Saran - KESIMPULAN DAN SARAN - Aktivitas antiangiogenesis ekstrak etanol buah mengkudu (Morinda

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

B. Saran

1. Identifikasi dan isolasi senyawa murni pada buah mengkudu sebagai antiangiogenesis, sehingga bisa diketahui mekanisme penghambatannya secara spesifik.

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui mekanisme aktivitas antiangiogenesis dari senyawa spesifik yang memiliki aktivitas antiangiogenesis dalam buah mengkudu.

DAFTAR PUSTAKA

Ariyanti, T., 1999, Penggunaan Model Tumor Angiogenesis faktor untuk Deteksi Biologis Karsinogenesis Paru Serviks Uterus Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi dengan Benzo(a)piren, Tesis, Program Pasca Sarjana UGM, Jogjakarta.

Backer and Brink, V.B., 1965, Flora of Java, Wolters Mood Hoff N. V., Netherlands, pp 167-173

Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2010, Acuan Sediaan Herbal, 5 (1), Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, pp. 6-7.

Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2005, Standarisasi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia, Salah Satu Tahapan Penting dalam Pengembangan Obat Asli Indonesia, 6, Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, pp. 5.

Bergers, G., Hanahan, D., 2008, Modes of resistance to anti-angiogenic therapy.

Nat Rev Cancer 8: 592–603.

Bestari, J., Parakkasi. A., and Akil, S., 2005, Pengaruh pemberian tepung daun mengkudu (Morinda citrifolia. L) yang direndam air panas terhadap penampilan ayam boiler, Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner, 704.

Bosman, F.T., 1999, Aspek-aspek Fundamental Kanker, In Van de Velde, C.J.H., Bosman, F.T., Wagner, D.J.Th.(Eds)., Onkology, diterjemahkan oleh Arjono, Edisi kelima, Panitia Kanker RSUD DR Sardjito, Jogjakarta, 3-10

Djauhariya, Endjo, 2003, Mengkudu (Morinda citrifolia L.) Tanaman Obat Potensial, Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat. Pengembangan Teknologi TRO, 15(1) : 1-16.

Djauhariya, E., Raharjo, M., dan Ma‟un, 2006, Karakterisasi Morfologi dan Mutu Buah Mengkudu. Buletin Plasma Nutfah, 12(1) : 1-8.

Eliceiri, B.P., and Cheresh, D.A., 1999, The role of αv Integrins During Angiogenesis : Insight Into Potential Mechanism of Action and Clinical Development, J., Clint. Invest, vol 103 : 1227-1230.

Elkin, M. dkk., 2000, “Halofuginone: a potent inhibitor of critical steps in angiogenesis progression”, The FASEB Journal, 14, 2477-2485.

Evans, C.W., 1991, The Metastatic Cell, Edisi pertama, Champman and Hall, London, pp. 191-289.

Folkman, J., 1971, Tumour Angiogenesis: Therapeutic Implications, New England J. Medicine, 285(21); 1182-1186.

Folkman, J, 1996, Fighting Cancer by Attaching its Blood Supply, Scientific American 19: 116-119.

Ferrara, N., and Alitalo, K., 1999, Clinical Application of Angiogenic Growth Factors and Their Inhibitor, Nature Medicine, 5 (12) : 1359-1364.

Gajovic, S., and Gruss, P., 1988, Differentiation oh The Mouse Embryoid Bodies Grafted on The Chariallantoic Membrane oh The Chick Embryo, Int.J. Dev. Biol., 42: 225-228.

Giavazzi, R., Albini, A., Bussolino, F., DeBraud, F., Presta, M., Ziche, M., Costa, A., 2000, The biological basis for antiangiogenic therapy (meeting report),

European Journal of Cancer., 36: 1913-1918

Grant, B,. 2008, Medical Nutrition Therapy for Cancer Prevention, Treatment, and Recovery. Di dalam: Mahan LK, Stump SE, editor. Krause’s Food,

Nutrition & Diet Therapy. USA: Saunders Elsevier, pp. 25.

