DAUN (Eurema spp. dan Spodoptera litura F.)
WIDA DARWIATI
Tesis
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains pada
Program Studi Silvikultur Tropika
SEKOLAH PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
(Eurema spp. dan Spodopteralitura F.) Nama : Wida Darwiati
NIM : E451070134
Disetujui : Komisi Pembimbing
Prof. Dr. Ir. I.G. K. Tapa Darma, M.Sc. Ir. Kasno, M.Sc K e t u a Anggota
Diketahui :
Ketua Program Studi Dekan Sekolah Pascasarjana Mayor Silvikultur Tropika
Prof. Dr. Ir. I.G. K. Tapa Darma, M.Sc Prof. Dr. Ir. Khairil A. Notodiputro, M.S.
Puji dan syukur Penulis panjatkan ke hadirat Allah S.W.T. atas segala karunia-Nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Januari 2009 ini ialah ” Uji Efikasi Ekstrak Tanaman Suren ( Toona sinensis Merr.) Sebagai Insektisida Nabati Dalam Pengendalian Hama Daun (Eurema spp. dan Spodoptera litura F).
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih dan penghargaan yang setinggi-tingginya kepada Bapak Prof. Dr. Ir. I.G.K. Tapa Darma selaku ketua komisi pembimbing dan Bapak Ir. Kasno M.Sc selaku anggota komisi pembimbing atas segala bimbingan dan pengarahan sejak rencana penelitian, persiapan penelitian, pelaksanaan penelitian sampai dengan penulisan tesis.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Dekan Sekolah Pascasarjana IPB beserta staf, Fakultas Kehutanan , khususnya Departemen Silvikultur beserta staf pengajar yang telah memberikan pelayanan akademik selama penulis belajar di IPB.
Kepada Kepala Badan Litbang Kehutanan dan Kepla Pusat Litbang Hutan Tanaman yang telah memberikan kesempatan bagi penulis untuk melanjutkan sekolah melalui Program Research School, serta Sdr. Linda Mardia Sari Mhs Fahutan IPB angkatan 40 yang telah membantu selama penelitian dilaboratorium, penulis sampaikan terima kasih yang sebanyak-banyaknya. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada Bapak, Mamie, Suami (Dede Sofyan) dan anak-anak (Hisyam dan Hasna) serta seluruh keluarga, atas segala doa, dorongan moril dan kasih sayangnya.
Akhirnya, kepada Yang Maha Kuasalah penulis berserah diri dan bertawakkal untuk mendapat ridho-Nya.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor, Agustus 2009
Penulis dilahirkan di Bogor pada tanggal 9 November 1964 dari ayah Ir. Jusuf Prawirasumantri dan Ibu Dra. Hayati. Penulis merupakan putri kedua dari tiga bersaudara. Tahun 1984 penulis lulus dari SMA Negeri 1 Bogor dan pada tahun yang sama masuk di Fakultas MIPA Jurusan Biologi Universitas Pakuan Bogor dan lulus pada tahun 1992. Pada tahun 1995 penulis bekerja sebagai honorer di Pusat Litbang Hutan dan Konservasi Alam pada kelompok peneliti Perlindungan Hutan . Baru pada tahun 2000 diangkat sebagai PNS di Instansi yang sama dengan jabatan peneliti pertama bidang perlindungan hutan. Pada tahun 2005 sampai sekarang penulis dipindahkan ke Pusat Penelitian dan Pengembangan Hutan Tanaman dengan jabatan Peneliti Muda di Bidang Perlindungan Hutan, khususnya hama hutan dan pada tahun 2007 penulis mendapat kesempatan melanjutkan pendidikan pada Program Silvikultur Hutan Tropika, Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor (IPB).
