BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai :
1. Senyawa dalam buah L. siceraria yang berperan untuk meningkatkan
proliferasi limfosit.
2. Pengkajian peringkat dosis ekstrak etanol buah L. siceraria dengan faktor
kelipatan untuk mendapatkan dosis efektif.
3. Pengkajian lama pemberian dosis ekstrak etanol buah L. siceraria yang dapat
menimbulkan efek imunomodulator.
4. Dosis doksorubisin yang dapat menimbulkan efek imunosupresan.
DAFTAR PUSTAKA
Akiyama, T., Ishida, J., Nakagawa, S., Ogawara, H., Watanabe, S., I toh N., Shibuya, M., and Fukami, Y., 1987, Genistein, a specific inhibitor of tyrosine specific protein kinase, J. Biol. Chem, 262, 5592-5595.
Aljancic, I., Stankovic, M., Tesevic, V., Vujisic, L., Vajs, V., Milosavljevic, S., 2010, Protective effect on human lymphocytes of some flavonoids isolated from two Achilleaspecies. Nat Prod Commun, May;5(5):729-32, PubMed PMID: 20521537.
Anonim, 2011, World Health Organization, http://apps.who.int/medicinedocs /en/d/Js2200e/, diakses tanggal 23 Juni 2013.
Baratawidjaja, K., dan Rengganis, I., 2009, Imunologi Dasar, Edisi ke-8, Balai Penerbit TKUI, Jakarta.
Block, K., Mead, M., 2003, Immune System Effects of Echinacea, Ginseng and Astragalus : A review Integrative cancer therapies, 2(3): 247-246.
Bruton, L., Lazo, J. S., dan Parker, K. L., 2005, Goodman & Gilman’s The
Pharmacological Basis of Therapeutics, 11th Edition, McGrawHill,
Lange.
Deore, S., Khadabadi, S., Patel, Q., Deshmukh, S., Jaju, M., Junghare, N., Wane, T., Jain, R., 2009, In Vitro Antioxidant Activity and Quantitative Estimation of Phenolic Content of Lagenaria siceraria, Rasayan J. Chem.,
Vol.2, No.1, India.
Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Deshpande, J., Choudhari, A., Mishra, M., Meghre, V., Wadodkar, S., Dorle, A.K., 2008, Beneficial Effects of Lagenaria siceraria (Mol.) Standley fruit eficarp in animal Model, Indian J. Exp Biol, 46, 234-242.
Doyle, A. & Griffiths, J. B., 1998, Cell and tissue culture : laboratory procedures
in biotechnology, Wiley & Sons Ltd., England, pp. 62-64.
Filbert, I., 2010, Gambaran Histopatologis Limpa Mencit Galur Swiss Webster
Jantan Pasca Pemberian Minyak Buah (Pandanus conoideus Lam.),
Laporan Akhir Penelitian Karya Tulis Ilmiah, Fakultas Kedokteran
Universitas Kristen Maranatha.
Gangwal, A., Panmar, S.K., Gupta, G., Rana A., and Sheth, N., 2008, Immunomodulatory Effects of Lagenaria siceraria Fruits in rats,
Pharmacognosy Mag., 4, S234-S238.
Gruendemann, B., Fernsebner, B., 2005, Keperawatan Perioperatif, EGC, Jakarta, pp. 610-611.
Handayani, W., 2008, Asuhan Keperawatan pada Klien dengan Gangguan Sistem
Hematologi, Salemba Medika, Jakarta.
Harris, J., 1991, Blood Cell Biochemistry Volume 3 : Lymphocytes and
Granulocytes, Plenum Press, New York.
Haryanto, S., 2009, Terapi Pengobatan Tumor-Kanker, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, p. 11.
37
Hernawati, 2009, Perbaikan Kinerja Reproduksi Akibat Pemberian Isoflavon dari Tanaman Kedelai, Laporan Penelitian, FPMIPA Universitas Pendidikan Indonesia, Bandung, p. 6.
Herwandhani, P., Nagadi, S.. dan Saktiningtyas, I.A., 2011, Potensi Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix D.C.) sebagai Agen Imunomodulator yang Prospektif pada Penekanan Efek Imunosupresi Kemoterapi, Jurnal Saintifika Gadjah Mada, III(2).
Jenie, R., Meiyanto, E., 2009, Aplikasi ko-kemoterapi Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanolik Daun Sambung Nyawa (Gyanura Procumbens (Lour.)Merr.) Pada Sel Kanker Payudara MCF-7, Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. VI, No. 3, Yogyakarta.
