UJI AKTI1ITAS BIOKIMIA MIKROBA

Nama :

NIM :

Kelompok :

Kelas :

Asisten :

J!san Teknolo"i #asil Pe!tanian

Fakltas Teknolo"i Pe!tanian

Uni$e!sitas B!a%i&a'a

()*+

Tanggal Praktikum

Praktikum 3 UJI AKTIVITAS BIOKIMIA MIKROBA

1. Jelaskan prinsip uji aktivitas biokimia mikroba!

2. Bakteri memiliki dua jenis enzim yaitu endoenzim dan eksoenzim. Jelaskan perbedaannya!

2+ *=-'ab

Prinsip uji aktivitas biokimia mikroba adalah mengetahui aktivitas biokimia atau metabolisme mikroba yang mana memiliki kemampuan untuk mendegradasi pada berbagai nutrisi seperti karbohidrat lemak protein dan asam amino dengan enzim

yang dimiliki oleh mikroorganisme itu sendiri.

yang dimiliki oleh mikroorganisme itu sendiri. ndoenzim merupakan enzim yang bekerja di dalam sel bakteri. ndoenzim bersi"at anaboli# dan kataboli#. $naboli#

adalah proses pembentukan molekul dari yang sederhana menjadi molekul yang kompleks yang mana membutuhkan energy. %edangkan kataboli# adalah proses peme#ahan molekul dari molekul kompleks menjadi molekul yang lebih sederhana

yang mana menghasilkan energy. &ontoh peme#ahan protein menjadi asam amino. ksoenzim merupakan enzim yang disekresikan atau dilepaskan ke luar sel dan berdi"usi ke dalam media. ksoenzim bersi"at hidroliktik yang mana enzim ini dapat menguraikan molekul'molekul kompleks menjadi molekul yang lebih sederhana. (olekul yang sederhana ini kemudian dapat masuk ke dalam sel dan digunakan untuk kepentingan sel)*aluyo 2++,-.

3. Jelaskan karakteristik dan komponen penyusun dari a. pati b. lemak #. protein d. gelatin. 2 A. ati

ati merupakan karbo$idrat kompleks yang tidak larut air dengan rantai yang panjang dan ber)abang dan muda$ ter$idrolisis. ati memiliki ujud bubuk puti$ taar dan tidak berbau. %elain itu pati tersusun dari dua ma)am karbo$idrat yaitu amilosa dan amilopektin. Amilosa memiliki karakteristik arna ungu pada tes iodin dan memberikan sifat keras sedangkan amilopektin memberikan sifat lengket. ada tes iodin amilopektin tidak bereaksi5$ang 2990. %e)ara alami pati merupakan butiran-butiran ke)il yang sering disebut granula. &entuk dan ukuran granula merupakan karakteristik setiap jenis pati karena itu digunakan untuk identiEkasi <ill dan /elley 1>420.

/omponen penyusun pati terdiri dari amilosa dan amilopektin. $milosa merupakan polisakarida berantai lurus bagian dari butir'butir pati yang terdiri atas molekul'molekul glukosa '1,'glikosidik. $milosa merupakan pati larut air yang memiliki berat molekul antara /+.+++'2++.+++. jika dilakukan penambahan iodium maka akan menjadi 0arna biru. Sedangkan amilopektin merupakan polisakarida ber#abang bagian dari pati yang terdiri atas molekul'molekul glukosa yang terikat satu sama lain melalui ikatan 1,'glikosidik dengan per#abangan melalui ikatan 1'glikosidik pada setiap 2+'2/ unit molekul glukosa. $milopektin merupakan pati tidak larut air dan memiliki berat molekul antara +.+++' 1.+++.+++. $milopektin dengan penambahan iodium akan menghasilkan 0arna ungu hingga merah )ehninger 1452-.

&. 'emak

'emak merupakan senyaa trigliserida yang umum digunakan sebagai ba$an baku pembuatan sabun dan memiliki asam lemak dengan panjang rantai karbon antara 12-1. 'emak adala$ Cat organi) $idrofobik yang bersifat sukar larut dalam air. "amun lemak dapat larut dalam pelarut organi) seperti kloroform eter dan benCene. 7nrus penyusun lemak adala$ karbon50 <idrogen<0 FksigenF0 dan kadang-kadang fosforus0 serta "itrogen"0<art 2990.

