BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
IV.5 Hasil Uji Aktifitas Antimikroba
Uji aktifitas antimikroba dilakukan dengan menggunakan metode difusi agar. Metode difusi agar memiliki beberapa kelebihan yaitu sederhana untuk melihat sensitifitas berbagai jenis mikroba terhadap mikroba pada konsentrasi tertentu (28).
Mikroba uji yang digunakan yaitu Staphylococcus aureus, Malessezia furfur dan Candida albicans. Hasil uji aktifitas antimikroba yang dilakukan terhadap ekstrak etil asetat dari fungi KC-2 memperlihatkan aktifitas daya hambat terhadap Candida albicans. Hal ini diduga dipengaruhi oleh beberapa hal, seperti tingkat sensitifitas dari organisme uji, kecepatan difusi dari senyawa dan konsentrasi senyawa antimikroba (29).
Hasil pengukuran diameter dapat dilihat pada gambar 3 rata-rata zona hambat dari ekstrak etil asetat isolat fungi endofit KC-2 terhadap Candida albicans yaitu 10,85 mm. Pada uji aktifitas antimikroba ini digunakan konsentrasi 10% dari berat ekstrak yang diperoleh.
32
Gambar 3. Zona hambat ekstrak fungi endofit terhadapCandida albicans Keterangan: a = kontrol positif nistatin; b = ekstrak isolat; c = pelarut etil asetat
A B C
33 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
V.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:
1. Isolasi fungi endofit dari daun ketepeng cina (Cassia alata L.) diperoleh 2 isolat fungi yang diberi kode KC-1 dan KC-2
2. Ekstrak fungi endofit isolate KC-2 menunjukkan aktivitas antifungi terhadapCandida albicans.
V.2 Saran
Perlu dilakukan isolasi fungi endofit dari beberapa bagian tumbuhan ketepeng cina sebagai penghasil antioksidan.
34
DAFTAR PUSTAKA
1. Olesen, AB. Chronic Skin Disease and Risk of Infection. The open Infectious Diseases Journal. 2012.6 hal. 60-64
2. Ryu S, dkk. Colonization and Infection of the Skin by S. aureus: Immune System Evasion and the Response to Cationic Antimicrobial Peptides.
International Journal of Molecular Sciences. 2014.
3. Saga T, dan Yamaguchi K, History of Antimikrobial Agents and Resistant Bacteria.Research and Revies. 2009. 52 (2) hal. 103-108.
4. Zhao, Jianglin., dkk. Antimicrobial Metabolites from the Endophytic Fungus Pichia guilliermondii Isolated from Paris polyphylla var.yunnanensis. Molecules Journal. 2010.
5. Selvi BK, dan Balagengatharathilagam P. Isolation and Screening of Endhophytic Fungi From Medicinal Plants of Virudhunagar District for Antimicrobial Activity. International Journal of Science and Nature.
2004. 5 (1) hal. 147-155
6. Siriwach R. Screening of Novel Secondary Metabolites from Enophytic Fungi by Chemical Library Analysis. Disertasi. Departemen of Biotechnology Osaka University. Jepang. 2013. Hal. 19
7. Radji, M. 2005. Peranan Bioteknoligi Dan Mikroba Endofit Dalam Pengembangan Obat Herbal. Laboratorium Mikrobilogi dan Bioteknologi. Vol. II. Departemen Farmasi, FMIPA-UI, kampus UI depok. 113-126. Departemen Farmasi, FMIPA-UI, Kampus UI Depok 16424 Majalah Ilmu Kefarmasian, No.3, Desember 2005, 113-126 8. Bahli M, Mutia R, Mustanir, Lukitaningsih E. Bioassay on n-Hexane
Extract of Leaves Cassia alata against Candida albicans. Jurnal natural. 2014. Vol. 14,No. 1 hal. 5-10
9. Bayuaji TS, Astuti IY, dan Dhiani BA. Aktivitas Antifungi Krim Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) Terhadap Triptophyton mentagrophytes. 2012. 9 hal.57-64
10. Rahman MS, Ali MY, Ali MU.In Vitro Screening Of Two Flavonoid Compounds Isolated From Cassia alata L. Leaves For Fungicidal Activities.J.Bio-scl. 2008. 16 hal. 139-142
35
11. Chatterje S, Chatterjee S, dan Dutta S. Original An Interview on the Enthnophythological Studies ofCassia alata L- an Important Medicinal Plant and the Effect of VAM on its Growth and Productivity.
International Journalf Research in Botany. 2012. 2 (4) hal. 13-19 12. Faruq ZU, Rahman UA, Bello M, Obianke M, dan Atiku FA.
