3.3.1 Persiapan Sampel untuk Analisis Kimia (TAPPI T-257 os 76)
Bambu dirajang dan dipotong-potong sebesar batang korek api, dikering udarakan kemudian digiling dengan menggunakan Hammer mill dan disaring hingga diperoleh serbuk dengan ukuran 40-60 mesh. Serbuk bambu dimasukan ke dalam timbel diekstrak dalam peralatan sokhlet dengan menggunakan 300 ml campuran pelarut etanol benzene (1:2). Ekstraksi dilakukan selama 6-8 jam, mencuci sampel minimal 24 kali atau hingga shiponing pada peralatan sokhlet berwarna bening. Kayu dipindahkan ke corong bunsher, kemudian lakukan ekstraksi dengan menggunakan 95% etanol selama 4 jam. Kelebihan pelarut setelah ekstraksi dapat dihilangkan dengan melakukan pengisapan dengan menggunakan vakum.
Pindahkan serbuk kayu ke dalam erlemeyer 1000 ml dan tambahkan 500 ml air destilasi mendidih. Setelah ekstraksi, saring pada kertas saring dan cuci dengan 500 ml air aquades mendidih. Kondisikan serbuk kayu pada kondisi kering udara kemudian dihitung kadar airnya.
3.3.2 Penentuan Kadar Air (ASTM Standard D 2016)
Serbuk sebanyak 1 gram ditempatkan pada cawan porselen yang telah diketahui bobotnya kemudian dimasukan ke dalam oven dengan suhu 103±2ºC selama 24 jam untuk menghilangkan seluruh air. Sampel dimasukan ke dalam desikator selama 15 menit dan ditimbang hingga bobotnya tetap.
Kadar air (%) = [ (BA-BKT)/BKT ] x 100%
Keterangan :
BA = Bobot awal (gram)
3.3.3 Penentuan Komponen Kimia Struktural Bambu 3.3.3.1 Penentuan Holoselulosa (Browning, 1967)
Serbuk bambu sebanyak 2 gram (40-60 mesh) dimasukan ke dalam labu erlemeyer dan camurkan secara berturut-turut 100 ml air aquades, 0.5 ml asaam asetat glasial dan 30 ml natrium hipoklorit. Labu erlemeyer ditempatkan pada penangas air dengan suhu 70 - 80°C selama satu jam dengan sesekali digoyangkan. Setelah satu jam tambahkan berturut-turut 0.2 ml asam asetat glasial dan 30 ml natrium hipoklorit. Ulangi penambahan asam asetat dan natrium hipoklorit pada akhir jam ke dua dan ke tiga. Dalam setiap penambahan asam asetat selalu dilakukan pertama kali.
Selanjutnya saring holoselulosa pada kertas saring yang telah diketahui bobotnya. Holoselulosa yang diperoleh dicuci dengan air panas dan tambahkan 25 ml asam asetat 10% lalu dicuci dengan air panas hingga bebas asam. Sampel dioven dengan mengeringkannya dalam oven dengan suhu 103±2ºC hingga bobotnya tetap.
Kadar holoselulosa (%) = [BKTAh/BKTBs] x 100%
Keterangan :
BKTAh = Bobot kering tanur holoselulosa (gram) BKTBs = Bobot kering tanur serbuk bambu (gram)
3.3.3.2 Kadar Selulosa (Cross dan Bevan 1912)
Sebanyak ± 2.5 gram serbuk bebas zat ekstraktif dimasukan ke dalam labu erlemeyer 300 ml lalu tambahkan 125 ml larutan asam nitrat 3.5% dan dipanaskan dalam waterbath selama 12 jam suhu 80 °C. Setelah pemanasan sampel disaring dengan air destilata hingga tidak berwarna dan kering udarakan. Sampel dipindahkan ke dalam erlemeyer kembali lalu ditambahkan 125 ml larutan campuran NaOH dan Na2SO3 dan panaskan 2 jam pada suhu 50°C. Saring dengan cawan saring dan cuci dengan air destilata hingga filtrat tak berwarna. Tambahkan 100 ml larutan sodium hipoklorit 10% dan cuci dengan air hingga diperoleh endapan berwarna putih. Tambahkan 100 ml asam asetat 10% lalu dicuci hingga bebas asam. Sampel dioven pada suhu 103 ± 2°C dan timbang hingga bobotnya tetap.
Kadar selulosa (%) = [BKTAs/BKTBs ] x 100 %
Keterangan :
BKTBs = bobot kering tanur serbuk (gram)
3.3.3.3 Kadar Alfa Selulosa (ASTM 1980)
Sebanyak 2 gram serbuk selulosa ditempatkan dalam erlemeyer 250 ml. Masukan 16 ml NaOH 17.5% dalam gelas ukur pada suhu 20°C sambil diaduk kemudian pada saat reaksi 5, 10 dan 15 menit ditambahkan 5 ml NaOH 17.5 % tutup dengan gelas arloji lalu biarkan sampai 45 menit. Saring sampel dengan kertas saring lalu dibilas dengan 125 ml NaOH 8% dan usahakan pembilasan berlangsung selama 5 menit. Bilas dengan menggunakan asam asetat 10% lalu bilas dengan air hingga bebas asam. Sampel dikeringkan pada suhu 103±2°C dan ditimbang hingga bobotnya tetap.
Alfa selulosa (%) = [BKTAa/BKTBs] x 100%
Keterangan :
BKTAa = Bobot kering tanur alfa selulosa (gram) BKTBs= Bobot kering tanur serbuk (gram).
