BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
C. Hasil Uji Pengaruh Pemberian Jangka Pendek Ekstrak Etanol Kulit
Buah Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALP
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui adanya pengaruh pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. pada tikus jantan
galur wistar yang terinduksi karbon tetraklorida. Percobaan ini dilakukan dengan memberikan ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. secara per oral, kemudian setelah 6 jam diinduksi dengan karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB dan sebagai akibatnya terjadi penurunan aktivitas enzim ALP.
Data aktivitas ALP dianalisis dengan analisis pola searah (One Way Anova) memiliki variansi homogen dengan signifikansi 0,142 (p>0,05). Kemudian dilanjutkan uji scheffe untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok, Aktivitas ALP (U/L) disajikan dalam bentuk purata ± SE pada tabel III dan gambar 4.
Tabel III. Purata aktivitas ALP tikus dengan pemberian ekstrak etanol kulit Persea
americana Mill. yang terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ( n = 5 )
Kelompok perlakuan Purata aktivitas ALP ± SE (U/L) Kontrol hepatotoksin CCl4
2 ml/kg BB 440,2 ± 37,7
Kontrol negative olive oil
2 ml/kg BB 274,2 ± 225,6
Kontrol ekstrak (EEPE 1,4
g/kgBB) 235,4 ± 11,4 EEPE 0,35 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB 242,2 ± 19,0 EEPE 0,70 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB 212,4 ± 16,8 EEPE 1,40 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB 439,2 ± 46,6 Keterangan :
Tabel IV. Hasil uji scheffe aktivitas ALP tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan Kelompok perlakuan Kontrol hepatotoksin CCl4 2 ml/kg BB Kontrol negative olive oil 2 ml/kg BB Kontrol ekstrak (EEPE 1,4 g/kgBB) EEPE 0,35 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB EEPE 0,70 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB EEPE 1,40 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB Kontrol hepatotoksin CCl4 2 ml/kg BB BB BB BB BB TB Kontrol negative olive oil 2 ml/kg BB BB BTB BTB BTB BB Kontrol ekstrak (EEPE 1,4 g/kgBB) BB BTB BTB BTB BB EEPE 0,35 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB BB BTB BTB BTB BB EEPE 0,70 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB BB BTB BTB BTB BB EEPE 1,40 g/kgBB + CCl4 2 ml/kgBB BTB BB BB BB BB
Keterangan: BB = Berbeda bermakna (p≤ 0,05) BTB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05) EEPE = Ekstrak Etanol Jangka Pendek Kulit Persea americana Mill.
Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas ALP tikus setelah pemberian karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan 1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kg BB
Pengujian kelompok negatif olive oil bertujuan untuk memastikan bahwa pelarut hepatotoksin karbon tertraklorida yakni olive oil, tidak berpotensi untuk menimbulkan efek toksik. Dosis olive oil yang digunakan dalam penelitian ini sama dengan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida yaitu 2 ml/kgBB. Berdasarkan penelitian Nopitasari (2013), menunjukkan bahwa dengan pemberian olive oil tidak menunjukkan adanya peningkatan nilai ALT. Didukung dengan penelitian Devaly (2014) yang menunjukkan bahwa dengan pemberian olive oil tidak menyebabkan peningkatan nilai ALT. Berdasarkan data statistika menunjukkan bahwa nilai purata aktivitas ALP setelah diberi olive oil adalah 274,2 ± 25,6 U/L. Ketika dibandingkan
dengan nilai ALP pada kelompok kontrol hepatotoksin yaitu 440,2 ± 37,7 U/L, menunjukkan perbedaan bermakna antara kelompok olive oil dengan kelompok hepatotoksin karbon tetraklorida. Hal ini berarti bahwa pada kelompok perlakuan
olive oil tidak menimbulkan peningkatan aktivitas ALP serum yang mengindikasikan
tidak terjadinya kerusakan pada hati.
Berdasarkan hal tersebut, maka dapat dikatakan bahwa apabila terjadi kenaikan aktivitas ALP pada kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida maupun kelompok perlakuan dipastikan itu bukan karena penggunaan olive oil sebagai pelarut. Kelompok kontrol negatif olive oil nantinya akan dipakai sebagai dasar nilai aktivitas ALP normal pada penelitian ini.
2. Kontrol Hepatotoksin Karbon Tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Pengukuran aktivitas ALP pada kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB (kelompok I) bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian karbon tetraklorida terhadap sel hati tikus berupa peningkatan aktivitas ALP. Selain itu, kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida menjadi patokan dalam menganalisis efek hepatoprotektif dari ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. Uji ini dilakukan dengan memejankan karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara intraperitonial pada tikus, kemudian pada jam ke-24 diambil darahnya untuk diukur aktivitas serum ALT dan serum AST ( Janakat dan Merie, 2002).
Aktivitas ALP kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB adalah 440,2 ± 37,7 U/L. Berdasarkan uji lanjutan yaitu uji scheffe terdapat perbedaan bermakna antara kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dan kelompok
kontrol negatif olive oil (Tabel IV). Hal ini berarti bahwa pada kelompok perlakuan hepatotoksin karbon tetraklorida mampu menimbulkan peningkatan aktivitas ALP yang menginduksi terjadinya kerusakan pada hati.