Hanahan, D., and Weinberg, R.A., 2000, The Hallamarks of Cancer, Cell, Cell Press, P. 57-70.

Harborne, J. B. 1996. Metode Fitokimia : Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan Diterjemahkan oleh : K. Padmawinata dan I. Soediro. Penerbit ITB, Bandung.

Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia, vol.3, Badan Litbang Kehu-tanan, Jakarta, pp. 1795-1799.

Hiramatsu, Tomonori, Imoto, Masaya, Koyano, Umezawa, Kazuo, 1993, Induction of normal Phenotypes in Ras-Transformed cell by Damnacanthal from Morinda Citrifolia.Cancer Letters. 73 (3) : 161-166.

Hirazumi A, Furusawa E., 1999, An immunomodulatory polysacchariderich substance from the fruit juice of Morinda citrifolia (noni) with antitumour activity. Phytother Res. 13(5):380-387.

Kerbel, R., Folkman, J., 2002, Clinical Translation of Angiogenesis Inhibitors,

Nature Cancer Rev., 2: 727-739.

Keshet, E., and Sasson, S.A.B., 1999, Anticancer Drug Targets : Approaching Angiogenesis, J. Clin. Invest, vol 104 : 11 : 1497-1500.

Kirchner, M.L., Schmidt, P.S., and Gruber, S.B., 1996, Quantitation of Angiogenesis in The Chick Charioallantoic Membrane Model Using Fractal Analysis, Microvascular Research, 51:2-14.

King, R.J.B., 2000, Cancer Biology, 2^nd edition, Pearson Education Ltd., London, pp. 1-4. 10-13.228-231.

Knighton, D.,Ausprunk, D., Tapper, D., and Folkman, J., 1977, Avascular and Vascular Phases of Tumour Growth in the Chick Embryo, British J. Cancer, 35 : 347-356.

Leahy, K.M., Koki, A.T., and Masferrer, J.L., 2003, Role of Cyclooxygenases in Angiogenesis, www. Bentham.org/cmc-sample/masferner/masferner.htm, diakses Mei 2014.

Lemmens, R.H.M.J., Banyapraphatsara, N., 2003, Morinda L. Dalam : Lemmens, R.H.M.J., Banyapraphatsara, N., Plant Resources of South-East Asia No 12 (3) Medical and Poisonous Plant 3, Prosea Foundation, Bogor, pp. 302-305. MacDonald, M.D.T., angiogenesis Inhibitors A New Frontier in Cancer Therapy,

Children‟s National Medical Center, Washington

Mulyadi, 1996, Kanker, Karsinogen, Karsinogenesis, dan Antikanker, Tiara Wacana Yogya, Yogyakarta.

Murray, R.K, Keeley, F.W., 1993, Matriks Ekstraseluler, dalam Biokimia Harper, diterjemahkan oleh : Hartono, A., Edisi 24, Penerbit EGC, Jakarta, pp. 562. Nayak, B. Shivananda, Marshall, Julien R., Isitor, Godwin, and Adogwa, 2010,

Hypoglycemic and Hepatoprotective Activity of Fermented Fruit Juice of

Morinda citrifolia (Noni) in Diabetic rats, Evidence – Based Compementary andAlternative Medicine, Vol.2011, No. 875293.

Novalina, 2003, Penggunaan Tanaman Obat Sebagai Upaya Alternatif dalam Terapi Kanker. Pengantar ke Falsafah Sain. PPS Institut Pertanian Bogor.

Ogata, Y., 1986, Medicinal Herb Index in Indonesia, 2

ed., PT. Eisai Indonesia, Tokyo, pp. 276.

Papetti M., Herman IM., 2002, Mechanisms of normal and tumor-derived angiogenesis. Am J Physiol Cell Physiol 282: C947-C970.

Patten, B.M., 1978, Extra-Embryonic Membranes, dalam Early Embriology of The Chick, Edisi ke-5, Graw-Hill Publishing Company LTD, New Dehli, pp. 147-151,175.

Peter, 2005, Chemical Constituents and Noni‟s Function, Noni News Indian Magazine, Edisi Oktober (2) X.

