ی زا دنچ ی ن
تونژ ی پ اب و ی گژ ی اه ی هرشح شک ی ،بولطم لماع مهم
رد نیوکت هرشح شک اه ی اپ رب ی ۀ وولوکاب ی سور .تسا
،یتسیز ینمیا لیاسم ۀظحلام اب عسوت
ۀ راجت ی
ادج ی ه اه یموب ی
HearSNPV
یارب تفآ لرتنک
H.
armigera
سب ی را تسا هجوت دروم (
Zhang et al.,
2014; 2005
.) دنچ ی ن ارب شور ی اسانش یی تی پ اه ی
شحو ی کرتون و ی
ب هلمجزا NPV
خشت ی ص
م ی پوکسورک ی
، شور یاه مرس یسانش
، شور اه ی
ای نم ی جنس ی جاوما اب
، ه ی رب ی د ی ساز ی نو دافتسا وDNA
ه
زا زنآ ی م اه یشرب زائلکونودنآ ی هب
راک هتفرگ تسا هدش
(
Smith and Summers, 1981; Brown et al. 1982;
Knell et al., 1983; Webb and Shelton, 1990;
Traverner and Connor, 1992; Baillie & Bouwer, 2011; Christian et al. 2001
.)
ا دربراک ی ن شور اه ای ب ه لد ی ل غ ی لباقر دامتعا ندوب
و تارضم داوم دار ی تکاو ی و دودحم هدش ناوت زا ای و
مامت یبایدر یارب یفاک لکشدنچ
ی اه کت ی
.دنتسین رادروخرب یدیتوئلکون مدع
اناوت یی زنآ ی م اه ی
شرب ی خشت رد ی ص عون یلکشدنچ
، عت یی ن ناکم
صخشم یلکشدنچ
و مونژ رد ی
سور عض مضه و ی
ف
( دناب اه ی ) رظندروم رد ادج ی ه اه یی بلاغ زا هک تسا ی
ت
مک ی دنتسه رادروخرب (
Motta et al., 2002
) .
وولوکاب ی سور اه
، تورپ ی ی ن لپ ی رده ی ن اب 245 ات 250
دیساونیمآ ار
لااب حوطس رد یی
اهن زاف رد یی تنوفع ییاز
دیلوت م ی دننک نایب نژ هک نآ ةدننک
سب ی را
تظافح هدش ا .تسا ی ن و ی گژ ی ا زا هدافتسا ساسا ی
ن
رد نژ یاسانش ی عاونا شهوژپ و NPV
ییازرابت یاه
نآ اه تسا (
Zanotto et al., 1993; Woo et al.,
.)2006
اب هجوت هب مدع مطا ی نان زا گدولآ ی اهورلا ی
عمج روآ ی هدش هب ۀنوگ
،رظندروم ن
ی زا هب در ی با ی
هعطق ا ی و مونژ زا ی سور هب هدولآ ورلا دناوتب هک تسا
HearSNPV
اس زا ار ی ر اهNPV
امتم ی ز دنک (
Rowley
et al. 2010, 2011; Baillie and Bouwer, 2011
.)
نونکات ه ی چ هنوگ تاعلاطا یلوکلوم زا ادج ی ه اه ی یناریا
HearSNPV
یلوکلوم حطس رد ،هدوبن سرتسد رد
ازا ی ن ور رضاح شهوژپ رد ،
هیادج یاه
HearSNPV
اب
ی ک شور لباق دامتعا
، ساسح رس و ی ع اپ رب ی ه شنکاو
هریجنز یا لپ ی ارم ز و لاوت ی ی با ی توئلکون ی د ی نژ
لپ ی رده ی ن ییازرابت طباور و ییاسانش نآ
اه رد بی ن
اهNPV
ی تبث هدش رد نژ کناب دیدرگ نییعت .
داوم
و
شور
اه
عمج روآ ی ادج ی ه اه ی و ی سور
هب روظنم تسد ی با ی هب عبنم ی زا یاه تنایراو موب
ی
و ی سور
، ط ی لاس اه ی 96 - 1395 زا عرازم تنس ی نودب
مس شاپ ی گ هجو گنرف ی و لاع اب ی م ورلا تراسخ
Helicoverpa sp.
دیدزاب و اهورلا ی اراد ی میلاع
رهاظ ی ب ی رام ی عمج روآ دندش ی . عومجمرد 35
اب ورلا
لاع ی م صاخ گنر یگدیرپ و بآ راد یکنکداب و
یا گرم
زا لامش برغ لماش(
ابرذآ ی ناج قرش ی 11 هنومن و
بدرا ی ل )هنومن کی
، لامش قرش ( ناسارخ وضر ی 14
هنومن و ناسارخ لامش ی هنومن کی )
لامش و روشک
)هنومن هن اب ناتسلگ(
عمج روآ ی دش ئن .
