5. Uji efek perlakuan
6.2 Ekstrak Daun Afrika Selatan Memperbaiki Profil Lipid
Ekstrak daun Afrika Selatan dapat memperbaiki profil lipid pada tikus wistar jantan yang diinduksi dyslipidemia (Adaramoye et al., 2008). Hal ini karena ekstrak daun Afrika Selatanmengandung senyawa fitokimia di dalamnya. Daun Afrika Selatan mengandung senyawa antosianin terutama flavonoid, tanin, saponin, polifenol terutama asam quinic, asam klorogenik dan luteolin serta antioksidan dan alkaloid, xeronin dan vitamin C (Santoso, 2015).
Pernyataan ini didukung hasil penelitian ini, yang menunjukkan bahwa ekstrak daun Afrika Selatan dapat memperbaiki profil lipid pada tikus setelah diinduksi dislipidemia. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan selama 14 hari dapat menurunkan kadar kolesterol total dari 216,64±6,20 mg/dl menjadi 171,33±3,03 mg/dl, yang kemudian terus mengalami penurunan menjadi 126,26±5,16 mg/dl setelah 28 hari perlakuan (P<0,01). Hal ini juga dapat diamati pada variabel lainnya. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan selama 14 hari dapat menurunkan kadar trigliserida dari 147,65±5,38 mg/dl menjadi 115,50±3,18 mg/dl, yang kemudian terus mengalami penurunan menjadi 28,78±4,66 mg/dl setelah 28 hari perlakuan (P<0,01). Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan selama 14 hari juga dapat meningkatkan kadar HDL dari 28,92±2,22 mg/dl menjadi
30,61±2,82 mg/dl, yang kemudian terus mengalami peningkatan menjadi 38,24±3,97 mg/dl setelah 28 hari perlakuan (P<0,01). Selain itu, pemberian ekstrak daun Afrika Selatan selama 14 hari dapat menurunkan kadar LDL dari 86,68±2,04 mg/dl menjadi 71,40±1,36 mg/dl, yang kemudian terus mengalami penurunan menjadi 76,04±4,82mg/dl setelah 28 hari perlakuan (P<0,01).
Hasil analisis fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak daun Afrika Selatan mengandung flavonoid. Telah banyak dilakukan penelitian mengenai efek flavonoid dalam memperbaiki profil lipid darah dan efek vasoprotektif (Shipp dan Abdel-Aal, 2010). Flavonoid dapat menginhibisi CETP (Cholesteryl ester transfer
protein). Kemudian akan meningkatkan kadar kolesterol HDL dan menurunkan
kadar kolesterol LDL (Qin et al., 2009). CETP adalah protein plasma yang memediasi pertukaran cholesteryl ester dari HDL ditukar dengan molekul trigliserida dari LDL, VLDL maupun kilomikron, sehingga yang terjadi VLDL kaya akan kolesterol, sedangkan HDL menjadi kaya akan trigliserida atau dikenal sebagai lipoprotein kaya trigliserida (TGrL). Apo A-1 dapat memisahkan diri dari HDL kaya trigliserida. ApoA-1 bebas ini segera dibersihkan dari plasma, melalui ginjal, sehingga mengurangi kemampuan HDL untuk reverse cholesterol transport. Akibatnya kadar HDL dalam darah menurun. LDL kaya trigliserida dapat mengalami lipolisis menjadi small dense LDL (Shulman, 2000). Dalam hal ini flavonoid bekerja menghambat CETP sehingga terjadi peningkatan kadar HDL kolesterol dan penurunan kadar LDL (Qin et al., 2009). Flavonoid juga memiliki efek anti inflamasi dengan menghambat sitokin seperti tumor necrosis factor α (TNF-α). Penurunan TNF-α akan meningkatkan sensitivitas insulin, meningkatkan
oksidasi asam lemak pada hepar, menghambat sintesis kolesterol oleh sel hepar (Karlsen et al., 2007).
