METODE PENELITIAN
4.7 Prosedur Penelitian
4.7.1 Makanan Standar Kelompok Kontrol
Makanan standar yang diberikan adalah pakan ikan merk Takari, diproduksi
oleh PT Central Proteinaprima Tbk, Sidoarjo, Jawa Timur, Indonesia. Pakan terdiri
enhancer, antioxidants. Serta diperkaya oleh vitamin A, D3, E, B1, B2, B6, B12, niacin, biotin, panthotenic, choline. Protein (min) 30%, crude fat (min) 3%, crude fiber (max) 4%, crude ash (max) 12%. Produk ini dipilih karena besar pelet cukup halus untuk dapat dicerna oleh tikus yang baru masuk masa sapih, serta
mencantumkan komposisi isi. Makanan dan air diberikan secara ad libitum (tanpa
takaran).
4.7.2 Pembuatan Sediaan Makanan Pengganti cair PediaSure®
Untuk anak usia 1-3 tahun dengan status BB kurang (± 10 Kg BB) diberikan
makanan pengganti cair PediaSure® sebanyak 5 takar bubuk susu (45 gr) dilarutkan
dengan 190 ml air untuk mendapatkan 237 ml makanan pengganti cair. Makanan
pengganti cair diberikan 4 kali sehari (± 1.000 ml) untuk memenuhi kecukupan gizi
harian.
Perhitungan sesuai tabel konversi :
BB anak ± 10 kg
Dosis tikus 20 gr adalah 1/12 dosis manusia dewasa dengan BB 60 kg → 1/12 dikalikan dengan berat badan anak (1/6 dosis berat dewasa) →
1/12 X 1/6 = 1/48 (Reagan-Shaw et al., 2007; Shin et al., 2010; Freireich, 2014)
1 kali pemberian bubuk susu pada anak adalah 45 gr → 1/48 X 45 gr ≈ 1 gr bubuk susu per kali
Dosis pada tikus : 1 gr bubuk susu diencerkan dengan 2 cc air sesuai besar
lambung tikus (10% dari total berat badan tikus) (Ngatidjan, 2006), diberikan 4 kali
per hari (sesuai dengan aturan dosis minum untuk anak).
Makanan pengganti cair PediaSure® sebanyak 1 gr dilarutkan dengan 2 ml air
hangat menghasilkan ± 5,2 kkal. Dosis yang digunakan adalah 1/12 dosis anak
dengan berat badan 10 kg, dimana untuk berat badan tikus dengan rata-rata 20 gr
maka dosis yang diberikan adalah 1 gr/kali yang dilarutkan dengan 2 ml air, diberikan
dengan menggunakan sonde (force feeding) sebanyak 2 ml per kali pemberian, 4 kali
per hari dengan jarak pemberian 4 jam sekali, setiap hari selama 21 hari.
4.7.3 Sediaan Makanan Pengganti Cair Nutrisure Gold®
Untuk anak usia 1-3 tahun dengan status berat badan kurang (± 10 Kg BB)
diberikan makanan pengganti cair Nutrisure Gold sebanyak 5 takar bubuk susu (45,5
gr) dilarutkan dengan 175 ml air untuk mendapatkan 230 ml makanan pengganti cair.
Makanan pengganti cair diberikan 4 kali sehari (± 1.000 ml) untuk memenuhi
kecukupan gizi harian.
Perhitungan sesuai tabel konversi :
BB anak ± 10 kg
Dosis tikus 20 gr adalah 1/12 dosis manusia dewasa dengan BB 60 kg → 1/12 dikalikan dengan berat badan anak (1/6 dosis berat dewasa) →
1 kali pemberian bubuk susu pada anak adalah 45,5 gr → 1/48 X 45,5 gr ≈ 1 gr bubuk susu per kali
Dosis pada tikus : 1 gr bubuk susu diencerkan dengan 2 cc air sesuai besar
lambung tikus (10% dari total berat badan tikus) (Ngatidjan, 2006), diberikan 4 kali
per hari (sesuai dengan aturan dosis minum untuk anak).
Makanan pengganti cair Nutrisure Gold sebanyak 1 gr dilarutkan dengan 2 ml
air hangat menghasilkan ± 5,2 kkal. Dosis yang digunakan adalah 1/12 dosis anak
dengan berat badan 10 kg, dimana untuk berat badan tikus dengan rata-rata 20 gr
maka dosis yang diberikan adalah 1 gr/kali yang dilarutkan dengan 2 ml air, diberikan
dengan menggunakan sonde (force feeding) sebanyak 2 ml per kali pemberian, 4 kali
per hari dengan jarak pemberian 4 jam sekali, setiap hari selama 21 hari.