صلاخ زاس ی ینییتورپ سکیرتام و
ی سور ، اب
غت یی تار ی رد شور صوت ی ه دش ة ( )2010 Rowely et al.,
و ( )2015 Arrizubieta et al.,
ماجنا دش . اهورلا هب روط
هناگادج اب
1 ات 5 / 1 م ی ل ی ل ی رت
، 1 SDS
/ 0 دصرد
( )W/V
درس رد نواه چ ی ن ی نگمه زاس ی و هب
م ی تورک ی و ب 2 م ی ل ی ل ی رت ی لقتنم و هب تدم 1 ات 2
قد ی هق درگ سکترو ی
د . هب روظنم فذح اقب یا ی تشرد
لثم توک ی لوک ،هراصع زا م
ی تورک ی بو اه یورین اب
g
100 هب تدم 10 ناث ی ه رتناس ی ف ی ژو دش دن شنور . ی ن هب
ورکیم ویت ب دج ی د هت و هدش لقتنم شن
ی ن هرابود رد
1 SDS
/ 0 دصرد لحرم و لح ۀ
رارکت لبق و
شنور ی ن
لحرم اب هلصاح ۀ
لبق طولخم و یورین اب 5000 g
هب
تدم 15 قد ی هق رتناس ی ف ی ژو هت .دش شن ی ن اهن یی
لپ ی رده ی ن رد 1 ات 5 / 1 م ی ل ی ل ی رت بآ نوی هدودز و لح
زا سپ سکترو یورین اب رابود 5000g
تدم هب 15
قد ی هق رتناس ی ف ی ژو دش رطقم بآ اب هلصاح بوسر .
رد سپس و وشتسش 300
م ی لورک ی رت لح رطقم بآ زا
.دش یگمه لحارم خی یور ماجنا دش دن . سناپسوس ی نو
هلصاح سپ زا لرتنک مک ی شرامش(
لپ ی رده رد دحاو
مجح هنومن اب سومه ی رتموت رابوئن
، قمع 2 / 0 م ی ل ی رتم ،
کچوک عبرم ره تحاسم 0625
/ 0 )،
امد رد ی 20 -
س ۀجرد سویسل
ارب ی ماجنا امزآ ی ش اه ی دعب ی
رادهگن ی درگ ی د .
ارب ی دادعت شرامش و هدهاشم رد OB
هنومن اه
،
ادتبا زا سناپسوس ی نو هت ی ه هدش رس ی اه ی تقر
ًلاماک
ی تخاونک هت نگمه و
ی ه رادقم .دش 10
رتیلورکیم زا
ره تقر اب م ی پورک ی تپ رد ره ش فرط ی را ملا لوبلگ
رامش (
MARIENFELD, Germany
) هتخیر دش ات
ز ی ر .ددرگ شخپ لملا سپ
بثت زا ی ت تارذ ردOB
فک
کبش ۀ جنرطش ی ملا تدم هب 10 قد ی
،هق هدهاشمOBs
و دادعت نآ اه شرامش .دش
جارختسا
DNA
و ی سور و شنکاو هریجنز
یا
لپ ی زارم
(PCR)
جارختسا و DNA
ی سور زا اهOB
ی صلاخ هدش ره زا
ک زا هدافتسا اب ورلا کت ی
ت جارختسا مه
نامز
DNA/RNA
و ی سور ام و امسلاپ ،مرس زا ی
تاع ندب
(Sinapure Viral Kit®)
س تکرش زا ی
نولکان قبط
لمعلاروتسد ماجنا تکرش
دش . تفج کی رگزاغآ
(
pol-aF/R
لودج 1 ) هب ناونع اسانش رکرام یی
و
ابرغ رگل ی لوا ی ۀ و ی سور ب رد ی ن هنومن اه ی
عمج روآ ی هدش ساسا رب لاوت
ی اه ی نژ لپ ی رده ی ن
ادج ی ه اه ی تبث هدش
HearSNPV/HzNPV
حاون زا ی
رد ناهج فلتخم نژ کناب
لودج(
2 حارط ) ی درگ ی د
هک راظتنا م ی تفر هعطق ا ی هب لوط رقت یبی 373 تفج
زاب ار رد شنکاو ثکت PCR
ی ر .دهد هب یبایتسد یارب
یلپ نژ لماک یلاوت رد نیرده
هنومن اه کی تبثم ی
( رگزاغآ تفج
pol-bF/R
لودج 1 ک ) ه هعطق ا هب ی
لوط 790 تفج زاب ریثکت ار م
ی دهد .دش یحارط
حارط ی اهرگزاغآ اب
هدافتسا زا
مرن رازفا
Primer3
(
Rozen and Skaletsky, 2000
ماجنا ) دش . شنکاو
جنز ی هر ا ی لپ ی زارم مجح رد 50
رتیلورکیم زنآ اب و
ی م
Pfu DNA polymerase
(
Thermo scientific,
Lithuania
هاگتسد رد ) اسومرت
ی رلک
BioRad
ماجنا
.دش
لودج 1 . لاوت ی اهرگزاغآ تاصخشم و ی
حارط ی هدش ارب ی در ی با ی و ی سور
HearSNPV
و ثکت ی ر لماک نژ لپ ی رده ی ن
Table 1. Charectristics of primer pairs designed to detectoin of HearNPV and amplify polh genes.
