Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai penentuan senyawa bioaktif ekstrak daun tembakau asal Temanggung yang memiliki aktivitas antibakteri paling optimum.
DAFTAR PUSTAKA
Abdullah A dan Soedarmanto. 1982. Budidaya Tembakau. Jakarta: CV Yasaguna.
Andersen RA, Fleming PD, Burton HR, Hamilton-Kemp TR, Sutton TG. 1991. J Agric Food Chem 39:1280.
Baldwin IT. 1989. Mechanism of damage induces alkaloid production in wild tobacco. J Chem. Ecol 20: 2139-2157.
Berdy J. 2005. Bioactive Microbial Metabolites. J Antibiotics Research Association 58(1): 1-26. Beuchat LR. 1994. Antimicrobial Properties of Species and Theirs Essential Oils. Di dalam Naidu AS
(ed). 2000. Natural Foods Antimicrobial Systems. CRC Press. USA. Blanch GP, Tabera J, Herraiz M, Reglero G. 1993. J Chromatograph 628:261.
Brooks GF, Janet SB, Stephen AM. 2001. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta: Salemba Medika. Brunnemann KD, Hofmann D. 1991. Rec Adv Tob Sci 17:71.
Cahyono B. 1998. Tembakau, Budidaya dan Analisis Tani. Yogyakarta: Kanisius. Cai JB, Liu BZ, Ling P, Su QD. 2002. J Chromatogr. A 947: 267-275.
Chomnawang MT, Surassno S, Nukoolkarn VS, and Gristanapan W. 2005. Antimicrobial effects of Thai medicinal plants against acneinducing bacteria. Jethnopharmacol 101: 330-333.
Cowan MM. 1999. Plant products as antimicrobial agents. Clinical Microbiology Reviews 12: 564– 82.
DerMarderosian A. 2001. The review of natural products 2nd ed. facts and comparison. Missouri. Halaman 554-555.
[Deptan]. 2011. http://www.litbang.deptan.go.id/varietas. [1 Februari 2011]
Evans WC. 1996. Trease and evans pharmacognosy 14th ed. wb saunders company Ltd. London. Halaman 251.
Fardiaz F. 1987. Mikrobiologi pangan jilid 1. Bogor: PAU.
Fathiazad F, Delazar A, Amiri R, Sarker SD. 2006. Extraction of flavonoids and quantification of rutin from waste tobacco leaves. Iranian Journal of Pharmaceutical Research 3:222-227.
Goodspread TH. 1954. The genus nicotiana, origins, relationships and evolution of its species in the light of their distribution, morphology and cytogenetics. USA: Waltham Mass.
Grinberg LN, Rachmilewitz EA, Newmark H. 1994. Protective effects of rutin against hemoglobin oxidation. Biochem Pharmacol 48:643-649.
Gunta YZ, Baynove CL, Baumes RL, Cordonnier RE. 1985. J. Chromatogr, 331: 83-90.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Edisi kedua. Penerjemah; Padmawinata K dan Soediro J, Niksolihin editor. Bandung: ITB. Terjemahan dari: Phytochemical methods.
Harborne JB. 1993. Phytochemistry. London: Academic Press.
Hastari DW. 2009. Struktur pendapatan usahatani tembakau Temanggung sistem rotasi dengan jagung dan kacang tanah: kasus di Desa Wonotirto kecamatan Bulu, Kabupaten Temanggung, Jawa
Kim KR, Zlatkis A, Park JW, Lee VC. 1982. Chromatographia 15:5590
Kusumaningjati F. 2009. Potensi antibakteri kitosan sebagai pengawet tahu [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Li Y, Pang T, Guo Z, Li Y, Wang X, Deng J, Zhong K, Li X, Xu G. 2010. Accelerated solvent extraction for GC-based tobacco fingerprint and its comparison with simultaneous distillation and extraction. Journal Talanta 81: 650-656.
Machado PA, Fu H, Kratochivl RJ, Yuan Y, Hahm TS, Sabliov CM, Wei CI, lo YM. 2010. Recovery of solanesol from tobacco as a value added byproduct for alternative applications. J Bioresources Technology 101: 1091-1096.
Man J. 1987. Secondary Metabolism (2nded). England: Oxford Clerendon Press. Merck. 8thedition. 1986. Paul G. Stecher (ed). USA: Merck & Co., Inc. Rahway. N. J.
Middleton E, Chitan K. 1994. The impact of plant flavonoids on mammalian biology: Implication for immunity, inflammation dan cancer. Di dalam: Harborne JB (ed) The Flavonoids. Chapman and Hall. London.
Miller LP. 1973. Phytochemistry organic metabolites van nostrand and reinbold company. New York 2: 382-384.
Misuzaki S, Tanabe Y, Roguchi M, Tamaki E. 1973. Changes in the activities of ornithin decarboxylase, putrescine n-methyltransferase and n-methylputrescine oxidase in tobacco roots in relation to nicotine biosynthesis. J Plant Cell Physiol 14:103-110.