Halaman DAFTAR TABEL... xiv DAFTAR GAMBAR... xvi DAFTAR LAMPIRAN... xvii I. PENDAHULUAN... 1 1.1. Latar Belakang ... 1 1.2. Perumusan Masalah ... 3 1.3. Tujuan Penelitian ... 3 1.4. Manfaat Penelitian ... 4 1.5. Hipotesis ... 4 II. TINJAUAN PUSTAKA ... 5 2.I. Insektisida Botani ... 5 2.2. Ekstraksi ... 6 2.3. Senyawa Bioaktif ... 6 2.4. Geografi dan Morfologi T. sinensis Merr... 8 III. BAHAN DAN METODE ... 10 3.1. Waktu dan Tempat ... 10 3.2. Bahan dan Alat ... 10 3.3. Metodologi Penelitian ... 10 3.3.1. Penyiapan Serbuk ... 11 3.3.2. Ekstraksi ... 11 3.3.3. Uji Efikasi ... 13 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 18 4.1. Pengaruh Fraksi Methanol terhdp mortalitas Eurema spp... 18 4.2. Pengaruh Fraksi n-heksan terhdp mortalitas Eurema spp……... 22 4.3. Pengaruh Fraksi Etyl asetat terhdp mortalitas Eurema spp……... 24 4.4. Pengaruh Fraksi Methanol terhdp mortalitas S. litura ……… 26 4.5. Pengaruh Fraksi n-heksan terhdp mortalitas S. litura ……… 29
V. SIMPULAN DAN SARAN ... 38 5.1. Simpulan ... 38 5.2. Saran ... 38 DAFTAR PUSTAKA……….. 39 LAMPIRAN ………... 43
Halaman
1 Pengaruh letal fraksi Methanol dari berbagai bagian tanaman
T.sinensis Merr terhadap larva Eurema spp...... 19 2 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi Methanol
dari berbagai bagian tanaman T. sinensis Merr terhadap
larva Eurema spp... 20 3 Pengaruh letal fraksi n-heksan dari berbagai bagian tanaman
T. Sinensis Merr terhadap larva Eurema spp... 22 4 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi n-Heksan dari
berbagai bagian tanaman T. sinensis Merr terhadap
larva Eurema spp…………... 24 5 Pengaruh letal fraksi Etyl Asetat dari berbagai bagian tanaman
T. sinensis Merr terhadap larva Eurema spp………….. 24 6 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi Etyl Asetat
dari berbagai bagian tanaman T. sinensis Merr terhadap
larva Eurema spp…………... 26
7 Pengaruh letal fraksi Methanol dari berbagai bagian tanaman
T. sinensis Merr terhadap larva Spodoptera litura F... 27 8 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi Methanol
dari berbagai bagian tanaman T. sinensis Merr terhadap
larva Spodoptera litura F... 28 9 Pengaruh letal fraksi n - heksan berbagai bagian tanaman
T. sinesnis Merr. terhadap larva Spodopteralitura F... 30 10 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi
n-heksan dari berbagai tanaman T. sinensis Merr.
terhadap larva S. litura F………... 31 11 Pengaruh letal fraksi etyl asetat dari berbagai bagian tanaman
12 Parameter hubungan konsentrasi mortalitas fraksi etyl asetat dari berbagai bagian tanaman T. sinensis Merr terhadap
larva Spodoptera litura F... 34 13 Jumlah senyawa aktif yang terdapat pada fraksinasi... 37
Halaman
1 Metode Sokslet ... 12 2 Rotary Vaccum Evaporator ... 12
3 Skematis Pembuatan Ekstraksi... 13
4a Daun Suren . ... 15 4b Kulit Batang Suren ... 15
4c Ranting Suren ... 15 4d Biji Suren ... 15
5 Sampel Ekstraksi ... 16
6 Hama Eurema spp ... 16 7 Hama Spodoptera litura F. ... 16
8 Uji Efikasi di Laboratorium ... 17 9 Gejala kematian dari ekstrak suren ... 37 10 Gejala kematian larva... 37
Halaman
Hasil analisis GCMS bahan aktif dari tiap
fraksi ekstrak suren... 45 1 Fraksi Etyl asetat untuk ekstrak biji suren ... 45 2 Fraksi Etyl asetat untuk ekstrak kulit batang suren... 45 3 Fraksi Etyl asetat untuk ekstrak daun suren... 46 4 Fraksi Etyl asetat untuk ekstrak ranting suren... 47 5 Fraksi n – heksan untuk ekstrak biji suren... 48 6 Fraksi n – heksan untuk ekstrak kulit batang suren... 48 7 Fraksi n – heksan untuk ekstrak daun suren... 49 8 Fraksi n – heksan untuk ekstrak ranting suren... 50 9 Fraksi methanol untuk ekstrak biji suren... 51 10 Fraksi methanol untuk ekstrak kulit batang suren... 52 11 Fraksi methanol untuk ekstrak daun suren... 52 12 Fraksi methanol untuk ekstrak ranting suren... 53
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang
Hutan sebagai karunia dan amanah Allah SWT yang dianugerahkan kepada bangsa Indonesia, merupakan kekayaan yang dikuasai oleh negara. Hutan yang dapat memberikan manfaat serba guna bagi umat manusia, wajib disyukuri, diurus dan dimanfaatkan secara optimal serta dijaga kelestariannya untuk sebesar-besarnya kemakmuran rakyat generasi sekarang maupun generasi berikutnya secara berkesinambungan. Di Indonesia tumbuh sekitar 30.000 – 40.000 jenis tumbuhan yang menyebar di seluruh kepulauan, dari jumlah tersebut terdapat tidak kurang dari 1.100 species tumbuhan yang dapat digunakan sebagai tumbuhan obat (Heyne 1987). Menurut Fransworth (1985) dalam Zuhud et al. (1994) menyatakan bahwa 74% dari 121 bahan aktif obat modern di USA berasal dari pengetahuan obat tradisional yang berasal dari tumbuhan hujan tropika, hal ini menunjukkan bahwa hutan tropika Indonesia sangat potensial mengandung berbagai senyawa bioaktif yaitu senyawa yang dalam kadar kecil dapat mempengaruhi fungsi fisiologi sel hidup. Dalam ekstrak tumbuhan selain beberapa senyawa aktif utama biasanya terdapat juga senyawa lain yang kurang aktif. Serangga tidak mudah menjadi resisten terhadap ekstrak tumbuhan dengan beberapa bahan aktif, karena kemampuan serangga untuk membentuk sistem pertahanan terhadap beberapa senyawa yang berbeda relatif lebih kecil dibanding terhadap senyawa insektisida tunggal (Prijono 1999).
Di China, tanaman tingkat tinggi telah banyak digunakan sebagai bahan insektisida sejak 2000 tahun yang lalu (Shang 1996). Bahan tanaman diketahui kaya akan senyawa kimia, kandungan senyawa sekunder tanaman seperti flavanoid, terpenoid dan alkaloid diketahui sebagai senyawa yang melindungi tanaman dari serangan hama dan penyakit tumbuhan. Penelitian kandungan bioaktif tanaman telah membuktikan bahwa beberapa kandungan kimia berpengaruh buruk pada serangga dan mengakibatkan perubahan perilaku seperti penghambatan makan (antifeedant) dan gangguan fisiologi serangga seperti sterilan, menghambat pertumbuhan, menghambat pembentukan khitin, bersifat racun yang mematikan (Dadang 1998).
Dalam pengendalian hama dengan menggunakan kandungan bahan alami tanaman, perlu memperhatikan beberapa aspek, diantaranya (1) Kandungan potensi bahan aktif telah diketahui kegunaannya untuk aplikasi pengendalian hama secara langsung maupun dalam bentuk yang telah disintetik, (2) Menciptakan tanaman resisten dengan rekayasa genetik oleh gen yang berperan dalam aktivitas biologi (Dadang 1998). Beberapa bahan alami mempunyai karakteristik penting dalam persaingannya dengan kimia sintetik dalam pertanian/perkebunan/kehutanan. Senyawa kimia yang berasal dari tanaman merupakan sumber yang kaya akan keragaman struktural. Beberapa bahan tanaman insektisida telah digunakan sebagai senyawa induk untuk dibuat sintetiknya. Salah satunya adalah piretroid (piretrin) merupakan sintetik dari ekstrak bunga Chrysanthemun cinerariaefolium (Benner 1993).
Penggunaan insektisida sintetik dalam pengendalian hama memiliki beberapa keunggulan, diantaranya dapat mengendalikan hama sasaran dengan cepat. Selain memiliki keuntungan, penggunaan insektisida sintetik juga dapat menimbulkan dampak negatif diantaranya dapat menyebabkan resistensi dan resurjensi hama, terbunuhnya musuh alami hama, ledakan hama sekunder, pencemaran lingkungan, serta bahaya residu bagi konsumen (Kishi et al.1995). Dampak negatif insektisida sintetik memicu reaksi balik masyrakat yang pada akhirnya memunculkan sikap keraguan terhadap insektisida sintetik. Keraguan tersebut menyebabkan orang mencari cara atau sarana pengendalian alternatif yang lebih aman. Cara pengendalian alternatif yang dikembangkan diharapkan dapat mengatasi atau setidaknya mengurangi permasalahan penggunaan insektisida sintetik dan dapat digunakan oleh pengelola hutan dengan mudah. Berkaitan dengan persyaratan tersebut, pemanfaatan metabolit sekunder tumbuhan berkhasiat insektisida merupakan salah satu alternatif yang dapat diupayakan (Isman et al.1997).
