BAB III METODE PENELITIAN
B. Saran
1. Perlu dilakukan fraksinasi ekstrak etanolik buah labu air agar dosis paling efektifnya dapat diturunkan.
2. Perlu dilakukan penelitian serupa dengan tingkatan dosis ekstrak etanol buah labu air menggunakan kelipatan dosis.
3. Perlu mengkaji ulang lama pemberian ekstrak etanol buah labu air yang dapat menaikkan kapasitas dan indeks fagositosis makrofag yang paling maksimal. 4. Perlu mengkaji ulang dosis doksorubisin yang dapat menurunkan kapasitas
5. Perlu dilakukan penelitian serupa dengan pengamatan komponen sistem imun non spesifik lainnya seperti neutrofil, eosinofil, sel NK, maupun pengamatan komponen sistem imun spesifik seperti rasio CD4/CD8.
6. Pengkajian ulang obat kemoterapi lain yang dapat menimbulkan efek penekanan nilai kapasitas dan indeks fagositosis makrofag yang lebih baik dari doksorubisin.
DAFTAR PUSTAKA
Abbas , A.K., dan Lichtman, A.h., 2005, Cellular and Molecular Immunology, 5th
editon, Elsevier Publisher, Philadelpia, pp. 5-6.
Abbas A.K., Lichtman, A.H., Pober, J.S., 2007, Cellular and Molecular Immunology, 3rded, WB Saunders Company, Philadelphia, pp 94-177. Anonima, 2007, Kanker : Pertumbuhan, Terapi dan Nanomedis, diambil dari situs
http://www.nano.lipi.go.id/utama.cgi?artikel&1187593839 diakses pada bulan agustus 2008.
Anonimb, 2007, Sistem Kekebalan Tubuh, diakses dari situs
http://mikrobia.wordpress.com/2007/03/08/sistem-kekebalan-tubuh068114009068114048068114055/, diakses pada bulan Mei 2012. Baratawidjaja , K.G., 2000, Imunologi Dasar, Edisi IV, Balai Penerbit fakultas
Kedokteran umum Universitas Indonesia, Jakarta, p. 49.
Baratawidjaja , K.G., dan Rengganis, I, 2009, Imunologi Dasar, Edisi VIII, Balai Penerbit fakultas Kedokteran umum Universitas Indonesia, Jakarta, pp. 29, 61-75.
Belly, J., 2012, Bottle Gourd,
http://www.joyfulbelly.com/Ayurveda/ingredient/Bottle-Gourd/116, diakses tanggal 20 Mei 2012.
Bruton, L., Lazo, J. S., and Parker, K. L., 2005, Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 11th Edition, McGrawHill, Lange.
Campbell, N.A., Reece, J.B.,and Mitchell, L.G., 1999, Biology, Edisi V, Jilid 3, diterjemahkan oleh Rahayu lestari, Ellyzar Adil, Nova anita, Andri, Wishnu Wibowo, Washmen manalu, penerbit Erlangga, Jakarta, pp. 73-85.
Childs, A.C., Phaneuf, S.L., Dirks, A.J., Phillips, T., and Leeuwenburgh, 2002, Doksorubisin Treatment in Vivo Causes Cytochrome c Release and Cardiomyocyte Apoptosis, As Well As Increased Mitochondrial Efficiency, Superoxide Dismutase Activity, and Bcl-2:Bax Ratio, Cancer Research, 62, 4592-4598.
Cutts, S.M., et al., 2005, Formaldehyde-releasing prodrugs in combination with adriamycin can overcome cellular drug resistance. Oncol Res, 15(4): p. 199-213.
Dasgupta, A., 1992, Modern Immunology, 131, Jaypee Brothers Medical Publishers (P) Ltd, New Delhi.
Deshpande, J.R., Choundhari, A.A., Mishra, M.R., Meghre, V.S., Wadodkar, S.G., and Dorle, A.K., 2008, Beneficial Effects of Lagenaria siceraria
(Mol.) Standley fruit eficarp in animal Model, Indian J. Exp Biol, 46, 234-242.
Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1999, Peraturan Perundang-undangan di bidang Obat Tradisonal, Depkes RI ,hal 76 – 77.
Feusner, J., 1996, The Role of Ascorbic Acid in The Prevention of Cancer, Nutr Bytes, 2(2), article 2.
Gangwal, A., Panmar, S.K., Gupta, G.L., Rana A.C., and Sheth, N.R., 2008, Immunomodulatory Effects of Langenaria siceraria Fruits in rats,
Pharmacognosy Mag., 4, S234-S238.
Gangwal, A., Parmar S.K., and Sheth, N.R., 2010, Phytochemical Investigation and Inmunomodulatory Activity of Lagenaria siceraria Fruits, J. Natural Remedies, vol. 10/2 (2010) 170-174
Ganong, W.F., 2002, Fisiologi Kedokteran, ed. 20, Penerbit Buku Kedokteran, EGC, Jakarta, pp. 496-500.
Goodman J.W., 1994, The Immune Response, in Basic and Clinical Immunology, 8th ed., Prentice Hall Int.Inc., USA, p. 57.
Handayani, T., 2009, Respon imun Non Spesifik, http://arifwr.wordpress.com/2009/06/09/respon-imun-non-spesifik/, diakses tanggal 1 Oktober 2010.
Herwandhani, P., Nagadi, S.. dan Saktiningtyas, I.A. 2011, Potensi Kulit Jeruk Purut (Citrus hystrix D.C.) sebagai Agen Imunomodulator yang Prospektif pada Penekanan Efek Imunosupresi Kemoterapi, Jurnal Saintifika Gadjah Mada, III(2)
Hutomo, R., Sutarno, Winarno, W., Kusmardi, 2005, Uji Antimalaria Ekstrak Buah Morinda citrifolia dan Aktivitas Makrofag pada Mencit (Mus musculus) setelah Diinfeksi Plasmodium berghei, Jurnal Biofarmasi, 3 (2), 61-69.
Israels, L.G., 2002, Mechanism in Hematology CDROOM, Core Health Service Inc, Ontario-Canada.
Jensch-junior, B.E.Z., Pressinoti, L.N., Berges, J.C.,S., and Silva, J.R.M.C., 2006, Characterization of Macrophage Phagocytosis of The Tropical Fish
Prochilous scrofa (Steindacher,1881), J Agriculture, 251, 509-615. Kasianningsih, S., 2011, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanolik Daun Jombang
(Taraxacum officinale wigger) terhadap Profil Sel limfosit T CD4 dan CD8 serta Histopatologi Jantung pada Tikus Galur Sprague dawley yang Dipejani Doksorubisin, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Kubde, M.S., Khadabadi, S.S., Farooqui, I.A. , Deore, S. L., 2010, Lagenaria siceraria:Phytochemistry, Pharmacognosy and Pharmacological Journal, 2(3), 91-98.
Kusmardi, Kumala,S., dan Triana, E.E., 2007, Efek Imunomodulator Ekstrak Daun Ketepeng cina (Cassia alata l.) terhadap Aktivitas dan Kapasitas fagositosis Makrofag, Makara, J Kesehatan,11(2). 50-53.
Leijh, P.J.C., Furtth, R.V., and Zwet, T.L.V., 1986, In Vitro Determination of Phagocytosis and Intracellular Killing by Polimorphonuclear and Mononuclear Phagocytes, In: Weir DM, Editor, Cellular Imunology, 2, 74085 Blackwell Scintific Publication, London.
Leung, P.Y., Miyashita, K., Young, M., and Tsao, C.S., 1993, Cytotoxyc Effect of Ascorbate and Its Derivates on Cultured Malignant and Nonmalignant Cell Lines.Anticancer res. 13(2), 475-80.
