DAFTAR PUSTAKA
TOTAL HARI
KE STADIA ppm ppm ppm ppm ppm ppm ppm/hari 1 N6 0.5 0.5 1 2 Z1 1.5 1 2.5 3 Z1-2 2.5 2 4.5 4 Z2 3 2.5 5.5 5 Z3 4 3 7 6 ZM 6 4 10 7 M1 6.5 4.5 11 8 M2 7 6 13 9 M3 7 4 4 15 10 MPL 8 8 16 11 PL1 8 8.5 16.5 12 PL2 9 9 18 13 PL3 4 6 9.5 19.5 14 PL4 11 10.5 21.5 15 PL5 11.5 5 6.5 23 16 PL6 12 5 7.5 24.5 17 PL7 8 7.5 10.5 26 18 PL8 8 9.5 13.5 31 19 PL9 8 11.5 13.5 33 20 PL10 8 11.5 14.5 34
42
Lampiran 4. Tingkat kelangsungan hidup (%) stadia larva udang vaname stadia Z2-PL1 (Litopenaeus vannamei) Stadia Perlakuan Ulangan Z2 Z3 M1 M2 M3 PL1 1 100.00 77.00 72.00 70.00 65.00 65.00 2 100.00 75.00 70.00 67.00 63.00 63.00 3 100.00 73.00 69.00 69.00 64.00 64.00 A rataan 100±0.00a 75.00±2.00b 70.33±1.53c 68.67±1.53c 64.00±1.00d 64.00±1.00d 1 100.00 76.00 72.00 72.00 72.00 72.00 2 100.00 71.00 69.00 69.00 69.00 69.00 3 100.00 70.00 68.00 66.00 66.00 66.00 B rataan 100±0.00a 72.33±3.21b 69.67±2.08c 69.00±3.00c 69.00±3.00c 69.00±3.00c 1 100.00 82.00 78.00 78.00 78.00 78.00 2 100.00 89.00 89.00 89.00 86.00 86.00 3 100.00 89.00 82.00 82.00 82.00 82.00 C rataan 100±0.00a 86.67±4.04a 83.00±5.57a 83.00±5.57a 82.00±4.00a 82.00±4.00a 1 100.00 77.00 76.00 76.00 76.00 76.00 2 100.00 74.00 74.00 74.00 74.00 74.00 3 100.00 87.00 80.00 80.00 80.00 80.00 D rataan 100±0.00a 79.33±6.81ab 76.67±3.06b 76.67±3.06b 76.67±3.06b 76.67±3.06b 1 100.00 77.00 76.00 76.00 74.00 74.00 2 100.00 80.00 76.00 74.00 74.00 74.00 3 100.00 81.00 77.00 74.00 73.00 73.00 E rataan 100±0.00a 79.33±2.08ab 76.33±0.58b 74.67±1.15bc 73.67±0.58bc 73.67±0.58bc
Lampiran 5. Intermolt periode (hari) setiap stadia larva udang vaname (Litopenaeus vannamei) STADIA PERLAKUAN ULANGAN Z2 Z3 M1 M2 M3 PL1 1 1.00 2.71 4.58 6.17 7.81 9.03 2 1.00 2.70 4.57 6.00 7.64 8.76 3 1.00 2.74 4.61 6.15 7.98 9.00 A 1.00±0.00a 2.71±0.02b 4.59±0.02c 6.11±0.09c 7.81±0.17c 8.93±0.15c 1 1.00 2.80 4.89 6.12 7.82 9.03 2 1.00 2.78 4.82 6.11 7.79 8.93 3 1.01 2.75 4.86 6.20 7.82 9.11 B 1.00±0.01a 2.78±0.03b 4.86±0.04d 6.14±0.05c 7.81±0.02c 9.02±0.09c 1 1.00 2.57 4.33 5.55 7.14 8.47 2 1.01 2.62 4.33 5.57 7.05 8.43 3 1.00 2.57 4.22 5.47 6.94 8.38 C 1.00±0.01a 2.59±0.03a 4.29±0.06a 5.53±0.05a 7.04±0.10a 8.43±0.05a 1 1.00 2.72 4.46 5.78 6.98 8.41 2 1.02 2.75 4.54 5.88 7.11 8.49 3 1.00 2.68 4.40 5.67 7.11 8.48 D 1.01±0.01a 2.72±0.04b 4.47±0.07b 5.77±0.11b 7.07±0.07a 8.46±0.04a 1 1.00 2.75 4.65 5.84 7.37 8.66 2 1.00 2.69 4.54 5.91 7.35 8.68 3 1.00 2.77 4.67 5.97 7.34 8.58 E 1.00±0.00a 2.74±0.04b 4.62±0.07c 5.91±0.06b 7.35±0.02b 8.64±0.05b
Lampiran 6. Kandungan asam lemak rotifer, Artemia dan larva udang vaname (% berat kering)
