BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
B. Saran
Perlu dilakukan optimasi pengaruh lama penjenuhan di dalam ruang
preparasi yang temperaturnya konstan.
Perlu dilakukan validasi metode dan penetapan kadar deksametason dan
deksklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet X® dengan menggunakan metode
KLT densitometri dengan perbandingan komposisi fase gerak etil asetat : metanol
58
Anonim1, 2009, Informatorium Obat Nasional Indonesia 2008 Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, CV. Sagung Seto, Jakarta, hal. 230,509-511.
Anonim2, 2010, TLC : Retention Factor, http://orgchem.colorado.edu, diakses tanggal 3 Mei 2013.
Badger, G.M., 1961, The Chemistry of Hetetrocyclic Compounds, Academic, New York,p.239.
Campbell, W.B., 1991, Lipid-Derived Autacoids : Eicosanoids and Platelet-Activating Factor. Dalam: Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics. Ed 8. Editor: Gilman, A.G . et al. New York:Pergamon Press. Vol.I.hal. 600-602, 605-606, 611.
Clark, J., 2007, Kromatografi Lapis Tipis, diaskes dari http://www.chem-is-try.org, diaskes tanggal 9 April 2013.
Clarke, E.G.C., 1969, Isolation and Identification of Drugs in Pharmaceuticals Body Fluids and Post-mortem Material, volume 1a, page 43-45, 254-255, 289,290, The Pharmaceutical Press, London.
Clarke, E.G.C., 1975, Isolation and Identification of Drugs in Pharmaceuticals Body Fluids and Post-mortem Material, volume 2, page 160-177, 255, 289, 465, The Pharmaceutical Press, London.
Cox, D.C., 1979, Semiautomated method for the analysis of formulations of chlorpheniramine maleate and brompheniramine maleate, J Assoc Off Anal Chem,. 62 (3),552.
Dean, J., 1995, Analytical Chemistry Handbook, Mc Graw-Hill Inc., USA, pp. 5.92 –5.93, 5.106.
Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal 286,288,293.
El- Yazbi, F.A., Hammud H.H., and Assi, S.A.,2006, New Spectrofluorometric Application For The Determination Of Ternary Mixtures Of Drugs, Analytica Chemica Acta, Volume 580, pp 39-46
Fessenden, R.J., and Fessenden, J.S.,1982, Kimia Organik , jilid II, Erlangga, Jakarta.
Gandjar I.G. dan Rohman A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, hal 333-337, 359.
Gasparic, J, dan Churacek, J., 1978, Laboratory Handbook of Paper and Thin-Layer Chromatography, Ellis Horwood Limited, English, pp 56-57.
New York cit. Rohman, A., 2009, Kromatografi untuk Analisis Obat , Graha Ilmu, Yogyakarta, hal.48.
Habtemariam, S., 2006, Chromatographic Principles and Theory, http://www.herbalanalysis.co.uk/Adsorption.html, diakses tanggal 22 Juni 2013.
Harjadi, W., 1986, Ilmu Kimia Analitik Dasar, Percetakan PT. Gramedia, Jakarta, hal. 70-71.
Hardjono, S., 1983, Kromatografi, Laboratorium Analisa Kimia Fisika Pusat, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, hal. 32-34, 45.
Hayes R.C., 1991, Adrenoticotropic Hormone., Dalam Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics. Ed 8. Editor: Gilman, A.G. et al.New York: Pergamon Press. Vol. II. hal 1443.
Honrath, R.E.,1995, Mass Transpor Process, http://www.cee.mtu.edu, diakses tanggal 11 Maret 2013.
Khopkar, S.M., 1990, Konsep Dasar Kimia Analitik, Universitas Indonesia Press, Jakarta, hal.128-129, 155-156.
Krzek, J., Maslanka ,A., Lipner , P., 2005, Identification and Quantitation of polymyxin B, framycetin, and dexamethasone in a ointment by using thin-layer chormatography with densitometry, Journal of AOAC International, 88(5): 1549-1554.