6omponen penyusun lemak adalah 6omponen penyusun lemak antara lain  a. 7liserol

Pada suhu kamar gliserol adalah zat #air yang tidak ber0arna netral terhadap lakmus kental dan rasanya manis. )8alam keadaan murni- bersi"at higroskopis. 8ehidrasi gliserol dapat terjadi karena penambahan 69%:, pada suhu tinggi. 9asil

2> b. $sam lemak

$sam lemak jarang ditemukan di alam bebas tetapi terdapat sebagai ester dalam gabungan dengan "ungsi alkohol. $sam lemak pada umumnya adalah asam monokarboksilat berantai lurus. $sam lemak pada memiliki jumlah atom karbon genap )genap berarti banyak karena asam'asam lemak disintesa terutama dua karbon setiap kali-. $sam lemak dapat dijenuhkan atau dapat mempunyai satu atau lebih ikatan rangkap

&. Protein

Protein merupakan komponen seluler utama yang menyusun sekitar setengah dari berat kering sel. Protein adalah senya0a polipeptida yang tersusun atas asam'asam

;'amino penyusunnyam yaitu & 9 : < %. pada umumnya protein murni tidak ber0arna dan tidak berbau. Protein sukar dimurnikan karena bentuknya yang mudah sekali rusak oleh panas asam basa dan pelarut organi#. Jika dipanaskan 0arnanya berubah menjadi #oklat dan berbau seperti bau bulu atau rambut terbakar. %truktur

dari protein adalah rantai peptidad yang memiliki satu atau lebih rantai polipeptida. Protein memiliki si"at kristalisasi mengubah kon"igurasi 3 dimensi molekul protein tanpa menyebabkan kerusakan ikatan peptide)denaturasi- memiliki daya angkut oksigen. Protein tidak larut dala air tetapi kaya akan radikal yang bermuatan dan mudah larut dalam garam netral)Bahl 2++-.

6omponen penyusun protein adalah asam amino. :leh karena itu asam amino terdiri dari $tom & yang bersebelahan dengan gugus karboksil)asam- atom & mengikat atom 9 gugus karboksil gugus amino dan gugus =.

D.Gelatin

7elatin merupakan molekul polipeptida yang berasal dari kolagen bersi"at am"oter merupakan protein utama penyusun jaringan he0an )kulit tulang dan tendon-. %e#ara "isik dan kimia gelatin ber0arna kuning #erah atau transparan berbentuk serpihan atau tepung bertitik leleh 3/o& diba0ah tubuh manusia berbau dan berasa dapat larut dalam air panas gliserol dan asam asetat serta pelarut organik lainnya. 7elatin dapat mengembang dan menyerap air /'1+ kali bobot asalnya)=aharja 2++,-.

komponen penyusun gelatin adalah protein yang merupakan asam amino non esensial )glisin dan prolin- yang mana glisin dan prolin dapat diproduksi di dalam tubuh. %elain itu gelatin kurang mengandung asam amino esensial )isoleusin treonin dan metionin- dan tidak mengandung tripto"an suatu asam amino essensial yang lain.

,. Jelaskan yang dimaksud bakteri proteolitik! Beri #ontoh bakteri proteolitik!

/. $pa yang $nda ketahui tentang amilase> Jelaskan!

. $pa yang $nda ketahui tentang lipase> Jelaskan!

39 Bakteri proteolitik adalah bakteri yang memproduksi enzim protease ekstraselular enzim protease ini diproduksi di dalam sel kemudian dilepaskan ke mediumnya. %emua bakteri mempunyai enzim protease di dalam sel namun tidak semua enzim protease tersebut dilepaskan ke mediumnya )$braham et al. 1443-.

8ekomposisi protein lebih sulit dibandingkan peme#ahan karbohidrat. Produk akhir dari dekomposisi protein pun lebih bervariasi. 9al ini disebabkan struktur protein yang lebih kompleks. (ikroorganisme dengan sistem enzim yang kompleks meme#ah protein menjadi senya0a'senya0a yang lebih sederhana )$braham et al. 1443-.