n-3 HUFA SAMPEL Kode LEMAK SATU
RATED MUFA PUFA LA LNA AA EPA DHA DHA/
EPA 20:3n3 20:4n-3 EPA 22:5n-3 DHA ∑N-3 HUFA RO 8.29 2.81 3.13 2.35 0.37 0.03 0.33 0.22 0.00 0.00 0.00 0.08 0.22 0.18 0.00 0.48 RB 19.9 10.85 5.87 3.18 0.94 0.05 0.28 0.32 0.05 0.16 0.01 0.06 0.32 0.10 0.05 0.55 RC 17.86 7.62 4.49 6.03 0.60 0.05 0.38 0.61 2.45 4.02 0.01 0.10 0.61 0.28 2.45 3.45 RD 19.27 5.94 4.67 8.93 0.46 0.05 0.54 0.90 4.52 5.04 0.01 0.13 0.90 0.32 4.52 5.87 ROTI F E RA RE 22.77 5.39 4.70 12.31 0.47 0.06 0.67 1.18 7.15 6.06 0.02 0.17 1.18 0.21 7.15 8.72 NAUPLI N 11.67 4.90 3.26 4.63 0.36 0.10 0.89 0.72 1.14 1.59 0.02 0.01 0.72 0.11 1.14 2.01 PAZ3 10.48 4.29 2.13 3.90 0.85 0.06 0.49 0.90 0.87 0.97 0.02 0.07 0.90 0.06 0.87 1.91 PBZ3 10.03 4.40 1.93 3.68 0.87 0.09 0.69 0.70 0.87 1.24 0.01 0.05 0.70 0.08 0.87 1.71 PCZ3 11.57 4.43 2.46 4.29 1.01 0.08 0.70 0.72 0.87 1.21 0.07 0.05 0.72 0.09 0.87 1.80 PDZ3 9.27 4.43 2.00 3.00 0.76 0.06 0.43 0.78 0.95 1.22 0.03 0.05 0.78 0.06 0.95 1.87 ZO EA PEZ3 11.11 4.49 2.03 3.91 0.91 0.06 0.25 0.80 1.01 1.26 0.02 0.06 0.80 0.06 1.01 1.95 PAM2 8.84 3.72 2.42 2.71 0.36 0.03 0.45 0.70 0.78 1.11 0.04 0.01 0.70 0.19 0.78 1.72 PBM2 10.30 4.49 1.97 3.34 0.76 0.06 0.60 0.80 1.05 1.31 0.05 0.02 0.80 0.19 1.05 2.11 PCM2 8.56 3.28 2.08 3.45 0.54 0.04 0.37 0.85 1.15 1.35 0.05 0.02 0.85 0.14 1.15 2.20 PDM2 10.06 3.65 2.12 3.64 0.63 0.04 0.45 0.93 1.49 1.61 0.02 0.06 0.93 0.18 1.49 2.66 MY SI S PEM2 10.10 4.12 2.29 3.87 0.62 0.06 0.46 0.90 1.59 1.77 0.06 0.01 0.90 0.19 1.59 2.74 PAL1 5.41 2.61 0.92 1.84 0.38 0.03 0.16 0.89 0.57 0.64 0.01 0.01 0.89 0.02 0.57 1.49 PBL1 8.62 3.49 2.32 2.94 0.53 0.05 0.35 0.80 0.84 1.05 0.01 0.03 0.80 0.12 0.84 1.79 PCL1 7.14 2.81 1.70 3.06 0.35 0.03 0.33 0.90 1.22 1.36 0.01 0.03 0.90 0.07 1.22 2.22 PDL1 11.84 4.89 2.99 4.10 0.71 0.07 0.52 1.14 1.66 1.46 0.01 0.05 1.14 0.12 1.66 2.97 PL 1 PEL1 12.94 5.40 3.30 4.31 0.70 0.06 0.54 1.12 1.96 1.75 0.01 0.06 1.12 0.14 1.96 3.29 A0 13.16 3.88 3.86 5.42 0.93 2.20 0.06 0.07 0.00 0.00 0.30 0.27 0.07 0.00 0.00 0.64 ArA 13.39 3.93 3.42 6.04 0.89 2.81 0.02 0.17 0.07 0.38 0.32 0.28 0.17 0.00 0.07 0.83 ArB 17.55 6.22 4.74 6.58 1.19 1.77 0.13 0.50 1.06 2.12 0.38 0.32 0.50 0.04 1.06 2.30 ArC 17.55 5.39 4.14 8.02 1.01 2.35 0.18 0.65 2.08 3.20 0.32 0.27 0.65 0.06 2.08 3.38 AR TE M IA ArD 16.24 4.67 3.83 7.14 0.87 1.37 0.23 0.70 2.47 3.53 0.28 0.25 0.70 0.10 2.47 3.80 PAL5 19.03 7.94 4.55 6.55 1.30 2.63 0.00 0.71 0.88 1.25 0.42 0.20 0.71 0.05 0.88 2.25 PBL5 15.33 5.73 3.52 6.08 0.97 2.09 0.32 0.98 1.31 1.34 0.40 0.20 0.98 0.04 1.31 2.93 PCL5 19.04 5.94 5.05 7.92 1.24 2.50 0.32 1.02 1.49 1.46 0.40 0.20 