Tingkat serum nilai RF, TNF a , dan IL-1 pada semua hewan secara
signifikan meningkat ( p <0,001) selama kondisi rematik, tetapi
tingkat RF dan TNFasecara signifikan berkurang oleh MF1 (p<0,05)
Ekstrak Hidroalkohol pada Tikus Wistar 157
Tingkat Sedimentasi Eritrosit (1 jam) 12
10 *
8 6
$ Diunduh oleh [University of Calgary] pada 06:21 22 September 2013
@ @
4 2 0
C DC DXM MF1 MF2
GAMBAR 4 Pengaruh MOFE pada laju sedimentasi eritrosit. Nilai = berarti SEM; * =berbeda
secara signifikan dari kontrol non-rematik ( p <0,001); @ dan $ = berbeda secara signifikan dari
pengendalian penyakit masing-masing pada p <0,001 dan p <0,05. DXM = deksametason; MF1 =
MOFE 100 mg / kg;MF2 = MOFE 200 mg / kg;n = 6 kelompok perlakuan tikus.ESR diukur pada hari
ke 21.
TABEL 3Efek MOFE pada Parameter Serum
RF TNF-a
Kelompok perlakuan (IU / mL) * (pg / mL) * IL-1
Kontrol (air suling) 5.20 0,88 15.8 1,7 47.9
4.1Kontrol sakit 11.570,98c 32.42,7b 123.83,5c RA + MF1 (100 mg kg-1) 8.120,91a 29.31,7d 122.0 4,5d RA + MF2 (200 mg kg-1) 6.401,05b 19.33,3a 102.0 5,2a RA + DXM (2,5 mg kg -1) 5.81 0,87b 19.1 2,6b 77.0
5.1a1Berartikesalahan standar rata-rata (n = 6), pengujian dilakukan pada hari ke 21 setelah memulai pengobatan, berarti dalam kolom diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda secara signifikan.
perawatan (Tabel 3).Kadar TNF-a yangmeningkat secara signifikan ( p<0,01)yang
ditemukan pada tikus rematik (vs kontrol non-rematik) secara signifikan menurun
oleh perawatan deksametason dan MF2 ( masing-masing p <0,01 dan p <0,05).
Pengurangan IL-1 kurang dari RF dan TNFa.
Histopatologi
Pemeriksaan histologis bagian dari hewan kontrol yang sakit menunjukkan perubahan patologis, termasuk kerusakan tulang, angiogenesis parah, dan
infiltrasi sel limfositik yang berkorelasi dengan rekan manusia. Namun, bagian
sinovial dari hewan yang diperlakukan dengan MOFE dan deksametason, dengan jelas menunjukkan beberapa tingkat perlindungan terhadap perubahan yang dicatat ini (Gambar 5).
Diunduh oleh [University of Calgary] pada 06:21 22 September 2013
158 SG Mahajan dan AA Mehta
SEBUAH
B C
GAMBAR 5 Efek histopatologis dari berbagai perawatan. Bagian sambungan sinovial diobati dan
tidak diobati lengkap Freund 's Adjuvant-arthritis yang diinduksi pada hewan uji; bagian yang
diwarnai dengan hematoxylin-eosin. A = perubahan patologis khas pada sendi artritis dengan
kerusakan tulang, angiogenesis berat dan infiltrasi sel limfositik, B = sendi sinovial normal, C =
kurang angiogenesis dan infiltrasi limfositik ringan dengan pengobatan deksametason, D = MF1
menunjukkan infiltrasi limfositik lebih sedikit tetapi tidak melindungi sendi. terhadap angiogenesis,E
= MF2 menunjukkan perlindungan yang signifikan terhadap infiltrasi limfosit, angiogenesis.
menunjukkan angiogenesis,↑menunjukkan infiltrasi limfositik.
