NGHIEN CUU SAN XUAT
QUE CHAN DOAN NHANH BENH KY SINH TRUNG TOXOPLASMA GONDII 6 NGUOI VA GIA SUC
LTS: Cong trinh vura dgt gidi nhat (thupc linh virc Sinh hpc phuc vu sdn xudt va ddi sdng) Gidi thwdtig Sdng tgo Khoa hpc vd Cong nghf tinh Thira Thien Hue ldn thu- VI ndm 2012. Day id cong trinh do PGS.TS. Dinh Thj Bich Ldn ciing nhdm tdc gid thupc Vien Tdi nguyen Moi trurdng vd Cong ngh^ sinh /tpc vd Trudng Dgi hpc Nong Lam - Dgi hpc Hue time hi^n. Bdn tin Khoa /tpc vd Cdng ngli^ xin gidi thieu tdm tat ket qud nghien cdu cua cong trinh.
1. Tinh cap thiet ciia cong trinh nghidn cihi
Benh do Toxoplasma gondii gay ra la mdt benh ky sinh trung lay nhilm gida nhieu Ioai dpng vat va ngudi, lam anh hudng den an toan ve sinh thyc pham va sue khde cdng ddng. Mpt tiong nhimg hau qua nghiem tipng do Toxoplasma gondii gay ra d ngudi la gay say thai, sinh con di dgng, ung nao. Gan day cac nha y hpc da chi rg rdng Toxoplasma gondii la mdt trong nhung nguyen nhan chinh gay viem giac mac keo dai, tai phat nhidu lan d ngudi, khd chiia khdi ban du da dupc su dung thudc hoac cac chl phlm sinh hpc chdng Toxoplasma gondii.
Hidn tgi, tinh hinh nhilm Toxoplasma gondii a ngudi ciing nhu gia sue d nudc ta chua dugc nghien cuu mpt each day dd. Enzyme Link Immunosorbent Assay (ELISA) la mpt tiong nhung phucmg phap phat hien khang the trong huyet thanh dupc sd dyng rdng rai de chan doan nhieu benh tiong dd cd bdnh do Toxoplasma gondii. Tuy nhien, vide thyc hien phan ung ELISA chan doan benh Toxoplasma gondii tdn nhieu thdi gian, cdng sdc va bat budc phai cd thidt bi (ELISA Reader) nen chi cd the tiln hanh trong didu kien phdng thi nghiem. De khac phyc nhimg ban che tren cda ELISA, hien nay cac nha khoa hpc da nghien cuu san xuat cac que chan doan nhanh dua tren nguyen Iy cua phuang phap sac ky mien dich (ICT- Immunochromatographic test). Dd Id mdt phuong phap chan doan nhanh, nhay, cd tinh dac hieu cao, it tdn kem, khdng can su dyng thilt bi ddt tien, khdng can ky thugt vien trinh dp cao va cd the chan doan ngay d bat ky didu kien nao. 6 Viet Nam, hidn nay chua cd cac nghien cihi san xuat que chan doan nhanh cho bdnh Toxoplasma gondii, vi vay, san xuat que chan doan dung cho cac xet nghiem nhanh dang la mdt ddi hdi cap thiet cda nganh y va thu y nudc ta.
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGHE TINH THITA THIEN HUE, 11/2012 ^ M
KHOA HQC VA C 6 N G N G H $
Trong giai dogn ndm 2008-2009. chdng tdi dd tiln hdnh dl tdi "Nghien cuu san xult que chan dodn nhanh b?nh ky sinh trung Toxoplasma gondii d ngudi va gia sue".
2. Nhihi}: npi dung chinh cua cong trinh
- Nghien cuu ihiiJi Igp quy trinh sdn xuat que chin dodn nhanh b?nh ky sinh trung Toxoplasma gondii.
- Ddnh gia dp ddc hi?u vd dp nhgy cua que chan dodn nhanh.
- Su dyng que chan doan nhanh dl nghien cuu tinh hinh nhiem Toxoplasma gondii d mdo vd Ipn tren dja bdn tinh Thua Thien Hue.
3. Nhirng ket qud chfnh cua cong trinh
Da nghien ciru thiet l^p dirpc quy trinh .vdn xual vd sdn xual Ihdnh cong que chdn dodn nhanh b^nh ky sinh trung Toxoplasma gondii
Tom tdi quy trinh sdn xuul que chdn dodn
- San xuat khdng nguyen SAG2 (surface antigen 2 -SAG2=P22) tai Id hgp.