Maria, A., Moyano., Maria , A.Rosasco., Maria T., Andriana, 2005, Simultaneous determination of chlorpheniramine maleate and dexamethasone in a tablet dosage form by liquid chromatography, Journal of AOAC International, Volume 88, pp 1677-1683.
Martono, S., 1996, Penentuan Kadar Kurkumin secara Kromatografi Lapis Tipis Densitometri, Buletin ISFI Yogyakarta, Vol. 2, No.4, April 1996, 11-12
Moffat, A.C., Osselton, M.D., and Widdop, B. (ed). 2005, Clarke's Analysis of Drugs and Poisons, 3rd ed., Pharmaceutical Press, London.
Moffat, A.C., Osselton, M.D., and Widdop, B. (ed). 2011, Clarke's Analysis of Drugs and Poisons, 4 th ed., Pharmaceutical Press, London.
Obach, S. 1999, Prediction Of Human Clearance Of Twenty-Nine Drugs From Hepatic Microsomal Intrinsic Clearance Data: An Examination Of In Vitrohalf-Life Approach And Nonspecific Binding To Microsomes, Drug Metabolism Department, Candidate Synthesis, Enhancement, and Evaluation, Central Research Division, Pfizer, Inc., Groton.
Poole, C.F. 1988, Progress in Planar Chromatography, Anal Chem, 66:27A-37A cit. Spangenberg, B., Poole, C.F, and Weins, Ch., 2011 , Quantitative Thin-Layer Chromatography: A Practical Survey, Springer, Heidelberg.
Rohman, A., 2009, Kromatografi untuk Analisis Obat , Graha Ilmu, Yogyakarta, hal.2-3, 47-49-50,53-54.
Riyadi, W., 2009, Validasi Metode Analisis, www.chem-is-try.org, diakses tanggal 11 Maret 2011.
Sastrohamidjojo, H., 2001, Spektroskopi, Liberty, Yogyakarta, hal. 1-43.
Scott, R.P.W., 2008, Principles and Practices of Chromatography, http://www.chromatography-online.org, diakses tanggal 11 Maret 2011.
Sherma, J. dan Fried, B., 1996, Handbook of Thin-Layer Chromatography, 2nd ed., Marcel Dekker Inc., New York, pp. 56, 57, 132, 287-289.
Snyder, L.R., Kirkland, J.J., dan Glajch, J.L., 1997, Practical HPLC Method Development, 2nd ed., JohnWiley and Sons, Inc., New York, pp. 210, 488, 690.
Spangenberg, B., Poole, C.F, and Weins, Ch., 2011 , Quantitative Thin-Layer Chromatography: A Practical Survey, Springer, Heidelberg.
Subarmaniyan, S.P.,dan Das, S.K., 2004, Rapid Identification and Quantification of Chlorpeniramine Maleate or Pheniramine Maleate in Pharmaceutical Preparations by Thin Layer Chromatography – Densitometry, Journal of AOAC International, 87(6), 1319-13922.
Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting, edisi V, cetakan ke-2, PT.Gramedia, Jakarta, pp. 254-255.
United States Pharmacopeial Convention, 2007, The United States Pharmacopoeia, 30th edition, United States Pharmacopeial Convention Inc., Rockville, pp. 2346-2350.
Weast, R. C., Astle, M. J. & Beyer, W. H. 1988. CRC Handbook of Chemistry and Physics. CRC Press, Inc., Boca Raton, Florida.
Wilson C.O, O. Giscold, and R. Doerge. 1966, Textbook of Organic Medicinal and Phamaceutical Chemistry, 5th ed., Lippincott, Philadelphia.
