B r u c e l l o s i s a d a l a h p e n y a k i t hewan n e n u l a r y a n g d i - s e b a b k a n o l e h b a k t e r i g e n u s B r u c e l l a d a n p a d a t e r n a k s a p i p e n y e b a b u t a m a n y a a d a l a h R r r c c e l i a a b o r t c c . ~ ; . P e n y a - k i t i n i t i d a k h a n y a m e n y e r a n g t e r n a k ( s a p i , d o m b a , k a n - b i n g d a n b a b i ) , t e t a p i d a p a t j u g a m e n y e r a n g m a n u s i a . ( E n r i g h t , 1 9 9 0 ) . B r u c e l l o s i s m e n i n b u l k a n k e r u g i a n e k o - n o m i y a n g c u k u p b e s a r . P e r k i r a a n D i r e k t o r a t B i n a K e s e - h a t a n Hewan, D i r e k t o r a t J e n d e r a l P e t e r n a k a n k e r u g i a n t a d i m e n c a p a i 10 n i l y a r r u p i a h p e r t a h u n . K e r u g i a n t e r - s e b u t a k i b a t p e n u r u n a n a n g k a k e l a h i r a n k a r e n a k e g u g u r a n ( a b o r t u s ) , p e n u r u n a n p r o d u k s i s u s u k a r e n a p e n y a k i t i n i n e n y e r a n g k e l e n j a r s u s u . g a n g g u a n r e p r o d u k s i ( i n f e r t i- l i t a s d a n s t e r i l i t a s ) k a r e n a m e n y e r a n g s a l u r a n d a n o r g a n r e p r o d u k s i , p e n u r u n a n p r e s t a s i k e r j a a k i b a t n y e r i p a d a p e r s e n d i a n l u t u t , p e n u r u n a n n i l a i j u a l s u s u d a n n i l a i j u a l s a p i r e a k t o r ( A n o n y m o u s , 1 9 8 1 a ) .
2 S o e r o s o d a n T a u f a n i , 1 9 7 2 ; W i t o n o , S u d a n a d a n S u h e n d r a ,
1 9 8 2 ) .
D i a g n o s i s B r u c e l l o s i s p a d a s a p i a n t a r a l a i n b e r d a - s a r k a n p e n g e n a l a n t a n d a - t a n d a k l i n i k , p e m e r i k s a a n b a k - t e r i o l o g i k d a n p e m e r i k s a a n s e r o l o g i k ( F e n s t e r b a n k , 1 9 8 7 ) .
3
p l a s e n t a f o e t a l i s , k o t i l e d o n , f o e t u s s e r t a i s i n y a .
c a i r a n a t a u l e n d i r u t e r u s d a n v a g i n a , l i n f o g l a n d u l a .
a i r s u s u d a n d a r a h ( D a s et d l . , 1 9 8 7 ; K a t s i a o u n i s ct a 2
.
,
1 9 8 8 ) . U n t u k p e r t u m b u h a n kuman d i p e r l u k a n m e d i a k o m p l e k s Cmengandung b e b e r a p a a s a n a m i n o , t h i a m i n , n i -k o t i n a m i d d a n i o n m a g n e s i u m ) , mengandung b e b e r a p a j e n i s
a n t i b i o t i k ( P o l i m i k s i n B , B a s i t r a s i n , S i k l o h e k s a m i d . ,
Asam N a l i d i k s i k , N i s t a t i n d a n V a n k o m i s i n ) s e r t a d i e r a m - k a n p a d a s u h u 3 7 O ~ s e l a m a l e b i h k u r a n g t i g a h a r i d a l a m
s u a s a n a 5 - 1 0 % C 0 2 ( C o r b e l , 1 9 8 9 ; A l t o n et a l . , 1 9 8 8 ) . U n t u k k e b e r h a s i l a n i s o l a s i kuman d a p a t j u g a d e n g a n m e -
n y u n t i k k a n s u s p e n s i s p e s i m e n p a d a hewan p e r c o b a a n mar-
mot d e n g a n d o s i s 0 . 1 - 0 . 2 m l s e c a r a i n t r a m u s k u l e r .