1.02 0.08 1.49 3.18 PL 5 PDL5 19.71 7.04 4.31 8.37 1.13 2.30 0.30 0.98 1.57 1.61 0.41 0.18 0.98 0.09 1.57 3.22 PAL10 7.53 2.63 1.66 3.23 0.58 0.79 0.18 0.54 0.64 1.19 0.17 0.08 0.54 0.05 0.64 1.47 PBL10 8.34 3.06 1.87 3.41 0.66 0.74 0.21 0.65 0.79 1.22 0.15 0.06 0.65 0.05 0.79 1.70 PCL10 7.99 2.96 1.65 3.38 0.53 0.74 0.25 0.63 0.92 1.46 0.18 0.07 0.63 0.05 0.92 1.84 PL 1 0 PDL10 8.53 3.01 1.92 3.60 0.60 0.79 0.25 0.65 0.96 1.48 0.18 0.07 0.65 0.04 0.96 1.90
Stadia Perlakuan Ulangan PL1 PL2 PL3 PL4 PL5 PL6 PL7 PL8 PL9 PL10 1 100.00 96.00 95.00 93.00 86.00 83.00 80.00 79.00 79.00 79.00 2 100.00 98.00 95.00 91.00 88.00 85.00 82.00 82.00 82.00 82.00 3 100.00 98.00 95.00 90.00 84.00 82.00 81.00 80.00 80.00 80.00 A rerata 100±0.00a 97.33±1.15a 95±0.00ab 91.33±1.53b 86±2.00c 83.33±1.53c 81±1.00d 80.33±1.53d 80.33±1.53d 80.33±1.53d 1 100.00 99.00 99.00 96.00 96.00 95.00 95.00 95.00 95.00 95.00 2 100.00 96.00 96.00 95.00 94.00 94.00 94.00 94.00 94.00 94.00 3 100.00 98.00 98.00 98.00 97.00 97.00 97.00 97.00 97.00 97.00 B rerata 100±a 97.67±1.53a 96.67±1.53a 96.33±1.53a 95.67±1.53a 95.33±1.53a 95.33±1.53a 95.33±1.53a 95.33±1.53a 95.33±1.53a 1 100.00 96.00 94.00 91.00 90.00 90.00 90.00 90.00 90.00 90.00 2 100.00 95.00 95.00 94.00 93.00 93.00 93.00 92.00 92.00 92.00 3 100.00 99.00 99.00 95.00 94.00 94.00 94.00 94.00 94.00 94.00 C rerata 100±0.00a 96.67±2.08a 96±2.65ab 93.33±2.08ab 92.33±2.08b 92.33±2.08a 92.33±2.08b 92±2.00b 92±2.00b 92±2.00b 1 100.00 98.00 95.00 93.00 90.00 90.00 89.00 89.00 89.00 89.00 2 100.00 96.00 93.00 90.00 89.00 88.00 87.00 87.00 87.00 87.00 3 100.00 94.00 93.00 90.00 88.00 88.00 88.00 88.00 88.00 88.00 D rerata 100±0.00a 96±2.00a 93.67±1.15b 91±1.73b 89±1.00c 88.67±1.15b 88±1.00c 88±1.00c 88±1.00c 88±1.00c
46
Lampiran 8. Prosedur Pengukuran Kadar Lemak
Kadar lemak dianalisis menggunakan metode ekstraksi dengan ethyl ether dengan prosedur sebagai berikut :
a. Cawan labu dipanaskan dalam oven (suhu 105-110ºC) selama 1 jam, didinginkan dalam eksikator selama 10 menit dan ditimbang (X1)
b. Bahan ditimbang sebanyak 5 gram (a) dan dibungkus dengan kertas filter. c. Selongsong kertas filter berisi bahan dimasukkan ke dalam soxlet dan diberi
pemberat diatasnya.
d. Ambil petroleum benzena sebanyak 150 ml. Masukkan ke dalam soxlet sampai kertas saring terendam dan sisa petroleum benzena dimasukkan ke dalam cawan labu.
e. Panaskan cawan labu yang dihubungkan dengan soxlet di atas water bath samapi cairan dalam soxlet terlihat bening.
f. Lepaskan cawan dari soxlet dan tetap dipanaskan di atas water bath untuk menguapkan semua petroleum benzena dari cawan labu.