DISKUSI
Arthritis eksperimental yang diinduksi oleh ajuvan (injeksi Mycobacterium TBC )
pada tikus adalahmodelin vivomapanuntuk rekapitulasibanyak fitur patologis RA
(39). Tikus dengan arthritis yang diinduksi ajuvan menunjukkan peradangan
(pembengkakan kaki dan peradangan leukosit masif pada sinovium) dan kerusakan tulang (berkurangnya kepadatan mineral tulang pada sendi kecil tangan,
pergelangan tangan, kaki, dan kerusakan tulang rawan) (43). Dengan demikian,
arthritis adjuvant memiliki kemampuan untuk menghasilkan lesi primer dan sekunder dan menyediakan kondisi untuk mengevaluasi ekstrak hidroalkohol
Diunduh oleh [University of Calgary] pada 06:21 22 September 2013
Ekstrak Hidroalkohol pada Tikus Wistar 159
bunga kelor untuk menentukan manfaat fisik, biokimia, dan histologis dari ekstrak dalam mengobati radang sendi.
Perubahan fisik yang merugikan, termasuk kehilangan berat badan, peningkatan volume edema paw, dan indeks artritis pada hewan kontrol yang
sakit, dibalikkan sampai batas tertentu dengan pemberian MOFE secara oral. Studi
praklinis dan klinis telah menunjukkan bahwa perubahan berat badan sejajar
dengan kejadian dan tingkat keparahan RA (50). Pengurangan maksimum edema
kaki, yang diamati 21 hari setelah dimulainya percobaan eksperimental, dikaitkan dengan penghambatan baik infiltrasi sel dan pembentukan edema lokal. Kemampuan obat untuk mengurangi pembentukan edema mungkin terkait dengan aksi penghambatan pada infiltrasi seluler dan sintesis prostaglandin yang merupakan karakteristik dari aksi obat antiinflamasi.
Perubahan LED juga menjadi ukuran yang berguna dari peradangan selama RA, berbanding lurus dengan tingkat keparahan penyakit pada hewan dan manusia
(44). Ramprasath et al. (42) telah mempelajari pengaruh ekstrak Semecarpus
anacardiumLinn.pada adjuvant diinduksi arthritis pada tikus di mana peningkatan
kadar ESR terjadi pada hewan kontrol yang sakit. Kruithof et al. (28) melaporkan
tingginya tingkat ESR pada pasien RA dari arthritis psoriatik, spondylarthropathy,
dan RA. ESR yang meningkat diamati pada tikus rematik dalam penelitian ini
dikurangi secara signifikan dengan pengobatan, mendukung hasil Plant et al. (41)
pada tingkat protein C-reaktif terintegrasi-waktu, LED, dan perkembangan radiologis pada pasien dengan RA.
Faktor reumatoid (RF), ukuran yang berguna dari jumlah IgM hadir dalam serum host yang sakit, disintesis oleh sel-B dan sel plasma yang telah menyusup ke
dalam sinovium pasien RA (24). Pengobatan dengan MOFE secara signifikan
mengurangi level RF serum dibandingkan dengan yang ada pada hewan uji kontrol
yang tidak sehat. Hasil-hasil antiinflamasi yang nyata ini diperoleh dengan
perawatan ekstrak bunga kelor yang paling mungkin dikaitkan dengan kehadiran flavonoid dan antioksidan yang ada dalam ekstrak.
Sinovitis, yang terdiri dari respons inflamasi dan arthritis yang dimediasi secara imunologis, didorong dalam model ini dengan masuknya makrofag, leukosit
(23) dan fibroblas (48). Secara khusus, setelah aktivasi, mereka masing-masing
mampu mensintesis mediator inflamasi seperti sitokin PGE 2(TNF- a , 1, dan
IL-6). Pada gilirannya, mediator ini menginduksi produksi berbagai enzim
(pro-teolitik) yang memulai tulang rawan dan kerusakan tulang (19). Pengurangan TNF
suatu sintesis akan mencerminkan efek perlindungan MOFE selama artritis
TNF- a memberikan efek proinflamasi dan imunopotensiasi in vivo dan in vitro
(10) dan telah terlibat dalam mekanisme patologis syn
proliferasi fibroblast ovial (46) dan destruksi kartilago (4) pada RA. Memang,
TNF-a adalah salah satu sitokin osteoklastogenik yang paling kuat yang diproduksi
terbaru telah menunjukkan adanya TNF- adalam cairan sinovial (18), plasma (22),
dan jaringan (20) pada pasien dengan RA. Dalam penelitian kami, pengobatan
dengan MOFE secara substansial mengurangi tingkat TNF- apada dosis 200 mg /
Diunduh oleh [University of Calgary] pada 06:21 22 September 2013
160 SG Mahajan dan AA Mehta
dibandingkan dengan kontrol yang sakit tidak menerima MOFE. Hasil ini serupa
dengan penelitian lain yang menunjukkan aktivitas penghambatan bahan tanaman
herbal pada tingkat TNF-apada model hewan dan manusia (42).