Kandungan tannin yang tinggi pada ekstrak daun Afrika Selatan dapat meningkatkan penyerapan glukosa pada jaringan adiposit tikus GLUT4, (Hayashi
et al., 2002).Tanin juga dapat menghambat enzim AcylCoA Cholesterol Acyl
Transferase (ACAT) yang berperan dalam esterifikasi kolesterol sehingga menghambat penggabungan kolesterol ester membentuk kilomikron dan VLDL. Menurunnya kadar APO B menyebabkan pembentukan kilomikron, LDL dan VLDL terganggu yang menyebabkan trigliserida tidak terbentuk sehingga ukuran partikel sdLDL besar (Rahastuti et al, 2011). Pada konsentrasi 0.04mg / mL, tanin menunjukkan potensi dalam menginduksi penyerapan glukosa yang setara dengan 100nm insulin dan tanin mencapai penyerapan glukosa maksimal di kisaran 24-49% pada konsentrasi di bawah 1 mg / mL (Liu et al., 2001). Pemberian senyawa aktif turunan tanin pada konsentrasi 0.1mg/mL dapat menurunkan proliferasi adiposit hingga mencapai 62-64% dan proliferasi benar-benar terhadap dengan pemberian pada konsentrasi 0.5 mg/mL (Liu et al., 2001; Hayashi et al., 2002).
Ekstrak daun Afrika Selatan juga mengandung saponin dalam jumlah yang cukup tinggi (Hayashi et al., 2002). Saponin memiliki efek antihiperlipidemia dengan cara menghambat kerja 3-Hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase (HMGCR) dan Acyl-CoA: cholesterol O-acyltransferase 2 (ACAT2) (Shi et al., 2014). HMGCR adalah enzim yang meregulasi biosintesis kolesterol. Inhibisi dari ekspresi atau aktivitas enzim HMGCR akan menghambat sintesis de novo kolesterol dalam hati dan dengan demikian mengurangi kadar kolesterol serum
(Jurevics et al., 2000). Sedangkan ACAT2 mengkonversi kolesterol bebas menjadi kolesterol ester sebagai respon terhadap biosintesis kolesterol intraseluler yang berlebihan. Ekspresi ACAT2 yang berlebihan meningkatkan produksi kolesterol ester yang akan bereaksi terhadap hepatik lipoprotein yang mengandung apoB dan disekresi ke dalam plasma. Jadi ACAT2 memainkan peran penting dalam produksi lipoprotein aterogenik (Lee et al., 2005).
Kandungan polifenol yang tinggi pada ekstrak daun Afrika Selatan, khususnya asam quinic, juga meregulasi profil lipid melalui jalur AMP-activated
protein kinase (AMPK) dan peroxisome proliferator-activated receptorsα(PPARα). Aktivasi PPARα oleh ligan meregulasi ekspresi gen yang
terlibat dalam transportasi dan oksidasi asam lemak, seperti asil-CoA oxidase (ACO), karnitin palmitoil transferase 1 (CPT1),fatty acid transport protein (FATP), hormon-sensitive lipase (HSL) dan lipoprotein lipase (LPL) (Huang et
al., 2012). Dengan merangsang transkripsi gen-gen tersebut, aktivasi PPARα
menyebabkan peningkatan degradasi trigliserida dan asam lemak, peningkatan penyerapan asam lemak seluler, dan mengurangisintesis trigliserida dan asam lemak.
Selain itu, LPL menyandi enzim yang membatasi tingkat hidrolisis trigliserida, kilomikron dan very low-density lipoprotein (VLDL) sehingga pemberian ekstrak daun Afrika Selatan dapat meregulasi metabolism trigliserida(Davies et al., 2012). LPL tidak hanya menurunkan jumlah trigliserida, tetapi juga berfungsi sebagai jembatan antara permukaan sel dan lipoprotein VLDL dan merangsang penyerapan LDL oleh sel. Oleh karena itu, LPL
berkontribusi terhadap pembersihan baik VLDL dan LDL dari serum (Beisiegel et
al., 1991). Telah dilaporkan bahwa efek hipotrigliseridemia dari PPARα adlah
sebagian dari induksi ekspresi dan aktivitas lipoprotein lipase (LPL) (Zhang et al., 2013).
