BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
B. Saran
1. Perlu dilakukan analisis terhadap struktur kimia phlorotannin untuk mengetahui kandungan fraksi etil asetat alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh.
2. Perlu dilakukan validasi penuh untuk memastikan bahwa metode Folin
Ciocalteau valid digunakan untuk menetapkan kadar phlorotannin dalam
fraksi etil asetat alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh.
3. Perlu dilakukan optimasi kondisi prosedur dalam metode kolorimetri
dengan reagen Folin Ciocalteau terkait pH untuk memastikan bentuk
senyawa kompleks molybdenum blue yang terjadi.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
DAFTAR PUSTAKA
Ahn, M. J., Yoon, K. D., Min, S.Y., Lee, J. K., Kim, J.H., Kim, T. G., Kim, S.H., Kim, N.G., Huh, H., and Kim, J., 2004, Inhibition of HIV-1 Reverse Transcriptase and Protease by Phlorotannins from the Brown Alga Ecklonia cava, Biol. Pharm. Bull., 27(4), 544-547
Anonim, 1986, Sediaan Galenik, Edisi I, 2-4, 7, Depkes RI, Jakarta
Anonim, 1995, United States Pharmacopoiea, 23rd Ed., 1982-1984, United States Pharmaceutical, Convention, Inc., 12601 Twinbrook Parkway, Rockville, United States of America.
Athukorala, Y., Kim, K.N., and Jeon,Y.J., 2006, Antiproliferative and Antioxidant Properties of an Enzymatic Hydrolysate from Brown Alga, Ecklonia cava, Food Chem.Toxicol., 44(7), 1065-1074
Auterhoff, H. and Knabe, J., 1978, Lehrbuch der Pharmazeutischen Chemie, 103, Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft Mbh., Stuttgart.
Boney, A.D., 1965, Aspect of the Biology of the Seaweeds of Economic Importance, In : Basic in Mar. Bot., 3:205-253
Burtin, P., 2003, Nutrional Value of Algas , Electron. J. Environ. Agric. Food Chem., France, 2 (4) , 498-500
Christian, G. D., 2004, Analytical Chemistry, Sixth Edition, 65, 66, 483, 484, John Wiley & Sons, Inc., United States of America.
Dahuri, R., 2003, The role of Marine Biotechnology in the Development of Marine Biomedical Product, Proceed.s Int. Symp. Biomed., 18-19 September, 2003, 1-5, IPB, Bogor.
Day, R. A. dan Underwood, A. L., 2002, Analisis Kimia Kuantitatif, diterjemahkan oleh Iis Sopyan, Edisi VI, 396, 397, 402, 403, 407, Penerbit Erlangga, Jakarta.
Evans, W.C., 2002, Trease and Evans: Pharmacognosy, 15th Ed., 98, W.B. Saunders, London.
Fatah, A.M., 1989, Spektroskopi, 1, 45-46, Fakultas Farmasi UGM, Yogyakarta. Folin, O. and Ciocalteau, V., 1944, On Tyrosine and Tryptophane Determinations
in Proteins, J. Biol. Chem., 73, 627-650 1927, cit. Todd-Sanford, 10th ed., 412
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
Hammerstrom, K., Dethier, M.N., and Duggins, D.O., 1998, Rapid Phlorotannin Induction and Relaxation in Five Washington Kelps, Mar. Ecol. Prog. Ser., 165, 293-305
Harborne, J.B. and Dey, P.M., 1989, Methods in Plant Biochemistry, Vol.I, 389, Academic Press, New York.
Harmita, 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya,
Majalah Ilmu Kefarmasian, I (3), 117 – 135
Hsien, W., 1920, Contribution to The Chemistry of Phosphomolybdic Acids, Phosphotungstic Acids, and Allied Substances, J. Biol. Chem., Harvard Medical School, Boston, 189-220
Jansoon, N., 2005, The Determination of Total Phenolic Compounds in Green Tea,
209.85.165.104/search?q=cache:Nj311vjKCdcJ:chemw.sc.mahidol.ac.th/s cess/scch108/2005_06_SCCH108Lab02.pdf+Folin-Ciocalteau+ method
+colori metric&hl=en&ct=clnk&cd=9&gl=id, diakses tanggal 24 Oktober
2007
Kadi, A., 2007, Beberapa Catatan Kehadiran Marga Sargassum di Perairan Indonesia, www.oseanografi.lipi.go.id/volxxxno.42.pdf, diakses tanggal 20 Februari 2007
Kang, K.A., Lee, K.H., Chae, S., Koh,Y.S., Yoo, B.S., Kim, J.H., Ham, Y.M., Baik, J.S., Lee, N.H., and Hyun, J.W., 2005a, Triphlorethol-A from Ecklonia cava Protects V-79-4 Lung Fibroblast Against Hydrogen Peroxide Induced Cell Damaged, Free Radic. Res., 39 (8), 883-892
Kang, K.A., Lee, K.H., Chae, S., Zhang, R., Jung, M.S., Ham, Y.M., Baik, J.S., and Hyun, J.W., 2005b, Cytoprotective Effect of Phloroglucinol on Oxidative Stress Induced Cell Damaged via Catalase Activation, J.Cell Biochem., 97(3), 609-620
Kang, K.A., Zhang, R., Lee, K.H., Chae, S., Kim, B.J., Kwak, Y.S., Park, J.W., Lee, N.H., and Hyun, J.W., 2006, Protective Effect of Triphlorethol-A from Ecklonia cava Against Ionizing Radiation in Vitro, J.Radiat Res., 47(1), 61-68
Khopkar, S.M., 1990, Basic Concepts of Analytical Chemistry, alih bahasa oleh Saptoraharjo, A., 193, 204, Universitas Indonesia Press, Jakarta.