Dewasa i n i i s o l a s i d a n i d e n t i f i k a s i kuman H - a b o r -
t u s d i I n d o n e s i a b e l u n s a m p a i p a d a p e n e n t u a n b i o t i p e . H a l i n i m e n a r i k u n t u k d i k e t a h u i a n t a r a l a i n g u n a mene-
mukan j a w a b a n t e n t a n g (1) H - a b o r t c t s b i o t i p e a p a y a n g
m e n g i n f e k s i t e r n a k s a p 2 d i I n d o n e s i a d a n b a g a i m a n a p e - n y e b a r a n n y a , (2) a p a b i l a b i o t i p e n y a t e l a h d i k e t a h u i
a p a k a h s a m a a t a u b e r b e d a d e n g a n b i o t i p e y a n g a d a d i n e - g a r a a s a l n y a ( a p a b i l a s a p i t e r s a n g k a B r u c e l l o s i s y a n g
a d a d i I n d o n e s i a b e r a s a l d a r i i m p o r ) d a n (3) a p a b i l a
s a p i t e r s a n g k a B r u c e l l o s i s s e b e l u m n y a t e l a h d i v a k s i n a s i
d e n g a n v a k s i n B r u c e l l a a k t i f ( g a l u r 1 9 ) a p a k a h h a 1 t e r -
s e b u t a k i b a t t e r i n f e k s i o l e h kuman y a n g d i p a k a i pembua-
4 P e m e r i k s a a n s e r o l o g i k secara k o n v e n s i o n a l CRBT. SAT d a n C F T ) n e m i l i k i b e b e r a p a k e l e n a h a n . D e n g a n
RBT
t i d a k j a r a n g t e r j a d i r e a k s i s i l a n p d e n g a n a n t i b o d i d a r i b e b e r a p a j e n i s b a k t e r i l a i n ( Y e r s i n i a . B o r d e t e l l a , S a l - m o n e l l a d a n P a s t e u r e l l a ) s e h i n g g a t e r j a d i r e a k s i p o s i - t i f p a l s u . D e n g a n SAT j u g a d a p a t t e r j a d i r e a k s i p o s i - t i f d a n n e g a t i f p a l s u . P o s i t i f p a l s u d a p a t t e r j a d i k a - r e n a a n t i g e n m e n e t a p p a e c a v a k s i n a s i p a d a s a p i d e w a s a . N e g a t i f p a l s u d a p a t t e r j a d i k a r e n a a k t i v i t a s IgG1 s e b a - g a i r e s p o n t e r h a d a p i n f e k s i n e r u p a k a n a g l u t i n a t o r y a n g k u r a n g b a i k d a n m e n u t u p i a k t i f i t a s I g H ( S u t h e r l a n d , 1 8 8 0 ) d a n k a r e n a f e n o n a n a p r o z o n e , y a i t u k o n s e n t r a s i a n t i b o d i y a n g t i n g g i m e l a p i s i p a r t i k e l a n t i g e n s e h i n g g a m e n c e g a h a g l u t i n a s i { T i z a r d , 1 8 8 2 ) . U n t u k n e n g a t a s i p e r n a s a l a h a n d a l a m p e m e r i k s a a n s e r o l o g i k s e c a r a k o n v e n -s i o n a l a n t a r a l a i n p e r l u d i k e m b a n g k a n e e t o d e s e r o d i a g - n o s t i k y a n g l e b i h t e p a t d a n a k u r a t l a g i s e p e r t i d e n g a n ELISA ( V i z c a i n o a n d A l v a r e z , 1 8 8 7 ; T r a p a n d G a u m o n t , 1984).
5 h u b u n g a n a n t a r a t i t e r a n t i b o d i d e n g a n i s o l a s i kuman ( S t e r b a , 1 9 8 4 ; H o r n i t z k y a n d S e a r s o n . 1 9 8 8 ) .
P e n g e n d a l i a n B r u c e l l o s i s s a p i d i l a p a n g a n l e b i h d i t i t i k b e r a t k a n p a d a p e n e k a n a n k a s u s a g a r p e n y a k i t t i d a k n e l u a s d e n g a n m e n g g u n a k a n v a k s i n B r u c e l l a
.