Esktrak daun Afrika Selatan juga mengandung vitamin C dan antioksidan lainnya yang mampu mencegah spesies oksigen reaktif (ROS) dalammenyebabkan kerusakan oksidatif pada LDL (Balkan et al., 2004). Perlindungan ini mempertahankan transportasi LDL melalui reseptor LDL di hati dan mempercepat katabolisme LDL dalam hati (Montano et al., 1998). Studi menunjukkan bahwa vitamin C menyebabkan peningkatan aktivitas 2 enzim yang terlibat dalam metabolisme kolesterol, yaitu cholesterol acyltransferase and
92
7.1 Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian ini, dapat disimpulkan sebagai berikut.
1. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan menurunkan kadar kolesterol total serum pada tikus jantan dislipidemia.
2. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan menurunkan kadar trigliserida serum pada tikus jantan dislipidemia.
3. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan meningkatkan kadar HDL serum pada tikus jantan dislipidemia.
4. Pemberian ekstrak daun Afrika Selatan menurunkan kadar LDL pada tikus putih jantan dislipidemia.
7.2 Saran
Sebagai saran dalam penelitian ini adalah.
1. Perlu dilakukan uji klinik terhadap khasiat ekstrak daun Afrika Selatan pada manusia dalam mencegah dan mengobati dislipidemia.
93
ACC/AHA, 2013. Guideline on Treatment of Blood Cholesterol to Reduce Atherosclerotic
Adaramoye, OA. Akintayo O, Achem J, Fafunso MA. Lipid-lowering effects of methanolic extract of Vernonia amygdalina leaves in rats fed on high cholesterol diet. Vascular Health and Risk Management. 2008;4(1):235-241.
AHA, 2012.What Cholesterol levels mean – Triglycerides ". Heart.org. Retrieved
10-24.Cardiovascular Risk in Adults. Available at http://content.onlineac.org
Almatsier, S. 2009. Lipid. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. CetakanVII. Jakarta: Penerbit PT Gramedia Pustaka Utama.h.51-69.
Atangwho , P.E., Ebong, E.U., Eyong, I.O., Williams, M.U., Eteng G.E., Egbung. 2009. Comparative chemical composition of leaves of some antidiabetic medicinal plants : Azadirachta idica, Vernonia amygdalina and Gongronema latifolium. African Journal of Biotechnology Vol 8 N0.18 ; 4685-4689. Bahri, A., 2004. Disiplidemia Sebagai Faktor Risiko Penyakit Jantung Koroner,
e-USU Repositor. Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.. Available from : http://www.library.usu.ac.id/download/fk/gizi-bahri3.pdf. Accesed 16-10-2014.
Balkan J., Dogru-Abbasoglu S., Aykac-Toker G., Uysal M. 2004;3(4):237– 242.Serum pro-oxidant–antioxidant balance and low-density lipoprotein oxidation in healthy subjects with different cholesterol levels. Clin Exp Med.
Barzilai, N., Rudin, E. 2005. Inflamatory Peptides Derived from Adipose Tissue. Imunity & Ageing, 21. Available from : http://www.immunityageing.com/content/2/1/1. Accessed 14-4-2016.
Beisiegel U, Weber W, Bengtsson-Olivecrona G. 1991. Lipoprotein lipase enhances the binding of chylomicrons to low density lipoprotein receptor-related protein. Proc Natl Acad Sci U S A88: 8342–8346
BrownMS, and GoldsteinJL. 1997. The SREBP pathway: regulation of cholesterol metabolism by proteolysis of a membrane-bound transcription factor.
Cell.89:331–40.
Davies BS, Beigneux AP, Fong LG, Young SG. 2012. New wrinkles in lipoprotein lipase biology. Curr Opin Lipidol23: 35–42
Depkes,2014. Situasi Kesehatan Jantung. Pusat data dan Informasi kemanterian
KesehatanRepublik Indonesia.
www.depkes.go.id/download.php?file=download/pusdatin/.jantung...