Koivikko, R., Loponen, J., Honkanen, T., and Jormalainen, V., 2005, Content of Soluble, Cell-Wall-Bound and Exuded Phlorotannins in the Brown Alga
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
Fucus Vesiculosus, with Implication on Their Ecological Functions, J. Chem. Ecol., 31(1), 196-197
Krumholz, L.R. and Bryant, M.P., 1988, Characterization of the Pyrogallol-Phloroglucinol Isomerase of Eubacterium oxidoreducens, J. Bact., Illinois, 170(6), 2478
Mulja, M. dan Hanwar, D., 2003, Prinsip Prinsip Cara Berlaboratorium yang Baik, Majalah Farmasi Airlangga, 3(2), 72
Mulja, M. dan Suharman, 1995, Analisis Instrumental, 26-28, Airlangga University Press, Surabaya.
Mustapha, K. and Ghalem, S., 2007, Effect of Heat Treatment on Polyphe nol Oxidase and Peroxidase Activities in Algerian Stored Dates, Afric. J. Biotech., 6(6), 790-794
Nagayama, K., Iwamura, Y., Shibata, I., Hirayama, I., and Nakamura, T., 2002, Bactericidal Activity of Phlorotannins from The Brown Alga Ecklonia kurome, JAC, 50, 889-893
Ohhannesian, L. and Streeter, A.J., 2002, Handbook of Pharmaceutical Analysis, Vol. 117, 209, 210, Marcel Dekker, Inc, New York, U.States.
Padda, M.S., 2006, Phenolic Composition and Antioxidant Activity of Sweetpotatoes [Ipomoea batatas (L.) Lam], Disertasi, Punjab Agricultural University ,15
Roleda, M.Y., Clayton, M.N., and Wieneke, C., 2006, Screening Capacity of UV Absorbing Compounds in Spore of Arctic Laminariales, J. Exp. Mar. Biol. Ecol., 338, 123-133
Roth, H.J. and Blaschke G., 1994, Pharmazeutische Analytic, diterjemahkan oleh S. Kisman, S. Ibrahim, 359-361, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Sastrohamidjojo, H., 1991, Spektroskopi, 1-15, Liberty, Yogyakarta
Shin, H.C., Hwang, H.J., Kang, K.J., and Lee, B.H., 2006, An Oxidative and Antiinflammatory Agent for Potential Treatment of Osteoarthritis from Ecklonia cava, Arch. Pharm. Res., 29(2), 165-171.
Silverstein, R.M., Bassler, G.C., and Morril, T.C., 1991, Spectrometric Identification of Organic Compound, 5th Ed., 289-294, John Wiley & Sons. Inc., Singapura.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
Singleton, V.L. and Rossi, J.A., 1965, Colorimetry of Total Phenolics with Phosphomolybdic-Phosphotungstic Acid Reagent, Am. J. Enol. Vitic, 16, 147.
Skoog, D.A., 1985, Principles of Instrumental Analysis, 3rd Ed., 22, 164-165, Saunders College Publishing, Philadelphia.
Skoog, D.A., West, D.M., and Holler, F.J., 1993, Analytical Chemistry an Introduction, 6th Ed., 68, 237, 408, 417, 418, 430, 604, 605, Saunders College Publishing, United States of America.
Skoog, D. A., Holler, F.J., and Nieman, T.A., 1998, Principles of Instrumental Analysis, 5th Ed., 11-14, 140, H. Brace College, Philadelphia.
