61 A. Simpulan
1. Kalus dari Sirih Merah dapat menghasilkan senyawa eugenol.
2. Penambahan auksin tidak terbukti mempercepat induksi kalus sirih merah.
B. Saran
1. Penelitian selanjutnya sebaiknya dilakukan juga variasi penambahan ZPT BA dalam medium ½ MS pada eksplan daun Sirih Merah untuk melihat konsentrasi terbaik untuk induksi kalus dan produksi eugenol.
2. Penelitian selanjutnya sebaiknya dilakukan penambahan prekursor untuk memicu biosintesis eugenol.
62
Abidin, Z. 1990. Dasar-Dasar Pengetahuan Tentang Zat Pengatur Tumbuh. Penerbit Angkasa. Bandung.
Ahmad, N., B. Guo, H. Fazal, B. H. Abbasi, C. Z. Liu, T. Mahmood, A. K. Shinwari. 2011. Feasilble Plant Regeneration in Black Pepper from Petiole Explants.Journal of Medicinal Plants Research. 5(18):4590-4595.
Ammirato, P. V., Evan D. A. A., Sharp W. R., Yamada Y. 1983. Handbook of Plant CellCulture Vol 1. MacMillan Publication Co. New York, London. Anggraeni, S., Kusdianti, dan D. Kartikasari. 2007. Kandungan Metabolit
Sekunder Dalam Kalus Mengkudu. Skripsi. Fakultas Pendidikan Matematika dan Ilmu Pengetahuan. Universitas Pendidikan Indonesia. Anny, S. 2002. Pengolahan Lanjut Minyak Atsiri dan Penggunaannya Dalam
Negeri. Workshop Nasional Minyak Atsiri 30 Oktober 2002. Dirjen Industri Kecil Dagang Menengah. Depperindag.
Amzu, E. dan Haryanto. 1990. Pelestarian pemanfaatan tumbuhan obat di Indonesia. Seminar Nasional Pelestarian Pemanfaatan Tumbuhan Obat. Bogor.
Avivi, S., dan P. Dewanti. 2005. Teknologi Produksi Benih Melon (Cucumis melo L.) dengan Teknik In-Vitro.Jurnal Ilmu Dasar. 6(1):33-40.
Basett, J., R. C. Denney, G. H. Jeffery, J. Mendham. 1994. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. EGC. Jakarta.
Bhaskaran, S. and R. H. Smith. 1990. Regeneration in cereal tissue culture. A Review. Crop Sciencie. 30:1328-1336.
Bhojwani, S. S and M. K. Razdan, 1996. Plant Tissue Culture : Theory and Practice, a Revised Edition. Elsevier Science. Amsterdam. The Netherlands.
Benchaar, C. and H. Greathead. 2011. Essential Oils and Opportunities to Mitigate Enteric Methane Emissions from Ruminants. Animal Feed Science and Technology. 166-167:338-355.
Chairil A. 1994. The Conversion of Eugenol into More Valuable Substances, Dissertation. Gadjah Mada University. Yogyakarta.
Chakrabarki, M. M. dan S. K. Ghosh. 1974. Studies on Some Essential Oils from Plants Grown in West Bengal.Indian Perfumer. 18:1.
Considine D. M., and G. D. Considine. 1982. Food and Food Production Encyclopedia. Van Nostrand Reinhold Co. New York.
Cronquist, A. 1981. An Integrated System of Classification of Flowering Plants. Columbia UniversityPress. New York.
Curl, E. A. dan I. F. Johnson. 1972.Methods for research on the ecology of soil-borne plant pathogens. Burges Publishing Company. Minnesota.
Darmono, D. W. 2003. Menghasilkan Anggrek Silangan. Penebar Swadaya. Jakarta.
Davies, P.J. 1995. The plant hormone their nature, occurence and function. In: Davies (ed.) Plant Hormone and Their Role in Plant Growth Development. Dordrecht Martinus Nijhoff Publisher.
Departemen Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Dirjen POM Departemen Kesehatan RI. Jakarta.
Deyena, T. dan T. Horiguchi. 1971. Studies of the Components of Essential Oil of Clove (Eugenia caryophyllataThumber).Yokugaku Zasshi.91:22.
Dodds, J.H. and L. R. Roberts. 1982. Experiments in Plants Tissue Culture. Cambridge University Press. Cambridge.
Domiguez, F., X. Lozoya, J. Simon. 2006. Tisuue Culture Regeneration of a Medicinal Plant from Mexico: Piper auritum Kunth. Journal of HortScience. 41(1):207-209.