Naidu AS. 2000. Natural Food Antimicrobial Systems. USA: CRC Press.
Nugroho LH, Peltenburg-Looman AMG, de Vos H, Verberne MC, Verpoorte R. 2002. Nicotine and related alkaloids accumulation in constitutive salycyclic acid producing tobacco plants. J Plant Science 162: 575-581.
Nychas GJE. 1995. Natural antimicrobial from plants. Di dalam: Gould GW (eds) Newmethods of food preservation. London: Blackie Academic and professional.
Palic R, Stojanovic G, Alagic S, Nikolic M, Lepojevic Z. 2002. Chemical Composition and Antimicrobial Activity of The Essential Oil and CO2 Extracts of Semi-orientl Tobacco, Prilep. Flavour Fragr J. 17:323-326.
Parwata IMOA, Dewi PFS. 2008. Isolasi dan uji aktivitas antibakteri minyak atsiri dari rimpang lengkuas (Alpinia galanga L.). Jurnal Kimia 2(2): 100-104.
Pelczar MJ dan Chan ECS. 1998. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI Pr.
Pang F, Sheng L, Liu B, Tong H, Liu S. 2004. Comparison of Different Extraction Methods: Steam Distillation, Simlutaneous Distillation and Extraction and Headspace Co-distillation, Used for the Analysis of the Volatile Components in Aged Flue Cured Tobacco Leaves. J Chromatogr. A 1040: 1-17.
Podlejski J, Olejniczak W. 1983. methods and techniques in research of tobacco flavour. Nahrung 27. 5:429-436.
Puspita PE, Purnamasari RA, Manurung AJ. 2010. Aplikasi antiseptik tembakau. Program Kreativitas Mahasiswa Bidang Penelitian. DIKTI.
Roselius W, Vitzhum O, Hubert P. 1979. US Patent, 4, 153, 063.
Sambantham P. 1985. Analgesic activity of certain bioflavonoids. Indian J Pharm Sci 47: 230-231. Shen J, Shao X. 2006. Determination of tobacco alkaloids by Gas Chromatographhy-Mass
Spectrometry using cloud point extraction as a preconcentration step. J Analytica Chimica Acta 561: 83-87.
Stanisavljevic I, Velickovic DT, Todorovic ZB, Lazic ML, Velkjovic VB. 2009. Comparison of techniques for the extraction of tobacco seed oil. Eur. J. Lipid Sci. Technol 111:513-518.
Stojanovic G, Palic R, Alagic S, Zekovic Z. 2000. Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oil and co2extracts of Semi-oriental Tobacco, Oltja. Flavour Fragr J. 15:335-338. Susilowati EY. 2006. Identifikasi nikotin dari daun tembakau kering dan uji efektivitas ekstrak daun
tembakau (Nicotiana tabacum) sebagai insektisida penggerek batang padi (Scirpophaga innonata). Skripsi. Universitas Negeri Semarang.
Teissser PJ. 1994. Chemistry of Fragment Substance. VHC Publ Inc. New York.
Todar K. 2004. Structure and Fuction of Prokarytic Cells. Todar’s Online Textbook of Bacteriology. Wisconsin-Madison.
Voight R. 1995. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi V. Diterjemahkan oleh Soendani Noerono. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Wax GR, Lewis K, Salyer AA, Taber H. 2008. Bacterial Resistance to Antimicrobials Second Edition. London. CRC Press. New York.
Wilson RA, Mookherjee BD, Vinals JF. 1982. A Comparative Analysis of The Volatile Constituents of Virginia, Burley, Turkeys, and Black Tobaccos. Plenary Lecture. Kansas.
Winarno FG. 2002. Kimia Pangan dan Gizi. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Wink M. 1998. A short history of alkaloids. Di dalam: Alkaloids: Biochemistry, ecology and medicinal applications. M.F. Roberts, & M. Wink, eds. Plenum. New York.
Wu ZM, Weeks WW, Long RC. 1992. J Agric Food Chem 40:1917.
Xin Z, Jinren N, Wen H. 2006. Extraction of Solanesol from Tobacco with Supercritical Carbon Dioxide. Fine Chem 23:480-501.
Yaqin HU, Jibao CAI, Xiaolan ZHU, Yun GAO, Qingde SU. 2006. Two-Step Simultaneous Distillation and Solvent Extraction for Isolation Both Free and Bound Aroma in Tobacco. J. Animali di Chimica, 96:1-8.