TNF- a adalah penginduksi kuat dari IL-1, dan kadar IL-1 yang tinggi telah
terdeteksi dalam cairan sinovial RA dan dalam sel-sel membran sinovial RA (17). Mediator inflamasi ini menstimulasi sinoviosit dan monosit dan mendorong
degradasi tulang dan tulang rawan melalui peradangan kaskade.Dengan demikian,
IL-1 terlibat dalam patogenesis sinovitis RA (2,12).Seperti disebutkan sebelumnya,
banyak strategi baru-baru ini telah memfokuskan pada pemblokiran aktivitas
TNF-adan IL-1 dengan tujuan mencapai efek terapeutik terhadap arthritis autoimun.
Bagian tanaman kelor telah dilaporkan memiliki efek menguntungkan terhadap
peradangan akut dan kronis. Ekstrak etanol kasar dari biji kering dari kelor dan
ekstrak metanol kasar dari akar kelor telah diuji untuk aktivitas antiinflamasi dengan menggunakan peradangan yang diinduksi karagenan di kaki belakang tikus (47) dan menggunakan edema kaki tikus yang diinduksi karagenan dan tikus.
model peradangan kantong udara hari (13), masing-masing. Informasi air panas
dari bunga, daun, akar, biji, dan batang atau kulit kelor, disaring untuk kegiatan farmakologis pada tikus percobaan, semuanya telah diamati untuk menghambat
edema yang diinduksi karagenan dengan dosis 1.000 mg kg - 1( 5).
Ekstrak etanol bunga kelor mengandung tiamin, riboflavin, asam nikotinat,
asam folat, piridoksin, asam askorbat,sebuah-tokoferol,b-carotene, rhamnetin, dan
kaempferol, sedangkan ekstrak air mengandung D-mannose, D-glukosa,
monosakarida tak dikenal, protein, dan asam askorbat (21). Di laboratorium kami,
kami telah berhasil mengisolasi benzyl isothiocyanate dari ekstrak biji kelor. Investigasi fitokimia kualitatif moringa dalam penelitian kami menunjukkan adanya berbagai komponen aktif biologis aktif.
Singkatnya, temuan kami menunjukkan bahwa MOFE dengan dosis 200 mg kg
- 1 menekan pembentukan dan / atau pelepasan sitokin proinflamasi kunci dan
menghambat infiltrasi leukosit ke situs target potensial untuk RA. MOFE juga
mengubah level sitokin. Dengan demikian, pengamatan kami mendukung beberapa
penggunaan tradisional dari tanaman kelor untuk tujuan pengobatan dalam sistem
pengobatan Ayurvedic, terutama di negara-negara Asia. Investigasi lebih lanjut
diperlukan untuk menjelaskan mekanisme yang tepat dari tindakan biologis MOFE dan peran konstituen yang bertanggung jawab atas kegiatan tersebut.
REFERENSI
1. Arend, WP, dan JM Dayer. 1995. Penghambatan produksi dan efek interleukin-1 dan
tumor necrosis factor- a pada rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum . 38 (2): 151 –160.
2. Arner, EC, dan MA Pratta. 1989. Efek independen interleukin-1 pada pemecahan
proteoglikan, sintesis proteoglikan, dan pelepasan prostaglandin E 2 dari tulang rawan
Diunduh oleh [University of Calgary] pada 06:21 22 September 2013
Ekstrak Hidroalkohol pada Tikus Wistar 161
3. Bertazzolo, N., L. Punzi, M. Stefani, G. Cesaro, M. Pianon, B. Finco, dkk. 1994. Keterkaitan antara interleukin IL-1, IL-6 dan IL-8 di SF dari berbagai arthr-opathies. Radang Res. 41 (1 –2): 90 –92.