Insektisida botani kurang resisten dibandingkan dengan insektisida sintetik sehingga tidak menimbulkan banyak residu, mudah terurai di alam, aman dalam penggunaan di lapang maupun bagi musuh alami dan tidak menimbulkan resurgensi bagi hama tanaman (Prijono 1999). Insektisida botani yang diketahui mempunyai potensi besar untuk dikembangkan sebagai pengendali serangga hama dari kelompok Meliaceae, Rutaceae, Asteraceae, Annonaceae, Labiatae, Malvaceae, Zingiberaceae dan Solanaceaea (Jacobson 1989; Schmuttere 1992 dalam Chapman and Hill 1997, Dadang 1999). Jumlah
bahan alami yang memiliki efek insektisida yang telah diisolasi dari anggota tumbuhan Meliaceae meningkat secara dramatis dalam dekade terakhir ini. Umumnya penelitian kimia tumbuhan menghasilkan senyawa aktif yang banyak difokuskan pada genera Melia dan Azadirachta, sedangkan jenis lain yang masih kurang diupayakan adalah pada genus
Trichilia, Toona dan Aglaia (Isman et al. 1995).
Diantara kelompok tanaman Meliaceae lain seperti Azadirachta indica, Aglaia odorata dan Swietenia mahogany, Toona sinensis juga berpotensi sebagai pengendali hama, banyak kandungan terpenoid yang diisolasi dari famili Meliaceae yang dapat menghambat aktivitas makan serangga, seperti cedrelobne, aphanin dan toosendanin yang masing-masing diisolasi dari Cedrella odorata, Aphanamixis sinensis dan Melia toosendan (Dadang 1998). Suren dilaporkan memiliki kandungan bahan surenon, surenin dan surenolakton yang berperan sebagai penghambat pertumbuhan, insektisida dan antifeedant terhadap larva serangga uji ulat sutera (Dinata 2005) dan ditingkat petani di daerah Jawa Barat suren telah digunakan untuk pengendalian walang sangit pada pertanaman padi dan hasilnya cukup baik (Prijono 1999). Bagian kulitnya digunakan untuk menyembuhkan berbagai penyakit misalnya oleh suku Rejang Lebong (Bengkulu) untuk obat mules, suku Jawa untuk demam, suku Bali untuk kencing manis dan oleh suku Sumawa (NTB) untuk menyembuhkan penyakit gondok (Sangat et al. 2002).
1.2. Perumusan Masalah
Dalam usaha menangulangi hama yang menyerang tanaman kehutanan para pengelola hutan lebih memilih menggunakan insektisida kimia sintetis dengan alasan praktis, mudah diperoleh dan hasilnya dapat terlihat secara nyata dan cepat. Cara pengendalian dengan insektisida kimia sintetis untuk penangulangan hama hutan memberikan dampak negatif yang cukup serius, khususnya mengenai residu insektisida. Selain itu penyemprotan insektisida sintetis dapat membunuh musuh alami hama dan serangga berguna lainnya (Hill 1983). Oleh karena itu sejak awal ’80 an para ahli terdorong untuk kembali menggunakan insektisida yang berasal dari tumbuhan atau lebih dikenal dengan sebutan insektisida nabati (Saxena 1982). Penggunaan insektisida nabati dianggap kurang mencemari lingkungan, lebih bersifat spesifik residunya relatif lebih pendek dan kemungkinan hama tidak mudah berkembang menjadi resisten terhadap
insektisida (Stoll 1984; Oka 1994). Sehubungan dengan hal itu dirasa perlu dilakukan penelitian-penelitian guna menggali potensi dari pestisida nabati yang bersifat insektisida terhadap hama hutan yang dapat dimanfaatkan. Salah satu alternatif pemecahan permasalahan yang tersedia adalah pemanfaatan bahan alam sebagai insektisida, misalnya pemanfaatan bahan tumbuhan sebagai insektisida. Berbagai tumbuhan telah diketahui bioaktivitasnya terhadap serangga dan potensinya sebagai insektisida , diantaranya beberapa jenis tumbuhan famili Meliaceae. Informasi tentang biaktivitas tanaman suren sebagai sumber insektisida botani masih terbatas. Dalam upaya menggali informasi tersebut pertanyaan yang diajukan adalah : dapatkah sediaan daun, ranting , kulit batang dan biji dari tanaman suren berfungsi sebagai insektisida dan seberapa besar potensinya untuk digunakan sebagai agens pengendalian hama yang ramah lingkungan dan dapat dimanfaatkan oleh para petani atau pengelola hutan.