61
Lampiran 3. Data Penimbangan dan Pengambilan Baku dan Sampel serta Contoh Perhitungan Konsentrasi Baku
1. Penimbangan Baku Deksklorfeniramin maleat
Bobot Deksklorfeniramin maleat
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gram 0,0504 0,0506 0,0508
Baku deksklorfeniramin maleat memiliki kemurnian 99,2 %, sehingga di dalam penimbangan diatas, bobot deksklorfeniramin maleat sebenarnya adalah :
Bobot Deksklorfeniramin maleat
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gram 0,0500 0,0502 0,0504
Contoh perhitungan kadar seri larutan baku deklorfeniramin maleat
Konsentrasi stok = = 5,0000 mg/mL
Konsentrasi intermediet = 5,0000 mg/mL .5 mL = Ki .25mL Ki = 1,0000 mg/mL
Konsentrasi seri baku yang dibuat :
a. Konsentrasi rendah V1 C1 = V2 C2 1 mL . 1,0000 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,10 mg/mL b. Konsentrasi tengah V1 C1 = V2 C2 3 mL . 1,0000 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,30 mg/mL c. Konsentrasi tinggi V1 C1 = V2 C2 5 mL . 1,0000 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,50 mg/mL 2. Penimbangan Baku Deksametason
Bobot Deksametason
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gram 0,0367 0,0363 0,0365
0,0500 g 10 mL
Baku deksametason memiliki kemurnian 99,4 %, sehingga di dalam penimbangan diatas, bobot deksametason sebenarnya adalah :
Bobot Deksametason
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gram 0,0365 0,0361 0,0363
Contoh perhitungan kadar seri larutan baku deksametason
Konsentrasi stok = = 3,6500 mg/mL
Konsentrasi intermediet = 3,6500 mg/mL .2 mL = Ki .25mL Ki = 0,2920 mg/mL
Konsentrasi seri baku yang dibuat :
a. Konsentrasi rendah V1 C1 = V2 C2 1 mL . 0,2920 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,0292 mg/mL b. Konsentrasi tengah V1 C1 = V2 C2 3 mL . 0,2920 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,0876 mg/mL c. Konsentrasi tinggi V1 C1 = V2 C2 3 mL . 0,2920 mg/mL = 10 mL . C2 C2 = 0,1460 mg/mL 3. Penimbangan Sampel Bobot Sampel
Replikasi I Replikasi II Replikasi III
Gram 0,3003 0,3006 0,3001
Lampiran 4. Contoh perhitungan Indeks Polaritas Fase Gerak
Diketahui data berikut :
Pelarut/Solvent Polarity Scale
Etil asetat 4.4
Metanol 5.1
Air 10.2
0,0365 g 10 mL
Perhitungan Indeks Polaritas
a. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 25 :4
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) = 4,50
b. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 8 :20 :2
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 5,25
c. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 20 :8 :2
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,97
d. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 25 :4 :2
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,86
e. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 25 :6 :1
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,71
f. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 27 :4 :1
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,82
g. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 23 :4 :1
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,7
h. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 25 :2 :1
Indeks Polaritas = ( x4,4) + ( x5,1) + ( x10,2) = 4,66
i. Fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25 % = 25 :4 :1
Lampiran 5. Sistem KLT-Densitometri yang Digunakan
Lampiran 7. Contoh densitogram hasil elusi dengan panjang track 10 cm
Lampiran 8. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a (25:4)
Lampiran 9. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (8 :20 :2)
1. Densitogram deksametason dan deksklorfeniramin maleat
Lampiran 10. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a: metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (20 :8: 2)