S e d a n g k a n p e n g o b a t a n d e n g a n a n t i b i o t i k p a d a i n d i v i d u maupun k e -l o m p o k j a r a n g m e m b e r i k a n h a s i l y a n g b a i k < B l o o d and' R a d o s t i t s . 1989; R e n n e r a n d McMahon, 1985).
Ada d u a j e n i s v a k s i n B r u c e l l a , y a i t u v a k s i n a k t i f ( g a l u r 1 s ) d a n v a k s i n i n a k t i f ( g a l u r 4 5 / 2 0 d a l a m a d j u - v a n ) . P e n g g u n a a n v a k s i n i n i d i l a p a n g a n t i d a k j a r a n g m e n g u n d a n g p e r m a s a l a h a n . Dengan v a k s i n a k t i f a n t a r a l a i n ( 1 ) d a p a t m e n i m b u l k a n a n t i g e n m e n e t a p t e r u t a m a b i l a d i b e r i k a n p a d a s a p i y a n g s u d a h d e w a s a s e h i n g g a n e n g g a n g g u p e n a f s i r a n h a s i l d i a g n o s i s s e r o l o g i k d a n ( 2 ) k e m u n g k i n a n d a p a t t e r j a d i a b o r t u s b i l a d i b e r i k a n p a d a s a p i b u n t i n g . Dengan v a k s i n i n a k t i f a n t a r a l a i n C I ) k a r e n a d a l a n b e n t u k a d j u v a n d a p a t m e n i m b u l k a n p e n g a r u h t o p i k a l b e r u p a o e d e n a d a n k e b e n g k a k a n . ( 2 ) d i b u t u h k a n d o s i s b e s a r ( p e m b e r i a n h a r u s d i u l a n g ) d a n (3) k e k e b a l a n y a n g d i t i m b u l k a n r e l a t i f t i d a k b e r l a n g s u n g l a m a k u r a n g
l e b i h s e l a m a s a t u t a h u n .
6 A t a s d a s a r p e r n a s a l a h a n - p e r n a s a l a h a n t e r s e b u t d i a t a s n a k a p e r l u k i r a n y a d i t e l i t i b e b e r a p a s i f a t b i o l o - g i k 13. ~ 3 b a t r t 5 i s o l a t l a p a n g .
T u j u a n p e n e l i t i a n i n i a d a l a h u n t u k (1) n e n g e t a h u i b i o t i p e B - a t h c r t ~ c s i s o l a t l a p a n g y a n g m e n g i n f e k s i s a p i d i b e b e r a p a d a e r a h d i I n d o n e s i a . ( 2 ) m e n g e t a h u i b e b e -
r a p a s i f a t p a t o g e n i t a s n y a p a d a hewan p e r c o b a a n m a r t m o t d a n ( 3 ) m e n g e t a h u i r e s p o n marmot t e r h a d a p v a k s i n B r u c e l l a y a n g k e m u d i a n d i t a n t a n g d e n g a n H . ~ ~ . i b u r t c l . ~
i s o l a t l a p a n g .
H i p o t e s i s y a n g a k a n d i u j i d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h (1) b i o t i p e B - a b a r t ~ t s i s o l a t l a p a n g t e r d i r i d a r i b e b e r a p a macam d a n y a n g d o m i n a n a d a l a h b i o t i p e 1 , ( 2 ) b e r d a s a r k a n t i n g k a t v i r u l e n s i n y a k e b a n y a k a n i s o l a t l a p a n g t e r g o l o n g g a l u r v i r u l e n d a n ( 3 ) r e s p o n m a r m o t t e r h a d a p v a k s i n B r u c e l l a y a n g k e m u d i a n d i t a n t a n g d e n g a n
-
a b o r t u s i s o l a t l a p a n g l e b i h b a i k t e r h a d a p v a k s i n a k t i f d a p i p a d a v a k s i n i n a k t i f.