Amplified genomic regions Reaction conditions
Primer sequence (5'-3') Primer name
Partial Polh genomic DNA (373 bp) 95°C /3 min, 25 x (94°C /30 sec,
54°C /30 sec, 72°C /30 sec), 72°C /5 min
CGTTACAGTTACAGCCCTAC TTGGTCGCATATTAACAGAC Polh- aF
Polh-aR
Complete Polh genomic DNA (790
bp) 95°C /3 min, 25 x (94°C /30 sec,
54°C /30 sec, 72°C /1 min), 72°C /7 min
CGTTACAGTTACAGCCCTAC GATCGAATTTAGATAAAATTATGAG Polh-bF
Polh-bR
F: forward primer; R: reverse primers; Polh: Polyhedrin gene
هناسمه ،یزاس لاوت ی ی با ی زیلانآ و هداد اه
لوصحم ثکت PCR
ی هدشر ادج ود رد ی
سوریو ۀ زا
ناتسا ابرذآ ی ناج قرش ی زا سپ صلاخ زاس ی هدافتسا اب
ک زا ی ت جارختسا لژ زاDNA
(GFX Gel Extraction
Kit, South Korea)
، رد لقان
PTG-19T
هت ی ه هدش زا
س تکرش ی نولکان ساسا رب و لمعلاروتسد
رد تکرش
رتکاب ی
Escherichia coli
رتسا ی ن
XL1-Blue
هناسمه زاس ی مسلاپ جارختسا و ی
د اه ی کرتون ی ب
(PTG-19T-Hear/Hz-SNPV)
هب شور ل ی لاکلآز ی ن ی
Ehrt & Schnappinger, 2003( .دش ماجنا )
سررب ی ادتبا یی نولک یاه رتکاب یا یی رظنزا روضح
مسلاپ ی د کرتون ی ب رتکاب نولک زا هدافتسا اب ی
ی ا
مسلاپ ی د جارختسا هدش شنکاو رد سرربPCR
ی .دش
یلاوت یبای مسلاپ ی اهد بیکرتون ی طسوت
تکرش
Bioron (South Korea)
.دش ماجنا سپ
زا مطا ی نان زا
ثکت ی ر نژ لپ ی رده ی ن رد ا ی ن ود ادج ی
،ه اس رد ی ر
هنومن اه ی باختنا ی فارغج قطانم زا ی
ا یی ،فلتخم
لوصحم ثکت PCR
ی هدشر زا ادج ی ه اه اب تفج
اهرگزاغآ ی
Polh-bF/R
هب روط قتسم ی م نودب و
هناسمه یزاس
، لاوت ی ی با ی دش .
لاوت ی اه ی توئلکون ی د ی هب تسد هدمآ
، سپ زا
وجتسج و تهباشم جنس ی رد اپ ی هاگ هداد اه ی تاعلاطا
مونژ ی ( )NCBI
تبث دش . جیاتن
لابرغ رگ ی لوا ی ه هنومن اه ی عمج روآ ی هدش
رد ادتبا ثکت ی ر شخب ی زا نژ لپ ی رده ی ن ادج ود ی ۀ
سوریو زا
ناتسا ابرذآ ی ناج یقرش (
200IRAZ -
201IRAZ
) اب قفوم ی ت ماجنا دش لکش(
1 ) تاعطق .
ثکت ی هدشر رد لماح
PTG-19T
هناسمه زاس ی سپس و
مسلاپ ی د بیکرتون و جارختسا
لاوت ی ی با ی درگ ی د . لاوت ی
توئلکون ی د ی هب تسد هدمآ اب لاوت ی اه ی تبث هدش رد
نژ کناب اقم
ی هس و زا ثکت ی ر نژ لپ ی رده ی ن مطا ی نان
.دش لصاح هب
یروط هک لاوت ی شخب ی نژ زا لپ ی رده ی ن
ادج رد ی ۀ
200IRAZ
و
201IRAZ
زا ابرذآ ی ناج قرش ی هب
ترت ی ب تهابش 100 و 73 / 99 یدصرد ادج اب
ی ۀ
HaNPV-Rajankute
اب سأر رامش
MH029111
و
HaNPV-AC53T5
اب سأر رامش
KU738904
ناشن
زا سپ .داد أت
ی ی د نژ لپ ی رده ی ن رد ا ی ن ود ادج ی
،ه زا
نآ هب ناونع لرتنک اه ی تبثم رد اس ی ر شنکاو اه ی
جنز ی هر ا ی لپ ی زارم هب راک هتفرگ دش . سپس شنکاو
جنز ی هر ا ی لپ ی زارم اب تفج اهرگزاغآ ی هدشرکذ رد
اس ی ر ادج ی ه اه ی عمج روآ ی هدش فلتخم طاقن زا
فارغج ی ا یی هب روظنم أت یی د ب ی رام ی اهورلا رد ی رظندروم
ماجنا لکش( دش 2
.) ثکت ی ر نژ لپ ی رده ی ن اهورلا رد ی
عمج روآ ی هدش زا ناتسا اه ی ابرذآ ی ناج قرش ی
، ناسارخ
وضر ی و ناتسلگ ترت هب ی ب 9 / 90 ، 75 و 75 دصرد
قفوم دوب . مه نچ ی ن زا ی ک هنومن عمج روآ ی هدش زا
ناتسا بدرا ی ل و ناسارخ لامش ی
، ره ود هدولآ هب و
ی سور رظندروم وب هد .تسا
لکش 1 نژ زا یشخب ریثکت . لپ
ی رده ی ن ۀعطق(
373 زاب تفج HearSNPV )ی
یاهرگزاغآ تفج اب Polh-aF/R
ۀیادج ود رد
عمج روآ ی هدش زا ابرذآ ی ناج ،یقرش )سوریو زا یراع ورلا( یفنم دهاش :C-
رکرام :M 1 kb .