Lampiran 11. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25:4:2)
Lampiran 12. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% (25 : 6: 1)
Lampiran 13. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (27 :4:1)
Lampiran 14. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (23 : 4 : 1)
Lampiran 15. Densitogram hasil elusi dengan fase gerak etil asetat : metanol : larutan amonia 25% (25 : 2 : 1)
Lampiran 16. Densitogram reprodusibilitas baku dengan fase gerak etil asetat p.a : metanol p.a : larutan amonia 25% p.a (25 :4 :1)
1. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,03:0,1 mg/mL) replikasi 1
2. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,03:0,1mg/mL) replikasi 2
3. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,03:0,1mg/mL) replikasi 3
4. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,09:0,3mg/mL) replikasi 1
5. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,09:0,3mg/mL) replikasi 2
6. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,09:0,3mg/mL) replikasi 3
7. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,15:0,5mg/mL) replikasi 1
8. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,15:0,5mg/mL) replikasi 2
9. Densitogram campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,15:0,5mg/mL) replikasi 3
Lampiran 17. Densitogram reprodusibilitas sampel
1. Densitogram larutan sediaan kaplet X® replikasi 1
3. Densitogram larutan sediaan kaplet X® replikasi 3
Lampiran 18. Perhitungan Nilai %KV AUC Baku dan Sampel
1. Contoh perhitungan %KV AUC baku seri rendah
No. AUC baku deksklorfeniramin maleat AUC baku deksametason
1. 626,8 394,4
2. 630,8 389,2
3. 649,2 394,5
%KV AUC baku deksklorfeniramin maleat = x
100%
= x 100%
= 1,879 %
%KV AUC baku deksametason = x
100% =
= 0,772 %
Lampiran 19. Contoh Perhitungan Nilai Rs (Resolusi) Puncak Deksklorfeniramin maleat dan Deksametason
1. Campuran larutan baku deksametason dan dekslorfeniramin maleat (0,15:0,5mg/mL) replikasi 1
Nilai resolusi antara puncak yang sebanding dan berdekatan dalam Densitogram di atas adalah puncak 1 dan 2, sehingga diketahui :
t1 = max Rf1 = 0,48 t2 = max Rf2 = 0,65
W1 = selisih nilai end Rf1 dikurangi nilai start Rf1 = 0,52 – 0,43= 0,09 W2 = selisih nilai end Rf2 dikurangi nilai start Rf2 = 0,69 – 0,60 = 0,09 Perhitungan nilai resolusi adalah sebagai berikut :
Rs = = = = 1,88 2 (t2-t1) W1+W2 2 (0,65-0,48) 0,09+0,09 00000000
Lampiran 20. Contoh Perhitungan Nilai Faktor Asimetris (As) Puncak Deksklorfeniramin maleat dan Deksametason
Keterangan : --- tinggi puncak = 2,794 cm 10 % dari tinggi puncak = 0,279
a = 0,22 b = 0,2 As = = = 1,1 A B a b 0,22 0,2
79
Penulis Skripsi Berjudul “Optimasi Komposisi Eluen Pada
Pemisahan Campuran Deksametason Dan Deksklorfeniramin Maleat Secara Kromatografi Lapis Tipis Densitometri “ memiliki nama
lengkap Lucia Shinta Ratnaningtyas. Penulis lahir di Yogyakarta tanggal 8 Juli 1991 sebagai anak kedua dari dua bersaudara dari pasangan Paulus Wahana dan Paulina Is Rukmiyati. Pendidikan formal yang pernah ditempuh penulis adalah menyelesaikan pendidikan di SD Kanisius Demangan Baru ( 1996-2003), SMPN 5 Yogyakarta (2003-2006), SMAN 3 Yogyakarta (2006-2009). Penulis melanjutkan pendidikannya di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2009. Selama menempuh pendidikan di Fakultas Farmasi Universita Sanata Dharma penulis terlibat dalam berbagai kegiatan dan organisasi, seperti Keyboardist Paduan Suara Farmasi (2009-2011), Panitia Inisiasi Fakultas Farmasi (2011) dan Pelepasan Wisuda (2011) sebagai koordinator Humas Panitia Pharmacy Competition (2010) Fakultas Farmasi USD sebagai seksi usaha dana (2010). Berbagai kegiatan dan organisasi lain juga banyak diikuti penulis di luar kampus.