K e g u n a a n p r a k t i s h a s i l p e n e l i t i a n i n i a d a l a h ( 1 ) s e b a g a i d a s a r u n t u k s t u d i e p i d e m i o l o g i B r u c e l l o s i s s a p i , t e r u t a m a p e n e t a a n d a n p e n y e b a r a n p e n y a k i t , < 2 ) n e n g e m b a n g k a n m e t o d e d i a g n o s i s y a n g l e b i h t e p a t t e r u t a m a d e n g a n n e t o d e b a k t e r i o l o g i k d a n s e r o l o g i k d a n
T I N J A U A N PUSTAKA
A - Sejarah Singkat Brucellosis
N a m a B r u c e l l o s i s p e r t a m a k a l i d i k e m u k a k a n o l e h A l i c e E v a n , s e o r a n g m i k r o b i o l o g i w a n b e r k e b a n g s a a n Ame-
r i k a p a d a t a h u n 1918, u n t u k m e n g g a n t i k a n n a m a Demam Malta y a n g d i k e n a l p a d a w a k t u i t u .
B r u c e l l o s i s p a d a m a n u s i a m e m p u n y a i b e b e r a p a s i n o - n i m . B e r d a s a r k a n g e j a l a demamnya d i s e b u t j u g a demam t i f o i d , demam t i f o i d m a l a r i a , demam u n d u l a n s , demam n a - i k t u r u n , demam b e r g e l o m b a n g d a n demam t e r p u t u s - p u t u s . B e r d a s a r k a n d a e r a h g e o g r a f i k p e n y e b a r a n p e n y a k i t d i s e - b u t j u g a demam R o c k a t a u demam G i b r a l t a r , demam M a l t a , demam N e o p o l i t a n , demam S i p r u s d a n demam L a u t T e n g a h ( M a d k o u r , 1 9 8 9 ) . A k h i r - a k h i r i n i V e l l a ( 1 9 8 3 ) m e n y e - b u t n y a s e b a g a i P e n y a k i t P a s u k a n ( T h e C o r p s D i s e a s e ) k a r e n a m e n y e r a n g p a s u k a n I n g g r i s s e w a k t u b e r t u g a s d i M a l t a d e n g a n a n g k a k e s a k i t a n d a n k e m a t i a n y a n g t i n g g i .
Kuman S r u c e l l a p e r t a m a k a l i d i i s o l a s i ole11 K a p t e n S i r D a v i d B r u c e s e o r a n g d o k t e r t e n t a r a I n g g r i s y a n g b e r t u g a s d i Malta p a d a t a h u n 1 8 8 7 . Kuman t e r s e b u t d i - i s o l a s i d a r i l i m p a a n g g o t a t e n t a r a I n g g r i s y a n g m e n i n g - g a l k a r e n a demam M a l t a . P a d a w a k t u i t u kuman p e n y e b a b - n y a d i s e b u t M . i c : r m c c c c ~ c c ; m e l i t e n s i . ; - .
8 m e n g i d e n t i f i k a s i kuman p e n y e b a b a b o r t u s p a d a s a p i y a i t u s e j e n i s kuman y a n g m e m p u n y a i s i f a t p e r t u m b u h a n i n t r a s e l u l e r d a n u n t u k i s o l a s i p e r t a m a d i p e r l u k a n C 0 2 . P a d a w a k t u i t u kuman p e n y e b a b n y a d i s e b u t B 6 3 c i l I ~ 1 5 a b a t - t ~ . ( s d a n u n t u k m e n g e n a n g j a s a B a n g , B r u c e l l o s i s s a p i d i s e b u t j u g a P e n y a k i t B a n g ( N i c o l e t t i , 1 9 8 9 a ) .
A l i c e E v a n p a d a t a h u n 1918 m e l a p o r k a n a d a h u b u n d - a n n o m e n k l a t u r a n t a r a M i c m c o c c u s m ~ e l l t e n s i s d e n g a n E + r c r c e I 1 a a b a r - t r t a , s e h i n g g a i a m e n g a j u k a n nama g e n u s B a c t e r i a c e a e u n t u k k e d u a g e n u s t e r s e b u t m e n j a d i R a c t e - . r . i a c e a e m e 1 .i t e n s i s d a n H a c t e r i a c e a e a b u r t ~ . r s . A k h i r n y a p a d a t a h u n 1920 H e y e r d a n Shaw m e n g g a n t i g e n u s B a c t e - r i a c e a e d e n g a n g e n u s B r u c e l l a , s e h i n g g a t i m b u l nama - 11 m e 1 .i t e r 7 . 5 i s d a n R rr.<ceJ l a t
<
M a d k o u r.