Ma’at, S., 2009, Membangun Sistem Kekebalan Tubuh dengan Herbal, http:’//www.indospiritual.com/artikel_membangun-sistem-kekebalan-tubuh-dengan-herbal.html, diakses tanggal 13 November 2009.
Marrelli, T.M., 2000, Nursing Documentation Handbook, 3th Ed, diterjemahkan oleh Rosidah, D., et al., EGC, Jakarta.
Meiyanto, E., 2012, Ko-kemoterapi, Alternatif untuk Penyembuhan Kanker, http://nationalgeographic.co.id/berita/2012/03/ko-kemoterapi-alternatif-untuk-penyembuhan-kanker, diakses tanggal 10 Mei 2012.
Nie, L., Perry, S., Zhao, Y., Huang, J., Kincade, P., Farrar, M.,A., and Sun, X., 2008, Regulation of Lymphocyte Development by Cell-Type-Specific Interpretation of Notch Signals, Mol Cell Biol, Mar;28(6):2078-90. Patel, D., Shukla, S., Gupta., 2007, Apigenin and Cancer Chemoprevention:
Perry, M.C., 2008, The Chemotherapy Source Book, 4th Ed, Williams And Wilkins, USA.
Phillip A. H., Garai, A.S., and Valenzuela, M.A., 2006, Reduction of Doksorubisin (Adriamycin) Bone Marrow Toxicity, J. Pharmaceutical Sciences, Volume 64 Issue 9, pp. 1574 – 1576.
Rios, J.L. 2010, Effects of Triterpens on the immune System, Journal of Ethnopharmacology,128,1-14.
Rosanti, T.I., 2005, Pengaruh Infeksi Brugia malayi dan Imunisasi Protein Ekskretori-sekretori Brugia malayi terhadap Aktivasi Makrofag dan Proriferasi Limfosit T (Meriones unguiculatus): Kajian pada Mencit Balb/c dan Gerbil (Meriones unguiculatus), Tesis, Program Pascasarjana Univesitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Scalabrin M., 2011, Analyses of Cross-linking Between DNA and Anthracycline,
Ph.D School in Molecular Science Orientation: Pharmaceutical Science XXIII Cycle
Shah, B.N., Seth, A.K., and Desai, R.V., 2010, Phytopharmacological Prodile of
Lagenaria siceraria: A Review, Asian Journal of Plant Sciences, 9 (3), 152-157.
Shen, W.C., and Louie S.G., 1999, Immunology for Pharmacy Students ,Harwood Academic Publishers, USA, p. 4, 6.
Shirley E.O., 2003, Pocket Guide of Oncology Nursing, diterjemahkan oleh Meiliya., E., EGC,Jakarta.
Stephens, J.M., 2009, Gourd, Bottle — Lagenaria siceraria (Mol.) Standl, Horticultural Sciences Department, University of Florida
Susilaningsih N,Johan A, Gunardi, dan Winarto, 2005, Pengaruh Polifenol Teh Hijau dan Komponen Aktifnya terhadap Aktifitas Fagositosis Makrofag dalam Membunuh Bakteri. Media Medika Indonesia, pp 40 : 76-81. Taatjes, D.J., Guadiano G, Resing K, and Koch TH., 1997, Redox pathway
leading to the alkylation of DNA by the anthracycline, antitumor drugs adriamycin and daunomycin. J Med Chem, 40(8): p. 1276-86.
Taatjes, D.J. and T.H. Koch, 2001, Nuclear targeting and retention of anthracycline antitumor drugs in sensitive and resistant tumor cells. Curr Med Chem,8(1): p.15-29.
Tambunan, C.A., 2006, Pengaruh Pemberian Vaksinasi BCG, Stres, dan Kombinasi Vaksinasi BCG-Stres Terhadap Kemampuan Fagositosis Makrofag pada Mencit BALB/c, Artikel penelitian, Universitas Diponegoro, Semarang.
Trease, G.E. and Evans, W.C., 2002, Pharmacognosy, 15th Ed, Harcourt brace & Co. Asia, Pvt. Ltd., W.B.Saunders Company Ltd.