Figure 1. PCR amplification of a 373 bp fragment of partial pol gene in two isolates of HearSNPV from East Azarbaijan. C- and M indicate negative control and DNA ladder (1Kb), respectively
لاوت ی ی با ی نژ لپ ی رده ی ن و عت یی ن عقوم ی ت
ادج ی ه اه ی ا ی نار ی و ی سور
HearSNPV
زا ب ی ن هنومن اه ی هب هدولآ
HearSNPV
عمج روآ ی هدش
ب کوکشم اب یگدولآ ه
HearSNPV
، جنپ هنومن زا
ناتسا ابرذآ ی ناج قرش ی
، ود هنومن زا زا کی ره
ناتسا اه ی وضر ناسارخ ی
و ناتسلگ و ی ک هنومن زا
ناتسا اه ی بدرا ی ل و ناسارخ لامش ی باختنا درگ ی د .
هعطق 790 زاب تفج لماک نژ( ی
لپ ی رده ی ن ) هیادج
یسوریو یاه رد
شنکاو جنز ی هر ا ی لپ ی زارم اب
اهرگزاغآ تفج ی
polh-bF/R
ثکت ی ر درگ ی د لکش(
3 .)
سپ زا لاوت ی ی با ی تهج أت یی د هنوگ و ی
،سور لاوت ی اه رد
اپ ی هاگ هداد اه ی تاعلاطا مونژ
ی تهابش جنس ی دش و
نوگ ۀ و ی سور ی
HearNPV
مامت رد ی ادج ی ه اه أت یی د
دش . لاوت ی نژ لماک لپ
ی رده ی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی
هب تسد هدمآ رد ا ی ن شهوژپ رد کناب نژ تبث درگ ی د
لودج(
2 ).
لکش 2 لوصحم زروفورتکلا . نژ زا یشخبPCR
لپ ی رده ی ن هعطق(
373 زاب تفج )ی
HearSNPV
زراگآ لژ یور 5
/ 1 رد دصرد
یاهورلا عمج روآ ی هدش .ییایفارغج فلتخم قطانم زا دک )A
:AZ
هنومن اه ی ابرذآ ی ناج قرش دک( ی ،)لیبدرا زا80AR
دک )B
:KH
هنومن اه ناسارخ ی وضر
( ی
42KHbo
زا ناسارخ لامش ،)ی دک )C
:GO
هنومن اه ،ناتسلگ ی
C+
و ۀیادج( تبثم دهاش بیترت هب :C-
200IRAZ
،)سوریو زا یراع ورلا( :یفنم و ) یلوکلوم نزو رگناشن :M
.1kb
Figure 2. PCR amplification belonging to the partial pol gene (fragment of 373 bp) HearSNPV on 1.5%
agaros gel in HearNPV-infected cadavers collected from different geographic regions of Iran. A) AZ:
East Azarbaijan (80AR from Ardabil) B), KH: Khorasan Razavi (42KHbo from North Khorasan), C) GO:
Golestan provinces. C- and M indicate negative control and DNA ladder (1Kb), respectively (Fermentas).
لکش 3 لوصحم زروفورتکلا.
لماک نژPCR
لپ ی رده ی ن هعطق ریثکت(
790 زاب تفج )ی ادج ی ه اه یباختنا یناریا ی
HearSNPV
( :AZ
هنومن اه ی ابرذآ ی ناج قرش دک( ی
،)لیبدرا ناتسا زا80AR
هنومن:GO
اه ناتسلگ ناتسا ی :KH
هنومن اه ی وضر ناسارخ ی
(
42KHbo
ناتسا زا ناسارخ لامش ،)ی دهاش :C-
فنم ی ( ،)سوریو زا یراع ورلا یلوکلوم نزو رگناشن :M
.1kb
Figure 3. PCR amplification belonging to the complete pol gene (fragment of 790 bp) of selected HearSNPV isolates. AZ: East Azarbaijan (80AR from Ardabil), GO: Golestan, KH: Khorasan Razavi (42KHbo from North Khorasan) provinces. C- and M indicate negative control and DNA ladder (1Kb),
respectively (Fermentas)/
لودج .2
و تاصخشم سر
لپ نژ رامش ی
رده ی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی
HearSNPV
تبث هدش زا ا ی ن شهوژپ اپ رد ی هاگ تاعلاطا ی .نژ کناب
Table 2. Accession numbers of the polh amplified from the studied HearSNPV Iranian isolates.