Jong, W., 2004, Kanker, Apakah itu? Pengobatan, Harapan Hidup dan Dukungan
Keluarga, Arcan, Jakarta, pp. 119-121.
Kartika, R., S., 2012, Isolasi Polisakarida Buah Mengkudu (Morinda citrifolia L.) dengan Metode Pengendapan Menggunakan Aseton serta Uji Aktivitasnya Terhadap Fagositosis Makrofag dan Proliferasi Limfosit secara in vitro,
Skripsi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, pp. 59,60.
Khasanah, N., 2009, Pengaruh Pemberian Ekstrak Jintan Hitam (Nigella Sativa) Terhadap Respon Proliferasi Limfosit Limpa Mencit Balb/C Yang Diinfeksi Salmonella typhimurium, Laporan Akhir Penelitian Karya Tulis
Ilmiah, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang.
Kimball, J., 1990, Introduction to Immunology, 3rd Edition. Macmillan Publishing Company, Inc., New York.
Kresno, S. B., 2001, Imunologi : Diagnosis dan Prosedur Labortorium, Edisi IV, Fakultas Kedokteran Umum, Universitas Indonesia, Jakarta.
Kunjumoideen, K., 2010, Doxorubicin (adriamycin), http://medicineworld.org/ cancer/breast/treatment/doxorubicin.html, diakses 7 Mei 2013.
Lemasters, J., Nieminen A., Qian, T., Trost L., Elmore S., Nishimura, Y., Crowe, R., Cascio, W., Bradham, C., Brenner, D., 1998, mitochondrial permeability transition in cell death : a common mechanism necrosis, apoptosis and autophagy, Biochem Biophys Acta., 1366: 177-196.
Lim, T. K., 2012, Edible Medicinal and Non-Medicinal Plants, Volume 2, Fruits, Spinger Dordrecht Heidelberg, New York.
Long B., Hai, Y., Xian, M., 2005, Spectroscopic and Viscosity Study of Doksorubisin Interaction with DNA, Journal of Molecular Structure, 749 (2005) 1008-113.
Mangan, Y., 2009, Solusi Sehat Mencegah dan Mengatasi Kanker, Agromedia Pustaka, Jakarta, p.1.
Maria, A., 2008, Bertahan Hidup Dengan Terapi Jus, Pustaka Anggrek, Yogyakarta, p. 31.
Mashitoh B., 2007, Effects of Damnacanthal, Nordamnacanthal, Betulinic Acid and Zerumbone Isolated From Local Medicinal Plants on Leukemia Cell Lines and Immune Cells, Laporan Penelitian, Universiti Putra Malaysia, Malaysia.
Mc. Clure, 1986. Physiology of Flavonoids in Plants. Plant Flavonoids in Biology and Medicine: Biochemical, Pharmaceutical and Structure-Activity
Relaionships. Alan R. Liss, Inc. p: 77-85.
Meydani, S., Wu, D., Santos, M., Hoyek, M., 1995, Antioxidant and immune response in aged person overview of present avidience, Am. J. Clin. Nutr.
62, 1462 S- 1476.
Miksusanti, 2010, Proliferasi Sel Limfosit Secara In Vitro oleh Minyak Atsiri Temu Kunci dan Film Edibel Anti Bakteri, Jurnal Penelitian Sains, 10:06-07, p.2.
Namgoong, S., Son, K., Chang, H., Kang, S., Kim, H., 1994, Effects of naturally occurring flavonoids on Mitogen-induced Lymphocyte Proliferation and Mixed Lymphocyte Culture, Life Science, vol. 54 issue, pp. 313-320. Pakki, E., 2007, Sediaan Bentuk Suspensi, V, DIPA Universitas Hasanudin,
Makasar.
Patil, U., Jaydeokar, A., Bandawane, D., 2012, Immunomodulators : Pharmacological Review, International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences, Vol 4, Suppl 1.
Phillip, A. H., Garai, A.S., and Valenzuela, M.A., 2006, Reduction of Doksorubisin (Adriamycin) Bone Marrow Toxicity, Journal of
Pharmaceutical Sciences, Volume 64 Issue 9, pp. 1574 – 1576.
Prosecus, 2006, Biosynth : Chemistry and Biology, http://www.biosynth.com/, diakses tanggal 17 Februari 2013.
Putri, H., 2012, Aktivitas Ekstrak Etanolik Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix D.C.) sebagai Agen Imunomodulator Terhadap Efek Imunosupresi Doksorubisin Pada Tikus Galur Sparague Dawley, Skripsi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Ramadhani, I., 2009, Efek Konsumsi Air Minum Penambah Oksigen Terhadap Proliferasi Sel Limfosit Manusia, Skripsi, 56-57, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Robbins dan Cotran, 2008, Dasar Patologis Penyakit, EGC, Jakarta, pp. 174-178. Ronald A., dan Richard A., 2004, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan
Laboratorium, EGC, Jakarta.