Pada dasarnya serangga mempunyai dua sistem penerimaan kimia (chemoreseptor), yaitu penciuman (Olfactory) dan pengecap (Gustatory). Stimulus untuk alat pencium berupa bau-bauan yang terbawa aliran udara, sedangkan stimulus pengecap berupa cairan.
1.3. Tujuan Penelitian
• Menguji bioaktivitas dari tiga fraksi (Methanol, n-heksan dan etyl asetat) dari ekstrak daun, ranting , kulit batang dan biji tanaman Toona sinensis Merr terhadap mortalitas hama daun Eurema spp. dan Spodoptera litura F.
• Menentukan konsentrasi pestisida nabati dan LC (Lethal Consentration) dari tiap fraksi tanaman suren yang dapat menekan perkembangan hama tersebut.
• Mengidentifikasi golongan senyawa kimia dalam tiap fraksi dari ekstrak daun, ranting , kulit batang dan biji dari tanaman Toona sinensis Merr.
1.4. Manfaat Penelitian
Selain dalam rangka memberdayakan tumbuhan lokal, secara umum tujuan penelitian ini adalah mencari kandidat tumbuhan sebagai sumber insektisida botani baru yang dapat dimanfaatkan oleh para pengelola hutan sebagai alternatif dalam pengendalian serangga hama. Diharapkan hasil penelitian ini dapat memperoleh data dan informasi
mengenai sumber daya tanaman suren sebagai pestisida nabati dalam menekan hama daun (Eurema spp dan S. litura ) dan keamanannya terhadap lingkungan.
1.5. Hipotesis
Ekstrak daun, ranting, kulit batang dan biji dari tanaman suren diduga dapat berfungsi sebagai pestisida nabati dalam mengendalikan serangga uji serta konsentrasi tertentu dari ekstrak tanaman suren tersebut diduga dapat menekan perkembangan serangga uji (Eurema spp. dan S.litura).
II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Insektisida Botani
Hutan tropik merupakan sumber keragaman hayati yang kaya. Selain dimanfaatkan sebagai sumber bahan bangunan, bahan obat-obatan dan berbagai keperluan lainnya, hutan tropik dapat dimanfaatkan sebagai sumber bahan insektisida botani. Jumlah species dan ketersediaan tumbuhan sebagai sumber insektisida botani pada hutan tropik cukup berlimpah. Informasi tentang berbagai species tumbuhan yang memiliki bioaktivitas terhadap berbagai jenis serangga banyak dilaporkan. Saat ini lebih dari 1500 species tumbuhan dari berbagai famili telah dilaporkan dapat berpengaruh buruk terhadap serangga (Grainge & Ahmed 1988). Di Filipina tidak kurang dari 100 species tumbuhan telah diketahui mengandung bahan aktif insektisida (Rejesus 1987). Laporan dari berbagai provinsi di Indonesia menyebutkan bahwa lebih dari 40 species tanaman berpotensi sebagai pestisida botani (Direktorat BPTP & Ditjenbun 1994). Hamid & Nuryani (1992) mencatat di Indonesia terdapat 50 famili tumbuhan penghasil senyawa berracun terhadap berbagai mahluk hidup.