+ Tgo plasmid tai td hpp: Dogn ADN 438-bp md hog khang nguyen SAG2 tdch td tachyzoites cda T.gondii chung RH dupc khulch dai bdng phan ung PCR, su dyng cap mdi 5'-ACG AAT TCG TCC ACC ACC GAG ACG-3'va 5'-ACG AAT TCT TAC TTG CCC GTG AGA-3'. San phlm PCR dupc dua vao vj tri EcoRI cda plasmid pGEX-4T-3, sau dd chuyen nap plasmid vao te bao E.coli chung DH5- alpha.
+ Bieu hien gen khang nguyen: Te bao E.coli dupc chuyen ngp plasmid tai to hop dupc nudi tiong mdi trudng LB (Luria-Bertani) cd chua Ampicillin, d nhiet do 37**C co Idc 170 vdng/phut den khi ndng dp vi khuan do d ODeoo dat 0,3-0,5 thi ngimg nudi. Sau do cam ung bdng IPTG (isopropyl-P-D- thiogalactopiranoside) ImM, nudi d nhiet dp 25°C trong 5 gid, lie 170 vdng/phut. Ly tam 3.000 vdng/phut (4T) tiong 10 phut, bd djch noi, thu ket tua va tai huyen phu kit tda trong TNE (50mM Tris-HCl cd pH 7,5, lOOmM NaCl, 2mM EDTA) cd chda lysozyme va Triton X 100, tipn U^n may vortex, u tren da lanh va lie nh? tiong 1 gid. Sieu am trong 5-10 phut vd ly tam 10.000 vdng tiong 5 phut (4° C), thu dich ndi.
+ Tinh sach khang nguyen tai td hpp: Sau khi ly tam, thu khang nguyen tai td hpp (dich ndi), tirdi sgch bdng Glutathione Sepharose 4B va di?n di dl udc tinh ndng dp protein thu dupc. Sau dd kiem tra tinh ddc hi?u cda khang nguyen tai td hgp bdng phuang phap Western blot.
San xult khdng thl ddc hi?u vdi khang nguyen SAG2: Khang the IgG khang rSAG2t thu dupc tu chupt BALB/c sau khi tdi mien dich 3 lln bdng khang nguyen tai td hpp rSAG2t va dupc tinh sgch bdi Econ-Pac protein A kh (Bio- Rad). Dp tinh khilt cda
BAN TIN KHOA HQC VA C 6 N C NGHf TINH THITA TH1£N HUfe, 11/2012
khang thS dirge kilm tra bing phuang phap dien di SDS-PAGE va ndng dp khang thS duge xae dinh bang KIT Pierce BCA Protein Assay cua hang Thermo Scientific.
- Che khang nguyen cong hgp: U G-rSAG2t (da dugc tinh sach, 500ng/ml) vgi gold colloid (DCN, My) voi ty le (1:10, thS tich/thS tich) d nhiet dp phong trong 10 phiit. Sau do, them 0,05% polyethylene glycol 20.000 (PEG) va 1% albumin huySt thanh bo (BSA) dJ c6 dinh cac phan tii da gin kk. Ly tam 18.000 vdng trong 20 phiit, b6 dich n6i. Phin eta dugc tai huyin phii trong PBS chira 0,05% BSA v4 0,05% PEG 20.000. N6ng do cua khang nguyen cgng hgp dugc dieu chinh cho t6i khi d^t dugc mat dp quang 5 (do 6 buoc song 520nm). Sau khi pha loang bing lOmM Tris-HCl (pH: 8,2) chira 5% sucrose, khdng nguyen cpng hgp dupc gan len giay thiiy tinh sgi, de a nhiet dp phong qua dem cho kho.