Shah, B.N., Seth, A.K., and Desai, R.V., 2010, Phytopharmacological Prodile of Lagenaria siceraria: A Review, Asian Journal of Plant Sciences, 9 (3), 152-157.
Siswandono, Soekardjo, B., 2000, Kimia Medisinal, Edisi 2, Airlangga University, Surabaya.
Stepankova, J., Malina, J., Kasparkova, J., Brabec, V., 2010, DNA Modifications by Doxorubicin Activated by Hexamethylenetetramine and Processing of
These Modifications by a DNA Helicase, Department of Biophysics,
Faculty of Sciences, Palacky University, Czech Republic.
Tsao, A., Kim, S., and Hong, W., 2004, Chemoprevention of Cancer, J. Clin: 54: 150- 180.
Voigt, R., 1984, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Edisi Kelima, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta.
39
Wang, H., Cheng, H., Wang, F., Wei, D., dan Wang, X., 2010, An improved 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reduction assay for evaluating the viability of Escherichia coli cells,
Journal of Microbiological Methods, 82 (2010) 330–333, Shanghai
200237, China.
Widjanarko, A., 2002, Penatalaksanaan Kanker Payudara Terkini, Pustaka Populer Obor, Jakarta, pp. 78,79.
Wijayakusuma, H., 2008 , Atasi kanker dengan tanaman obat, Puspa swara, Jakarta, pp. 2-3.
Winarsi, H., 2012, Protein Kedelai dan Kecambah, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, p. 192.
Koirewoa, Y., Fatimawali, Wiyono, W., 2012, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Dalam Daun Beluntas (Pluchea indica L.), Skripsi, UNSRAT, Manado.
Zhang, X., Li, W., Wu, Y., and Gao, M., 2005, Amelioration of Doxorubicin-Induced Myocardial Oxydative stress and imunosuppresion by Grape Seed Proanthocyanidins in tumour-bearing Mice, J Pharm Pharmacol, 57, 8, 1043-1051.
41
Lampiran 1. Foto Ekstrak Buah L. siceraria dalam CMC Na 1%
Lampiran 2. Foto Buah L. siceraria
Lampiran 3. Komposisi Media Tumbuh Limfosit 1. Medium RPMI RPMI : 10,4 g NaHCO3 : 2 g Hepes : 2,6 g Aquades add 1000 mL 2. Medium Komplit Medium RPMI : 100 mL FBS : 10 mL Penstrep : 1 mL Fungison : 5 mL
43
Lampiran 4. Data Orientasi Proliferasi Limfosit tiap Kelompok Kontrol Kelompok Rasio Proliferasi
Kontrol Pelarut 1,07
Kontrol Doksorubisin 1,01
Kontrol Ekstrak 1,11
Lampiran 5. Data Rasio Proliferasi Limfosit Tahap Pengujian
Kelompok Replikasi Rata-rata OD (+) PHA
Rata-rata OD
(-) PHA Rasio Proliferasi
Kontrol Pelarut 1 0.297 0.279 1.065 2 0.293 0.280 1.046 3 0.295 0.275 1.074 4 0.311 0.285 1.091 5 0.298 0.284 1.049 Kontrol Doksorubisin 1 0.253 0.250 1.012 2 0.268 0.270 0.993 3 0.279 0.276 1.011 4 0.279 0.275 1.015 5 0.280 0.269 1.041 Ekstrak Dosis 1000 mg/kg BB 1 0.287 0.276 1.040 2 0.273 0.274 0.996 3 0.272 0.260 1.046 4 0.300 0.292 1.027 5 0.298 0.289 1.031 Ekstrak Dosis 750 mg/kg BB 1 0.350 0.334 1.048 2 0.302 0.278 1.086 3 0.295 0.275 1.073 4 0.297 0.280 1.061 5 0.286 0.276 1.036 Ekstrak Dosis 500 mg/kg BB 1 0.284 0.274 1.036 2 0.296 0.265 1.117 3 0.296 0.279 1.061 4 0.291 0.271 1.074 5 0.292 0.279 1.047
Lampiran 6. Analisis statistik proliferasi limfosit pengaruh ekstrak etanol buah labu air (Lagenaria siceraria) pada berbagai variasi dosis terhadap
imunosupresan doksorubisin One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
Kelompok Proliferasi
N 25 25
Normal Parametersa Mean 3.00000 1.04704 Std. Deviation 1.443376 .029762 Most Extreme Differences Absolute .156 .114 Positive .156 .114 Negative -.156 -.075 Kolmogorov-Smirnov Z .779 .569 Asymp. Sig. (2-tailed) .579 .902 a. Test distribution is Normal.
