UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN
KELADI TIKUS
(Typonium flagelliforme L .)
, KEMANGI
(Ocimum sanctum L.),
DAN PEPAYA
(Carica papaya
L.)
TERHADAP SEL MCF-7
SKRIPSI
Oleh :
PUTRI KHILDA AMALIA
K100130189
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
ii
UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN
KELADI TIKUS
(Typonium flagelliforme L .)
, KEMANGI
(Ocimum sanctum L.),
DAN PEPAYA
(Carica papaya
L.)
TERHADAP SEL MCF-7
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Mencapai Derajad Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
PUTRI KHILDA AMALIA
K100130189
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
v
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena berkat Rahmat dan
Karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini yang berjudul
“Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus (Typonium flagelliforme L .), Kemangi (Ocimum sanctum L.), dan Pepaya (Carica papaya L.)
Terhadap Sel MCF-7” dapat selesai.
Penulisan skripsi ini diajukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis menyadari bahwa bahwa dalam menyajikan data dan penilihan
kata-kata dalam skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh karenanya, penulis
mengharapkan saran dari semua pihak sebagai perbaikan bagi penulis di waktu
mendatang.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih kepada :
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhamadiyah Surakarta dan penguji I
2. Bapak Haryoto, M,.Sc selaku pembimbing utama dan penguji III, yang
telah bersedia meluangkan waktu untuk membimbing, memberi saran, dan
semangat kepada penulis hingga penulisan skripsi ini dapat selesai tepat
waktu.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. Selaku penguji II
4. Kedua orang tua dan adik tercinta yang telah memberikan doa, semangat,
kasih sayang, kepercayaan, inspirasi, dukungan yang tak terhingga serta
pendampingan selama proses penulisan skripsi ini.
5. Keluarga besar Tjiptarno dan Maskar yang telah memberikan
dukungan,semangat dan arahan bagi penulis untuk menyelesaikan skripsi
vi
6. Seluruh teman-teman seperjuangan farmasi angkatan 2013, terutama
kepada kelompok skripsi yaitu Dhinar Asti, Atikah Hapsari, Rizki Awalia,
Selviana, dan Alivia Putri yang telah memberikan dukungan, semangat,
inspirasi serta suasana kerja sama yang baik sehingga penulisan skripsi ini
dapat selesai.
7. Semua pihak yang telah memberikan semangat selama proses penulisan
skripsi ini, yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.
Hanya doa yang dapat penulis panjatkan kepada Allah SWT semoga
membalas kebaikan Bapak, Ibu, Saudara, dan teman-teman. Akhir kata, semoga
penelitian ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Wasalamu’alaikum Warohmatullahi Wabarokatuh
Surakarta, 28 November 2016
vii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... ii
PENGESAHAN SKRIPSI ... iii
DEKLARASI ... iv
KATA PENGANTAR ... v
DAFTAR ISI ... vii
DAFTAR GAMBAR ... ix
DAFTAR TABEL ... x
DAFTAR LAMPIRAN ... xi
DAFTAR SINGKATAN ... xii
ABSTRAK ... xiii
1. Tanaman Keladi Tikus ( Typonium flagelliforme L.) ... 4
2. Tanaman Kemangi (Ocimum santum L.) ... 5
3. Tanaman Pepaya (Carica papaya L.) ... 6
4. Kanker Payudara ... 7
5. Sel Michigan Cancer Foundation (MCF-7) ... 8
6. Kromatografi Lapis Tipis... 9
7. Metode Uji Sitotoksik dengan MTT ... 9
E. Landasan Teori ... 10
F. Hipotesis ... 11
BAB II. METODE PENELITIAN ... 12
A. Kategori dan rancangan penelitian ... 12
B. Variabel penelitian dan definisi operasionalnya... 12
viii
1. Alat... 13
2. Bahan ... 13
D. Tempat penelitian ... 13
E. Jalannya penelitian ... 13
1. Determinasi ... 13
2. Penyiapan Bahan... 13
3. Ekstraksi... 14
4. Optimasi Fase Gerak ... 14
5. Penentuan Kandungan Senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis ... 14
6. Pembuatan Media Kultur ... 15
7. Panen sel MCF-7 ... 15
8. Penanaman atau Platting ... 15
9. Pembuatan Larutan Uji ... 15
10. Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT ... 15
F. Analisis data ... 17
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 17
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 29
A. Kesimpulan ... 29
B. Saran ... 29
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur 6-glucosyl apigenin (isovitexin) ... 4
Gambar 2. Struktur Asam Ursolat ... 6
Gambar 3. Struktur Carpain ... 7
Gambar 4. Struktur Lycopene ... 7
Gambar 5. Bagan Uji aktivitas sitotoksik dengan metode MTT ... 16
Gambar 6. Hasil KLT ekstrak daun pepaya ... 19
Gambar 7. Hasil KLT ekstrak daun kemangi... 19
Gambar 8. Hasil KLT ekstrak daun keladi tikus ... 20
Gambar 9. Reaksi pembentukan kristal formazan ... 22