- Gan ket cac thanh phan cua que chan doan: Khang the IgG khang rSAG2t (l,5mg/
ml), khang nguyen tai to hgp G-rSAG2t (0,5mg/ml), dugc phun len mang nitrocellulose (NC) bang may phan phoi Biojet 3050 quanti-dispenser. Sau khi mang NC dugc say kho trong tu say 50'^C trong 30 phut va dugc c6 dinh boi 0,5% casein trong 50mM d?m acid boric (pH 8,5) trong 30 phiit, rira bing 50mM Tris-HCl (pH 7,4) chiia 0,5% sucrose va 0,05% sodium cholate, mang NC dugc de 6f nhiet dp phong qua dem cho kho. Cuoi cung, mang NC (da dugc phim khang nguyen va khang the), dem hut (hap phu), d?m conjugated khang nguyen va dem mau dupc gan vao tam bia dinh chuyen dung va cit thanh timg que chan doan co chieu rpng 2-3mm bang may cat chuyen dung cua hang BioDot (Hinh duoi; Cau tnic que chan doan).
CAU TRUC QUE CHAN DOAN
Dim hut
• Ducmg d6i chiing Dudng t h l
Mtog Nitrocellulose D?m conjugate D ^ m &
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGH$ TINH T H O A THIEN HUE, 11/2012
KHOA HQC VA C 6 N G N G H $
Que chin dodn dupc cho vdo hgp dy'ug, dupc thilt kl de bdo v§ vd ti?n su dyng khi chin dodn b?nh.
Nguyen ly va cdch sir dimg que chdn dodn
Khi nhd huyet thanh (SOpl) dupc pha lodng vdi PBS theo ty 1? 1:2 len d?m mau qua vj tri tra mlu, huylt thanh s5 thIm vdo d?m mau va chuyen djch din d?m conjugate. Tgi d?m conjugate, khdng the (neu cd trong huylt thanh) s6 gin vdi khdng nguyen cgng hpp, phuc hpp khdng nguyen cpng hpp - khdng thl sd tilp t\ic tham theo mdng nitrocelluose va sd ket hpp vdi khdng nguyen dd dugc gdn d vj tri dudng thu ldm xult hi?n mdu hdng tim d dudng thu. Mdt khdc, khdng nguyen cpng hpp sd kit hpp vdi khdng the ddc hi?u dd dupc gdn sdn d dudng doi chung ldm xult hi?n mdu hong tim d dudng doi chung. Nlu xuat hi?n mau ddng thdi tgi dudng thu vd dudng doi chimg, phan ung dupc xem Id ducmg tinh; neu chi xuat hi?n mau d dudng ddi chumg thi phan ung dugc xem ta am tinh. Ket qua sd dupc xdc dinh trong vdng 15 phut.
Ddnh gid dp dgc hi^u vd dp nhgy cua que chan dodn
Chung tdi dd kiem tra dg ddc hieu cda que chan doan benh ky sinh trung Toxoplasma gondii tien 02 ddi tupng chugt va meo thdng qua viec kiem tra khang the trong huyet thanh. Dp nhay cda que chan doan dupc so sdnh vdi cac phuong phap ngimg ket (LAT:
Latex Agglutination Test), ELISA.
- Danh gia dp dac hieu cda que chan doan thdng qua kiem tia khang the trong huyet thanh cua chupt dupc gay nhiem bdi Toxoplasma gondii va Neospora caninum: Dd kiem tia dp dac hieu cua que chan doan chdng tdi dd sd dung que chan doan (san phain cua de tai) de kiem tra huyet thanh cua chudt sgch benh, khdng gay nhiem va cda cac nhdm chugt dugc gay nhiem bdi Toxoplasma gondii (cac chung Beverley, Gail, PLK, va S-273) va Neospora caninum. Tat ca huyet thanh tu chugt dupc gay nhiem mgt trong 4 chiing Toxoplasma gondii cho ket qua duong tinh. Rieng chupt dupc ga}»jihiem N. caninum va 10 chudt sach b?nh cho ket qua am tinh. Ket qua nay chi ra rdng que chin doan khdng nhimg chi cd kha ndng phat hien khdng the khang Igi ca 4 chung Toxoplasma gondii, mdc du khang nguyen cda nd dupc ma hda bdi gene tu chung RH, ma cdn cd the phan biet dupc Toxoplasma vdi Neospora. Ket qua nay ia rat quan trgng bpi vi mgt sd dgng v§t (nhu chd, trau bd, curu, va ngua) cd the bi nhiem mgt each tu nhien ddng thdi cd Toxoplasma gondii va Neospora canium.