Iranian Isolate Collected date / Geographic region Accession number
200IRAZ East Azarbaijan/2013-2014 MN840078
201IRAZ " MN840079
10 IRAZ " MN840074
40IRAZ " MN840075
80IRAZ Ardabil/ 2013-2014 MN840076
100IRAZ East Azarbaijan/2013-2014 MN840077
35IRKH Khorasan razavi /2016 MN840082
41IRKH " MN840083
76IRGO Golestan /2017 MN840080
79IRGO " MN840081
42 IRNK North Khorasan/2017 MN840084
لاوت ی اه ی نژ لپ ی رده ی ن هب تسد هدمآ اب اس ی ر
ادج ی ه اه ی زا NPV
سنج اه ی فلتخم وولوکاب ی سور
تبث هدش رد نژ کناب لودج
همیمض اب هدافتسا زا
مرن رازفا
MEGA6
ز ی مهر چ ی ن ی و همانرابت ادج ی ه اه ی
سوریو ا ساسا رب ی
ن مونژ زا شخب یزاسزاب
درگ ی د
لکش(
4 ) . لاوت ی اه ی نژ لپ ی رده ی ن
، 11 ناکم
یلکشدنچ کت
توئلکون ی
4د ( )SNP
هب روط کرتشم رد
بی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی ناشن داد . مه نچ ی ن رد
ادج ی ه اه ی
76IRGO
و
79IRGO
و ناتسلگ ناتسا زا
ادج ی ه اه ی
35IRKH
و
41IRKH
زا ناتسا ناسارخ
وضر ی رد عقوم ی ت 48 زا نودک زاغآ ی ن
G―‣T( ) و
عقوم ی ت 69 زا نودک زاغآ ی ن
G―‣A ( )
SNP
صاصتخا ی ا ی ن ادج ی ه اه هدهاشم م
ی دوش . مانرابت ۀ
مسر هدش رب ساسا لاوت ی همجرت دش ة مآ ی ساون ی د ی
تورپ ی ی ن لپ ی رده ی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی
، مامت ی
هنومن اه ی در ی با ی ار هدش ۀخاش رابتعا اب 99
دصرد رد
4.Single Nucleotide Polymorphic
لاک د
HearSVPV/HzNPV
هورگ رد و سنج II
Alphabaculovirus
رارق داد هنوگ .
اه ی نج س
Betabaculovirus
،
Deltabaculovirus
و
Gammabaculovirus
خاش رابتعا اب ۀ
ا زا لااب ی ن سنج
ف .دندش ادج ی
مارگول اب
CuniNPV
سنج زا
Deltabaculovirus
ر ی هش راد هدش تسا .
ثحب
عمج دشر ی
ت رشب یناهج ن و
ی زا هب ازفا ی ش و یمک
تلاوصحم )ملاس( یفیک اذغ
یی زا ی ک فرط
، غت یی تار
میلقا ی ناهج ی و دعاسم طیارش ندش دشر
و ومنو
فارغج شنکارپ ی
ا یی تارشح هعسوت ، تمواقم
هب
هرشح شک اه ی و موسرم ناهایگ
ارت فرط زا هتخیر
رگید ن ، ی زا هب شهوژپ یدربراک یاه رد
همانرب اه ی
لرتنک یتسیز ار تدش شخب ی هد تسا (
Rowely et
al., 2011
.) وولوکاب ی سور اه ییاناوت هعسوت هب ناونع
تفآ شک اه ی یتسیز هوقلاب ار اراد دنتسه . اجنآزا یی هک
ادج ی ه اه ی موب ی ور ی عمج ی ت اه ی موب ی تفآ تلاح رد
،دنراد یرتلااب ینیگآرهز یلک اسانش
یی وس ی ه اه ی
موب ی ی ک اب هقطنم تیفرظ ۀنیشیب
تفآ لرتنک شیپ
زا دیلوت عسوت و ۀ ی ک تفآ شک رظن هب یرورض یتسیز
م ی دسر (
Figueiredo et al. 1999; Chen et al.,
2002; Arrizubieta et al., 2013
)؛
هکارچ ینیگآرهز
و ی سور ب هب هجوت اب ی
تو ی پ م ی نابز قطنم و ۀ فارغج ی ا یی
عمج روآ ی و ی سور مه توافتم تسا (
Barrera et al.,
و )2011
هچ اسب دیاش/
ادج ی ه اه ی غ ی موبر ی
، لاعف ی ت
وس ی ه اه ی موب ی ی ک شهاک ار هقطنم م
ی دنهد
(
Munoz & Caballero, 2000
.) هعلاطم و اسانش یی
ادج ی ه اه ی صاصتخا ی ی ک هقطنم اب شور اه ی
خشت ی ص ی لباق دامتعا در رد دنمتردق و ی
با ی حص ی ح و
قد ی ق ترورض دراد رب هبلغ یارب . دودحم
ی ت اه ی زیلانآ
زنآ ی م اه ی شرب ی (
Baillie & Bouwer, 2011;
Christian et al. 2001
) رد اسانش یی و ی
،سور ثکت ی ر
تاعطق مونژ ی تظافح هدش اب و PCR
هب لابند نآ
لاوت ی ی با ی و لانآ ی اهز ی یشیازرابت تاعطق
ثکت ی هدشر
سب ی را راک دمآ و رثؤم تسا . مونژ وولوکاب ی سور اه ی
لاب کلوپ ناراد لاوت ی ی با ی هدش ات هب زورما 62 نژ
کرتشم ار
اراد دنتسه (
Arizubieta et al., 2015
.)
