Reference Interval Determination for Anti-Müllerian Hormone Level and Confirmation of Related Genetic

건강한 한국 여성의 혈청 항뮐러관 호르몬 기준치 확립 및 관련 유전자 돌연변이 검증. 따라서 본 연구에서는 건강한 여성의 관련 유전적 돌연변이 확인과 함께 AMH 기준 범위를 결정하려고 시도했습니다.

배경

AMH는 임상적으로 다양한 분야에서 사용됩니다. 조기 난소 부전, 다낭성 난소 증후군 등 난소 기능 장애와 관련된 주요 유전자에는 BMP15(뼈 형태 형성 단백질 15)와 GDF9(성장 분화 인자 9)가 있으며, 이 두 유전자는 난소 및 난포 발달에 매우 중요한 역할을 합니다7,8).

연구필요성 및 연구목표

따라서 본 연구에서는 건강한 한국 여성을 대상으로 AMH를 평가하고자 하였다. BMP15 유전자 검사는 2차 기준으로 수행되었으며 임상적으로 관련된 돌연변이가 관찰되지 않은 경우 대상체는 영향을 받지 않은 것으로 간주되었습니다.

연구대상자

국립중앙인체자원은행 인체자원 분양

BMP15 유전자검사

직접 시퀀싱의 경우 엑손 1은 한 방향으로 실행되고 엑손 2는 양방향으로 실행되었습니다. PCR, 정제, 시퀀싱은 마크로젠(Macrogen Inc., SEOUL, Korea)에서 수행하였으며, 결과는 연구자가 읽고 검증하였습니다.

Table 1. Primers for BMP15 gene direct sequencing

AMH 와 progesterone 검사

국민건강영양조사사업 역학정보 분석

소득 사분위수 연령, 연도, city_t, ho_incm 여성 건강 최소 1개월 동안 경구 피임약 사용. 국민건강영양조사 역학자료 분석을 위해 적절한 지침에 따라 질병관리본부 건강영양조사과에 학술연구자료 활용 신청서를 제출하였다. 원자료 활용지침 및 학술연구자료 활용절차에 따라 연구제안서, 통계방법 적용방안 및 결과표를 제출하였다. 승인절차 후 보건영양학술진료실을 방문하여 통계분석을 실시하였다. 질병통제예방센터 연구과.

1) 만 19세 이상 모든 대상자를 대상으로 신체측정 및 혈액검사 결과가 연령별로 차이가 있는지를 비교하기 위해 기술통계분석을 실시하였다. 상관계수와 P-value로 상관관계 유무를 판단하고, 각 변수를 x축, AMH를 y축으로 하여 산점도를 작성하였다. 총 콜레스테롤, 중성지방, HDL 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤, 비타민 D, hsCRP, 납, 수은, 카드뮴, 갑상선 자극 호르몬 및 유리 티록신의 농도를 분산 분석을 통해 조사하여 사분위수 그룹 간에 유의한 차이가 있는지 확인했습니다.

비공통항목(비타민D, hsCRP, HDL콜레스테롤, LDL콜레스테롤, 중금속, 갑상선 관련 검사 등)의 경우 특정 연도에만 시행하기 때문에 일부 대상자에 대해서만 값이 나와 있었습니다. 또는 측정 연령층. 영양섭취(동/읍/면), 가구소득 4분위수, 비만유병률, 최근 1년 동안 건강보조식품을 2주 이상 섭취했는지 여부에 영향을 줄 수 있는 변수에 대해 사분위군 간 유의한 차이가 있는지 평가합니다. 이를 위해 먼저 카이제곱 검정을 수행했습니다.

Table 3. Variables for KNHANES data analysis

통계분석

AMH 와 progesterone 검사수행 및 AMH 병행검사

대상자의 연령 그룹별 특성 비교

Abbreviations: BMI, body mass index; SBP, systolic blood pressure; DBP, diastolic blood pressure; chol, cholesterol.

Table 4. Demographic and laboratory characteristics of study participants *

BMP15 유전자검사결과 및 변이 빈도

Allelic Variant Mendelian Inheritance in Man (OMIM) online. †Clinical significance of variants is described in OMIM ClinVar. The observed variants of the BMP15 gene in this study. p.Lys241Glu) NA 0.1 NA Novel variant Abbreviations: KRG, Korea Reference Genome Database; UTR, untranslated region; NA, not available. A cytosine to thymine substitution at nucleotide position 852 was observed with no amino acid change (p.Ser284=).

This variant was detected in 5.8% of participants and a cytosine to guanine heterozygous substitution was noted at -9 nucleotide position. A cytosine to guanine heterozygous substitution was noted at nucleotide position 598, which changes the histidine at codon 200 to tyrosine. Two participants revealed an adenine to guanine heterozygous substitution at nucleotide position 721 that changes lysine at codon 241 to glutamate.

표 7에는 총 양성 돌연변이 비율과 연령별 가장 빈번하게 발생하는 3가지 돌연변이의 빈도가 요약되어 있습니다.

Table 5. Major genetic variants of the BMP15 gene

AMH 농도분포 및 참고범위 설정

30~34세 연령군에서는 시약 지시값에 비해 낮은 백분위 특성과 높은 백분위 특성을 보였다. 20대는 대상자가 적기 때문에 일부 결과에 따라 백분위수가 영향을 받을 수 있습니다. 따라서 과목 수도 표에 표시됩니다.

Fig. 7. AMH distribution of the entire study population. One bar represents 0.5 ng/mL.

Progesterone 검사결과 해석

AMH 농도와 BMP15 변이의 관련성 탐색

국민건강영양조사사업 역학정보 분석

결과를 비교해 보면, 비슷한 연령대의 AMH 수치가 본 연구 결과보다 높은 수치를 보였다. AMH 농도와 BMP15 유전자 사이에는 간접적인 관계가 있는 것으로 추정되나, 본 연구에서는 난소 기능 장애군은 포함하지 않았으므로 향후 POF나 PCOS 환자군에서 난포 형성이 나타날 것으로 예상된다. 또한 통계적으로 유의하지는 않지만 염증 지수 hsCRP 값은 AMH가 25번째 백분위수보다 낮은 대상에서 더 높은 경향이 있었습니다.

본 연구에서는 모든 피험자를 분석한 결과, 비타민 D와 AMH는 약한 음의 상관관계를 보였습니다. 본 연구에서는 처음으로 일일 영양소 섭취 유형에 따른 상관관계를 분석한 결과, 통계적으로 유의미한 차이는 발견되지 않았다. 본 연구에서 과목선정의 한계는 다음과 같다.

본 연구에서는 건강한 한국 여성을 대상으로 한 로슈일렉시스 AMH 검사에 대한 연령별 기준 범위를 설정하기 위해 국민건강영양조사 대상자의 혈청 및 DNA 자원을 국립인적자원은행으로부터 배포받았다. 또한, 본 연구에서는 난소 기능 장애와 관련된 유전자인 BMP15에 대한 유전자형 데이터를 생성했으며, 총 9개의 돌연변이가 검출되었습니다. BMP15 유전자 돌연변이의 빈도는 AMH가 극도로 낮거나 높은 대상에서 더 높았습니다.

비타민D는 AMH 농도와 약한 음의 상관관계를 보이므로 향후 난소에서 비타민D의 역할에 대한 연구가 필요하다.