- Danh gia do ddc hieu cda que chan doan thdng qua kiem tra khang the trong huyet thanh cda meo sgch benh va meo dugc gay nhiem bdi Toxoplasma gondii: Dp dac hieu cda que chan doan (san pham cua de tai) cung dupc danh gia bdng viec su dung que chan
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGH$ TINH T H C A THIEN HUfe, 11/2012
dodn de kiem tra huylt thanh cua mdo sgch b?nh (khdng dupc gay nhiem) vd meo dupc gay nhiem. Ket qud cho thay huylt thanh tu cdc con meo sach b?nh cung cho ket qua am tinh khi tim khdng the bdng que chan dodn. Ngugc Igi, huylt thanh thu tu mdo dupc gay nhiem sau 35-110 ngdy vdi Toxoplasma gondii chung Beverley d3 cho ket qua duong tinh.
- Ddnh gid dp nhgy cua que chan dodn thdng qua so sdnh kha ndng phdt hi?n khdng the d huylt thanh mdo bdng cac phuang phdp ngung kit (LAT-Latex Agglutination Test), ELISA vd su dyng que chan dodn: Chung tdi dd so sdnh kit qud phdt hi?n khdng the trong huylt thanh thu thgp tu 200 nico nudi tren dia bdn thdnh pho Hul bdng 3 phuang phdp: sic ky mien djch (ICT) su dyng que chan dodn cua dl tdi, ngung kit latex (LAT) vd r.LISA. Ket qua cho thay khi sd dyng que chan doan cd 45/200 mau cho ket qua duang tinh (22,5%), trong khi dd khi sd dyng LAT cd 37/200 mau cho kit qud duong tinh chiem (18,5%) va phucmg phap ELISA cho 39/200 mau ducmg tinh chiem (19.5%).
Nhu vgy dp nhgy cua que chan dodn Id cao nhat. tiep theo Id phuang phdp ELISA vd thap hon la LAT.
Sir dijng que chdn dodn nhanh nghien ciru linh hinh nhiem Toxoplasma gondii d meo vd lpn tren dja biin linh Thira Thien Hue
Chung tdi dd sd dyng que chan dodn (san pham cua dd tai) de nghien cim ddnh gia tinh hinh nhiem Toxoplasma gondii 6 meo va lpn tren dja ban tinh thdng qua vi?c kiem tra khang the trong huyet thanh.
- Ket qua kidm tra huyet thanh meo: kidm tra huyet thanh dupc thyc hi?n tren 2 nhdm mdo: meo nudi trong thdnh phd (100 con) va meo nudi d ndng thdn (100 con). Kdt qua nghien cuu cho thay ty 1? huyet thanh ducmg tinh vdi Toxoplasma gondii d meo rat cao (60%) va cd sy khdc bi?t r6 rang giua meo nudi d thanh pho (33%) vd meo nudi d ndng thdn (87%).
- Ket qua kilm tra huylt thanh lpn: Chung tdi dd tien hanh kiem tra huyet thanh cda 3 nhdm lpn, nhdm I: dupc nudi bdng thuc dn cdng nghi?p cho dn them rau xanh, thuc dn du thda cua ngudi vd nuoi trong chudng hd (100 con); nhdm 2: lpn nudi bdng thuc dn cdng nghi?p nhung chudng khdng cd ludi ngdn, meo cd the tiep xuc vdi lpn (50 con);
nhdm 3: lpn dupc nudi bdng thdc dn cdng nghi?p, chuong cd ludi ngdn de meo khdng tiep xuc dupc vdi lpn (50 con). Kit qua nghien cuu cho thiy ty 1? huylt thanh duong tinh vdi Toxoplasma gondii 6 lpn dao dpng td 10 din 63% va cd sy khac nhau ro r?t gida cac nhdm Ipn. d nhdm 1: c6 ty 1? duang tinh cao nhlt (63%); d nhdm 2: ty 1? duong tinh la 46%; 6 nhdm 3: ty 1^ ducmg tinh Id 10%. Kdt qua tren chi ra rdng dan lpn nghien cdu d
BAN TIN KHOA HQC VA C 6 N G N G H $ TINH THUA THI^N HUfe, 11/2012
KHOA HQC VA CONG NGH$
tinh Thira Thien Hul cd ty 1? nhidm Toxopla.sma gondii kha cao, trung binh 38.66%, nhung noi mdo cd thl tilp xuc vdi Ipn de ddng thi ty I? lpn nhiem Toxoplasma gondii cao hon. Ket qua ndy cung dd chi rd moi lien quan quan trgng gida mdo vd lpn trong dich te cua b?nh do Toxoplasnia gondii gay ra. Ket qua trong nghien cuu nay cua chung tdi tuong ty vdi bao cao ciia mgt sd tdc gia khac tren the gidi.