Gambar 10. Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan ekstrak kemangi ... 22
Gambar 11. Grafik konsentrasi ekstrak daun kemangi vs % sel hidup ... 24
Gambar 12. Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan ekstrak pepaya ... 24
Gambar 13. Grafik konsentrasi ekstrak daun pepaya vs % sel hidup ... 25
Gambar 14.Morfologi sel MCF-7 setelah diberi perlakuan keladi tikus ... 26
x
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Klasifikasi sel kanker payudara ... 8
Tabel 2. Variabel dan Definisi Operasional ... 12
Tabel 3. Reagendeteksisenyawa... 14
Tabel 4. Data hasil rendemen ekstrak etanol ... 17
Tabel 5. Hasil Deteksi Kandungan Senyawa ... 21
Tabel 6. Data hasil IC50 uji sitotoksik ... 23
Tabel 7. Data hasil Perlakuan Ekstrak Pepaya terhadap Sel MCF 7 ... 24
Tabel 8. Data hasil Perlakuan Ekstrak Kemangi terhadap Sel MCF 7 ... 25
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Determinasi Tanaman ... 34
Lampiran 2.Ekstraksi Sampel ... 37
Lampiran 3. Hasil Optimasi ... 38
Lampiran 4. Hitung sel pada saat penanaman (platting)... 40
Lampiran 5. Treatmen uji sitotoksik ... 41
Lampiran 6. Perhitungan % sel hidup ... 42
xii
DAFTAR SINGKATAN
CCL4 : Karbon Tetra Klorida
COX-2 : Cyclooxigenase-2
DMSO : Dimetil Sulfoksida
ELISA : Enzim-lingked Immunosorbent Assay
GF254 : Gel Flouresensi 254
IC50 : Inhibitory Concentration 50
IL-4 : Interleukin-4
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
LAF : Laminar Air Flow
MTT : 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid
Nf-KB : Nucelar Factor Kappa B
NMR : Nuclear Magnetic Resonance
P.A : Pro Analysis
PBS : Phosphate buffer salin
Rf : Retardation Factor
SDS : Sodium Dodecyl Sulfat
Th-1 : T-helper 1
TNF : Tumor Necrosis Factor
UV254 : Ultraviolet 254
xiii
ABSTRAK
Kanker payudara pada wanita, merupakan salah satu kanker dengan angka kematian yang tinggi di dunia, termasuk Indonesia. Bahan alam seperti keladi tikus, kemangi, dan pepaya merupakan contoh tanaman yang dapat digunakan sebagai alternatif pengobatan kanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol daun keladi tikus, kemangi, dan pepayaterhadap sel MCF-7 dan mengetahui kandungan golongan senyawa masing-masing tanaman secara kualitatif.
Serbuk masing-masing sampel dimaserasi dengan etanol 96% selama 72 jam. Maserat disaring dan selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator, kemudian diletakan diatas waterbath hingga diperoleh ekstrak kental. Identifikasi kandungan senyawa dengan KLT, menggunakan fase gerak n-heksan-aseton (7,5:2,5). Hasil KLT divisualisasi menggunakan reagen semprot dragendorf, anisaldehid, FeCl3, dan sitroborat yang diamati dibawah UV366 serta sinar
tampak.Ekstrak dibuat seri konsentrasi 500;250 : 125;62,5;31,25 µg/mL dan diuji aktivitas sitotoksiknya dengan MTT assay.
Ekstrak pepaya, kemangi, dan keladi tikus positif mengandung golongan alkaloid, fenolik, terpenoid, saponin, dan flavonoid. Hasil uji sitotoksik menunjukan ekstrak pepaya, kemangi, dan keladi tikus mempunyai efek sitotoksik terhadap sel MCF-7 dengan IC50 secara berurutan 17,40 ; 6,95 ; 9,73
µg/mL. Ketiga ekstrak merupakan sumber yang potensial menjadi agen antikanker.
xiv
ABSTRACTS
Breast cancer in women is the one of cancers that causes high mortality around the world, including Indonesia. Natural medicine such as keladi tikus,
kemangi, and pepaya can be used as alternative medicine against cancer. The aim of this study was to evaluate the cytotoxic activity of keladi tikus, kemangi, and
pepaya etanol extract against MCF-7 cells and determine of qualitative phytochemical constituent from the extracts.
Samples powder are macerated with etanol 96 % for 72 hours. Samples were filtered, then filtrates are evaporated with rotary evaporator and put on waterbath to obtain crude extracts. Identification of pythochemical constituent with TLC using mobile phase n-heksan-aceton (7,5;2,5). Visualization is using annisaldeid-H2SO4, sitroborat, dragendorf, and FeCl3 spray reagent, then viewed
under UV366 and daylight. Extract were diluted to obtain serial concentration of 500 ; 250 ; 125 ; 62,5 ; 31,25 µg/mL and tested the cytotoxic activity using MTT assay.
Extract of keladi tikus, kemangi, and pepaya are positive contain alkaloid, phenolic, terpenoid, saponin, and flavonoid. The result of cytotoxic test show that extract of keladi tikus, kemangi, and pepaya have cytotoxic effect against MCF-7 cells with IC50 respectively, 17,40 ; 6,95 ; 9,73 µg/mL. it means
that the leaf extracts are a potential source to be a anticancer agent.
Keywords : Typonium flagelliforme, Ocimum santum, Carica papaya, Cytotoxic,