Duryatmo, S. 2005. Dulu Hiasan Kini Obat.Trubus. 427:37.
Evans, D. A., W. R. Sharp, P. V. Ammirato. 1986. Handbook of plant cell culture: techniques and applications Vol. I. Macmillan Publishing Company. New York.
Fitriyani, A., L. Winarti, S. Muslichah, dan Nuri. 2011. Antiinflamasi Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah Pada Tikus Putih. Majalah Obat Tradisional. 16(1):34-42.
Fowler, M. W. 1983.Comercial Application and Economic Aspects of Mass Plant Cell Culture.In: Mantell Smith, H (eds).Plant Biotechnology.Cambridge Univ. Press. London.
Gaba, V.P. 2005. Plant Growth Regulator. In R.N. Trigiano and D.J. Gray (eds.) Plant Tissue Culture and Development. CRC Press. London. p. 87-100. Gardner, E. P, R. G. Pearce and R. L. Mitchel. 1991.Physiology of Crop Plants.
Terjemahan: H. Susilo. University Indonesian Press. Jakarta.
George, E. F. 1993. Plant Propagation by Tissue Culture. Part 1. The Technology Exegetic. England. p. 1361.
George, E. F. dan P. Sherrington. 1984.Plant propagation by tissue culture. Hand Book and Directory of Comereial Laboratories. Eastern Press, Reading, Berks. England.
George, E. F., M. A. Hall, and G. J. de Klerk. 2007.Plant propagation by tissue culture 3rd Edition Vol 1. The Background. Springer. Netherland.
Goldsworthy, A. dan M. G. Mina. 1991. Electrical patterns of tobacco cells in media containing indole-3-acetic acid or 2,4-D.Planta. 183 : 386-373. Guenther, E.S. 1950. The Essential Oils, Individual Essential Oil of The Plant
Families Vol. IV. Van Nostrand Company Inc. New York.
Gunawan, L. W. 1987 Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Gunawan, L. W. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Gunawan, L. W. 2008. Teknik Kultur Jaringan. Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman Penghasil Minyak Atsiri. Dalam Edisi Khusus LITTRO. 5(2). Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik. Bogor.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Penerbit ITB. Bandung.
Hartman, H. T. dan D. E. Kester. 1983. Plant Propagation, Principles and Practices. Prentice Hall, Inc. New Jersey. USA.
Hartman, H. T., D. E. Kester, dan F. T. Davis. 1990. Plant Propagation :Principles and Practices. Prentice Hall International Inc. New Jersey. Hendaryono, D. P. 1994. Teknik Kultur Jaringan Pengenalan dan Petunjuk
Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif-Modern. Kanisius. Yogyakarta. Hendaryono, D. P. S. dan A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan:
Pengenalan dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif Modern. Kanisius. Yogyakarta.
Herawan, T. dan M. Na’iem. 2006.Teknik Kultur Jaringan, Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman. Pusat Antar Universitas (PAU) Bioteknologi. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Heyne, K. 1987. Tumbuhan Obat berguna Indonesia Jilid II Cetakan ke-1. Badan Litbang Kehutanan Yayasan Sarana Wana Jaya. Jakarta.
Hoesen, D., S. Hazar, Priyono dan H. Sumarnie. 2000.Peranan zat pengatur tumbuh IBA, NAA, dan IAA pada perbanyakan Amarilis Merah (Amaryllidaceae). Prosiding Seminar Hari Cinta Puspa dan Satwa Nasional. Lab Treub Balitbang Botani Puslitbang Biologi, LIPI Bogor.
Hu C. Y. dan P. J. Wang. 1983. Meristem Shoot Tip and Bud Cultures. Di dalam: Ammirato PV, Yamada Y, editor. Handbook of Plant Cell Culture: Techniques for Propagation and Breeding. Volume ke-1. Mc Millan Publ. Co. London.
Hussain, A., S. Naz, H. Nazir, Z. K. Shinwari. 2011. Tissue Culture of Black Pepper (Piper nigrumL.) in Pakistan.Pakistan Jurnal Botani. 43(2):1069-1078.
Kadiman, K. 2006.Buku Putih Indonesia 2005-2025 (Penelitian, Pengembangan, dan Penerapan Ilmu Pengetahuan dan Teknologi. Kementrian Negara Riset dan Teknologi Republik Indonesia. Jakarta.
Kardinan, A. 2003.Tanaman Pengendali Lalat Buah. Agromedia. Jakarta.