g. Cawan labu dipanaskan dalam oven pada suhu 105-110ºC selama 15 menit – 1 jam, kemudian didinginkan dalam eksikator selama 10 menit dan ditimbang. h. Ulangi prosedur (g) sampai diperoleh berat yang stabil (X2)
Kadar lemak yang diperoleh dengan persamaan sebagai berikut :
Kadar lemak(%) =( 1 2)x100%
a X X −
Lampiran 9. Prosedur Pengukuran Kadar Asam Lemak (Metode AOCS-AOAC)
Lemak hasil ekstraksi 25 mg dimasukkan ke dalam tabung reaksi 20 ml dan ditambahkan 2 ml NaOH 0.5 M, kemudian dipanaskan hingga larut selama 5 menit pada suhu 100ºC. Setelah didinginkan tambahkan 2 ml BF3 dan aduk hingga merata dengan stearer, kemudian panaskan selama 30 menit pada suhu 100ºC. Dinginkan sampai suhu 30-40ºC dan tambahkan 1 ml isooktan kemudian diaduk hingga merata dengan stearer selama 30 detik. Kemudian tambahkan 5ml NaCl dan aduk hingga merata. Setelah terbentuk dua lapisan cairan yang terpisah, ambil bagian atasnya dan pindahkan ke test tube yang lain. Injeksikan 1-2 µL ke dalam mesin Gas Crhomatography.
Asam lemak metil ester kemudian dianalisis dengan menggunakan Gas Liquid Chromatografi (Shimadzu, GCMS 17A) yang dilengkapi dengan kolom kapiler silica (30m x 0.25mm x 0.25µm film thickness; J & W Scientific, USA). Gas helium digunakan sebagai karier dengan tekanan 100 kPa. Temperatur pada kolom, tempat injeksi dan detector ditetapkan pada suhu 205, 250 dan 250ºC. Selanjutnya asam lemak metil ester diidentifikasi dengan cara membandingkan dengan standar.
48
Lampiran 10. Hasil analisa statistik tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname (Litopenaeus vannamei) stadia Z3-PL1
Lampiran 10.1. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia Z3 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 355.067 4 88.767 5.457 .014
Within Groups 162.667 10 16.267 Total 517.733 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 B 3 72.3333 A 3 75.0000 D 3 79.3333 79.3333 E 3 79.3333 79.3333 C 3 86.6667 Sig. .075 .059
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 10.2. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia M1 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 355.733 4 88.933 9.394 .002
Within Groups 94.667 10 9.467 Total 450.400 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 B 3 69.6667 A 3 70.3333 E 3 76.3333 D 3 76.6667 C 3 83.0000 Sig. .796 .897 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 10.3. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia M2 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 423.600 4 105.900 9.991 .002
Within Groups 106.000 10 10.600 Total 529.600 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 A 3 68.6667 B 3 69.0000 E 3 74.6667 74.6667 D 3 76.6667 C 3 83.0000 Sig. .056 .469 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 10.4. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia M3 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 575.600 4 143.900 20.173 .000
Within Groups 71.333 10 7.133 Total 646.933 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 64.0000 B 3 69.0000 E 3 73.6667 73.6667 D 3 76.6667 C 3 82.0000 Sig. 1.000 .058 .199 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
50
Lampiran 10.5. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL1 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 575.600 4 143.900 20.173 .000
Within Groups 71.333 10 7.133 Total 646.933 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 64.0000 B 3 69.0000 E 3 73.6667 73.6667 D 3 76.6667 C 3 82.0000 Sig. 1.000 .058 .199 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Lampiran 11. Analisis statistik intermolt period setiap stadia larva vaname (Litopenaeus vannamei)
Lampiran 11.1. Intermolt period larva udang vaname stadia Z2 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .000 4 .000 .583 .682
Within Groups .000 10 .000 Total .000 14
Duncan
Perlakuan N Subset for alpha = .05 1 A 3 1.0000 E 3 1.0000 B 3 1.0033 C 3 1.0033 D 3 1.0067 Sig. .261
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 11.2. Intermolt period larva udang vaname stadia Z3
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .061 4 .015 15.719 .000
Within Groups .010 10 .001 Total .071 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 C 3 2.5867 A 3 2.7167 D 3 2.7167 E 3 2.7367 B 3 2.7767 Sig. 1.000 .053
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
52
Lampiran 11.3. Intermolt period larva udang vaname stadia M1 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .516 4 .129 41.532 .000
Within Groups .031 10 .003 Total .547 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 C 3 4.2933 D 3 4.4667 A 3 4.5867 E 3 4.6200 B 3 4.8567 Sig. 1.000 1.000 .481 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 11.4. Intermolt period larva vaname stadia M2
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .761 4 .190 32.670 .000
Within Groups .058 10 .006 Total .820 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 C 3 5.5300 D 3 5.7767 E 3 5.9067 A 3 6.1067 B 3 6.1433 Sig. 1.000 .064 .569
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 11.5. Intermolt period larva udang vaname stadia M3 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.726 4 .431 47.836 .000
Within Groups .090 10 .009 Total 1.816 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 C 3 7.0433 D 3 7.0667 E 3 7.3533 A 3 7.8100 B 3 7.8100 Sig. .770 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 11.6 Intermolt period larva udang vaname stadia PL1 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups .880 4 .220 29.913 .000
Within Groups .074 10 .007 Total .953 14