Didangelos, A., Simper, D., Monaco, C., Mayr, M., 2009. "Proteomics of acute coronary syndromes." . Current atherosclerosis reports.11 (3): 188–95. Eleyinmi, A.F. Sporns, P. Bressler. 2008. Nutritional composition of Gongronema
latifolium and Vernonia Amgydalina. Nutrition and Food Siences.Vol
38.99-100.
Goldman, R. dan Klatz, R. 2007. The Long- Life Diet: Nutrition for Longevity.The
New Anti-Aging Revolution. Advantage Quest Publication edition.
Malaysia: Petaling Jaya. h. 371.
Guyton, A.C. dan Hall, J.E. 2007.Keseimbangan Diet; Aturan Pemberian Makanan ; Obesitas dan Kelaparan; Vitamin dan Mineral. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 11. Terjemahan Irawati et al. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC. h . 916 – 918.
Hamid, A.A.,Aiyelaagbe, O.O.,Usman, L.A, Ameen, O.M., Lawal, A. 2010.Antioxidant : its Medidal and Pharmacological Applications.African Journal of pure and appliedchemistry vol.4 8 pp. 142- 151
Hardini D, Yuwanta T, Supadmo, Zuprizal.2007. Pengaruh Telur Beromega-3 dan 6Hasil Olahan terhadap Profil Lipid DarahTikus Rattus norvegicus L. Normal dan Hiperkolesterolemia.Media Peternakan.30(1): 26-34.
Hayashi, T., Maruyama, H., Kasai, R., Hattori, K., Takasuga, S., Hazeki, O., Yamasaki, K., dan Tanaka, T. 2002. Ellagitannins from
Lagerstroemiaspeciosa as activators of glucose transport in fat cells. Planta Med.,68: 173-5.
Hostettmann, K., Marston, K. Ndjoko and J. Wolfender, 2000.The Potential of
African Plants as a Source of Drug.Curr.Org>Chem., Vol 4, 973-1010.
Huang J, Jia Y, Fu T, Viswakarma N, Bai L. 2012. Sustained activation of PPARalpha by endogenous ligands increases hepatic fatty acid oxidation and prevents obesity in ob/ob mice. FASEB J26: 628–638.
Huvers, F. C., Popa,C., Netea,M.G., Van den Hoogen, F.H.J., Tack,C.J. 2007.
Improved insulin sensitivity by anti-TNF-a antibody treatment in patients with rheumatic diseases. Ann. Rheum.Dis. In press.
Illingworth, D.R. 2007. Lipid Lowering Drugs: An Overview of Indications and
Optimum Theraupeutic Use. Drugs33 : 259-79.
Izevbigie, J.L., Bryant, A. Walker. 2004. A novel natural inhibitor of ekstracellular signal regulated kinases and human breast cancer cell growth. Exptal. Biol. Med. Vol 220, 163-169.
Judajana, F.M. 2011. Tata Kelola Hiperlipid [cited 2011March.11].Available from: http//labparahita.com/parahita/2011/02/tata-kelola-hiperlipid
Jurevics, H., Hostettler, J., Barrett, C., Morell, P., and Toews, A. D. 2000. Diurnal and dietary-induced changes in cholesterol synthesis correlate with levels of mRNA for HMG-CoA reductase. Journal of Lipid Research.41: 1048–1053 Karimah, F. 2010. Pengaruh pemberian klorofil dari tanaman alfafa ( Medicagi
sativa ) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (rattus norvegicus)strain
wistar.tesis. Universitas sebelas maret, Surakarta.