Famili tumbuhan yang dilaporkan memiliki aktivitas terhadap serangga di antaranya Meliaceae, Annonaceae, Asteraceaae, Piperaceae dan Clusiaceae (Isman 1995). Jumlah ini tentunya masih dapat bertambah dengan semakin intensifnya orang melakukan upaya pencarian sumber bahan insektisida botani. Masih banyaknya species-species tumbuhan yang kemungkinan berkhasiat insektisida yang belum diteliti mendorong peneliti untuk melakukan pencarian insektisida botani sebagai alternatif pengendalian hama. Setelah species tumbuhan diketahui memiliki aktivitas insektisida, selanjutnya dilakukan studi potensi dari berbagai segi untuk mendukung pengembangannya sebagai sumber insektisida alternatif.
Terdapat tiga sumber insektisida alami yang penting dan memiliki prospek yang baik untuk dikembangkan lebih lanjut, yaitu tumbuhan, mikroorganisme tanah dan organisme laut. Insektisida botani kurang persisten dibandingkan dengan insektisida sintetik sehingga tidak menimbulkan banyak residu, aman dalam penggunaan di lapang maupun bagi musuh alami dan tidak menimbulkan resurjensi bagi hama tanaman (Prijono 1999). Senyawa kimia yang dihasilkan tanaman berdasarkan jalur metabolisme dikelompokkan
menjadi dua bagian besar, senyawa primer dan sekunder ( Brielman 1999). Berkaitan dengan interaksi serangga – tanaman, metabolit primer tanaman didefinisikan sebagai metabolit yang menyediakan nutrisi esensial bagi serangga, sedangkan metabolit sekunder tanaman merupakan metabolit yang tidak memiliki arti penting bagi kebutuhan nutrisi (Vickery & Vickery 1981 , Panda & Khush 1995).
Senyawa penghambat makan dapat menyebabkan serangga menghentikan kegiatan makannya secara permanen atau sementara. Dengan adanya senyawa penghambat makan, serangga dapat menggigit bagian tertentu dari makanan, kemudian menilai apakah makanan tersebut tidak/dapat dimakan, selanjutnya memutuskan untuk tetap atau pergi ke bagain lainnya. Banyak senyawa tumbuhan baik dalam bentuk ekstrak maupun senyawa murni diketahui memiliki aktivitas penghambat makan terhadap berbagai species serangga. Penghambat makan dari kelompok terpenoid yang paling dikenal ialah azadirakhtin yang merupakan senyawa insektisida utama dari tanaman mimba.
Beberapa ekstrak tumbuhan selain memiliki pengaruh terhadap mortalitas, aktivitas makan, juga dapat berpengaruh terhadap penekanan kemampuan reproduksi serangga dan perkembangan generasi keturunannya (Rembold et al.1984 ; Champagne et al.1989). Oleh karena itu penggunaan insektisida botani tidak dikhawatirkan menimbulkan resurjensi, bahkan sebaliknya dalam jangka panjang akan mengakibatkan penekanan populasi hama sasaran (Prijono 1994). Keunggulan-keunggulan insektisida botani tersebut diatas terdapat pada sediaan mimba (Azadirachta indica) sebagai insektisida botani generasi terkini yang paling menonjol. Harapan-harapan tersebut memicu usaha pencarian sumber-sumber insektisida botani baru dari species tumbuhan lainnya.
2.2. Ekstraksi
Ekstraksi adalah suatu metode pemisahan komponen-komponen dari suatu campuran dimana komponen yang larut masuk ke dalam pelarut yang dipakai sedangkan komponen yang tidak larut akan tertinggal didalam bahan. Metode yang paling sederhana yang digunakan untuk mengekstraksi padatan adalah mencampurkan seluruh bahan dengan pelarut, kemudian memisahkannya dari padatan yang tidak terlarut (Lehnoger dan Baverloo 1976). Hasil ekstraksi yang diperoleh bergantung pada kandungan ekstrak yang terdapat pada contoh uji dan jenis pelarut yang digunakan. Hal-hal yang perlu
dipertimbangkan dalam pemilihan pelarut adalah seleltivitas, kapasitas, kemudahan untuk diuapkan dan harga pelarut tersebut. Prinsip kelarutan adalah “like dissolve like”, yaitu (1) pelarut polar akan melarutkan senyawa polar, demikian juga sebaliknya pelarut non- polar akan melarutkan senyawa non-polar, (2) pelarut organik akan melarutkan senyawa organik (Khopkar 1990 dalam Yunita 2004).