Dibidang akademik, penulis ikut aktif menjadi anggota tim penelitian antara lain penelitian : Inovasi Teknologi Produksi Garam Berbasis Kerakyatan untuk Kemandirian dan Kesejahteraa Bangsa (2011) dan Penelitian: Molecular Target Therapy Isoflavon Tempe Pada Kasus Kanker Payudara dengan Strategi Sistem Penghantaran Obat secara Transdermal (2013). Penulis merupakan peserta wakil USD dalam olimpiade Kimia Mahasiswa PTS Kopertis wilayah V (2010) dan ON-MIPA Yogyakarta (2010) Penulis juga menjadi asisten praktikum, antara lain Praktikum Analisis Farmasi (2013), Praktikum Validasi Metode (2013), Praktikum Compounding (2013), Praktikum Toksikologi Dasar (2012), Praktikum Kimia Organik (2011 dan 2012), Praktikum Kimia Dasar (2010).
xxiv INTISARI
Kombinasi deksametason dan deksklorfeniramin maleat terdapat dalam sediaan kaplet X®. Penjaminan mutu menjadi hal yang penting untuk menjamin keamanan pemakaian sediaan kaplet X®. Salah satu usaha penjaminan mutu adalah penetapan kadar zat aktif yang akan mempengaruhi efek farmakologi obat. Metode kromatografi lapis tipis (KLT) densitometri adalah metode alternatif yang digunakan untuk memisahkan dan juga analisis kualitatif dan kuantitatif deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam waktu yang bersamaan.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kondisi optimal fase gerak dari KLT densitometri sehingga dapat menghasilkan pemisahan optimal dan dapat menetapkan kadar deksametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan kaplet X®.Penelitian ini merupakan jenis rancangan penelitian eksperimental yang pada subjek uji diberikan perlakuan yaitu jenis dan komposisi fase ferak. Sistem KLT yang digunakan fase normal menggunakan fase diam silika gel dan fase gerak optimal dari perbandingan etil asetat : metanol : larutan amonia 25%. Pembacaan dilakukan pada panjang gelombang 262 nm.
Sistem optimal komposisi dan jenis fase gerak yang diperoleh adalah etil asetat : metanol : larutan amonia 25% p.a (25 : 4 : 1) dengan jarak elusi 5 cm. Sistem memberikan bentuk puncak simetris, sempit, dan runcing (nilai faktor asimetris berada dalam kisaran 0,95-1,10), Range nilai Rf untuk deksametason adalah 0,60-0,68. Range Rf untuk deksklorfeniramin maleat adalah 0,40-0,48, dan %KV dari nilai AUC ≤ 2.
Kata kunci : deksametason, deksklorfeniramin maleat, kromatografi lapis tipis, densitometri
xxv ABSTRACT
Combinations of dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate exist in X® tablet. Quality assurance becomes an essence since patient have to get the benefit of the safe medication. One kind of quality assurance involves the active substance quantifications related to the pharmalogical effect. Thin layer chromatography (TLC) densitometry is alternative method used for separation and also for qualitative and quantitative analysis of dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate simultaneous.
The aim of this study is to determine optimal condition to produce the optimal separation and determine between dexamethasone and dexchlorpheniramine maleate in X® tablet. This study is an analytical experimental study that the test subjects are subjected by treatments consisted of different types and composition of mobile phase. The optimization of TLC-UV densitometric method was performed on ethyl acetate:methanol:larutan amonia 25% p.a with various compositions as the developing solvents. Detection was carried out at 262 nm.
The optimum system was confirmed by ethyl acetate : methanol : larutan amonia 25% p.a (25 : 4 : 1) as developing solvent with 5 cm elution distance. The systems gives symmetry, narrow, and pointed shaped peak (As = 0,95-1,10), Range Rf for dexamethasone are 0,60-0,68, Range Rf for dexamethasone are 0,40-0,48, and %CV of AUC ≤ 2.
Keywords : dexamethasone, dexchlorpheniramine maleate, thin layer chromatography, densitometric