دادعت ی زا ا ی ن نژ اه ی صا ل ی اراد ی لاوت ی توم ی ف اه ی
هب تدش تظافح هدش دنتسه هک
ناکما حارط ی
لا ی توئلکونوگ ی
اهد ی هرنژد صاصتخا ی ارب ی خشت ی ص ود
سنج هدرتسگ
وولوکاب ی سور
(
اه افلآ ووولوکاباتب ی سور
)
اه ار مهارف م ی دنروآ.
رد حارط ی ا ی ن رگزاغآ اه تاعطق هس نژ سب ی را
تظافح هدش هلمجزا لپ ی رده ی ن لونارگ/
ی ن (
Pol/gran
،
)(
8
)lef late expression factor 8
، (
lef 9
)
late
expression factor 9
لانآ سپس .دنتسه فده ی
ز
لاوت ی اه ی هب مه پ ی هتسو ا ی ن
،تاعطق عضو ی ت تخرد
شیازرابت ار
ارب ی لماک ندرک هعومجم نژ اه ی لصا ی
صخشم م ی
؛
دنک اربانب ی ن ناکما پ ی ش ب ی ن ی طابترا ی کو ی سور صخشمان اب
و ی سور اه ی هتخانش هدش ار مهارف
م ی دروآ (
Lange et al., 2004; Jehle et al., 2006
.)
ثکت ی ر اب شنکاو وPCR
لاوت ی ی با ی نژ اه ی تظافح دش ة
وولوکاب ی سور اه ی صاصتخا ی لاب کلوپ ناراد
، هلمجزا نژ لپ
ی رده ی ن
، ارب ی عت یی ن هنوگ و لانآ ی اهز ی ییازرابت
وولوکاب ی سور اه لوادتم تسا (
Rowley et al. 2010,
Rowley et al. 2011; Baillie and Bouwer, 2011;
Lang et al. 2004; Christian et al. 2001
.) تورپ ی ی ن
لپ ی رده ی ن رد اهNPV
ی لاب کلوپ ناراد سب ی را بش ی ه و
بی ن 90 - 85 دصرد تهابش مآ ی ساون ی د ی دنراد
، هچرگا
هتسب هب نوگ ۀ و ی
،سور لوط و نزو لوکلوم ی توافتم
دراد (
Woo et al. 2006
نژ .) لپ
ی رده ی ن
لاب کلوپ ناراد دودح 50
دصرد مه
یتخاس
(
Homology
) رد ا س ی اهد ی مآ ی هن اب تورپ ی ی ن لونارگ ی ن
وولونارگ ی سور اه و 40 دصرد تهابش اب لپ ی رده ی ن
و ی سور اه ی هجودنچ ی هتسه ا ی لاب اشغ یی نا ناشن
دنداد (
Rohrmann, 1992
ا .) ی ن م ی ناز لااب ی تهابش
،
ار ه درب حارط ی رگزاغآ ی نو ی لاسرو هب روظنم خشت ی ص
رس ی ع گدولآ ماگنهدوز و ی
هب دوبهب ار NPV
م ی دشخب .
زم ی ت ا ی ن ا شور ی ن ا تس هک م ی ناوت همه زا
لاوت ی اه ی نژ لپ ی رده ی ن و ی سور اه ی هجودنچ ی
هتسه ا ی دوجوم رد اپ ی هاگ هداد اه ی مونژ ی و ی ک همانرب
مرن رازفا ی هداس هب روظنم باختنا مود ی ن دزمان بسانم
ارب ی ثکت ی ر هرهب تسج . ای ن اهرگزاغآ ناکما
ثکت ی ر
زا DNA
سب ی را ی زا هنوگ اه ی و NPV
شهوژپ یاه
دعب ی ارب ی هنوگ اه ی هتخانشان ار
هب روط اراک و رثؤم
مهارف م ی دروآ (
Galal, 2009
.) رد ا ی ن شهوژپ
، ادتبا
رب ساسا لاوت ی اه ی تظافح ش ۀ ه نژ لپ ی رده ی ن رد
ادج ی ه ه ا ی
HearSNPVs
/
HzNPVs
، ی ک رگزاغآ تفج
ارب ی لابرغ رگ ی لوا ی ۀ هنومن اه ی عمج روآ ی هدش زا
حم ی ط و هدولآ هب و ی سور رظندروم حارط
ی دش . لانآ ی ز
نژ لپ ی رده ی ن رد ب ی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی و اقم ی هس
نآ اه اب لاوت ی نژ لپ ی رده ی ن زا ادج ی ه اه ی
HearSNPVs/HzNPVs
حاون ی فلتخم ند
ی
،ا
مه اس یتخ سب ی را لااب یی ب(
ی ش زا 6 / 99 دصرد ) مه رد
لاوت ی توئلکون ی د ی و DNA
مه رد لاوت ی مآ ی ساون ی د ی
راکشآ درک . مه نچ ی ن لانآ ی ز
Neighbor-joining
مانرابت ۀ نژ لپ ی رده ی ن
، مامت ادج ی ه اه ی ا ی نار ی اب ار
رابتعا 100 دصرد هورگ رد
سنج II
Alphabaculoviruses
هشوخ دنب ی درک . تورپ یی ن
لپ ی رده ی ن اهNPV
ی هورگ
،II
246 سا ی مآد ی هن رد
اقم ی هس اب اه NPV
ی هورگ اب I
245 مآ ی ساون ی د دنراد
(
Woo et al., 2006
.) لانآ ی اهز ی تهباشم جنس ی و
مه در ی ف ی لاوت ی نژ اه ی لپ ی رده ی ن ادج ی ه اه ی ا ی نار ی اب
لاوت ی اه ی
HearSNPV
/
HzNPV
مه تخاس ناشن داد
هک گمه ی ادج ی ه اه ی ا ی نار ی م نوگ هب قلعت ۀ
HearSNPV
لانآ و هدوب ی
اهز ی یشیازرابت تسناوتن مه
ادج ی ه اه ی
HzNPV
و
HearSNPV
ار امتم ی ز نک ن د .