3.3.3.4 Kadar Lignin Klason
Serbuk kayu bebas zat ekstraktif sebanyak 1,0 ± 0,1 gram dalam gelas piala. Tambahkan 15 ml larutan asam sulfat 72%. Penambahan asam dilakukan secara perlahan dan bertahap sambil diaduk pada temperatur 2 ± 1 ºC. Setelah tercampur sempurna, simpan gelas piala pada suhu 20 ± 1 ºC selama dua jam sambil diaduk sesekali. Ditambahkan sekitar 300-400 ml air ke dalam erlemeyer 1000 ml dan pindahkan sampel dari gelas piala ke erlemeyer. Bilas dan encerkan larutan dengan air aquades hingga dicapai konsentrasi asam sulfat 3% yaitu hingga total volume 575 ml. Didihkan larutan selama 4 jam dan jaga agar volume larutan tetapdengan menambahkan air panas. Lignin disaring dengan kertas saring dan dicuci dengan air panas hingga bebas asam. Sampel lignin dikeringkan dalam oven pada suhu 105 ±3 ºC hingga bobotnya tetap.
KadarLignin (%) = [BKTAL/BKTBs] x 100%
Keterangan :
BKTAL = Bobot kering tanur lignin (gram) BKTBs = Bobot tanur serbuk (gram)
3.3.4 Penentuan Komponen Kimia Non-struktural Bambu 3.3.4.1 Kelarutan dalam Etanol-benzene (TAPPI T 204 om 88)
Serbuk bambu sebanyak 10 gram dimasukan ke dalam kertas saring yang dibuat seperti timble yang telah diketahui bobotnya. Ektraksi dilakukan di dalam sokhlet dengan menggunakan etanol benzene (1:2) sebanyak 300 ml selama 6-8 jam atau minimal 24 kali pencucian timble oleh pelarut. Setelah itu timble dicuci menggunakan etanol hingga larutan bening. Untuk menghilangkan sisa pelarut digunakan vakum dan dioven pada suhu 103±2ºC hingga bobotnya tetap.
Kelarutan (%) = [BKA-BKTB] /BKTB x 100%
Keterangan :
BKTA = Bobot kering tanur serbuk sebelum ekstraksi (gram) BKTB = Bobot kering tanur serbuk setelah ekstraksi (gram)
3.3.4.2 Kelarutan kayu dalam Air Dingin (TAPPI T 207 om-93)
Serbuk kayu sebanyak 2 gram diekstrak dengan 300 ml aquades dingin dalam erlemeyer 400 ml selama 48 jam pada suhu kamar sambil diaduk. Kemudian serbuk disaring melalui kertas saring yang telah diketahui bobotnya. Cuci dengan 200 ml air aquades dingin dan keringkan pada oven bersuhu 103±2°C, simpan pada desikator dan timbang sampai bobotnya tetap.
Kelarutan (%) = [ BKTA – BKTB ] / BKTA x 100%
3.3.4.3 Kelarutan Kayu dalam Air Panas (TAPPI T 207 om-93)
Serbuk kayu sebanyak 2 gram, diekstrak dengan 100 ml aquades panas yang dimasukan ke dalam erlemeyer 250 ml. Sampel dipanaskan di dalam waterbath selama 3 jam dan diaduk sesekali. Kemudian sampel disaring dan dicuci dengan menggunakan air panas. Masukan sampel ke dalam oven dengan suhu 103±2°C selama 2 jam.
Kelarutan (%) = [ BKTA – BKTB ] / BKTB x 100 %
3.3.4.4 Kelarutan Kayu dalam NaOH 1 % (TAPPI T 212 om-93)
Sebanyak 2 gram serbuk bambu ditempatkan dalam gelas piala 200 ml. Tambahkan 100±1 ml larutan NaOH 1% dan aduk dengan pengaduk kaca. Tutup gelas piala dengan gelas arloji dan tempatkan dalam waterbath. Aduk larutan dengan dengan pengaduk kaca selama masing-masing 5 detik setelah setelah
pemanasan 10, 15, dan 25 menit. Setelah 60 menit pindahkan sampel dalam gelas filter dan cuci dengan 100 ml air panas. Kemudian tambahkan 25 ml asam asetat 10% dan biarkan sampel terendam selama 1 menit sebelum larutan asam asetat dihilangkan. Cuci dengan air panas hingga bebas asam. Keringkan glass filter dan sampel dalam oven pada suhu 105 ± 3°C, kemudian timbang hingga bobotnya tetap.
Kelarutan (%) = [ BKTA – BKTB ] / BKTB x 100%
3.3.4.5 Penentuan Kadar Abu dalam Kayu (TAPPI 211 om-93)
Serbuk kayu sebanyak 1 gram kering ovgen ditimbang dalam cawan abu yang telah diketahui bobotnya dan dioven pada suhu 100°C, lalu ditingkatkan sampai 525°C secara bertahap sehingga terjadi karbonisasi tanpa pembakaran. Atur suhu pengabuan pada kisaran 525 ± 25°C. Pembakaran selesai apabila partikel hitam telah hilang kemudian sampel dimasukan ke dalam desikator kemudian timbang hingga tetap.
Kadar abu (%) = [BKTAb /BKTBs] x 100%
Keterangan :
BKTAb = Bobot kering tanur abu (gram)
BKTBs = Bobot kering tanur serbuk kayu kering (gram)