1989). B r u c e l l o s i s p a d a k a m b i n g p e r t a m a k a l i d i l a p o r - k a n o l e h Z a m m i t p a d a t a h u n 1905 k e t i k a i a b e r h a s i l m e n g i s o l a s i H r c r c e l l a m e 1 iten.si.5 d a r i s u s u k a m b i n g y a n g d i d u g a s e b a g a i p e n y e b a b demam m a l t a p a d a m a n u s i a . T r a u m p e r t a m a k a l i m e n g i s o l a s i R 1 ; - c t c e l ; a _ . ; t . . r i 3 p a d a t a h u n
1914 d a r i a n a k b a b i y a n g l a h i r p r e m a t u r d i A m e r i k a S e r i k a t . P a d a t a h u n 1953 B u d d l e d a n B o y e s d i New Z e a -
l a n d s e r t a H a l l d i A u s t r a l i a m e n g i d e n t i f i k a s i F r u c e l I a
a v i s s e b a g a i p e n y e b a b e p i d i d i m i t i s p a d a d o m b a .
9
c a n l s m e r u p a k a n s p e s i e s b a r u , d i i s o l a s i o l e h C a r m i c h a e l p a d a t a h u n 1 9 6 6 d a r i a n j i n g y a n g a b o r t u s d i U n i v e r s i t a s C o r n e l l , A m e r i k a S e r i k a t .
S e j a r a h B r u c e l l o s i s p a d a s a p i d i I n d o n e s i a d i m u l a i s e j a k t a h u n 1 9 2 5 k e t i k a K i r c h n e r b e r h a s i l m e n g i s o l a s i kuman L i r c ~ r e l l a ahorSr~c_c: d a r i j a n i n s a p i y a n g a b o r t u s d i B a n d u n g ( S u d i b y o d a n R o n o h a r d j o , 1 9 8 9 ) . K r a n e v e l d
( 1 9 2 7 ) m e n g i s o l a s i kuman Rrcrce7 i = t . ? t m r d < i i d a r i c a i r a n p e r s e n d i a n l u t u t s a p i y a n g b e n g k a k d i A c e h d a n S u m a t e r a U t a r a . O l e h m a s y a r a k a t s e t e m p a t p e n y a k i t i n i d i s e b u t p e n y a k i t S a n e y a n g s e b e n a r n y a m e r u p a k a n g e j a l a B r u c e l -
l o s i s s a p i . Hannemann y a n g d i k u t i p o l e h K r a n e v e l d ( 1 9 2 7 ) j u g a m e l a p o r k a n t e n t a n g k e j a d i a n p e n y a k i t S a n e p a d a s a p i d i d a e r a h Aceh d e n g a n t a n d a - t a n d a k e b e n g k a k a n s e n d i p a d a s a p i j a n t a n d a n k e g u g u r a n p a d a s a p i b e t i n a . P e m e r i k s a a n s e c a r a s e r o l o g i k t e r h a d a p s e r u m n y a memper- l i h a t k a n r e a k s i p o s i t i f t e r h a d a p F;" --!icir-tl-tc: ( 4 3 d a r i
5 7 s e r a y a n g d i p e r i k s a ) . L o b e l , S c h a a f d a n R o z a ( 1 9 3 8 ) menemukan s a p i r e a k t o r B r u c e l l o s i s ( 0 , 5 7 % ) p a d a s a p i d i G r a t i . P a s u r u a n d a n j u g a m e m p e r o l e h i s o l a t 3 - a b c * r t c r ; - -
d a r i s p e s i m e n k a r k a s .
1 0 k a s u s n y a s e l a l u a d a , s e j a l a n d e n g a n p e n y e b a r a n s a p i - s a p i b i b i t d a r i d a e r a h t e r t u l a r B r u c e l l o s i s ( S u l a w e s i S e l a t a n ) k e b e r b a g a i d a e r a h t r a n s m i g r a s i d i S u n a t e r a d a n K a l i m a n t a n C S e t i a w a n , 1 9 8 1 ) .