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 C 3 8.4267 D 3 8.4600 E 3 8.6400 A 3 8.9300 B 3 9.0233 Sig. .644 1.000 .212
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
54
Lampiran 12. Hasil analisa statistik tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname (Litopenaeus vannamei) stadia PL1-PL10
Lampiran 12.1. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL2 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 4.917 3 1.639 .546 .664 Within Groups 24.000 8 3.000
Total 28.917 11
Duncan
Perlakuan N Subset for alpha = .05 1 D 3 96.0000 C 3 96.6667 A 3 97.3333 B 3 97.6667 Sig. .299
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 12.2. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL3 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 25.583 3 8.528 3.198 .084
Within Groups 21.333 8 2.667 Total 46.917 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 D 3 93.6667 A 3 95.0000 95.0000 C 3 96.0000 96.0000 B 3 97.6667 Sig. .132 .091
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 12.3. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL4 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 54.000 3 18.000 6.000 .019
Within Groups 24.000 8 3.000 Total 78.000 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 D 3 91.0000 A 3 91.3333 C 3 93.3333 93.3333 B 3 96.3333 Sig. .152 .067
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 12.4. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL5 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 156.917 3 52.306 17.933 .001
Within Groups 23.333 8 2.917 Total 180.250 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 A 3 86.0000 D 3 89.0000 C 3 92.3333 B 3 95.6667 Sig. .064 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
56
Lampiran 12.5. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL6 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 240.250 3 80.083 31.000 .000
Within Groups 20.667 8 2.583 Total 260.917 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 A 3 83.3333 D 3 88.6667 C 3 92.3333 B 3 95.3333 Sig. 1.000 1.000 .052 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 12.6. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL7 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 348.333 3 116.111 53.590 .000
Within Groups 17.333 8 2.167 Total 365.667 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 81.0000 D 3 88.0000 C 3 92.3333 B 3 95.3333 Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Lampiran 12.7. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL8 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 375.583 3 125.194 51.805 .000
Within Groups 19.333 8 2.417 Total 394.917 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 80.3333 D 3 88.0000 C 3 92.0000 B 3 95.3333 Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000.
Lampiran 12.8. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL9 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 375.583 3 125.194 51.805 .000
Within Groups 19.333 8 2.417 Total 394.917 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 80.3333 D 3 88.0000 C 3 92.0000 B 3 95.3333 Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
58
Lampiran 12.9. Tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname stadia PL10 ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 375.583 3 125.194 51.805 .000
Within Groups 19.333 8 2.417 Total 394.917 11
Duncan
Subset for alpha = .05 Perlakuan N 1 2 3 4 A 3 80.3333 D 3 88.0000 C 3 92.0000 B 3 95.3333 Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
Latar Belakang
Udang vaname (Litopenaeus vannamei) dewasa ini merupakan salah satu komoditas andalan dalam sektor perikanan. Udang vaname di Indonesia mulai berkembang sejak tahun 2001 dan semakin meningkat dalam beberapa tahun terakhir ini karena teknis budidayanya yang lebih mudah dibandingkan dengan udang windu, ketersediaan benur SPF (Specific Pathogen Free) dan produktivitas yang tinggi. Hatchery sebagai salah satu penghasil benih udang telah berkembang dengan baik. Untuk memenuhi kebutuhan benih, hatchery harus mampu meningkatkan tingkat kelangsungan hidup udang sehingga ketersediaan benih ukuran PL cukup banyak. Tersedianya benih yang cukup dalam jumlah maupun kualitas merupakan faktor utama yang menentukan keberhasilan budidaya udang. Benih yang berkualitas baik akan memberikan pertumbuhan yang baik dan tingkat kelangsungan hidup yang tinggi .
Perkembangan hatchery udang yang semakin meningkat dengan padat pemeliharaan larva yang tinggi, menjadikan kualitas pakan sebagai faktor yang sangat penting karena udang mendapatkan nutrien dari pakan tersebut. Meskipun berbagai macam kendala seperti faktor lingkungan, penyakit dan nutrisi, tetapi produksinya yang bernilai tinggi terus naik setiap tahun (Shiau 1998). Salah satu masalah penting dalam budidaya udang vaname adalah kurangnya informasi tentang kebutuhan nutrien udang terutama selama stadia larva (Navvaro et al. 1996). Produktivitas dari upaya pembenihan harus tinggi, dengan kondisi postlarva yang sehat dan tahan terhadap stress. Tingkat produktivitas tersebut ditentukan oleh mutu induk, kualitas lingkungan dan pakan. Kualitas lingkungan harus diupayakan layak, khususnya pengaturan salinitas agar tetap isoosmotik bagi kehidupan larva dan postlarva. Induk dan kualitas lingkungan telah dapat diupayakan layak dan potensial untuk menghasilkan larva, sedangkan pakan bagi larva dan awal postlarva masih menjadi kendala. Berbagai upaya untuk memperbaiki kualitas pakan telah dilakukan, antara lain dengan pemberian pakan alami seperti Chaetoceros, Skeletonema, Artemia dan rotifer (Brachionus rotundiformis).