Karlsen, A., Retterstol, L., Laake, P., Paur, I.,kjolsrud-Bohn, S., Sandvik, L., Blomhoff, R., 2007. Anthocyanins Inhibit Nuclear Factor- Kappa Activation In Monocytes and Reduce Plasma Concentrations of Pro- Inflammatory Mediators In Healthy Adults, Journal of Nutrition, 137:1951-4
Kersshaw, E. E., Flier, J. S. 2004. Adipose Tissue as an Endocrine Organ. J Clin
Endocrinol Metab. 89(6), p 2548-2556.
Kumar, V., Butcher, S.J., Katrina, O.,Engelhardt, P.,Heikkonen, J., Kaski, K., Ala-Korpela, M., Kovanen, P.T. 2011. "Three-Dimensional cryoEM Reconstruction of Native LDL Particles to 16Å Resolution at Physiological Body Temperature". PLoS ONE 6 (5): e18841
Kusumawati, D. 2004. Bersahabat dengan Hewan Coba. Yogyakarta: Gadjahmada University Press.
Lawrence, G.D. 2013. Dietary Fats and Health: Dietary Recommendations in the Context of Scientific Evidence. Adv Nutr4: 294-302.
Lichtenstein, A., Jones, P. 2005. Lipids: Absorption and Transport. Present Knowledge in Nutrition. 9th edition, Washington, D.C. p.111-124
Lilis. 2010. Pemberian Astaxanthin Oral Memperbaiki Profil Lipid darah Tikus Putih jantan (Albino Rat) Dislipidemia
Linder, M.C. 2006. Biokimia Nutrisi dan Metabolisme. Jakarta. Universitas Indonesia Press.
Liu, F., Kim , J.K., Li,Y.K.,Liu, X., Li., J. dan Chen, X. 2001. An Extract of
Lagerstroemia speciosa L. Has Insulin-Like Glucose Uptake–Stimulatory
and Adipocyte Differentiation–Inhibitory Activities in 3T3-L1 Cells1. J
Nutr. Sep;131(9):2242-7.
Mahley R.W., Weisgraber K.H., Farese R.V. 2003. Disorder of lipid
metabolism.in Williams Textbook of Endocrinology. 10th Ed. P. 1642-1680.
Mandal,A. 2012. Lipid Biological Functions. Available from: http://www.news-medical.net/health/Lipid-Biological-Functions.aspx Accessed October 18, 2015.
Mayes PA., Botham KM. 2003. p 205-218.Lipid transport & storage. Dalam Muff ay RK.Harper’s illustrated biochemistry.26th Ed. New York : Lange Medical Books/Me Graw-Hill.
McRae MP. 2008;7(2):48-58.Vitamin C supplementation lowers serum low-density lipoprotein cholesterol and triglycerides: a meta-analysis of 13 randomized controlled trials. Journal of Chiropractic Medicine.
Montano C.E., Fernandez M.L., McNamara D.J. 1998;47(7):883–891.Regulation of apolipoprotein B–containing lipoproteins by vitamin C level and dietary fat saturation in guinea pigs. Metabolism.
Murray, R.K., Granner, D.K., Mayes, P.A., Rodwell, V.W., 2012. Harper’s
Illustrated Biochemistry. 29th Ed. McGraww-Hill Companies Inc. Lange Medical Publication
Nimenibo, R. 2003. Effect of Vernonia amygdalina in alloxan inducet diabetic albino rats. J. Med. Lab.Sci 12(1) :25-31.
Nurdiastuti, T. 2015. Penelitian Pendahuluan Ekstrak daun Afrika Selatan (Vernonia amygdalina)memperbaiki profil lipid tikus wistar jantan dislipidemia.
Pangkahila, W. 2007.Anti Aging Medicine : Memperlambat Penuaan, Meningkatkan Kualitas Hidup. Cetakan ke-1.Jakarta : Penerbit Buku Kompas. Hal : 8-17.
Pangkahila, W. 2011.Anti Aging Medicine : Tetap Muda dan sehat. Cetakan ke 1.Jakarta : Penerbit Buku Kompas. hal : 1-3, 9-10, 36-40.