4. Bertolini, DR, GE Nedwin, TS Bringman, DD Smith, dan GR Mundy. 1986. Stimulasi resorpsi tulang dan penghambatan pembentukan tulang secara in vitro oleh faktor nekrosis tumor manusia. Alam 319 (6053): 516 –518.
5. Caceres, A., A. Saravia, S. Rizzo, L. Zabala, ED Leon, dan F. Nave. 1992. Sifat farmakologis Moringa oleifera : 2. Penapisan untuk aktivitas antispas-modic, anti-inflamasi dan diuretik. J. Ethnopharmacol. 36 (3): 233 –237.
6. Caceres, A., O. Cebreva, O. Morales, P. Miollined, dan P. Mendia. 1991. Sifat Phar-macological M. oleifera : 1. Skrining awal untuk aktivitas antimikroba. J. Ethnopharmacol . 33 (3): 213 –216.
7. Chuang, PH, Lee CW, JY Chou, M. Murugan, BJ Shieh, dan HM Chen. 2007. Aktivitas antijamur ekstrak kasar dan minyak atsiri Moringa oleifera Lam. Technol Biosource. 98 (1): 232 –366.
8. Dahot, MU, dan AR Memon. 1985. Signifikansi nutrisi dari minyak yang diekstrak dari biji Moringa oleifera . J. Pharm. (Univ. Karachi) . 3 (2): 75 –80.
9. Das, BR, PA Kurup, dan PL Narasimha Rao. 1958. Prinsip antibiotik dari Moringa Pterosperma Bagian IX. Penghambatan transaminase oleh isocyanate. Ind J. Med. Res. 46 : 75 –77.
10. Dayer, JM, B. Beutler, dan A. Cerami. 1985. Faktor nekrosis Cachectinitumor merangsang produksi kolagenase dan prostaglandin E2 oleh sel sinovial manusia dan fibroblas kulit. J. Exp. Med. 162 (6): 2163 –2168.
11. Dayrit, FM, ADAlcantara, dan IM Villasenor. 1990. Senyawa antibiotik dan penonaktifannya dalam larutan berair. Phil. J. Sci. 119 : 23–26.
12. Evans, CH, PD Robbins, SC Ghivizzani, MC Wasko, MM Tomaino, R. Kang, dkk.
2005. Transfer gen ke sendi manusia: Kemajuan menuju terapi 485 artritis gen. Proc
Natl. Acad. Sci. USA. 102 (24): 8698 –8703.
13. Ezeamuzie, IC, AW Ambakederemo, FO Shode, dan SC Ekwebelem. 1996. Efek antiinflamasi dari ekstrak akar Moringa oleifera . Int. J. Pharmacogn. 34 (3):207 –212. 14. Faizi, S., BS Siddiqui, R. Saleem, S. Siddiqui, K. Aftab, and AHGilani. 1995. Fully acetylated carbonate and hypotensive thiocarbamate glycosides from Moringa oleifera . Phytochemistry 38 (4):957 –963.
15. Guevara, AP, C. Vargas, H. Sakurai, Y. Fujiwara, K. Hashimoto, T. Maoka, et al. 1999. An antitumor promoter from Moringa oleifera Lam. Mutat. Res. 440 (2):181 –188. 16. Halliwell, B. 1994. Free radicals, antioxidants, and human disease: Curiosity, cause, or consequence? Lancet . 344 (8924):721 –724.
17. Hirano, T., T. Matsuda, M. Turner, N. Miyasaka, G. Buchan, B. Tang, K. et al. 1988. Excessive production of interleukin 6/B cell stimulatory factor-2 in rheu-matoid arthritis. Eur. J. Immunol . 18 (11):1797 –1801.
18. Hopkin, SJ, and A. Meager. 1988. Cytokines in synovial fluid: II. The pres-ence of tumour necrosis factor and interferon. Clin. Exp. Immunol . 73 (1): 88 –92.