هشوخ دنب ی ادج ی ه اه ی ا ی نار ی اب ادج ی ه اه ی
HzNPV
کاح ی زا هقبط دنب ی ا ی ن و ی سور اه هب ناونع ی ک نوگ ۀ
ی ناسک تسا
؛ هکارچ م ساسا رب ی
نابز لباق امت ی ز
نی دنتس . ای ن لئسم ه لباق رکذ مونژ راتخاس هک تسا ی
HearSNPV
و
HzNPV
، تهابش سب ی را لااب یی رد
لاوت ی توئلکون ی د ی و مآ ی ساون ی د ی دنراد . و ی سور اه ی
هجودنچ ی اسانش یی هدش قوف ۀنوگ ود زا پ
ی ش رت رب
ساسا هنوگ ا ی هک زا نآ زاسادج ی م ی دندش
،
HearSNPV
و یا
HzNPV
مان م ی دنتفرگ
، خا ی
ًار رد
نوگ ۀ
H. armigera Single nucleopolyhedrovirus (HearSNPV)
رارق هتفرگ دنا رب .
ا ی ن مامت ساسا ی
ادج ی ه اه یی هک پ ی ش رت
HzNPV
شرازگ هدش دنا
،
هب ناونع راو ی تنا اه یی زا ی ک هنوگ (
HearSNPV
رب )
انبم ی لاوت ی شخب ی سب نژ زا ی
را تظافح دش ة
polh
دنتسه (
Adams et al., 2015, Noune & Hauxwell,
.)2016
ریظن ینارگشهوژپ اتسار نیا رد
Cristian et al.,
(2001)
یصیخشت شور کی لابرغ
رگ رب عیرس ی
یانبم و ییاسانش رد یشرب یاهزائلکونودنا و PCR
کیکفت یاهNPV
هدشادج زا
هنوگ اه سنج ی
Helicoverpa sp.
نژ زا هدافتسا اب لپ
ی رده ی ن هب روظنم
تیعمج کیتنژ و شنکارپ کرد
HearSNPV
رد
و یحارط ایلارتسا ارا
ی ه یداهنشیپ شور .دندرک
ًاساسا
رد هناماس اه یارب یزاساهر زا سپ و شیپ یشیاپ ی
هرشح شک اه دربراک بیکرتون ۀتفایدوبهب یتسیز ی
لاس رد .دراد 2009
ساسا رب 152
یدیتوئلکون یلاوت
تبث هدش نژ زا لپ ی رده ی ن زا هنوگ اه فلتخم ی ،NPV
رگزاغآ تفج کی یبایدر رد لاسروینوی هرنژد
اهNPV
اب هارمه شور نیا .دش یحارط فلتخم ی لاوت ی ی با هب رداق یریثکت ۀعطق ی یبایدر
هنوگ اه ی
فلتخم هک دوب NPV
م ی ناوت زا نآ تهج شیاپ
یایاقب یبایدر و یشحو پیت شنکارپ ،طیحم ردNPV
هرشح شک اه یسوریوولوکاب ی هدشاهر
طیحم رد
( درک هدافتسا
Galal, 2009
.) مه نچ ی ن
Woo (2001)
ۀسیاقم اب لاوت
ی اه نژ ی لپ ی رده ی ن زا 26 ۀنوگ
لپوئلکون ی وورده ی سور اب یحاون زا هرنژد رگزاغآ ،
تظافح گدش ییاسانش هب رداق هک یحارط لااب ی
Autographa californica NPV ،
Hyphantria cunea
،NPV Bombyx mori NPV ،
Spodoptera exigua
،NPV S. litura NPV و
Lymantria dispar NPV
زا
طیحم دوب . ریثکت ناکما یحاون نیا باختنا
وولوکاب ی سور اه ی بی ش رت مهارف ار م ی دروآ شور نیا .