Pramono, S., 2006, Strategi dan Tahapan Menuju Produksi Obat Herbal Terstandar dan Fitofarmaka bagi Perusahaan Jamu, dalam Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan obat Indonesia XXIX, UNS Press, Surakarta, 1.

Pratiwi, I., 2009, Uji Antibakteri Ekstrak Kasar Daun Acalypha indica terhadap Bakteri Salmonella choleraesuis dan Salmonella typhimurium, Skripsi, Jurusan Biologi FMIPA UNS, Surakarta.

Rafii S., 2002, Efficient mobilization and recruitment of marrow-derived endothelial and hematopoietic stem cells by adenoviral vectors expressing angiogenic factors. J Gene Ther 9: 631–641.

Ribatti, D., Urbinati, C., Nico, B., Rusnati, M., Roncali, L., and Presta, M., 1995, Endogenous Basic Fibroblast Growth Factor is Implicated in the Vascularization of the Chick Embryo Charioallantoic Membrane, Dev.Biol., 170: 39-48.

Ribatti, D., Bertossi, M., Nico, B., Vacca, A,, Ria, R., Riva, A., Roncali, L., and Presta, M., 1998, Role of the basic Fibroblast Growth Factor in the Formation of the Capillary Plexux in the Chick Embryo Charioallantoic Membrane. An In Situ Hybridization, Immunohistochemical and Ultrastructural Study, J. Submicrose. Cytol. Pathol., 30 : 127-136.

Ribatti, D.,Vacca, A., Giuliani, R., Gualandris, A., Roncali, L., Nolli, M.L., Presta, M., 1999, In Vivo Angiogenic Activity of Urokinase : role of Endogenous Fibroblast Growth Factor-2, Journal of Cell Science, 112: 4213-4221.

Ribbati, D., Vacca, A., Presta, M., 2002, The discovery of angiogenic factors: A historical review, General Pharmacology., 35: 227-231.

Sambamurty, A.V.S.S. 2005, Taxonomy of Angiosperms, I. K. International Pvt Ltd. New Delhi, pp. 404.

Schneider, A.K., 1997, Cancer Genetic, Encyclopedia of Human Biology, 2^nd, Academic Press, pp. 311-321.

Schor, A.M., and Schor, S.L., 1983, Tumour Angiogenesis, J. Pathology, 141 : 385-413.

Sofyan, R., 2000, Terapi kanker pada Tingkat Molekuler, Cermin Dunia Kedokteran, 127: 5-10.

Stetler-Stevenson, W.G., 1999, Matrix Metalloproteinases in Angiogenesis : A Moving Target for Therapeutic Intervetion, J. Invest, vol 103 : 9 : 1237-1241. Storer, T.J., Stebbins, R.C., Usinger, R.L., and Nybakker, J.W., 1979,

Reproduction and Development, dalam General Zoology, Edisi ke-6, Mc Graw-Hill Book Company, New York, pp. 191-194.

Suryowinoto, S. M., 1997. Flora Eksotika, Tanaman Peneduh. Penerbit Kanisius, Yogyakarta.

Thararat N, Pleumchitt R, Wandee G, Seong-Ho L, Darunee L, Seung JB., 2012, Damnacanthal, a noni component, exhibits antitumorigenic activity in human colorectal cancer cells. The Journal of Nutritional Biochemistry. 23: 915–923. Tosetti, F., Ferrari, N., De Flora, S., Albini, A,, 2002, Angioprevention :

Angiogenesis is a Common and Key Target for cancer Chemopreventive Agent, FASEB, 16: 2-14.

Waha, M. G., 2000, Sehat dengan Mengkudu. Jakarta: MSF Group: 1-16. Waha, M. G., 2001, Sehat dengan mengkudu.MSF Group, Jakarta, pp. 1- 44. Wang MY, Su C 2001, Cancer preventive effect of Morinda citrifolia (Noni).

Ann. N. Y. Acad. Sci. 952:161-168.

Wiseman M., 2007, Essential of Human Nutrition, New York : Oxford University Press, pp. 9.