Pocock, S. 2008. Clinical Trial : A Practical Approach. Chichester : John Willey & Sons. P. 127-128
Powers, A.C. 2008.Diabetes Mellitus. Harrisons Principles of Internal Medicine 7th Edition
Qin, Y., Xia, M., Ma, J., Hao, Y.T., Liu, J., Mou, H.Y., Cao, L., Ling, W.H. 2009. Anthocyanin Supplementation Improves Serum LDL- and HDLCholesterol Concentrations Associated with The Inhibition of Cholesteryl Ester Transfer Protein in Dyslipidemic Subject. The American Journal of Clinical Nutrition, 90(3):485-492
Rader D.J. dan Hobbs RH. 2005. In Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th Ed. P. 2286-2298. McGraw-Hill. New York.
Rahastuti, S., Tjahjani ,S.,Hartini, E. 2011. Efek Infusa Daun Salam (Syzgium polyanthum) terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Darah Tikus Model Dislipidemia Galur Wistar. Jurnal Medika Planta. 4: 28-32
Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) Indonesia. 2010
Santoso dan Setiawan, 2005. Penyakit Jantung Koroner. Cermin Dunia Kedok-
teran No.147, [cited 2011Feb.25].Available
from:http://www.kalbe.co.id/files /147.05 Penyakit Jantung Koroner.pdf/147-05 Penyakit Jantung Koroner htm.
Santoso, I.A. 2015. “Pemberian Ekstrak Etanol Daun Afrika Selatan (Vernonia Amgydalina) Per Oral Menurunkan Kadar Glukosa Darah Post Prandial Dan Meningkatkan Kadar insulin puasa Pada Tikus Putih Jantan (Rattus Norvegicus) Yang DM Tipe 2 (tesis).Universitas Udayana, Denpasar
Shahab, A. 2005. Penatalaksanaan Dislipidemia. Buku Petunjuk Praktis Penata- laksanaan Dislipidemia.Perkumpulan Endokrinologi Indonesia.h. 5-14 Shi, Y., Guo, R., Wang, X., Yuang, D., Zhang, S., Wang, J., Yang, X., and Wang,
C. 2014. The Regulation of Alfalfa Saponin Extract on Key Genes Involved in Hepatic Cholesterol Metabolism in Hyperlipidemic Rats. Claret M, ed.
PLoS ONE. 9(2):e88282.
Shipp J, Abdel-Aal, 2010. Food Applications and Physiological Effects of Anthocyanins as Functional Food Ingredients. In: The Open Food Science
Journal, 4: p. 7-22
Shulman, G. I. 2000. Cellular Mechanisms of Insulin Resistance. Journal clinical
Investigation. 106, 171.
Smith, J.B. dan Mangkoewidjojo, S. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia (UI Press). hal : 30-32 , 43-44, 54,5
Smith, S. S., Gropper, J.L.,Smith, J.S. 2013. Advanced nutrition and human metabolism (6th ed.). Belmont, CA: Wadsworth/Cengage Learning.
SteinbergD. 2005. Thematic review series: the pathogenesis of atherosclerosis. An interpretive history of the cholesterol controversy: part II: the early evidence linking hypercholesterolemia to coronary disease in humans. J Lipid Res. 46:179–90.
Suyatna, F.D. 2007. Hipolipidemik.Farmakologi dan Terapi. Edisi ke lima. Jakarta: Gaya Baru. h.373-387
Tiwari, A.K, and Rao, J.M. 2002. Diabetes mellitus and multiple therapeutic approaches of phytochemical ; Present status and future prospects. Current
Yayasan Stroke Indonesia, 2012. Sekilas tentang stroke. https://id.wikipedia.org/wiki/Lemak_makanan
Zhang X, Wu C, Wu H. 2013. Anti-Hyperlipidemic Effects and Potential Mechanisms of Action of the Caffeoylquinic Acid-Rich Pandanus tectorius Fruit Extract in Hamsters Fed a High Fat-Diet. Motta A, ed. PLoS ONE. 2013;8(4):e61922.
Lampiran 3 : Uji Statistik
ANALISIS DESKRIPTIF