Bakteri proteolitik dapat digolongkan menjadi beberapa kelompok yaitu  1. Bakteri aerobik atau anaerobik "akultati" tidak membentuk spora

2. Bakteri aerobik atau anaerobik "akultati" membentuk spora 3. Bakteri anaerobik pembentuk spora

$braham $. 7. 7. $ntoni . and $?on $. &. 1443. Proteolyti# $#tivity o" Lactobacillus bulgaricus 7ro0n in (ilk Journal of Diary Science. a Plata

$rgentina

$milase adalah enzim yang ber"ungsi meme#ah zat tepung dan polisakarida lainnya menjadi monosakarida bentuk gula yang dapat diserap tubuh. %umber utama amilase adalah pankreas yang menyekresikan amilase dan enzim lain ke dalam duodenum. %elain itu air liur juga mengandung amilase yang memulai proses pen#ernaan saat makanan masuk ke dalam mulut.

.

$pa yang $nda ketahui tentang gelatinase> Jelaskan!

5. Beri #ontoh jenis mikroorganisme penghasil a. amilase

b. lipase #. gelatinase.

nzim'enzim amilase termostabil juga berhasil didapatkan dari mikroorganisma seperti B. subtilis B. stearothermophilus B. #al#alovelo@ B. al#alophilus Thermus sp.&lostridium a#etobutyli#um Pyro#o##us "uriosus %ul"olobus a#ido#aldarius dan lainnya )=ath A %ubramanyam 1445-.

abbe )144/- dalam penelitiannya berhasil menumbuhkan ;'amilase dari bakteri &losditrium per"ringens yang dapat menghasilkan menghasilkan maltosa maltotriosa dan maltotetrosa sebagai produk utama.

'ipase adala$ enCim yang ddapat larut dalam air dan bekerja dengan mengkatalus $idrolisis ikatan ester dalam substrat lipid yang idak larut air sepertitrigliserida beranyai panjang. ,engan demikian lipase tergolong dalam enCim esterase. =nCim ini juga mampu mengkatalisasi pembentukan ikatan ester esteriEkasi0 dan pertukaran ikatan ester transferiEkasi0 pada media bukan air. 'ipase diproduksi pada karbon berlipid seperti minyak asam lemak dan gliserol. 'ipase dari bakteri kebanyakan diproduksi se)ara ekstraseluler. /ebanyakan lipase dapat bekerjapada kisaran p<dan temperature yang ber@ariasi alaupun lipase dari bakkteri bersifat basa lebi$ umum. 'ipase adala$ serina $ydrolase dan mempunyai stabilitas yang tinggi dalam larutan organi)

Manfaat lipase dari fungsi dan bakteri memainkan peranan yang penting dalan ke$idupan manusia seperti pembuatan yog$urt dan keju. 'ipase juga digunakan sebagai katalis yang mura$ dan serbaguna untuk mendegradasi lipid dalam aplikasi modern seperti pengguaan enCim lipase untukpembuatab deterjen dan biokatalis serta juga dapat digunakan seperti energy alternatif untuk mengua$ minyak tumbu$an menjadi ba$an bakar

=izky $l"i. 8$%$='8$%$= $=($6:7<:%C

7elatinase merupakan enzim yang dapat menguraikan molekul gelatin menjadi peptida'peptida ke#il penyusun gelatin tersebut sehingga peptida'peptida tersebut dapat

Para" $sisten

<ama

Praktikum A. Uji Hidrolisis Gelatin Tael ! "ata Primer

%pesies Bakteri 9asil PengamatanD- 6emampuan 9idrolisa %ebelum inkubasi 2, jam %esudah inkubasi 2, jam

D-6eterangan pengamatan meliputi kenampakan medium ada tidaknya enzim dsb.

Tael ! "ata Sekunder #"ari kelom$ok lain% ! Kelom$ok ...

%pesies Bakteri 9asil Pengamatan 6emampuan 9idrolisa %ebelum inkubasi 2, jam %esudah inkubasi 2, jam

D-6eterangan pengamatan meliputi kenampakan medium ada tidaknya enzim dsb.

1. Bandingkan dan bahas data antar mikroba dalam menghidrolisis gelatin!

32 'aporan raktikum

2. Bandingkan dan bahas data yang anda peroleh dengan data dari kelompok lain!

Praktikum B. Uji Hidrolisis Protein Tael ! "ata Primer

%pesies Bakteri 9asil PengamatanD- 6emampuan 9idrolisa %ebelum inkubasi 24 jam %esuda$ inkubasi 24 jam