Lampiran 1. Prosedur pengukuran kadar air
Lampiran 2. Kadar air daun tembakau sampel A dan B
Ulangan Kadar Air (%)
Sampel A Sampel B
1 12.34 10.33
2 12.27 10.55
3 12.50 11.18
Rerata 12.37 10.69
Wadah sampelDiukur bobotnya (a) Sampel tembakau
serbuk(b)
Dikeringkan dalam oven 105˚C, 24 jam
Diukur bobot akhirnya (c)
Bobot stabil
tidak
ya
Lampiran 3. Prosedur ekstraksi daun tembakau dengan metode soxletasi
Lampiran 4. Rendemen hasil soxletasi daun tembakau sampel A dan B
Sampel Bobot awal
(g)
Bobot akhir
(g)
Rendemen
(%)
A 50.00 46.25 22.2
B 50.00 44.25 14.42
Sampel tembakau serbuk (10 g)
Ditambahkan etanol (100 ml)
Soxletasi 90 min, 4 refluks
Lampiran 5. Prosedur pengujian alkaloid
Lampiran 6. Prosedur pengujian flavonoid
Sampel tembakau serbuk (1 g) Ditambahkan 5 ml kloroform, NH4OH, H2SO4 Ditambahkan pereaksi Meyer Ditambahkan pereaksi Wagner Ditambahkan pereaksi Dragendrof Terbentuk endapan putih Terbentuk warna coklat Terbentuk warna jingga
Sampel tembakau serbuk (0.1 g)
Ditambahkan 1 ml metanol
dididihkan
Ditambahkan H2SO4
Lampiran 7. Prosedur pengujian steroid dan terpenoid
Sampel tembakau serbuk (0.1g)
Ditambahkan 5 ml metanol
dididihkan
Ditambahkan eter dan pereaksi Liebermen
Dikocok
Terbentuk warna merah menunjukkan adanya
terpenoid Terbentuk warna hijau
menunjukkan adanya steroid
Lampiran 8. Prosedur pembuatan media NA
Lampiran 9. Prosedur pembuatan media LB
Media NA (2 gram) dan 100 mL air
Dipanaskan pada suhu 70°C, 30 menit dan diaduk dengan magnetik stirer
Sterilisasi dengan autoklaf 121°C, 15 menit
Dituang ke dalam labu Erlenmeyer dan disumbat dengan kapas
NaCl (0.5 g), yeast extract (1.25), tripton (0.5 g), 1 liter aquadest
Dipanaskan pada suhu 70°C, 30 menit dan diaduk dengan magnetik stirer
Sterilisasi dengan autoklaf 121°C, 15 menit
Dituang ke dalam labu Erlenmeyer dan disumbat dengan kapas
Lampiran 10. Prosedur peremajaan bakteri
S. aureus
Diinokulasi ke dalam labu Erlemeyer berisi larutan LB 10 ml
Dituang ke dalam labu Erlenmeyer dan disumbat dengan kapas
Inkubasi dalam shaker bergoyang 18 jam, 37°C, 200 rpm
E. coli
Dituang ke dalam labu Erlenmeyer dan disumbat dengan kapas Diinokulasi ke dalam labu Erlemeyer
Lampiran 11. Prosedur uji aktivitas antibakteri Stok bakteri Sampel berupa: 1) Ekstrak (20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%) 2) DMSO 3) Tetrasiklin (10%)
Media NA berisi bakteri dituangkan ke cawan Petri Peremajaan bakteri ke
media LB
24 jam, 37°C, 200 rpm
Inokulasi remajaan bakteri ke media NA
Pembentukan sumur berdiameter 0.5 cm
Inkubasi selama 24 jam, suhu 37°C Pengukuran diameter zona bening
Lampiran 11. Prosedur uji aktivitas antibakteri
Stok bakteri Sampel berupa: 1) Ekstrak (20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%) 2) DMSO 3) Tetrasiklin (10%)
Media NA berisi bakteri dituangkan ke cawan Petri Peremajaan bakteri ke
media LB
24 jam, 37°C, 200 rpm
Inokulasi remajaan bakteri ke media NA
Pembentukan sumur berdiameter 0.5 cm
Inkubasi selama 24 jam, suhu 37°C Pengukuran diameter zona bening
Lampiran 11. Prosedur uji aktivitas antibakteri
Stok bakteri Sampel berupa: 1) Ekstrak (20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%) 2) DMSO 3) Tetrasiklin (10%)
Media NA berisi bakteri dituangkan ke cawan Petri Peremajaan bakteri ke
media LB
24 jam, 37°C, 200 rpm
Inokulasi remajaan bakteri ke media NA
Pembentukan sumur berdiameter 0.5 cm
Inkubasi selama 24 jam, suhu 37°C Pengukuran diameter zona bening
Lampiran 12. Diameter zona hambat (mm) ekstrak etanol daun tembakau sampel A terhadap bakteri S. aureus
Ulangan
Kontrol Konsentrasi
Tetrasiklin
(10%) DMSO 20% 40% 60% 80% 100%
1 29 0 4 6 6 7 7
2 30 0 4 6 6 7 7
Rerata 29.5 0 4 6 6 7 7
Lampiran 13. Diameter zona hambat (mm) ekstrak etnol daun tembakau sampel A terhadap bakteri E. coli