Winarti, C. 2005, Peluang Pengembangan Minuman Fungsional dari Buah Mengkudu (Morinda citrifolia L.). Jurnal Litbang Pertanian. 24 (4) : 149-155.

Yuswanto, Ag., Sinardi., F., 2000, Kanker, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta, pp. 1-5.

Zetter , B.R., 1980, Migration of Capillary Endothelial cells is Stimulated by Tumour-Derived Factor, Nature, 285:41-43

Zuhud, AM. E., 2011, Kanker Lenyap Berkat Sirsak, PT AgroMedia Pustaka, Jakarta, pp. 9.

Lampiran 1. Foto Buah Mengkudu (Morinda citrifolia. L)

Lampiran 2. Foto Serbuk (Morinda citrifolia. L)

Lampiran 3. Foto Ekstrak Kental Etanol Buah Mengkudu (Morinda citrifolia. L)

Lampiran 4. Foto Pembuatan larutan uji dan larutan basic Fibroblast Growth Factor (bFGF)

Lampiran 5. Foto Pembuatan Jendela Berukuran 1x1 cm

Lampiran 6. Data Perhitungan Rendemen Ekstrak Etanol Buah Mengkudu

A. Penimbangan

Bobot cawan = 43,18 gram

Bobot cawan + ekstrak = 58,86 gram

Bobot ekstrak = 15,68 gram

Bobot buah mengkudu yang digunakan = 100 gram

B. Rendemen Ekstrak Etanol Buah Mengkudu

Rendemen ekstrak etanol buah mengkudu = x 100% = x 100% = 15,68%

Lampiran 7. Data Perhitungan Pengenceran bFGF

A. Pengenceran bFGF

Konsentrasi awal bFGF (C1) adalah 25

Konsentrasi bFGF yang diinginkan (C2) adalah 1 konsentrasi setiap telur adalah 10 ng.

V =

=

= 10 µl

Setiap telur diinduksi dengan volume induksi bFGF sebesar 10µl. Telur yang digunakan untuk masing-masing perlakuan adalah 10 telur

Kontrol bFGF

Total telur = 10 telur

Volume bFGF yang dibutuhkan = total telur x volume induksi bFGF = 10 x 10 µl = 100 µl

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 25 ng/µl = 100 µl x 1 ng/µl V1 =

V1 = 4 µl

Larutan bFGF (25 ng/µl) diambil 4 µl kemudian ditambahkan dengan pelarut bFGF yaitu PBS.

Konsentrasi Ekstrak Etanol Buah Mengkudu

Terdapat 3 macam variasi konsentrasi ekstrak yaitu (100 µg/ml, 150 µg/ml dan 200 µg/ml).

Total telur = 3x 10 telur = 30 telur.

Volume bFGF yang dibutuhkan = total telur x volume induksi bFGF = 30 x 10 µl = 300 µl

V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 25 ng/µl = 300 µl x 1 ng/µl V1 =

V1 = 12 µl

V1 = larutan bFGF ( 25 ng/µl) diambil 12 µl kemudian ditambahkan dengan pelarut bFGF yaitu PBS

Volume PBS yang ditambahkan = 100 µl – 12 µl = 88 µl

Lampiran 8. Perhitungan Berat Ekstrak dan Volume DMSO

A. Berat Ekstrak untuk Masing-masing Konsentrasi Ekstrak

Konsentrasi 100 µg/ml m = C x V

100 µg/ml = 0,1 mg/ml 0,1 mg/ml x 200 ml

m = 20 mg = 0,02 g ditambah 0,4 ml DMSO add sampai 200 ml

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Konsentrasi 150 µg/ml m = C x V

150 µg/ml = 0,15 mg/ml 0,15 mg/ml x 200 ml

m = 30 mg = 0,03 g ditambah 0,4 ml DMSO add sampai 200 ml Konsentrasi 225 µg/ml

m = C x V

225 µg/ml = 0,25 mg/ml 0,25 mg/ml x 200 ml

m = 50 mg = 0,05 g ditambah 0,4 ml DMSO add sampai 200 ml

B. Volume DMSO

Konsentrasi awal DMSO (C1) adalah 99,5% Konsentrasi yang diinginkan (C2) adalah 0,2% V1 x C1 = V2 x C2