4.7.4 Persiapan Hewan Coba
1. Anak tikus (rattus norvegicus) jantan galur wistar, usia 21 hari dengan
berat badan 16-20 gram, sudah disapih dan sehat digunakan sebagai
hewan percobaan.
2. Kandang yang digunakan untuk memelihara anak tikus berupa bak
plastik dan pada bagian atas diberi penutup kawat serta pada dasar bak
diberikan sekam untuk menyerap kotoran tikus.
3. Anak tikus dilakukan aklimatisasi selama satu minggu di tempat
4. Anak tikus ditimbang berat badannya lalu dikelompokkan secara
random menjadi 3 (tiga) kelompok yaitu: Kelompok P0 (Kelompok
Kontrol dengan pemberian pakan ikan dan aquabidest), Kelompok P1
(Kelompok Perlakuan pertama dengan pemberian makanan pengganti
cair PediaSure® dan aquabidest) dan kelompok P2 (Kelompok
Perlakuan ke dua dengan pemberian makanan pengganti cair Nutrisure
Gold® dan aquabidest) kemudian dimasukkan dalam kandang
masing-masing.
5. Tikus pada Kelompok Kontrol (P0) diberikan pakan ikan dan aquabidest
selama 21 hari. Pakan ikan serta air diberikan secara ad libitum (tanpa
takaran). Berat badan tikus ditimbang setiap 3 hari sekali.
6. Tikus pada Kelompok Perlakuan pertama (P1) diberikan makanan
pengganti cair PediaSure® sebanyak 1 gr bubuk susu yang dilarutkan
dengan 2 ml air, diberikan dengan menggunakan sonde (force feeding),
2 ml per kali pemberian sebanyak 4 kali per hari dengan jarak
pemberian 4 jam sekali, setiap hari selama 21 hari. Air diberikan secara
ad libitum (tanpa takaran). Berat badan tikus ditimbang setiap 3 hari sekali.
7. Tikus pada Kelompok Perlakuan ke dua (P2) diberikan makanan
pengganti cair Nutrisure Gold® sebanyak 1 gr bubuk susu yang
feeding), 2 ml per kali pemberian sebanyak 4 kali per hari dengan jarak
pemberian 4 jam sekali, setiap hari selama 21 hari. Air diberikan secara
ad libitum (tanpa takaran). Berat badan tikus ditimbang setiap 3 hari sekali.
8. Tikus yang sakit selama masa penelitian diperiksa dan dirawat oleh
dokter hewan.
9. Pada hari ke 15, seluruh anak tikus ditimbang berat badannya dan
diambil darah kurang lebih 1 ml dari medial canthus sinus orbitalis serta
diperiksa kadar hormon estrogen serta progesteron di laboratorium.
Setelah itu anak tikus akan dikembalikan lagi ke Laboratorium Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Udayana untuk diberi minum, serta
vitamin secukupnya. Anak tikus yang telah digunakan sebagai hewan
coba, kemudian disumbangkan ke Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Udayana.
4.7.5 Pemeriksaan Kadar Estrogen dan Progesteron
Pemeriksaan kadar Estrogen dan Progesteron dengan menggunakan teknik
4.7.6 Alur Penelitian
Gambar 4.3 Bagan Alur Penelitian
Anak t ikus jantan usia 21 hari ; 30 ekor
Kontrol 10 ekor
Perlakuan Kelompok pertama 10 ekor
Pem berian pakan ikan dan air selama 21 h a r i
Pem berian makanan pengganti cair PediaSure ® selama 21 hr
Pemeriksaan post test Kon trol
Pemeriksaan post test P erlakuan Kelompok I
Berat badan
Estrogen dan progestron
Analis is Data
Perlakuan Kelompok kedua 10 ekor
Pemberian makanan pengganti cair Nutrisure Gold® selama 21 hari
P emeriksaan post test P erlakuan Kelompok II
4.7.7 Cara Pengumpulan Data
Data yang dilakukan pada penelitian ini diperoleh dari:
30 ekor anak tikus (rattus norvegicus) jantan galur wistar usia 21 hari, dibagi menjadi
3 (tiga) kelompok. Terhadap ke 10 ekor anak tikus dari masing-masing kelompok,
dilakukan pengukuran berat badan setiap 3 hari sekali dan pengambilan sampel darah
pada akhir penelitian, sejumlah 1 ml dari bagian medial canthus sinus orbitalis serta
dilakukan pemeriksaan kadar hormon estrogen dan progesteron di laboratorium.