Kartha, K. K. 1990. Organogenesis dan Embriogenesis P. 14-21. Dalam L. R. Welter. F. Constabel (Eds). Metode Kultur Jaringan. Penerbit ITB. Bandung.
Karuppusamy, S. 2009. A Review on Trends in Production of Secondary Metabolites from Higher Plants by In Vitro Tissue, Organ, and Cell Cultures.Journal of Medical Plants Research. 3(13):1222-1239.
Kelkar, S. M., G. B. Deboo, and Krishnamurthy K. V. 1996. In Vitro Plant Regeneration from Leaf Callus in Piper colubrinum Link. Plant Cell Reports. 16:215-218.
Ketaren, S. 1985.Pengantar Teknologi Minyak Atsiri. PN Balai Pustaka. Jakarta. Kurniawati, N. 2010. Sehat dan Cantik Alami berkat Khasiat Bumbu Dapur.
Qanita. Bandung.
Lakitan, B. 1996.Fisiologi Pertumbuhan dan Perkembangan Tanaman. PT. Raja Grafindo Persada, Jakarta.
Litz, R. E., P. A. Moon, and V. M. Chavez. 1995. Somatic Embryogenesis from Leaf Callus Derived from Mature Trees of The CycadCeratozamia hildae (Gymnospermae).Plant Cell. 40:25-31.
Lei, D., C. P. Chan, and T. M. Wang. 2003. Antioxidative and Antiplatelet Effects of Aqueous InflorescencePiper betleExtract.Journal of Agri Food Chem. 51(7):2083-2088.
Lerch, K. 1981. Tyrosinase Kinetics: A semi-quantitative Model of Mechanism of Oxidation of Monohydric and Dihydric Phenolic Substrates. In Hutami, S. Ulasan Masalah Pencoklatan paa Kultur Jaringan.AgroBiogen. 4(2):83-88. Lestari, E. G. dan I. Mariska. 1997. Kultur in vitro Sebagai Metode Pelestarian
Tumbuhan Obat Langka.Buletin PlasmaNutfah. 2(1):1-8.
Lestari, E. G. dan Mariska, I. 2003. Pengaruh Berbagai Formulasi Media terhadap Regenerasi Kalus Padi Indica. Prosiding Seminar Hasil Penelitian Rintisan dan Bioteknologi Tanaman: 257-263.
Manopo, J. L. 2008. Isolasi Eugenol dari Bunga Cengkeh. Skripsi. Universitas Kristen Ambon. Ambon.
Muningsih, T., Chairul dan E. S. Kuncari. 2009. Metil Eugenol, Khemotipe dari Minyak AtsiriMelaleuca spp. (Myrtaceae) yang Tumbuh Di Kebun Raya Cibodas.Berita Biologi. 9(6):806-816.
Nurhidayati, L., Y. Desmiaty, S. Mariani. Penetapan Kadar Eugenol dalam Minyak Atsiri dari Daun Sirih Merah (Piper cf fragile Benth.) dan Sirih Hijau (Piper betleL.) secara Kromatografi Gas. Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Pancasila. Jakarta.
Pierik, R. L. M. l987. In Vitro Culture of Higher Plants. Martinus Nijhoff Publisher. London. 344 p.
Poonsapaya, P. M. W., Nabors, W. Kersi, and M. Vajrabhaya. l989. A comparison of methods for callus culture and plant regeneration of RD-25 rice (Oryza sativa L.) in vitro laboratoris. Plant Cell Tissue Organ Culture. 16:175-186.
Prahastuti S, dan K. Tambunan. 2004. Tinjauan literatur sirih. Pusat Dokumentasi dan Informasi Ilmiah (PDII). Jakarta.
Pratama, F. 2006. Pengolahan Beras Wangi Buatan Metode dan Retensi Senyawa Aroma.Jurnal Teknologi dan Industri Pangan. 17(2):153-157.
Rahayu, B., Solichatun dan E. Anggarwulan. 2003. Pengaruh Asam 2,4-Diklorofenoksiasetat (2,4-D) terhadap Pembentukan dan Pertumbuhan Kalus serta Kandungan Flavonoid Kultur KalusAcalypha indicaL.Jurnal Biofarmasi.1(1):1-6.
Rahmawati, E .S. 1999. Variasi Kadar Kalium Dihidrogenafosfat dalam Medium MS terhadap Sintesis Minyak Atsiri pada Tunas Hasil Kultur In Vitro Daun Nilam Aceh (Pogostemon cablin (Blanco)Bth.). Skripsi. Fakultas Biologi UGM. Yogyakarta.