19. Hopkins, SJ 1990. Cytokines and eicosanoids in rheumatic diseases. Ann. Rheum. Dis . 49 (4):207 –210.
Downloaded by [University of Calgary] at 06:21 22 September 2013
162 SG Mahajan and AA Mehta
20. Husby, G., and RC Williams. 1988. Synovial localization of tumor necrosis fac-tor in patients with rheumatoid arthritis. J. Autoimmunol . 1 (4):363 –371.
21. Jadhav, SL, S. R Sharma, SC Pal, SB Kasture, and VS Kasture. 2000. Chemistry and pharmacology of Moringa oleifera Lam and M.concanensis Nimo. Indian Drugs 37 (3):139 –144.
22. Kamanl, A., M. Naziroglu, N. Aydilek, and C. Hacievliyagil. 2003. Plasma lipid peroxidation and antioxidant levels in patients with rheumatoid arthritis. Sel Biokem. Fungsi 22 (1):53 –57.
23. Kasama, T., F. Shiozawa, K. Kobayashi, N. Yajima, M. Hanyuda, HT Takeuchi, et al. 2001. Vascular endothelial growth factor expression by activated synovial leukocytes in rheumatoid arthritis: Critical involvement of the interaction with synovial fibroblasts. Arthritis Rheum. 44 (11):2512 –2524.
24. Kim, H. J, V. Krenn, G. Steinhauser, and C. Berek. 1999. Plasma cell develop-ment in synovial germinal centers patients with rheumatoid and reactive arthritis. J. Immunol. 162 (5):3053 –3062.
25. Kirtikar, KR, and BD Basu. 1975. Indian Medicinal Plants , 2 nd Ed., Vol. 1. In D. Dun,
B. Singh, and MP Singh, eds. M/s Bishen Singh Mahendra Pal Singh, New Cannaught Place, Dehradun, India. pp. 676 –683.
26. Koch, AE, SL Kunkel, and RM Strieter. 1995. Cytokines in rheumatoid arthritis. J. Invest. Med. 43 (1):28 –38.
27. Krause, I., G. Valesini, R. Scrivo, and Y. Shoenfeld. 2003. Autoimmune aspects of cytokine and anticytokine therapies. Saya. J. Med. 115 (5):390 –397.
28. Kruithof, E., D. Baeten, LD Rycke, B. Vandooren, D. Foell, J. Roth, et al. 2005. Synovial histopathology of psoriatic arthritis, both oligo and polyarticular, resembles spondyloarthropathy more than it does rheumatoid arthritis. Radang sendi Res. Ada 7 (3):R569 –R580.
29. Landrault, N., P. Poucheret, P. Ravel, F. Gasc, G. Cros, and PL Teissedre. 2001. Antioxidant capacities and phenolics levels of French wines from different varieties and vintages. J. Agric. Food. Chem 49 (7):3341 –3343.
30. Mahajan, S. G, RG Mali, and AA Mehta. 2007. Effect of Moringa oleifera Lam. seed extract on toluene diisocyanate-induced immune-mediated inflam-matory responses in rats. J. Immunotoxicol. 4 (2):85 –96.
31. Mahajan, S. G, RG Mali, and AA Mehta. 2007. Protective effect of ethanolic extract of seeds of Moringa oleifera Lam. against inflammation associated with development of arthritis in rats. J. Immunotoxicol. 4 :39 –47.
32. Mekonnen, Y., and A. Gessesse. 1998. Documentation on the uses of Moringa
stenopetala and its possible antileishmanial and antifertility effects. SINET: Ethi-opian J. Sci. 21 (2):287 –295.
33. Memon, GM, and LM Khatri. 1987. Isolation and spectroscopic studies of mono-palmitic, di-oleic triglyceride from seeds of Moringa oleifera Lam. Pak. J. Sci. Indian Res. 30 (5):393 –395.
34. Miossec, P. 1992. Cytokine abnormalities in inflammatory arthritis. Baillieres Clin. Rheumatol. 6 (2):373 –391.
35. Murakami, A, Y. Kitazono, S. Jiwajinda, K. Koshimizu, and H. Ohigashi. 1998. Niaziminin, a thiocarbamate from the leaves of Moringa oleifera , holds a strict structural requirement for inhibition of tumor promoter- induced Epstein-Barr virus activation. Planta Med. 64 (4):319 –323.