4. Tinh m61, tinh sang tao, hi?u qud \k kha ndng dp dung cua cong trinh Tinh mdi cda cong Irinh nghien cuu
- Nhdm tdc gia da img dyng cdng ngh? sinh hpc - mpt cdng ngh? mdi, hi?n dgi, tien tiln de phuc vy san xult va ddi song. C\i the dd img dyng ky thuat gene cloning vao trong ITnh vyc thd y: nghien cuu, san xuat khdng nguyen tai to hpp SAG2 la nguyen li?u quan trgng de san xuat khang the ddc hieu va san xuat thanh cdng que chan dodn nhanh benh k\' sinh trung do Toxoplasma gondii gay ra.
- San pham que chan doan nhanh b?nh ky sinh trdng Toxoplasma gondii dugc san xuat dya tren nguyen ly cda phuang phap sdc ky mien dich, cho phep phat hien khang the trong huyet thanh va cac dich sinh hpc. Day la mpt phuang phap cho phep chan doan nhanh, cd do nhay va tinh dac hieu cao, chi phi chan doan thap, khdng can sd dyng thiet bi dat tien, khdng can ky thuat vidn cd trinh do cao ma van chan doan dupc va cd the chan doan ngay d bat ky dieu kien nao, ke ca d vung sau, vung xa va trong dieu kien d chudng trgi.
- Nhdm tac gia va ddng tdc gia da nghien ctm san xuat va sd dung que chan doan (san pham cua de tai) de chan doan nhanh benh do Toxoplasma gondii gay ra d lpn va meo tren dia ban tinh Thua Thien Hue. Cac ket qua nghien cuu tren dia ban Thira Thien Hue da dupc xuat ban (Tap chi Khoa hpc Dgi hpc Hue - sd 66 nam 2009. ir 149-155) la co sd thyc tien ve tinh hinh nhiem benh ky sinh trung Toxoplasma gondii tren gia sue d Thira Thien Hue de cac nha chuyen mdn, cac nha quan ly, cac co quan cd chdc ndng cd cac chiln lupc phu hpp de bao ve sdc khde cpng ddng va bao dam an toan vd sinh thuc phlm.
Tinh sdng Igo cda cong Irinh
- Nhdm tac gia va ddng tac gia da dng dyng ky thuat gene cloning va tinh ddc hieu cda khang nguyen va khang the de nghien cdu, san xuat thanh cdng khang nguyen tdi td hpp SAG2 va que chan doan benh ky sinh trdng Toxoplasma gondii phu hpp vdi dilu kien cy the cda Viet Nam.
- Kit qua cua cdng trinh nghien cuu va san pham que chin doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii ta kel qua cua qua trinh lao dpng sang tao, lau dai va nhdng tran trd dua khoa hgc va cdng nghe, dac biet la cdng ngh? cao vao phyc vu san xult va bao ve sue khde ngudi chan nudi va cdng ddng.
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGH$ TINH THUA THIEN HUE, 11/2012
De tai nghien cdu cd tinh khoa hpc va tinh dng dyng cao. ddng thdi ket qua nghien cdu md ra kha nang mdi cd tinh kha thi cao trong viec ung dung cdng nghe cao nghien cim san xuat ra cdc che pham sinh hpc phyc vu san xuat va ddi sdng, gdp phan nang cao hieu qua san xuat, bao ve sue khde ngudi va vat nudi phu hop vdi dieu kien cy the cua Viet Nam.
Hieu qud cua cong trinh nghien ciru Hieu qud kinh te
- Vdi ket qua nghien cim cua de tai cho phep chdng ta cd the chd dpng trong viec san xuat que chan doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii thay thd hang nhap ngoai gia thanh cao.