8. S i t u a s i B r u c e l l o s i s Sapi D i I n d o n e s i a
B r u c e l l o s i s p a d a s a p i d i I n d o n e s i a l e b i h d i k e n a l d e n g a n nama " K e l u r o n M e n u l a r " k a r e n a s e s u a i d e n g a n ge- j a l a n y a t e r j a d i a b o r t u s ( k e l u r o n ) p a d a t r i w u l a n t e r a k - h i r m a s a k e b u n t i n g a n a t a u p a d a b u l a n k e enam s a m p a i k e s e m b i l a n p e r i o d e k e b u n t i n g a n ( T o e l i h e r e . 1 9 8 5 ) : K e ~ a - d i a n a b o r t u s b e r k i s a r a n t a r a 5 s a m p a i 10% d a l a m s a t u k e l o m p o k t e r n a k , t e r g a n t u n g p a d a j u m l a h t e r n a k y a n g b u n t i n g , t e r n a k y a n g d e w a s a d a n t i n g k a t v i r u l e n s i k u - rnannya ( T o e l i h e r e , l 9 8 5 ) .
P e n y a k i t i n i m e n j a d i m a s a l a h n a s i o n a l k a r e n a ( 1 ) t e l a h m e n y e b a r l u a s k e s e l u r u h p r o p i n s i d i I n d o n e s i a ( s e t i d a k n y a 2 5 p r o p i n s i s u d a h t e r k e n a ) . ( 2 ) a d a kesan s u l i t d i d i a g n o s i s d a n d i o b a t i . < 3 ) m e n g h a m b a t l a j u p e - n i n g k a t a n p o p u l a s i t e r n a k s a p i . ( 4 ) n e n i m b u l k a n k e r u g i - a n e k o n o m i d a n ( 5 ) m e n u l a r k e p a d a m a n u s i a ( z o o n o s i s ) .
11 S e l a t a n k e b e r b a g a i d a e r a h t e r u t a m a k e d a e r a h p e m u k i m a n b a r u d i l o k a s i t r a n s m i g r a s i d i S u m a t e r a d a n K a l i m a n t a n y a n g m e n e r i m a s a p i b i b i t d a r i S u l a w e s i S e l a t a n t e r s e b u t ( G a m b a r 1 ) . D a l a m k a s u s i n i s a p i b i b i t 1010s d a r i p e - n g a m a t a n s e r o l o g i k ( R B T ) d i d a e r a h a s a l n y a , s e k a l i p u n t e l a h d u a k a l i m e n g a l a m i p e m e r i k s a a n s e r o l o g i k d e n g a n h a s i l n e g a t i f ( S e t i a w a n , 1 9 9 1 ) . K a r e n a i n t e r a k s i kuman p e n y e b a b d a n i n d u k s e m a n g a g a k r u m i t , f l u k t u a s i a n t i - b o d i d a l a m d a r a h d a n m a s a i n k u b a s i s a n g a t b e r v a r i a s i ( 2 m i n g g u s a m p a i 8 b u l a n a t a u l e b i h ) , maka t i m b u l m a s a l a h ( t e r j a d i w a b a h ) s e t e l a h t e r n a k t e r s e b u t s a m p a i d i t e m - p a t t u j u a n .
P e n y e b a r a n B r u c e l l o s i s s a p i p e r a h m e n g i k u t i p o l a p e n y e b a r a n b i b i t s a p i p e r a h d a r i J a w a T i m u r a t a u d a r i n e g a r a a s a l n y a ( a p a b i l a s a p i i m p o r ) k e l o k a s i d i m a n a s a p i p e r a h t e r s e b u t d i t e m p a t k a n ( A n o n y m o u s , 1 9 8 1 b ; 1 9 8 2 a ) . S e b a g a i c o n t o h k a s u s p e n y e b a r a n B r u c e l l o s i s s a p i p e r a h d a r i J a w a T i m u r k e b e b e r a p a d a e r a h p r o p i n s i d i , J a w a ( G a m b a r 1 ) .
,
.
-
,
Pola penyebaran Brucellosis sapi potong
.