Peningkatan aktivitas ALP merupakan parameter terjadinya kolestasis yang merupakan salah satu macam kerusakan hati, dan pada obstruksi intra maupun ekstrabiliar enzim ini akan meningkat 3-10 kali dari nilai normal sebelum timbul ikterus (Ruqiah, dkk., 2007). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa adanya peningkatan aktivitas ALP sudah menimbulkan kolestasis, walaupun kolestasis yang terjadi belum sampai menimbulkan ikterus karena peningkatan aktivitas ALP pada penelitian ini belum mencapai 3-10 kali dari nilai normal. Hal tersebut juga dapat dipastikan dengan melakukan penelitian mengenai histologis hati sehingga kerusakan yang menyebabkan kolestasis akibat karbon tetraklorida dapat tampak secara histologis.
3. Kontrol Ekstrak Etanol Kulit buah Persea americana Mill. dosis 1,4 g/kgBB Pembuatan kontrol ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. (Kelompok II) bertujuan untuk melihat pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit buah
Persea americana Mill. dosis 1,4 g/kgBB terhadap aktivitas ALP. Pemberian ekstrak
etanol kulit buah Persea americana Mill. ini dilakukan secara oral dan dengan dosis terbesar dari ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill., yakni 1,4 g/kgBB. Alasan digunakan dosis tertinggi dalam uji ini yaitu untuk uji praperlakuan ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dari dosis rendah 0,35 g/kgBB hingga dosis tertinggi 1,4 g/kgBB.
Aktivitas ALP kontrol ekstrak etanol kulit buah Persea americana dosis 1,4 g/kgBB adalah 235,4 ± 11.4 U/L, sedangkan aktivitas ALP kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 274,2 ± 25,6 U/L. Apabila keduanya dibandingkan, maka aktivitas ALP terlihat hampir mendekati sama (0,00), secara statistik berbeda tak bermakna. Hal ini dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol kulit buah Persea
americana Mill. tidak memberikan pengaruh pada peningkatan aktivitas ALP sel hati
tikus. Namun perlu dilakukan pengujian lanjutan mengenai standarisasi ekstrak etanol untuk lebih memastikan pengaruh ekstrak etanol pada penurunan nilai aktivitas enzim ALP.
4. Kelompok perlakuan jangka pendek ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dosis 0,35; 0,70; dan 1,40 g/kg BB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB
Pengujian pada kelompok perlakuan ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida berdasarkan pada ada tidaknya penurunan aktivitas ALP. Aktivitas ALP pada dosis I dengan perlakuan ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dengan dosis 0,35 g/kgBB adalah 242,2 ± 19,0 U/L. Bila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB terdapat perbedaan bermakna dan ketika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB terdapat perbedaan tidak bermakna. Hal ini berarti ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dosis 0,35 g/kgBB
memiliki efek menurunkan aktivitas ALP akibat dari karbon tetraklorida, dimana aktivitas ALP sudah setara dengan keadaan normal.
Hal yang sama terjadi pula pada dosis II dengan ektrak etanol kulit buah
Persea americana Mill. dosis 0,70 g/kg BB dengan nilai ALP sebesar 212,4 ± 16,8
U/L. Bila dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB terdapat perbedaan bermakna dan ketika dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB terdapat perbedaan tidak bermakna. Hal ini berarti ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dosis 0,70 g/kgBB memiliki efek menurunkan aktivitas ALP akibat dari karbon tetraklorida, dimana aktivitas ALP sudah setara dengan keadaan normal.
Pada dosis III dengan nilai ALP 439,2 ± 46,6 U/L, ketika dibandingkan dengan kontrol karbon tetraklorida menunjukkan perbedaan tidak bermakna, sedangkan ketika dibandingkan dengan kontrol olive oil menunjukkan berbeda bermakna. Hal ini berarti setelah pemberian dosis III tidak menunjukkan penurunan nilai ALP, hal tersebut karena ada kemungkinan terjadi oksidasi dari antioksidan yang tidak berbahaya menjadi prooksidan yang beracun. Menurut Gordon (1990), besarnya antioksidan yang diberikan dapat berpengaruh pada laju oksidasi. Pada konsentrasi tinggi, aktivitas antioksidan grup fenolik sering lenyap bahkan antioksidan tersebut menjadi prooksidan. Pengaruh jumlah konsentrasi pada laju oksidasi tergantung pada struktur antioksidan, kondisi dan sampel yang akan diuji. Berdasarkan hal tersebut, maka perlu dilakukan pengujian lanjutan mengenai
senyawa yang berperan menurunkan aktivitas enzim ALP pada kulit buah Persea
americana Mill.
Hasil dari kelompok dosis ini menunjukkan nilai aktivitas ALP dosis I 0,35 g/kg BB ketika dibandingkan dengan dosis II 0,70 g/kgBB, menunjukkan bahwa dosis I dan dosis II setelah uji scheffe berbeda tidak bermakna. Dosis I dibandingkan dengan dosis III 1,40 g/kgBB menunjukkan perbedaan bermakna. Hal tersebut berarti bahwa antara dosis I, II dan III tidak memiliki kekerabatan dosis dengan respon yang muncul. Semakin besar dosis ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. yang diberikan, tidak dibarengi dengan respon yang muncul, yaitu penurunan nilai aktivitas ALP. Hal ini mempertegas bahwa tidak adanya kekerabatan antara dosis ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. dengan penurunan aktivitas ALP .