Downloaded by [University of Calgary] at 06:21 22 September 2013
Hydroalcoholic Extract in Wistar Rats 163
36. Njoku, OU, and MU Adikwu. 1997. Investigation on some physicochemical antioxidant and toxicological properties of Moringa oleifera seed oil. Acta Pharm Zagr. 47 (4):287 –290.
37. Paech, D., and MV Tracey. 1955. Modern Methods of Plant Analysis , Vol. IV. Springer-Verlag, Berlin. pp. 373 –374.
38. Pari, L., and NA Kumar. 2002. Hepatoprotective activity of Moringa oleifera on antitubercular drug-induced liver damage in rats. J. Med. Food 5 (3):171 –177. 39. Pearson, CM 1956. Development of arthritis, periarthritis and periostitis in rats given adjuvant. Proc Soc. Exp. Biol. Med. 91 (1):95 –101.
40. Pearson, CM, and F. Wood. 1963. Studies of arthritis and other lesions induced in rats by the injection of Mycobacterium adjuvant. Saya. J. Pathol. 42 (1):93 –95. 41. Plant, MJ, AL Williams, MM O 'Sullivan, PA Lewis, EC Coles, and JD Jessop. 2000. Relationship between time-integrated C-reactive protein levels and radiologic progression in patients with rheumatoid arthritis. Radang sendi Rheum . 43 (7):1473 –1477.
42. Ramprasath, V. R, P. Shanthi, and P. Sachdanandam. 2006. Curative effect of Semecarpus anacardium Linn. nut milk extract against adjuvant arthritis —with special reference to bone metabolism. Chem Biol. Berinteraksi 160 (3):183 –192. 43. Romas, E., MT Gillespie, and TJ Martin. 2002. Involvement of receptor acti-vator
of NFkB ligand and tumor necrosis factor- ∝ in bone destruction in rheu-matoid
arthritis. Bone 30 (2):340 –346.
44. Sarban, S., A. Kocyigit, M. Yazar, and UE Isikan. 2005. Plasma total antioxidant capacity, lipid peroxidation, and erythrocyte antioxidant enzyme activities in patients with rheumatoid arthritis and osteoarthritis. Clin. Biokem. 38 (11):981 –986.
45. Schorlemmer, HU, R. Kurrle, R. Schleyerbach, and RR Bartlett. 1999. Disease modifying activity of malononinitrilamides, derivates of leflunomide 's active metabolite, on models of rheumatoid arthritis. Inflamm. Res. 48 (2):113 –114.
46. Sugarman, BJ, BB Aggarwal, PE Hass, IS Figari, MA Palladino, and HM Shepard.
1985. Recombinant human tumor necrosis factor- a : Effects on prolifera-tion of
normal and transformed cells in vitro . Science 230 (4728): 943 –945.
47. Udupa, SL, AL Udupa, and DR Kulkarni. 1994. Studies on the anti-inflammatory and wound healing properties of Moringa oleifera and Aegle marmelos . Fitoterapia 65 (2):119 –123.
48. Vilcek, J., VJ Palombella, D. Henriksen-DeStefano, C. Swenson, R. Feinman,
M. Hirai, et al. 1986. Fibroblast growth enhancing activity of tumor necrosis
factor and its relationship to other polypeptide growth factors. J. Exp. Med. 163 (3):632 –643.
49. Villasenor, IM, CY Lim-Sylianco, and F. Dayrit. 1989. Mutagens from roasted seeds of Moringa oleifera . Mutat. Res. 224 (2):209 –212.
50. Walz, DT, JJ Dimartino, and A. Misher. 1971. Adjuvant-induced arthritis in rats: Drug effect on physiologic, biochemical and immunologic parameters.
J. Pharm Exp. Ada 178 (1):223 –231.
51. Westergren, A. 1926. The techniques of the red cell sedimentation reaction. Saya. Rev. Tuberc . 14 :94 –101.
52. Winter, CA, EA Risley, and W. Nuss. 1962. Carrageenan induced edema in hind paw of rats as an assay for anti-inflammatory drugs. Proc Soc. Exp. Biol. Med. 111 :544 –547.