نویسادیربیه نرداس رانک رد هعطق زا هدافتسا اب 5
ثکت ی دشر نژ ة هب ناونع راتخاس ییاسانش ناکما ،بورپ
نژ لپ ی رده ی ن مهارف ار م ی دروآ . یاراک یو شور نیا ی
شنکارپ یبایدر رد ار و
ی سور اه ی هجودنچ ی هتسه ا ی
یزاساهر و تی
پ اه ی بیکرتون و یشحو دیفم NPV
.تسناد هجوت اب هب
تقد صیخشت نییاپ و
ی سور اه ی
زا هدافتسا اب هداوناخ کی و
ی گژ ی اه ی تخیر یتخانش و
،یکیژولونویمیا شور
اه ی ساسا رب لیلحت و
ی گژ ی اه ی
،یکیتنژ شور
اه یی ،دنمتردق لباق
دامتعا ،عیرس ،
مک زه ی هن و ذپرارکت ی ر ییاسانش رد و
ی سور اه حطس رد
تسا داژن و هنوگ .
نیا رب هولاع
، وجتسج و یبایدر ادج ی ه اه ی یموب
دادعت هب یبایتسد ناکما بی
ش رت ی زا ادج ی ه اه ی دوجوم
و تنرد ی هج وس ی ه اه ی تاراک مهارف ار هقطنم ره رد ر
م ی دروآ . عونت تنژ ی ک ی د ر عمج ی ت اه ی وولوکاب ی سور ی
عمج روآ ی هدش زا ی ک هعرزم م ی دناوت اهنرد ی ت درکلمع
لرتنک یتسیز ار ازفا ی ش دهد (
Cory et al. 2005;
Baillie & Bouwer, 2012
.) تهباشم تنژ
ی ک ی ب ی ن
ادج ی ه اه یموبریغ و یموب ی و
ی سور اه ی هجودنچ ی
هتسه ا ی هک هب ناونع تفآ شک هب راک هتفرگ م ی دنوش
،
ن ناش م ی دهد هک ا ی ن م ی ناگراورک ی مس اه و تارشح
م ی ناشنابز رداق
هب هبلغ رب اهزرم ی فارغج ی ا یی و
نولک ی هز ندرک ز ی هاگتس اه ی دج ی د دنتسه (
Mazzi &
Dorn, 2012
.) تنایراو زا یرایسب یاه
وولوکاب ی سور اه
رد ی ک م ی نابز شخرچ هدرک و زا نوگ ۀ ی ناسک زا
حاون ی فلتخم فارغج ی ا یی رداق هب ج زاساد ی دنتسه .
لاوت ی اه ی تونژ ی پ اه ی فلتخم ی ک نوگ ۀ و ی سور اب
5.Southern hybridization
لکشدنچ ی کت توئلکون ی
،د اج ی زگ ی ن ی و فذح / قاحلا
هعطق ا ی غت هب رجنم تسا نکمم هک نژ زا یی
ر بوچراچ دوشب شناوخزاب
یا خ ی ر اسانش لباق یی
دنتسه
(
Krejmer- (Rabalska et al., 2019
.
لکش 4 مسر ۀمانرابت . اسا رب هدش
یلاوت س همجرت دش ة مآ ی ساون ی د لماک نژ ی لپ
ی رده ی ن سنج اه .سوریوولوکاب فلتخم ی زاسزاب
ی
زا هدافتسا اب مرن
رازفا
MEGA6
شور اب و
Neibour-joining
اب 1000 تیعقوم .دش ماجنا پرتسا توب رارکت ادج
ی ه اه رد یناریا ی
نیب سنج اه رتسا توب شزرا ریداقم .تسا هدش صخشم سوریوولوکاب ی رد ب
هخاش اه .تسا هدش جرد رظانتم ی
Figure 4. Phylogenic tree constructed based on full polyhedrin amino acid sequences of baculovirus isolates by Neibour-joining analysis method in MEGA6. The division of baculovirus genus is indicated
and the position of Iranian isolates marked. Bootstrap resampling was done 1000 times and resulting bootstrap values are shown on the corresponding branches (Alphabaculovirusgroup I [HycuNPV (NC-
007767), BmNPV(JQ-291706), AcMNPV (M-25054), AgMNPV (NC-008520), AceNPV (U40834)],Alphabaculovirus group II [HearMNPV (NC-011615), SINPV (X-94437), HtarNPV (U-97657), MacoNPV-A (NC-003529), LsNPV (LSU30302), MbNPV (M-20927), AgipNPV (NC-011345), AgseNPV (NC- 007921)], Betabaculovirus [ TnGV (NC_038375), CpGV(NC-002816), PlxyGV (NC-002593), SpliGV (NC-009503),
XnGV (NC-002331), Gmmabaculovirus [ NeabNPV (NC-008252), NeleNPV (NC-005906), NeseNPV (NC- 005905), deltabaculovirus [ CuniNPV (NC-003084)].
شور هعسوت ی هتفا مامت زا رضاح شهوژپ رد یاهرایعم
شور اه ی بسانم رد یبایدر م ی ناگراورک ی مس اه