Saad, A. I. M., dan A. M. Elshahed. 2012. Plant Tissue Culture Media. http://www.intwechopen.com/. 3 November 2013.
Salisbury, F. B. dan C. W. Ross. 1992.Fisiologi Tumbuhan Jilid 3. Terjemahan: Diah R. Lukman dan Sumaryono. ITB. Bandung.
Salisbury, F. B. dan C. W. Ross. 1995.Fisiologi Tumbuhan Jilid 3. Terjemahan: Diah R. Lukman dan Sumaryono. ITB. Bandung.
Sandra, E. 2003. Kultur Jaringan Anggrek Skala Rumah Tangga. AgroMedia Pustaka. Jakarta.
Konservasi Sumberdaya hutan Fakultas Kehutanan IPB. PAU-IPB. Bogor.
Sanger, G. 2010. Oksidasi Lemak Ikan Tongkol (Auxis thazard) Asap yang Direndam dalam Larutan Ekstrak Daun Sirih. Pacific Jurnal. 2(5):870-873.
Santoso, U. dan F. Nursandi. 2001. Kultur Jaringan Tanaman. Universitas Muhammadiyah Malang Press. Malang.
Santoso, U. dan F. Nursandi. 2002. Kultur Jaringan Tanaman. Universitas Muhammadiyah Malang Press. Malang.
Sastrohamidjojo, H. 2004. Kimia Minyak Atsiri Cetakan ke-1. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta.
Satyavathi, V. V., P. P. Jauhar, E. M. Elias, and M. B. Rao. 2004. Genomics, Molecular Genetic and Biotechnology Efects of Growth Regulators on In Vitro Plant Regeneration.Crop Science. 44:1839-1846.
Siregar, L. A. M., C. L. Keng, dan B. P. Lim. 2006. Pertumbuhan dan Akumulasi Alkaloid dalam Kalus dan Suspensi SelEurycoma longifolia Jack.Jurnal Ilmiah Pertanian KULTURA. 41(1):19-27.
Sudewo, B. 2005. Basmi Penyakit dengan Sirih Merah. Agromedia Pustaka. Jakarta.
Sudirga, S. K. 2002. Analisis Kandungan Senyawa Bioaktif Azadirachtin dalam Kultur Suspensi Sel Tanaman Mimba (Azadirachta indicaA.Juss). Jurnal Biologi. VI(2):60-63.
Sunyoto, dan L. Sadwiyanti. 2002. Perbanyakan Benih Klonal Nangka Secara In Vitro.Stigma. 9(3):228-232.
Suryowinoto, S. M. 1991. Perbanyakan Vegetatif pada Anggrek. Kanisius. Yogyakarta.
Suwarsono, H. 1986.Hormon Tumbuhan. CV. Yasaguna. Bogor.
Syahid, L. R. 2008. Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dari daun Dewandaru (Eugenia uniflora L.). Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.
Tabata, M. 1977.Recent Advances in The Production of Medicinal Substances by Plant Tissue Culture. In: W. Barz, E. Reinhard, and M. H. Zenk (eds). Plant Tissue Cultures and It’s Bio-Technological Applications. Springer Verlag. Berlin.
Tisserat B. 1985. Embryogenesis, Organogenesis, and Plant Regeneration. Di dalam Dixon RE, editor. Plant Cell Culture: A practical Approach. Oxford England: I.R.L. Press Ltd.
Trimulyono, G., Solichatun, S. D. Marliana. 2004. Pertumbuhan Kalus dan Kandungan Minyak Atsiri Nilam (Pogostemon cablin (Blanco) Bth.) dengan perlakuan Asam α-Naftalen Asetat (NAA) dan Kinetin. Biofarmasi. 2(1):9-14.
Turhan, H. 2004. Callus Induction and Growth in Transgenic Potato Genotypes. African Journal of Biotechnology. 3(8):375-378.
Tyler, V. E., Claus P. E., Brady. 1976. Pharmacognosy Seventh edition. Lea & Febiger. London.
Wardani, R. K., Wahyu T., dan Boedi S. R. 2012. Uji Efektifitas Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper crocatum) Terhadap Bakteri Aeromonas hydrophila SecaraIn Vitro.Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan. 4(1):59-64.
Wattimena, G. A. 1988.Zat Pengatur Tumbuh Tanaman. PAU-IPB. Bogor Wattimena, G. A. 1991.Zat Pengatur Tumbuh Tanaman. PAU-IPB. Bogor. Wattimena, G. A., L. W. Gunawan, N. A. Mattjik, E. Syamsudin, N. M. A.