Pada saat pertama kali larva makan perlu diperhatikan jenis dan ukuran partikel pakan yang dapat dicerna. Tersedianya pakan yang sesuai dengan ukuran bukaan mulut merupakan salah satu aspek penting untuk larva krustasea
2
yang baru menetas dengan sedikit atau tidak adanya cadangan kuning telur. Pakan yang tersedia untuk larva harus memenuhi tiga kriteria, yaitu ukuran yang sesuai sehingga memudahkan untuk menangkap dan mengkonsumsi, harus selalu tersedia dalam jumlah yang mencukupi, dan mengandung nutrien pakan yang esensial (Suprayudi et al. 2002b). Asam lemak merupakan salah satu komponen penting dalam pakan yang mempengaruhi pertumbuhan dan kelangsungan hidup larva udang.
Brachionus rotundiformis dan Artemia merupakan pakan alami yang cocok diberikan pada pemeliharaan larva udang, karena selain memiliki ukuran tubuh yang kecil juga memiliki nilai nutrisi yang cukup baik. Namun dari beberapa hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan asam lemak n-3 HUFA, terutama asam-asam lemak 20:5n-3 (EPA, eicosapentaenoic acid) dan 22:6n-3 (DHA, decosahexaenoic acid) dari rotifer dan Artemia sangat rendah (Sargent et al. 1997, 1999; Han et al 2000; Sorgeloos et al. 2001 Suprayudi et al. 2002a). Padahal EPA dan DHA merupakan asam lemak tidak jenuh berantai panjang yang berperan penting dalam menunjang tingkat kelangsungan hidup dan pertumbuhan larva krustasea (D’Abramo & Sheen 1993; Kanazawa 1997). Hasil dari penelitian sebelumnya menyebutkan bahwa Artemia tidak dapat secara efektif memperpanjang EPA menjadi DHA (Watanabe et al. 1978) dan rotifer tampaknya juga mempunyai kemampuan terbatas untuk memperpanjang EPA (Whyte & Nagata 1990).
Oleh karena itu, untuk mengatasi masa kritis yang terjadi pada perubahan fase zoea dan mysis diperlukan perbaikan kualitas nutrien pada rotifer dan Artemia dengan cara meningkatkan kandungan asam lemak esensialnya melalui pengkayaan dengan DHA sehingga mampu meningkatkan tingkat kelangsungan hidup dan mempercepat intermolt period.
Perumusan Masalah
Kendala yang dihadapi dalam budidaya udang vaname adalah produktivitas yang masih rendah dan belum sesuai dengan harapan. Produktivitas yang rendah tersebut berkenaan dengan kematian yang cukup tinggi pada saat stadia zoea menjadi mysis. Lama waktu perkembangan proses metamorfosis antara zoea menjadi mysis dan mysis menjadi postlarva terlalu lama yang akhirnya diikuti oleh kematian. Tingkat kelangsungan hidup udang vaname di hatchery masih berkisar antara 30-50%.
Produksi benur udang vaname rendah karena terjadi hambatan pada proses metamorfosis sehubungan dengan pasokan asam lemak tak jenuh yang tidak memadai. Kecepatan proses metamorfosis pada kondisi isoosmotik tidak diimbangi oleh ketersediaan pasokan pakan yang mengandung energi atau asam lemak tak jenuh yang memadai untuk mengimbangi kecepatan proses metamorfosis. Untuk mengatasi masalah tersebut perlu diupayakan pasokan pakan yang mengandung asam lemak tak jenuh pada saat stadia zoea menjelang mysis dan pada saat mysis menjadi post larva. Untuk kebutuhan tersebut kiranya rotifer dan naupli Artemia dapat memenuhi syarat untuk diperkaya dengan asam lemak tak jenuh sehingga potensial menunjang proses metamorfosis menjadi postlarva.
Dengan pendekatan di atas maka diperoleh kerangka konseptual yang jelas dan mendasar bagaimana rotifer dan Artemia yang diperkaya dengan DHA mempengaruhi kecepatan intermolt period dan tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname.
Tujuan dan Manfaat
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh rotifer (B. rotundiformis) dan naupli Artemia yang telah diperkaya dengan DHA 70G terhadap tingkat kelangsungan hidup dan intermolt period larva udang vaname (Litopenaeus vannamei).