Ekstraksi yang umum untuk mengekstrak bahan insektisida botani ialah ekstraksi dengan pelarut dan distilasi uap (penyulingan) dengan metode soklslet. Tujuan metode ekstraksi ini adalah mengeluarkan bahan yang diinginkan dari sel-sel dengan proses difusi. Hasil ekstraksi dari proses ini dipengaruhi oleh suhu, pH, ukuran bahan yang akan diekstraksi dan gerakan pelarut yang terjadi di sekitarnya. Keanekaragaman senyawa yang dapat diekstraksi biasanya membutuhkan serangkaian ekstraksi yang hasilnya memberikan ciri awal komposisinya dan hal yang mempengaruhi kandungan zat ekstraktif dalam tanaman diantaranya adalah umur, site (tempat tumbuh), genetik, jenis pelarut yang digunakan dan kecepatan pertumbuhan (Fengel dan Wegener 1995).
2.3. Senyawa Bioaktif
Senyawa bioaktif merupakan senyawa yang mempunyai aktivitas biologis terhadap organisme lain atau pada organisme yang menghasilkan senyawa tersebut. Senyawa bioaktif hampir selalu toksik pada dosis tinggi. Setiap zat kimia termasuk senyawa aktif dari tumbuhan pada dasarnya bersifat racun, tergantung pada penggunaan, takaran, pembuatan, cara pemakaian dan waktu yang tepat untuk mengkonsumsi. Beberapa tanaman dikenal menghasilkan senyawa bioaktif yang mepunyai berbagai aktivitas bioaktif termasuk insektisida yang pada umumnya berupa senyawa-senyawa flavonoid, glikosida, streroid, alkaloid dan terpenoid (Kurz dan Constabel 1998).
Alkaloid
Menurut Harbone (1987) alkaloid sekitar 5.500 jenis telah diketahui dan merupakan golongan zat tumbuhan sekunder yang terbesar. Alkaloid seringkali bersifat racun bagi manusia dan banyak mempunyai kegiatan fisiologi yang menonjol yang secara luas banyak digunakn dalam bidang pengobatan. Alkaloid dapat ditemukan dalam berbagai bagian tumbuhan seperti seperti biji, daun, ranting dan kulit batang. Alkaloid memang
jarang ditemukan dalam jaringan mati. Umumnya alkaloid terakumulasi dalam jaringan yang tumbuh aktif seperti epidermis, hipodermis dan kelenjar lateks. Adapun fungsi alkaloid dalam tumbuhan belum diketahui begitu pasti, walaupun beberapa senyawa ditafsirkan berperan sebagai pengatur atau penolak dan pengikat serangga. Menurut Sumiwi (1992) fungsi alkaloid bagi tumbuhan antara lain sebagai zat beracun untuk melawan serangga atau hewan pemakan tumbuhan, faktor pengatur tumbuh, substansi cadangan untuk memenuhi kebutuhan akan nitrogen dan elemen-elemen lain yang penting bagi tumbuhan dan hasil akhir reaksi detoksifikasi dari suatu zat yang berbahaya bagi tumbuhan.
Flavanoid
Flavanoid merupakan senyawa fenol terbesar di alam ,terdapat dalam dua bentuk yaitu flavonoid glikosida yang umumnya larut dalam air dan flavonoid aglikon lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter dan kloroform. Falvonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau yang terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, biji dan bunga (Harborne 1987).
Pada tumbuhan flavonoid dapat meningkatkan dormansi, meningkatkan pembelahan sel-sel kalus, sebagai enzim penghambat pembentukan protein, menghasilkan zat warna pada bunga, untuk merangsang serangga, burung dan satwa lainnya untuk mendatangi tumbuhan tersebut sebagai agen dalam penyerbukan dan penyebaran biji. Dalam dunia pengobatan, beberapa senyawa flavonoid berfungsi sebagai antibodi misalnya antivirus dan jamur, peradangan pembulh darah dan dapat digunakan sebagai racun ikan (Vickery dan Vickery 1981).
Saponin
Pada tumbuhan, saponin mempunyai fungsi yang sama dengan triterpenoid karena mengandung turunan dari senyawa ini, diantaranya dapat meningkatkan daya kecambah benih dan menghambat pertumbuhan akar, menghambat pertumbuhan sel-sel tumor pada tumbuhan dan satwa.
Triterpenoid dan Steroid
Triterpenoid dan turunannya termasuk saponin dan steroid pada tumbuhan berfungsi