V1 x 99,5% = 200 ml x 0,2% V1 =

=

0,4 ml

Untuk membantu dalam melarutkan ekstrak etanol buah mengkudu, setiap konsentrasi ekstrak ditambahkan 0,4 DMSO

Lampiran 9. Persentase Penghambatan Angiogenesis

Tabel IV. Rata-rata dan Standar Deviasi Pembuluh Darah Baru Kelompok Jumlah Pengamatan Jumlah Pembuluh Darah Rata-Rata Standar Deviasi Kontrol Blank 3 15 14,33 1,15 11 15 Kontrol Pelarut 3 13 13 2 11 15 Kontrol bFGF 3 24 23,33 0,58 23 23 Konsentrasi I (100µg/ml) 3 22 20,33 1,52 19 20 Konsentrasi II (150µg/ml) 3 13 14,66 1,52 15 16 Konsentrasi III (225µg/ml) 3 10 11,66 2,88 10 15

A. Persentase Penghambatan Angiogenesis

Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah Baru = x 100%

a = jumlah pembuluh darah baru rata-rata konsentrasi ekstrak etanol buah mengkudu

b = jumlah pembuluh darah baru rata-rata kontrol bFGF Persentase Penghambatan Angiogenesis

= 100 – Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah baru

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Konsentrasi I (100 µg/ml)

Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah Baru = x 100% = 87,14% Persentase Penghambatan Angiogenesis = 100% - 87,14% = 12,86% Konsentrasi II (150 µg/ml)

Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah Baru = x 100% = 62.83% Persentase Penghambatan Angiogenesis = 100% - 62,83% = 37,17% Konsentrasi III (225 µg/ml)

Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah Baru = x 100% = 49,97% Persentase Penghambatan Angiogenesis = 100% - 49,97% = 50,03%

Tabel V. Persentase Penghambatan Angiogenesis

Kelompok X ± SD Persentase Pertumbuhan Pembuluh Darah Baru (%) Persentase Penghambatan Angiogenesis (%) Konsentrasi I (100 µg/ml) 20,33 87,14 12,86 Konsentrasi II (150 µg/ml) 14,66 62,83 37,17 Konsentrasi III (225 µg/ml) 11,66 49,97 50,03

Lampiran 10. Foto Pengamatan makroskopik pembentukan pembuluh darah pada setiap kelompok

Kontrol paper disc Kontrol pelarut

Kontrol bFGF + pelarut Konsentrasi I (100 µg/ml)

Konsentrasi II (150 µg/ml) Konsentrasi III (225 µg/ml)

Lampiran 11. Analisis uji statistik normalitas

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Lampiran 14. Hasil determinasi

BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi dengan judul „Aktivitas AntiAngiogenesis Ekstrak Etanol Buah Mengkudu Morinda citrifolia L. terhadap CAM

yang diinduksi bFGF’ yang bernama lengkap

Pande Putu Krisna Wedana lahir di Bangli pada tanggal 3 April 1992 adalah putra pertama dari pasangan I Wayan Sumantra dengan Nyoman Mudiani. Penulis mengawali masa pendidikannya di TK Bhayangkari (1996-1998), kemudian melanjutkan pendidikan di tingkat Sekolah Dasar di SD No.2 Bangli (1998-2004). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 1 Bangli (2004-2007), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat menengah atas di SMA Negeri 2 Bangli (2007-2010). Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2010. Selama menempuh pendidikan di Universitas Sanata Dharma, penulis aktif dalam kegiatan kepanitiaan di dalam dan di luar kampus, serta aktif dalam organisasi UKF Hindu sebagai pengurus. Selain itu penulis juga aktif mengikuti seminar di dalam maupun luar kampus.

Dalam dokumen Aktivitas antiangiogenesis ekstrak etanol buah mengkudu (Morinda citrifolia L.) terhadap chorioallantoic membrane yang diinduksi basic fibroblast growth factor - USD Repository (Halaman 61-82)