Uspenskaya, Y.A., Mikhutkina, S.,V., taksanova, E.I., Popova, N.N., Olovyannikova, R.Y.,and A.b., Salmina,2004, Induction of Apoptosis in Bone Marrow Cells in Mediated via Purigenic Receptors,
Byulleten’Eksprimental’noi Biologii I Meditsiny, pp. 138, 8, 135-138. Wagner, H., and Jurcic K., 1991, Assay For Immunomodulation and Effect on
Mediators of Inflammation, In: Methods in Plants Biochemistry: Assay for Bioactivity VI, PM Dey And JB Harbone (Eds.), Academic Press, London.
Widianto, M.B., 1987, Imunomodulator, Cermin Dunia Kedokteran No. 44, Pusat Penelitian dan Pengembangan PT. Kalbe Farma, pp. 43-46.
Xu, G., Fujita, K., Negayama, K., Yuube, S., Hojo, Y., Yamaji, K., Kawanishi and, Takahara, J., 1996, Effect of Macrolide Antibiotics on Macrophage Functions, Microbiol Immunol 7: 473-479.
Zhang, X., Li,W., Wu, yong-Jie,G., and Ming-tang, 2005, Amelioration of Doksorubisin-Induced Myocardial Oxydative stress and imunosuppresion by Grape Seed Proanthocyanidins in tumour-bearing Mice, J Pharm Pharmacol, 57, 8, 1043-1051.
Zuhud,E. AM., 2011, Kanker Lenyap Berkat Sirsak, Argomedia Pustaka, Jakarta, pp. 345-355.
Lampiran 1. Buah labu air
Lampiran 2. Komposisi media tumbuh makrofag 1. Medium RPMI RPMI : 10,4 g NaHCO3 : 2 g Hepes : 2,6 g Aquades add 1000 mL 2. Medium Komplit Medium RPMI : 100 mL FBS : 30 mL Penstrep : 6 mL Fungison : 3 mL
Lampiran 3. Data orientasi kapasitas fagositosis dan indeks fagositosis makrofag pada tiap kelompok kontrol
No. Kelompok Rata-rata KF (%) Rata-rata IF
1 Kontrol Negatif 50,08 1,26 2 Kontrol Doxorubicin 37,79 0,66 3 Kontrol Ekstrak (1000 mg/kgBB) 59,4 1,19
Lampiran 4. Analisis statistik kapasitas fagositosis pengaruh ekstrak etanol buah labu air (Lagenaria siceraria) pada berbagai variasi dosis terhadap imunosupresan doxorubicin
Descriptives
Descriptive Statistics
N Minimum Maximum Mean Std. Deviation Statistic Statistic Statistic Statistic Std. Error Statistic KF 25 28.30 66.36 47.3996 2.14585 10.72925 Valid N
(listwise) 25
NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
KF
N 25
Normal Parametersa,,b Mean 47.3996 Std. Deviation 10.72925 Most Extreme
Differences Absolute Positive .113 .113 Negative -.097 Kolmogorov-Smirnov Z .565 Asymp. Sig. (2-tailed) .907 a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives
KF
N Mean Deviation Std. Error Std.
95% Confidence Interval for Mean
Minimum Maximum Lower
Bound Bound Upper
Kontrol 5 50.0840 10.00152 4.47281 37.6655 62.5025 38.74 59.83 Kontrol Doxorubicin 5 37.7900 7.13709 3.19180 28.9281 46.6519 28.30 46.36 EELA 1000mg/kg 5 57.8640 5.68329 2.54164 50.8073 64.9207 50.98 64.86 EELA 750 mg/kg 5 51.5460 10.57766 4.73047 38.4121 64.6799 40.78 66.36 EELA 500 mg/kg 5 39.7140 6.23712 2.78932 31.9696 47.4584 33.33 46.67 Total 25 47.3996 10.72925 2.14585 42.9708 51.8284 28.30 66.36
Test of Homogeneity of Variances
KF Levene Statistic df1 df2 Sig. 1.319 4 20 .297 ANOVA KF Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1426.576 4 356.644 5.338 .004 Within Groups 1336.226 20 66.811
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
KF LSD
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean Difference
(I-J) Error Std. Sig.