Oneway Descriptives Proliferasi N Mean Std. Deviation Std. Error 95% Confidence Interval for Mean Min Max Lower
Bound Upper Bound
Kontrol Pelarut 5 1.06500 .018534 .008289 1.04199 1.08801 1.046 1.091 Kontrol Doksorubisin 5 1.01440 .017199 .007692 .99304 1.03576 .993 1.041 Ekstrak dosis 1000 5 1.02800 .019378 .008666 1.00394 1.05206 .996 1.046 Ekstrak dosis 750 5 1.06082 .019750 .008832 1.03630 1.08534 1.036 1.086 Ekstrak dosis 500 5 1.06700 .031409 .014046 1.02800 1.10600 1.036 1.117 Total 25 1.04704 .029762 .005952 1.03476 1.05933 .993 1.117
45
Test of Homogeneity of Variances
Proliferasi
Levene Statistic df1 df2 Sig.
.603 4 20 .665
ANOVA
Proliferasi
Sum of
Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups .012 4 .003 6.112 .002 Within Groups .010 20 .000 Total .021 24
Post Hoc
Multiple Comparisons Proliferasi Scheffe(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound K. Pelarut K. Doxorubicin .050600* .013831 .030 .00377 .09743 EELA 1000 .037000 .013831 .171 -.00983 .08383 EELA 750 .004180 .013831 .999 -.04265 .05101 EELA 500 -.002000 .013831 1.000 -.04883 .04483 K. Doxorubicin K. Pelarut -.050600* .013831 .030 -.09743 -.00377 EELA 1000 -.013600 .013831 .911 -.06043 .03323 EELA 750 -.046420 .013831 .053 -.09325 .00041 EELA 500 -.052600* .013831 .023 -.09943 -.00577
EELA 1000 K. Pelarut -.037000 .013831 .171 -.08383 .00983 K. Doxorubicin .013600 .013831 .911 -.03323 .06043 EELA 750 -.032820 .013831 .268 -.07965 .01401 EELA 500 -.039000 .013831 .135 -.08583 .00783 EELA 750 K. Pelarut -.004180 .013831 .999 -.05101 .04265 K. Doxorubicin .046420 .013831 .053 -.00041 .09325 EELA 1000 .032820 .013831 .268 -.01401 .07965 EELA 500 -.006180 .013831 .995 -.05301 .04065 EELA 500 K. Pelarut .002000 .013831 1.000 -.04483 .04883 K. Doxorubicin .052600* .013831 .023 .00577 .09943 EELA 1000 .039000 .013831 .135 -.00783 .08583 EELA 750 .006180 .013831 .995 -.04065 .05301
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Homogeneous Subsets
Proliferasi Scheffe
Kelompok N
Subset for alpha = 0.05
1 2 Kontrol Doxorubicin 5 1.01440 EELA 1000 mg/kg BB 5 1.02800 1.02800 EELA 750 mg/kg BB 5 1.06082 1.06082 Kontrol Pelarut 5 1.06500 EELA 500 mg/kg BB 5 1.06700 Sig. .053 .135
47
Lampiran 7. Surat Ethical Clearence Penelitian
BIOGRAFI PENULIS
Skripsi yang berjudul ”Pengaruh Ekstrak Etanolik Buah Labu Air (Lagenaria siceraria (Mol.) Standley) sebagai Imunomodulator melalui Pengamatan Proliferasi Limfosit pada Tikus Jantan Galur Sprague Dawley yang Dipejani
Doksorubisin” ini ditulis oleh Joseph Singgih Dwilaksono.