Swanson, A.K. and Druchl, L.D., 2002, Induction, Exudation and the UV Protective Role of Kelp Phlorotannins, Aquatic Bot., 73, 241-253
Vogel, A.I., 1978, A Text Book of Quantitative Inorganic Analysis, Fourth edition, 728, The English Languange Book Society, Richard Clay Ltd., Bungay.
Voigt, R., 1994, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi V, 572, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
Waterman, P.G. and Mole, S., 1994, Analysis of Phenolic Plant Metabolites: Extraction and Chemical Quantification, Black. Sci. Pub., 66-69.
Willard, H.H., Merritt, J.R.L., Dean, J.A., and Settle J.F., 1988, Instrumental Methods of Analysis, 7th Ed., 160, Wadsworth Publishing Company, California.
Yuan, Y.V., and Walsh, N. A., 2006, Antioxidant and Antiproliferative Activities of Extract from a Variety of Edible Algas, J.Fd.Chem.Toxicol., 44, 1144-1150
Zhang, Q., Zhang, J., Shen, J., Silva, A., Dennis, D.A., and Barrow, C.J., 2006, A Simple 96-well Microplate Method for Estimation of Total Polyphenol Content in Algas, J. App. Phycol., 18, 445-450.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48 LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan hasil identifikasi spesies alga coklat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
Lampiran 2. Data perhitungan kadar air dengan Karl Fischer
Drift = 19
Blangko:
Berat air + spuit = 8,6898 g
Berat spuit + sisa air = 8,6694 g
Berat air yang dimasukkan = 0,0204 g
Konsentrasi = 25,253 mg/ 5 mL titran
Angka pada alat = 0,0349%
Kadar air blangko =
100 0349 , 0 x 10000 mg = 3,49 mg
Keterangan: 10000 adalah angka untuk konversi perhitungan blanko dan sampel
agar didapat angka yang mempermudah perhitungan.
Replikasi I: Berat sampel = 2001,5 mg Kadar air = 100 1094 , 0 x 10000 mg = 10,94 mg
Persentase kadar air =
5 , 2001 10 ) 49 , 3 94 , 10 ( − x x 100% = 3,72% Replikasi II: Berat sampel = 1999,3 mg Kadar air = 100 1051 , 0 x 10000 mg = 10,51 mg
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
Persentase kadar air =
3 , 1999 10 ) 49 , 3 51 , 10 ( − x x 100% = 3,51% Replikasi III: Berat sampel = 1999,7 mg Kadar air = 100 0894 , 0 x 10000 mg = 8,94 mg
Persentase kadar air =
7 , 1999 10 ) 49 , 3 94 , 8 ( − x x 100% = 2,73%
Lampiran 3. Data penimbangan replikasi seri baku phloroglucinol
Replikasi I:
Berat kertas + zat = 0,45148 g
Berat kertas + sisa = 0,40029 g ( - )
Berat zat = 0,05119 g à ad 50,0 mL aseton 75 %
Replikasi II:
Berat kertas + zat = 0,44613 g
Berat kertas + sisa = 0,39553 g ( - )
Berat zat = 0,05060 g à ad 50,0 mL aseton 75 %
Replikasi III:
Berat kertas + zat = 0,49880 g
Berat kertas + sisa = 0,39798 g ( - )
Berat zat = 0,10082 g à ad 100,0 mL aseton 75 %
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52 absorbansi 0,100 0,200 0,600 0,400 0,300 0,500 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00 90,00 Waktu (menit)
Lampiran 4. Contoh perhitungan seri kadar baku phloroglucinol yang dibuat
Replikasi I:
Konsentrasi stok baku phloroglucinol = 51,19mg/50mL = 1,0238 mg/mL C1 = 0,5 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,0512 mg/100mL C2 = 1,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,1024 mg/100mL C3 = 2,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,2048 mg/100mL C4 = 3,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,3071 mg/100mL C5 = 4,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,4095 mg/100mL C6 = 5,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,5119 mg/100mL C7 = 6,0 . 1,0238 . 1/10. 0,5/50 . 102 mg/100mL = 0,6143 mg/100mL
Lampiran 5. Hasil scanning Operating Time (OT)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
Lampiran 6. Hasil scanning ?maks kadar phloroglucinol 1,0 ppm setelah direaksikan
dengan Folin Ciocalteau
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
Lampiran 7. Hasil scanning ?maks kadar phloroglucinol 3,0 ppm setelah direaksikan dengan Folin Ciocalteau