95% Confidence Interval Lower
Bound Bound Upper Kontrol Kontrol Doxorubicin 12.29400* 5.16958 .027 1.5105 23.0775
EELA 1000mg/kg -7.78000 5.16958 .148 -18.5635 3.0035 EELA 750 mg/kg -1.46200 5.16958 .780 -12.2455 9.3215 EELA 500 mg/kg 10.37000 5.16958 .059 -.4135 21.1535 Kontrol Doxorubicin Kontrol -12.29400 * 5.16958 .027 -23.0775 -1.5105 EELA 1000mg/kg -20.07400* 5.16958 .001 -30.8575 -9.2905 EELA 750 mg/kg -13.75600* 5.16958 .015 -24.5395 -2.9725 EELA 500 mg/kg -1.92400 5.16958 .714 -12.7075 8.8595 EELA
1000mg/kg Kontrol Kontrol Doxorubicin 20.074007.78000 5.16958 * 5.16958 .148 -3.0035 18.5635 .001 9.2905 30.8575 EELA 750 mg/kg 6.31800 5.16958 .236 -4.4655 17.1015 EELA 500 mg/kg 18.15000* 5.16958 .002 7.3665 28.9335 EELA 750 mg/kg Kontrol 1.46200 5.16958 .780 -9.3215 12.2455 Kontrol Doxorubicin 13.75600* 5.16958 .015 2.9725 24.5395 EELA 1000mg/kg -6.31800 5.16958 .236 -17.1015 4.4655 EELA 500 mg/kg 11.83200* 5.16958 .033 1.0485 22.6155 EELA 500 mg/kg Kontrol -10.37000 5.16958 .059 -21.1535 .4135 Kontrol Doxorubicin 1.92400 5.16958 .714 -8.8595 12.7075 EELA 1000mg/kg -18.15000* 5.16958 .002 -28.9335 -7.3665 EELA 750 mg/kg -11.83200* 5.16958 .033 -22.6155 -1.0485 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.
Lampiran 5. Analisis statistik indek fagositosis makrofag pengaruh ekstrak etanol buah labu air (Lagenaria siceraria) pada berbagai variasi dosis terhadap imunosupresan doksorubisin
Descriptives
Descriptive Statistics
N Minimum Maximum Mean Std. Deviation Statistic Statistic Statistic Statistic Std. Error Statistic IF 25 .49 2.19 1.0064 .08098 .40489 Valid N
(listwise) 25
NPar Tests
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test
IF
N 25
Normal Parametersa,,b Mean 1.0064 Std. Deviation .40489 Most Extreme Differences Absolute .166 Positive .166 Negative -.101 Kolmogorov-Smirnov Z .830 Asymp. Sig. (2-tailed) .496 a. Test distribution is Normal.
Oneway
Descriptives IF N Mean Std. Deviation Std. Error 95% Confidence Interval for MeanMinimum Maximum Lower Bound Upper Bound Kontrol 5 1.2620 .62351 .27884 .4878 2.0362 .68 2.19 Kontrol Doxorubicin 5 .6640 .12720 .05689 .5061 .8219 .49 .77 EELA 1000mg/kg 5 1.2840 .23394 .10462 .9935 1.5745 .94 1.59 EELA 750 mg/kg 5 1.0540 .31769 .14208 .6595 1.4485 .63 1.49 EELA 500 mg/kg 5 .7680 .15675 .07010 .5734 .9626 .60 .95 Total 25 1.0064 .40489 .08098 .8393 1.1735 .49 2.19
Test of Homogeneity of Variances
IF Levene Statistic df1 df2 Sig. 2.808 4 20 .053 ANOVA IF Sum of
Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.594 4 .398 3.404 .028 Within Groups 2.341 20 .117
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
IF LSD
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean Difference
(I-J) Error Std. Sig.