Manfaat dari percobaan ini adalah dapat memberikan informasi yang dapat diaplikasikan di hatchery mengenai kadar DHA 70G yang harus diberikan melalui teknik pengkayaan kepada rotifer (B. rotundiformis) dan naupli Artemia untuk diberikan pada larva vaname sehingga dapat meningkatkan tingkat kelangsungan hidup dan mempercepat intermolt period larva udang vaname (Litopenaeus vannamei).
Perumusan Hipotesis
Apabila rotifer (B. rotundiformis) dan naupli Artemia dapat diperkaya dengan DHA 70G sebagai sumber pasokan nutrien larva maka lama waktu metamorfosis dan atau molting dapat dipercepat sehingga tingkat kelangsungan hidup dari setiap stadia larva dan atau post larva dapat meningkat.
TINJAUAN PUSTAKA
Perkembangan Larva Udang Vaname
Jenis Stadia dan Lama Waktu Perkembangan Stadia
Setelah fertilisasi, telur menetas sekitar 14-16 jam dan udang vaname mengalami tiga stadia perkembangan larva sebelum menjadi post larva, yaitu naupli, zoea dan mysis. Masing-masing stadia dalam perkembangannya mengalami metamorfosis. Dalam perkembangan dari stadia ke stadia lainnya diikuti pula dengan perubahan pola makannya. Setelah 30 menit menetas, naupli dapat berenang dalam jarak yang pendek dan bersifat fototaksis positif. Naupli yang baru menetas mengandalkan kuning telur untuk mensuplai semua kebutuhan nutrisinya. Naupli mengalami perubahan sebanyak lima kali, dan setiap perubahan terjadi dalam waktu 7 jam. Setelah perubahan tersebut cadangan kuning telurnya habis dan naupli mengalami metamorfosis menjadi zoea, diikuti dengan pola makannya yang mulai memakan mikroalge, seperti
Chaetoceros dan Skeletonema. Menurut Sweeney & Wyban (1991) stadia zoea 1 (Z1) dan zoea 2 (Z2) masing-masing akan berkembang dalam selang waktu 2 hari, sedangkan zoea 3 (Z3) akan berkembang menjadi mysis 1 (M1) dalam waktu 1 hari. Setelah tiga kali berubah, zoea mengalami metamorfosis menjadi mysis, dan terjadi perubahan pola makan dari herbivora menjadi karnivora, atau mulai memakan zooplankton, seperti rotifer dan naupli Artemia (Elovaara 2001). Setelah mengalami perubahan tiga kali mysis yang bersifat plankonik berubah menjadi postlarva. Postlarva sudah terlihat seperti udang dewasa, dan sudah bersifat bentik .
Kecepatan molting pada stadia zoea dipengaruhi oleh kondisi kultur. Di bawah kondisi kultur yang optimum, zoea berubah melalui 3 substadia (Z1-Z3) selama 5 hari (36 jam setiap stadia). Pada stadia Z1 mata tidak kelihatan, namun pada akhir stadia ini sudah terlihat. Tubuhnya ramping dan tidak dilindungi oleh karapas, telsonnya sudah berkembang dengan baik dan kelihatan seperti ekor yang bercabang.
Z1 mengalami perubahan menjadi Z2 dalam waktu 30-40 jam, dan pada stadia Z2 ini mata dan rostrum sudah terlihat jelas. Rostrumnya terletak pada ujung anterior karapas dan panjangnya setengah dari karapas. Karapas pada Z2 memiliki sepasang duri (supra-orbital spine) diatas matanya. Z2 mengalami
perubahan menjadi Z3 dalam waktu 30-40 jam, ditandai dengan berkembangnya uropod pada ujung posterior. Setelah stadia Z3 lengkap, larva berubah menjadi mysis. Bentuk tubuhnya secara umum hampir sama dengan udang dewasa. Di bawah kondisi yang optimum, tiga substadia mysis dicapai dalam waktu 3 hari (24 jam per stadia). Zoea cenderung berenang dipermukaan air, tetapi mysis mulai berenang di bagian kolom air. Mysis berada dalam kolom air dengan posisi kepala dibawah dan ekor ke arah atas ke permukaan air.
Tingkat Kelangsungan Hidup dan Masa Kritis Perkembangan Larva
Pertumbuhan dan tingkat kelangsungan hidup merupakan indikator keberhasilan pemeliharaan larva (Bransden MP et al. 2005). Oleh karena itu dalam pemeliharaan larva dan post larva udang perlu ditunjang oleh kualitas larva yang baik. Persentase tingkat kelangsungan hidup yang mencapai stadia zoea, atau keberhasilan bermetamorphosis dari naupli menjadi zoea merupakan salah satu kriteria kualitas larva udang vaname. Morfologi larva, seperti panjang naupli, zoea dan mysis tidak berhubungan dengan tingkat kelangsungan hidup larva udang vaname (Racotta et al. 2004).