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
Lampiran 8. Hasil scanning ?maks kadar phloroglucinol 6,0 ppm setelah direaksikan dengan Folin Ciocalteau
Lampiran 9. Hasil pembacaan absorbansi seri baku phloroglucinol pada ketiga ?maks C phloroglucinol (ppm) Absorbansi pada ? maks 758.7 nm 750.1 nm 743.4 nm 0,477 0,049 0,070 0,050 0,953 0,131 0,126 0,123 1,905 0,286 0,306 0,281 2,859 0,418 0,423 0,420 3,812 0,544 0,549 0,543 4,765 0,656 0,653 0,659 5,718 0,727 0,732 0,732 A 0,01598 0,02917 0,01084 B 0,131738 0,129576 0,133349 r 0,99425 0,99387 0,99477
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Lampiran 10. Kurva baku phloroglucinol
Lampiran 11. Data penimbangan sampel
Replikasi I:
Berat kaca arloji + zat = 15,45098 g
Berat kaca arloji + sisa = 15,40139 g ( - )
Berat zat = 0,04959 g à ad 50,0 mL aseton 75 %
Replikasi II:
Berat kaca arloji + zat = 15,45223 g
Berat kaca arloji + sisa = 15,40162 g ( - )
Berat zat = 0,05061 g à ad 50,0 mL aseton 75 %
Kurva Baku 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0.0000 0.1000 0.2000 0.3000 0.4000 0.5000 0.6000 0.7000 Konsentrasi (ppm) Absorbansi y = 1,2665 x + 0,0082
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
Replikasi III:
Berat kaca arloji + zat = 15,44657 g
Berat kaca arloji + sisa = 15,39576 g ( - )
Berat zat = 0,05081 g à ad 50,0 mL aseton 75 %
Lampiran 12. Data absorbansi sampel fraksi etil asetat Sargassum cymosum C. Agardh 759,6 750,1 745,9 730,9 Panjang gelombang (nm) Absorbansi Replikasi I 1 0,161 0,164 0,166 0,165 2 0,171 0,171 0,171 0,170 Replikasi II 1 0,172 0,172 0,171 0,171 2 0,172 0,173 0,172 0,172 Replikasi III 1 0,170 0,171 0,170 0,169 2 0,174 0,175 0,173 0,173
Lampiran 13. Contoh perhitungan kadar sampel
Persamaan kurva baku: y = 1,2665 x + 0,0082 Replikasi I: Duplo 1 à y = 0,164 à x = 0,1230 mg/100mL C1 = g g 10x50mL 6,201mg/ 50 x 0,04959 mg/mL .10 1230 , 0 2 = −
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58 Duplo 2 à y = 0,171 à x = 0,1285 mg/100mL C2 = x50mL 6,478mg/g 10 50 x g 0,04959 mg/mL 0,1285.10 2 = −
Kadar rata-rata sampel = 6,339mg PE/gsampel 2
mg/g 6,478)
(6,201+ =
Lampiran 14. Foto hasil uji kualitatif alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh
Keterangan:
1. ekstrak alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh + gelatin 1%
2. ekstrak alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh + gelatin 1% + NaCl 10%
3. ekstrak alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh + FeCl3 LP
4. ekstrak alga coklat Sargassum cymosum C. Agardh tanpa perlakuan (kontrol)
1 2 3 4
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Lampiran 15. Foto instrumen spektrofotometer UV - VIS Perkin Elmer Lambda-
20
Lampiran 16. Foto autoklaf
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Lampiran 17. Foto Vacuum Rotary Evaporator
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
BIOGRAFI PENULIS
Andriani Noerlita Ningrum , penulis skripsi yang berjudul Penetapan Kadar Phlorotannin dalam Fraksi Etil Asetat Alga Coklat Sargassum cymosum C. Agardh dengan Metode Kolorimetri Folin Ciocalteau , lahir di kota Semarang, pada tanggal 24 Mei 1986 dari pasangan Bapak Sri Wiyono dan Ibu Siti Nurkhayatun. Penulis menyelesaikan pendidikan di TK Siwipeni III Boyolali, pada tahun 1992, SD Negeri I Boyolali pada tahun 1993, SD Negeri I Karanganyar pada tahun 1998, SLTP Negeri I Karanganyar pada tahun 2001, dan SMU Negeri III Surakarta pada tahun 2004. Penulis melanjutkan kuliah di Fakultas Farmasi Univesitas Sanata Dharma, Yogyakarta pada 2004 hingga 2008. Selama kuliah, penulis pernah menjadi asisten praktikum Spektroskopi pada semester gasal tahun ajaran 2006/2007, asisten praktikum Kimia Analisis pada semester gasal tahun ajaran 2006/2007 dan tahun ajaran 2007/2008. Selain itu, penulis juga pernah menjabat sebagai koordinator UKF Tari pada Tahun 2006-2007 dan menjadi panitia dalam berbagai kegiatan yang diadakan oleh Fakultas maupun Universitas.