Penulis merupakan anak kedua dari tiga bersaudara, yang lahir di Magelang, Jawa Tengah pada tanggal 17 Agustus 1992. Pada tahun 1997, penulis menempuh pendidikan di SD Kanisius Borobudur Magelang hingga tahun 2003. Pada tahun 2003 – 2006 penulis menempuh pendidikan menengah pertama di SMP Kanisius Borobudur Magelang. Selepas dari pendidikan menengah pertama penulis melanjutkan pendidikan di SMA Marsudirini Muntilan Magelang pada tahun 2006 – 2009. Selanjutnya mulai tahun 2009 penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Pada tahun 2010 penulis pernah menjabat sebagai Sie Kesenian Titrasi (Tiga Hari Temu Akrab Farmasi). Pada tahun 2011 menjabat kembali dalam kepanitiaan Titrasi sebagai Steering committee. Pada tahun 2012 penulis lolos Program Kreativitas Mahasiswa (PKM-M) didanai DIKTI. Penulis juga menjadi Asisten Praktikum Kimia Organik (2010), Praktikum Biokimia (2010), Praktikum Farmakognosi-Fitokimia (2011), dan Praktikum Kromatografi (2011).
xvi INTISARI
Doksorubisin merupakan salah satu obat sitotoksik yang digunakan sebagai agen kemoterapi. Doksorubisin dapat menimbulkan efek merugikan yaitu supresi sumsum tulang belakang, sitotoksik pada sel hematopoietic sehingga dapat menurunkan jumlah sel limfosit yang merupakan sel penting dalam pertahanan imunitas tubuh. Oleh karena itu perlu dikembangkan agen ko-kemoterapi untuk mengurangi efek merugikan doksorubisin. Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai ko-kemoterapi adalah buah Lagenaria siceraria yang bersifat sebagai imunomodulator. Tujuan penelitian adalah memperoleh informasi mengenai pengaruh pemberian ekstrak etanolik buah Lagenaria siceraria terhadap proliferasi sel limfosit tikus galur Sprague Dawley yang dipejani doksorubisin.
Sebanyak 25 ekor tikus Sprague Dawley dibagi menjadi 5 kelompok : Kelompok I sebagai kelompok kontrol pelarut. Kelompok II sebagai kelompok kontrol doksorubisin. Kelompok III diberikan doksorubisin dan ekstrak buah
Lagenaria siceraria dosis 1000 mg/kg BB secara p.o. Kelompok IV diberikan
doksorubisin dan ekstrak buah Lagenaria siceraria dosis 750 mg/kg BB secara p.o. Kelompok V diberikan doksorubisin dan ekstrak buah Lagenaria siceraria
dosis 500 mg/kg BB secara p.o. Perlakuan dilakukan selama 15 hari terus-menerus kemudian diamati proliferasi limfosit. Data dianalisis dengan uji one way
ANOVA taraf kepercayaan 95% yang dilanjutkan dengan uji Scheffe.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian ekstrak etanolik buah
Lagenaria siceraria berpengaruh terhadap proliferasi limfosit pada tikus galur
Sprague Dawley yang dipejani doksorubisin. Dosis pemberian ekstrak etanolik
buah L. sicearia yang paling efektif untuk meningkatkan proliferasi limfosit yaitu 500 mg/KgBB.
Kata kunci : Lagenaria siceraria, doksorubisin, imunomodulator, proliferasi limfosit
xvii ABSTRACT
Doxorubicin is a cytotoxic drug that is used as a chemotherapeutic agent. Doxorubicin has adverse effects such as suppression of bone marrow, cytotoxic to hematopoietic cells that could reduce the number of lymphocytes that are important cells in the immune defense. Therefore, it is necessary to develop co-chemotherapy agent to reduce adverse effects of doxorubicin, one of which is
Lagenaria siceraria fruit’s which can be as immunomodulators. The aim of this
research was to obtain information of the effect of ethanolic extract of Lagenaria
siceraria fruit’s on lymphocytes proliferation on Sprague Dawley rats induced
doksorubisin.
A total of 25 Sprague-Dawley rats were divided into 5 groups: Group I as a negative control group was given CMC Na 1%. Group II as a doxorubicin control group was given doxorubicin 4,5 mg/kg BW. Group III was given doxorubicin 4,5 mg/Kg BW + 1000 mg/Kg BW ethanolic extract of Lagenaria
siceraria fruit’s. Group IV was given doxorubicin 4,5 mg/Kg BW + 750 mg/Kg
BW ethanolic extract of Lagenaria siceraria fruit’s. Group V was given doxorubicin 4,5 mg/Kg BW + 500 mg/Kg BW ethanolic extract of Lagenaria
siceraria fruit’s. Treatment was given for 15 days continuously then observed
lymphocyte proliferation. The data were analyzed by one-way ANOVA test with confidence level of 95%, followed by Scheffe's test.
The results showed that the ethanolic extract of Lagenaria sicerariafruit’s
has an effect on lymphocyte proliferation in Sprague-Dawley rats induced doksorubisin with effective dose 500 mg/Kg BW to increase lymphocyte proliferation.
Key words : Lagenaria siceraria, doxorubicin, immunomodulator, lymphocyte proliferation.