Stadia zoea dan mysis adalah fase pertumbuhan cepat, dan merupakan waktu yang sangat kritis karena pada saat itu larva udang sangat rentan dan sering terjadi tingkat kematian yang tinggi. Dengan pola pemeliharaan secara tradisional di bak outdoor menggunakan teknik yang sederhana, air yang tidak diberi perlakuan, kepadatan tebar yang rendah dan bak pemeliharaan yang kecil diperoleh tingkat kelangsungan hidup larva vaname sekitar 50%, sedangkan metode pemeliharaan yang intensif dengan padat tebar tinggi dengan kondisi lingkungan pemeliharaan yang terkontrol dapat mencapai tingkat kelangsungan hidup 70-80% (Elovaara 2001).
Naupli dengan cadangan nutrien tinggi memiliki kemungkinan untuk bertahan hidup selama bermetamorphosis menjadi zoea dan selama stadia zoea dan mysis terjadi adaptasi fisiologis dengan makanan yang berasal dari luar (Lovvet & Felder 1990). Larva udang biasanya mengkonsumsi pakan hidup dan meskipun masih stadia protozoea, beberapa spesies dapat mencerna zooplankton berukuran kecil seperti rotifer atau naupli Artemia (Yufera et al. 1984; Kurmaly et al. 1989; Jones et al. 1997).
6
Pemanfaatan Pakan Alami
Rotifer
Sampai saat ini pakan alami masih merupakan pakan utama untuk larva ikan laut dan krustasea yang belum dapat digantikan kualitas nutriennya secara lengkap oleh pakan buatan (Sorgeloos et al. 2001; Suprayudi et al. 2004). Rotifer telah lama dan secara luas digunakan sebagai pakan alami untuk larva ikan laut dan krustasea yang baru menetas karena ukurannya sesuai dengan bukaan mulut larva, teknologi produksi massalnya sudah dikuasai dan terus dikembangkan (Sorgeloos 1998), memiliki kecepatan renang rendah, hidup melayang dalam air sehingga mudah ditangkap oleh larva (Waynarovich & Horvath 1980), serta dapat dilakukan pengkayaan dengan asam lemak tak jenuh rantai panjang sehingga zat-zat tersebut mudah ditransfer ke dalam tubuh larva (Sargent et al. 1989; Dhert et al. 2001)
Rotifer merupakan zooplankton yang dapat dimanfaatkan sebagai pakan alami udang vaname dan telah lama dikembangkan. Salah satu rotifer laut yang telah dikembangkan dewasa ini adalah Brachionus rotundiformis yang biasa disebut sebagai rotifer tipe-S, yang memiliki panjang lorika 100-210 μm (rerata 160 μm) (Sorgeloos 1996). Watanabe (1998) menyatakan bahwa rotifer merupakan pakan alami yang paling cocok bagi larva ikan laut yang baru menetas karena kebutuhan akan protein sebesar 40-60% dan lemak sebesar 13-16% dapat dipenuhi.
Profil asam lemak pada rotifer sangat menentukan kualitas rotifer, dan umumnya ditunjukkan oleh kandungan n-3 HUFA (highly unsaturated fatty acids) serta perbandingan antara kandungan EPA (eicosapentaenoic acid, 20:5n-3) dan DHA (docosahexaenoic acid, 22:6n-3). Rotifer mempunyai kemampuan untuk mensintesa beberapa jenis n-3 HUFA dari rantai karbon 18 (C-18) asam lemak tak jenuh n-3, akan tetapi laju sintesanya sangat rendah sehingga tidak dapat memenuhi kebutuhan larva ikan laut dan krustasea pada fase pertumbuhan yang sangat cepat (Kanazawa et al. 1979; Kayama et al. 1980). Rendahnya kandungan n-3 HUFA terutama EPA dan DHA, membuat kualitas nutrien rotifer sangat rendah (Watanabe 1993) padahal sangat dibutuhkan untuk kelangsungan hidup dan keberhasilan perkembangan larva (Sargent et al. 1997, 1999). Oleh karena itu pengkayaan rotifer dengan n-3 HUFA merupakan proses yang penting dalam menentukan keberhasilan pada budidaya ikan laut (Dhert et
al. 2001). Suprayudi (2003) menyatakan bahwa asam lemak esensial dari rotifer ditentukan oleh jenis bahan pengkaya, lama waktu pengkayaan dan macam zat pengkaya. Hasil percobaan Fernandez-Reiriz et al. (1993) membuktikan bahwa kandungan gizi rotifer dapat ditingkatkan dengan memperkaya asam lemak n-3 melalui teknik pengkayaan.
Artemia
Artemia biasa digunakan sebagai pakan alami untuk larva ikan laut dan krustasea, tetapi naupli Artemia mengandung n-3 HUFA, terutama EPA dan DHA yang sangat rendah (Han et al. 2000; Suprayudi et al. 2002). Dengan keuntungan dari karakteristik cara makan naupli Artemia, dimungkinkan untuk meningkatkan nilai nutriennya yang kekurangan n-3 HUFA. Ketika berubah