- Kdt qua nghien cdu cda cdng trinh neu dupc dp dyng rdng rai vao san xuat va ddi sdng sd gdp phan giam chi phi cho viec chan doan benh ky sinh trung Toxoplasma gondii (vi san phlm san xult ra cd gia thanh thap), gdp phan nang cao hieu qua kinh te.
- Vide su dung que chan doan cho phep chan doan nhanh, chu dpng trong viec phdng va tri benh cho ngudi va gia sue se ban che anh hudng cda benh len dan gia sdc giup giam thieu thiet hgi ve kinh te, va dgc biet la ddng gdp vao viec bao dam an toan vd sinh thyc pham va bao ve sdc khde cho cdng ddng,
Hieu qud ky ihugt
Nghien cdu san xuat thanh cdng que chan doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii dua tren co sd img dung cdng nghe cao [ky thuat tao ddng (gene cloning), ky thuat san xuat khang nguyen tdi td hpp (cdng nghd protein) va nguyen Iy cua phuang phap sac ky mien dich da khang dinh sy lam chu vd cdng nghe cua nhom can bd nghien cuu va nang cao kha nang nghien cdu san xuat cac KIT chan doan va che pham sinh hgc phyc vy san xuat va ddi sdng.
- Phucmg phap chan doan benh ky sinh trung Toxoplasma gondii bang que chan dodn cd nhieu uu the han cac phuang phap trudc day. Chang hgn, phuang phap ELISA va phuang phap PCR, thudng mat nhieu thdi gian, cdng sue, bat budc phai cd thiet bi chuyen dung mdi cd the thyc hien dupc nen chi tien hanh dupc trong dieu kien phdng thi nghidm, trong khi do ddng que chan doan cho phep chan doan nhanh, cd do nhay va tinh dgc hieu cao, it tdn kem, khdng can su dyng thiet bi dat tien. khdng can ky thuat vien trinh dp cao ma van cd the chan doan chinh xac benh d trong hoac ngoai phdng thi nghiem, d vdng sau vdng xa va tham chi d trong chudng tiai.
Hieu qud xa hpi
- Sd dyng que chan doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii gidp viec chan
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGHE TINH THUA THIEN HUE, 11/2012
KHOA HQC vA CONG NGH^
dodn b?nh trd nen nhanh, dan gidn, tilt kipm va chinh xdc, gidm ap lyc cho cdc ky thuat vien. bdc s^.
- Vdi sdn pham que chin dodn nhanh b?nh ky sinh trdng Toxoplasma gondii cho phep chd dgng va tdng cudng kha ndng chan dodn bpnh, dam bdo an toan ve sinh thyc phlm.
- De tai dd tao dieu ki?n cho hgc vien cao hpc, sinh vien thyc tap tdt nghipp chuyen ngdnh chdn nudi thd y vd thd y cua Khoa Chdn nudi Thu y, Trudng Dgi hpc Ndng Lam, Dgi hgc Hue tham gia, vi vgy dd phyc vy die lyc va cd hi?u qud cho vi?c ddo tgo.
Khd ndng dp dung
- Quy trinh san xuat que chan doan nhanh b?nh ky sinh trung Toxoplasma gondii (san pham cua cdng trinh) cd the dupc chuyen giao cho cac doanh nghipp khoa hgc de san xuat que chan dodn nhanh b?nh ky sinh trung Toxoplasma gondii. Vdi quy trinh nay cd the sd dyng cdc nguyen vgi li?u, hda chll sdn cd hodc cd the mua dupc tren thj trudng va de dang san xult thdnh cdng san pham que chan dodn cd dp nhgy va linh ddc hi?u cao vdi gid thanh thap hem nhieu so vdi san pham cung logi nhap khau.
- Que chan doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii (san pham cua cdng trinh) cd the dugc su dyng rpng rai d tinh Thira Thien Hue va cac dia phuang trong toan qudc de chan doan nhanh benh ky sinh trung Toxoplasma gondii. Trong thuc le de tai dd sd dyng de danh gia tinh hinh nhiem benh ky sinh trdng Toxoplasma gondii d tren dan lpn va meo nudi d linh Thua Thien Hue va dua ra cac khuyen cao cho dia phucmg.
PGS.TS. Dinh Thj Bich Lan (Dgi didn cac tdc gia va ddng lac gia)
BAN TIN KHOA HQC VA CONG NGHf TINH THUA THIEN HUE, 11/2012