95% Confidence Interval Lower
Bound Bound Upper Kontrol Kontrol Doxorubicin .59800* .21637 .012 .1467 1.0493
EELA 1000mg/kg -.02200 .21637 .920 -.4733 .4293 EELA 750 mg/kg .20800 .21637 .348 -.2433 .6593 EELA 500 mg/kg .49400* .21637 .033 .0427 .9453 Kontrol Doxorubicin Kontrol -.59800 * .21637 .012 -1.0493 -.1467 EELA 1000mg/kg -.62000* .21637 .010 -1.0713 -.1687 EELA 750 mg/kg -.39000 .21637 .087 -.8413 .0613 EELA 500 mg/kg -.10400 .21637 .636 -.5553 .3473 EELA
1000mg/kg Kontrol Kontrol Doxorubicin .62000.02200 .21637 * .21637 .920 -.4293 .010 .1687 1.0713 .4733 EELA 750 mg/kg .23000 .21637 .300 -.2213 .6813 EELA 500 mg/kg .51600* .21637 .027 .0647 .9673 EELA 750 mg/kg Kontrol -.20800 .21637 .348 -.6593 .2433 Kontrol Doxorubicin .39000 .21637 .087 -.0613 .8413 EELA 1000mg/kg -.23000 .21637 .300 -.6813 .2213 EELA 500 mg/kg .28600 .21637 .201 -.1653 .7373 EELA 500 mg/kg Kontrol -.49400* .21637 .033 -.9453 -.0427 Kontrol Doxorubicin .10400 .21637 .636 -.3473 .5553 EELA 1000mg/kg -.51600* .21637 .027 -.9673 -.0647 EELA 750 mg/kg -.28600 .21637 .201 -.7373 .1653 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.
BIOGRAFI PENULIS
Skripsi yang berjudul ” Efek Ekstrak Etanolik Buah Labu Air (Langenaria siceraria (Mol.) Standley) sebagai Imunomodulator melalui Pengamatan Kapasitas dan Indeks Fagositosis Makrofag pada Tikus Jantan Sprague Dawley yang Dipejani Doxorubicin” ini ditulis oleh Maria Larizza Handoyo. Penulis merupakan anak kedua dari dua bersaudara, yang lahir di Tegal, Jawa Tengah pada tanggal 7 Juli 1991. Pada tahun 1996-1997 penulis menempuh pendidikan di TK Elkana Tegal. Kemudian pada tahun 1997, penulis melanjutkan pendidikan ke SD Pius Tegal hingga tahun 2003. Pada tahun 2003 – 2006 penulis menempuh pendidikan menengah pertama di SLTP Katolik Pius Tegal. Selepas dari pendidikan menengah pertama penulis melanjutkan pendidikan di SMA Katolik Pius Tegal pada tahun 2006 – 2009. Selanjutnya mulai tahun 2009 penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Pada tahun 2010 penulis pernah menjabat sebagai Panitia Musyawarah Wilayah JMKI (Jaringan Mahasiswa Kesehatan Indonesia). Pada tahun 2011 menjadi pelaksana Pengabdian Masyarakat bersama Dosen dalam rangka merayakan lustrum III Fakultas Farmasi Sanata Dharma, menjadi Panitia Malam keakraban JMKI sebagai Sekretaris, dan ikut serta menjadi panitia Pelepasan Wisuda Sanata Dharma sebagai Sie Kesekretariatan. Pada tahun 2011 penulis pernah menjadi Asisten Dosen Kimia Organik II, Asisten Dosen Praktikum Spektroskopi, Asisten Dosen Praktikum Farmakognosi Fitokimia I, serta menjadi Tentor di bimbel Perfecta kids. Pada tahun 2012 penulis menjadi Asisten Dosen FTS Solid, Asisten Dosen FTS Semi Solid, serta Asisten Dosen Kimia Dasar.