О НЕКОТОРЫХ АСПЕКТАХ
ВЛИЯНИЯ НИТРОЗОДИМЕТИЛАМИНА НА ОРГАНИЗМЫ
Б.М. Айкешев, Г.Е. Саспугаева, Р.Р.Бейсенова, М.К.Сапарбаев, М.Р.Хантурин, Евразийский Национальный Университет им. Л.Н.Гумилева
г. Астана, Казахстан, [email protected]
Данные микроядерных тестов в экспериментах на лабораторных крысах, на яйцах курицы показали генотоксичность нитрозодиметиламина [1,2,3].
По результатам наших экспериментов методом микроядерного тестирования было определено, что при хронической интоксикации частота появления микроядер выше, чем при острой интоксикации. Во второй группе животных (хроническая интоксикация НДМА) этот показатель составлял 4,5±0,1 (p<0,001), в третьей группе 3,9±0,1 (p<0,001), а в первой группе 2,9±0,07 (рисунок 10).
Рисунок 1 - Уровень микроядер при интоксикации нитрозодиметиламином.
Таким образом, результаты наших экспериментов показали, что НДМА обладает значительным мутагенным эффектом, образование микроядер свидетельствует о двухцепочечном разрыве молекумы ДНК.
Чтобы проверить механизм воздействия НДМА на геном нами была предпринята попытка прямого воздействия на ДНК. В эксперименте использовалась бактериальная ДНК- плазмиды, которые непосредственно обрабатывались НДМА. К 5 мкг плазмиды добавлялось 1,35 мМ, 6,75 мМ и 0,675 мМ НДМА соответственно, также учитывался контроль. Данные электрофореза показали отсутствие изменений в бактериальной ДНК (Рисунок 2).
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5
Контроль Затравка НДМА хрон Затравка НДМА остр
Ряд1
Рисунок 2. Данные электрофореза. На пластинке видно одинаковое расположение необработанных и обработанных НДМА плазмид, что говорит об отсутствии непосредственного эффекта влияния данного мутагена на ДНК.
Рисунок 3. В микробиологическом Хgal тесте проросли только колонии сине- зеленого цвета, что говорит об отсутствии модифицирующего действия нитрозодиметиламина на плазмиду.
Культуры трансформированных бактерий, генетический материал которых непосредственно подвергался влиянию НДМА, также не показали мутагенной активности нитрозодиметиламина в Xgal тесте (выращивание трансформированных бактерий на среде с Xgal (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиронозид) (Рисунок 3).
Итак, при интоксикации нитрозодиметиламином уровень появления микроядер в периферической крови повышался и при хронической, и при острой форме интоксикации, что свидетельствует о воздействии данного токсиканта на генетический аппарат, а в плазмидной ДНК при прямом воздействии на нее НДМА изменений не наблюдалось. По видимому, на уровне организма происходит опосредованное влияние НДМА на геном, посредством образования промежуточных метаболитов, например - продуктов свободнорадикального окисления.
Литература:
1. Бейсенова Р. Р., Позднякова Е.В., Хантурин М.Р.Влияние нитрозодиметиламина на некоторые гематологические и цитогенетические показатели крови, Медицина и экология, 2004, №1(30), С.80-83.
2. Бейсенова Р.Р., Хантурин М.Р. Воздействие производных гидразина и препарата «Салсоколлин» на систему крови, Материалы Международной научно-практической конференции «Современные проблемы экологической физиологии», Алматы, 2008. - С. 38-39.
3. Wolf T, Niehaus-Rolf C, Luepke NP. Investigating genotoxic and hematotoxic effects of N-nitrosodimethylamine, N-nitrosodiethylamine and N-nitrosodiethanolamine in the hen's egg-micronucleus test (HET-MN) // Food Chem Toxicol. – 2003 Apr. – 41(4). – P. 61-73.