Antibacterial activity of the active component of Cassia alata (Linn) leaves. Nigerian Journal of Basic and Applied Science. 2010. 18 (1) hal. 97-100
13. Tan, R. X dan Zou, W. X. 2001. Endophytes: A Rich Source of Functional Metabolites. Institute of functional biomolecule, school of life sciences. Nanjing University, Nanjung.
14. Purwanti, E. 2007. Senyawa Bioaktif Tananam Sereh Ekstrak Kloroform dan Etanol serta Pengaruhnya terhadap Mikroorganisme Penyebab Diare. Laporan penelitian. http://publikasi.umm.ac.id . akses 19 Nobvember 2016
15. Prihatiningtias, W. 2008. Mikroba Endofit, Sumber Penghasil Antibiotic yang Potensial. Fakultas farmasi UGM
.
16. Djide N. 2013. Dasar-Dasar Mikrobiologi Farmasi. FAkultas Farmasi Universitas Hasanuddin.
17. Pratiwi S. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Penerbit Erlangga: Jakarta.
18. Waluyo, 2004. Mikrobiologi umum. Universitas Muhammadiyah.
Malang Press. Malang.
19. Wolf, F. A., Wof, F.T. The Fungi. Hafner Publishing Company. New York. 1969. Pg 14-15
20. McNeil, B. and Harvey, L.M., Practical Fermentation Technology, 42, 70-90, 100-101, John Wiley & Son Ltd., England. 2008
21. Stainer R. Y. Dunia Mikrobiologi I. Bharata Karya Aksara, Jakarta.
1982
22. Djide, N., Sartini, dan Kadir S. 1997, Metode Instrumentasi Bioteknologi Farmasi, Laboratorium Mikrobiologi Farmasi, Jurusan Farmasi Fakultas MIPA, Universitas Hasanuddin, Makassar.
23. Pelczar. Jr. M. J. Dasar-dasar Mikrobiologi. R. S. Hadioetomo. UI-Press. Jakarta. 1988.
36
24. Holt, J. G.Bergey’s Manual of Determinative Bacteriologi. [9thEd.]. The Williams & Wilkins Company. Baltimore. Maryland 21202 United States of America.1994
25. Inamandar AC, Paliit A. The Genus Malessezia and Human Diseases.India. Dermatol Venereol Leprol. 2003
26. Daud, NH. Jayaraman S. Mohamed R. An improved surface sterilization technique for introducing leaf, nodal and seed explants of Aquilaria malaccensis from field sources into tissue culture. Asia-Pacific Journal of Molecular Biology and Biotechnology. Vol. 20 (2) : 55-58. 2012
27. Waluyo, L. Mikrobiologi Lingkungan. Universitas Muhammadiyah Malang Press. Malang. 2005
28. Mawaddah Rosliana. Kajian Hasil Riset Potensi Antimikroba Alami dan Aplikasinya dalam Bahan Pangan di Pusatinformasi Teknologi Pertanian Fateta IPB. Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor. 2008
37 Lampiran 1. Skema Isolasi Fungi Endofit
DaunKetepeng cina (Cassia alata L.)
Alkohol 70% (1 menit), natrium hipoklorit 1% (3 manit), alkohol 70% (1 menit), air steril (bilas 3 kali) dan dipotong-potong kecil
Daun hasil potongan
Medium PDA + kloramfenikol, 25° C (5-7 hari)
Isolat Fungi Endofit
Medium PDA baru 25° C (5-7 hari) Isolat Murni
- Medium PDB 200 ml, 25° C (15 hari)
- Uji antagonis Hasil fermentasi
Biomassa Supernatan
Ekstrak metanol
Etilasetat (1:1),
corongpisah metanol, sonikasi
20 kHz, 60 watt (30 menit)
dandisentrifugasi (15 menit)
Ekstrak etil asetat
Uji aktivitas antimikroba
38 Lampiran 2. Komposisi Medium
1. Medium Nutrient Agar (NA) Ekstrak beef 5 gram
Pepton 3 gram
NaCl 2,5 gram
Agar 15 gram
Aquadest ad 1000 ml
pH 7,4
2. Medium Potato Dextrosa Agar (PDA) Ekstrak Kentang 4 gram
D-Glukosa 20 gram
Agar 15 gram
Aquadest ad 1000 ml
pH 5,6 ± 0,2
3. Medium Potato Dextrosa Yeast (PDY)
Pepton 10 gram
Glukosa 40 gram
Agar 15 gram
Ekstrak Yeast 4 gram
Aquadest ad 1000 ml
pH 5,6 ± 0,2
39
Lampiran 3. Dokumentasi isolasi fungi endofit daun ketepeng cina (Cassia alata L.)
Gambar 4. Sampel daun Ketepeng Cina (Cassia alata L. )
Gambar 5. Pertumbuhan fungi endofit pada daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.) Ket: TD= Tampak depan TB= TampakBelakang
TD
TB TD