Wiendi, dan A. Ernawati, 1992. Bioteknologi Tanaman. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Wetherell, D. F., 1982. Pengantar Propagasi Tanaman secara In Vitro. Terjemahan: Koensumardiyah. Avery Publishing Group Inc., Wayne, New Jersey.
Wijayakusuma, H. 1992.Tanaman berkhasiat obat. Penerbit Kartini. Jakarta. Winata, L. l987. Teknik Kultur Jaringan. PAU Bogor. 252 hal.
Winarto, W. P. 2007. Tanaman Obat Indonesia untuk Pengobat Herbal Jilid 2. PT. Karyasari Herba Media. Jakarta.
Zaerr J. B., dan M. O. Mapes. 1982. Action of growth regulators. Di dalam: Bonga JM, Durzan DJ, editor. Tissue Culture in Forestry. Martinus Nijhoff Publishing. Amsterdam.
Lampiran 1. Komposisi MediumMurashige and Skoog(MS) 1962.
Bahan Berat (mg/L)
NH4NO3 1650
KH2PO4 170
KNO3 1900
CaCl2.H2O 440
MgSO4.7H2O 370
MnSO4.H2O 22,3
ZnSO4.4H2O 8,6
H3BO3 6,2
KI 0,83
NaMoO4.2H2O 0,25
CuSO4.5H2O 0,025
CoCl2.6H2O 0,025
FeSO4.7H2O 27,8
Na2EDTA.2H2O 37,3
Tiamin HCl 0,1
Asam Nikotinat 0,5
Piridoksin 0,5
Mioinositol 100
Lampiran 2. Komposisi LarutanStock
Stock Bahan Berat
(gram/L)
Resep ½ MS (ml/L)
A NH4NO3 82,5 10
B KNO3 95 10
C CaCl2.H2O 44 5
D MgSO4.7H2O 37 5
KH2PO4 17
E Na2EDTA.2H2O 7,45 2,5
FeSO4.7H2O 5,57
F MnSO4.H2O 3,38 2,5
ZnSO4.4H2O 1,72
H3BO3 1,24
KI 0,166
NaMoO4.2H2O 0,05
CuSO4.5H2O 0,005
CoCl2.6H2O 0,005
VIT Tiamin HCl 0,1 0,5
Asam Nikotinat 0,5
Piridoksin 0,5
Glycine 2
Lampiran 3. Hasil Pengukuran Berat Basah Kalus Sirih Merah (Piper crocatumRuiz and Pav.) Minggu Ke-6 (gram)
Ulangan Kontrol (mg/L)
Konsentrasi Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) (mg/L)
Rata-Rata Total
BA 2,4-D NAA IAA
2 (A) 0,5 (B) 1 (C) 0,5 (D) 1 (E) 0,5 (F) 1 (G) 1 0,6139 1,8413 0.6612 0,6742 0,7030 1,2101 0,7913 2 0,6067 1,8687 0.6624 0,6686 0,6904 1,2441 0,8020 3 0,5859 1,8530 0.9700 0,6759 0,6858 1,2256 0,7875 4 0.6045 1,8569 0.6744 0,6573 0,7026 1,2381 0,7842 5 0,6023 1,8638 0.6692 0,6767 0,7072 1,1997 0,7960 6 0,6461 1,8713 0.6725 0,6970 0,7181 1,2789 0,7714
Lampiran 4. Analisis Varian dan Uji Duncan Parameter Berat Basah Kalus Sirih Merah (Piper crocatumRuiz and Pav.) Minggu Ke-6
1. Uji Antara Efek Subjek
2. DMRT ANOVA Hasil Jumlah Kuadrat Derajat Bebas (db) Kuadrat
Tengah F hitung Sig.
Antara Kelompok 7.595 6 1.266 3516.070 .000
Dalam Kelompok .013 35 .000
Total 7.607 41
Berat Basah Duncana
Perlakuan N
Himpunan untuk alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6
A 6 .6098
C 6 .6683
D 6 .6749
E 6 .7012
G 6 .7804
F 6 1.2328
B 6 1.8592
Sig. 1.000 .547 1.000 1.000 1.000 1.000
Lampiran 5. Analisis Korelasi Antara Berat Basah Kalus dan Kandungan Eugenol Kalus Sirih Merah (Piper crocatumRuiz and Pav.)
Correlations
Berat Basah Kalus
Kandungan Eugenol Berat Basah Kalus Pearson
Correlation
1 -.320
Sig. (2-tailed) .600
N 7 5
Kandungan Eugenol
Pearson Correlation
-.320 1
Sig. (2-tailed) .600