- j
Pola penyebaran Brucellosis sapi perah
1 3 p a l s u k a r e n a t e r j a d i r e a k s i s i l a n g d e n g a n a n t i b o d i b e - b e r a p a j e n i s kuman l a i n a t a u k a r e n a f l u k t u a s i a n t i b o d i d i d a l a m s e r u m s a p i . P e m e r i k s a a n b a k t e r i o l o g i k u n t u k m e n g i s o l a s i kuman p e n y e b a b n y a j u g a t i d a k m u d a h k a r e n a kuman l e b i h s e r i n g t e r d a p a t d i d a l a m s e l ( i n t r a s e l u l e r f a k u l t a t i f ) d a n j a r a n g b e r e d a r d a l a m d a r a h . Kuman i n i m e m p u n y a i s i f a t d a p a t t u m b u h d a n b e r k e m b a n g d i d a l a m s e l m a k r o f a g d a n mampu m e n g h i n d a r d a r i b a k t e r i o l i s i s m a k r o f a g d e n g a n m e n c e g a h f u s i f a g o s o m l i s o s o m ( E n r i g h t , 1 9 9 0 ) . D e m i k i a n j u g a s i f a t kuman i n i k u r a n g p e k a t e r h a d a p a n t i b i o t i k .
K e r u g i a n y a n g t i m b u l a k i b a t B r u c e l l o s i s s a p i a d a - l a h ( I ) a b o r t u s , b e r u p a h i l a n g n y a a n a k , < 2 ) k e m a t i a n d i - n i p e d e t y a n g d i l a h i r k a n k a r e n a k o n d i s i p e d e t l e m a h d a n r e n t a n t e r h a d a p p e n y a k i t . ( 3 ) g a n g g u a n r e p r o d u k s i b e r u - p a i n f e r t i l i t a s d a n s t e r i l i t a s , ( 4 ) p e n u r u n a n p r o d u k s i s u s u d a n t e n a g a k e r j a d a n (5) h a r g a j u a l s u s u d a n h a r g a j u a l s a p i b i b i t r e a k t o r B r u c e l l o s i s m e n u r u n . K e r u g i a n i n i m e n u r u t t a k s i r a n D i r e k t o r a t K e s e h a t a n Hewan m e n c a - p a i 1 0 m i l y a r r u p i a h p e r t a h u n ( A n o n y m o u s . 1 9 8 1 a ) .
1 4 k a r y a w a n Rumah P e m o t o n g a n Hewan (RPH) D e n p a s a r B a l i ( A n o n y m o u s . 1 9 8 L b ) .
K e j a d i a n B r u c e l l o s i s p a d a s a p i d i I n d o n e s i a a k h i r - a k h i r i n i m e n g a l a m i p e r g e s e r a n d a r i s a p i p e r a h k e s a p i p o t o n g . H a l i n i d i m u n g k i n k a n k a r e n a ( 1 ) u n t u k m e n i n g - k a t k a n m u t u d a n j u m l a h p o p u l a s i s a p i p o t o n g d e n g a n m e n g i m p o r b i b i t s a p i p o t o n g d a r i l u a r n e g e r i , t i d a k m e - n u t u p k e m u n g k i n a n i k u t t e r b a w a p u l a B r u c e l l o s i s s a p i , ( 2 ) p o l a p e n y e b a r a n b i b i t s a p i p o t o n g d a r i d a e r a h t e r - t u l a r ( k a s u s S u l a w e s i S e l a t a n ) k e d a e r a h l a i n y a n g b e - lum t e r t u l a r ( d a e r a h t r a n s m i g r a s i d i S u m a t e r a d a n K a l i - m a n t a n ) , < 3 ) p o l a p e m e l i h a r a a n s a p i p o t o n g t i d a k s e i n - t e n s i f s a p i p e r a h , s e h i n g g a f a k t o r s a n i t a s i d a n h i g i e n e k u r a n g m e n d a p a t p e r h a t i a n d a n memudahkan t e r j a d i p e n u - l a r a n . ( 4 ) t a t a l a k s a n a r e p r o d u k s i a t a u p e n a n g a n a n p e - n y a k i t r e p r o d u k s i p a d a s a p i p e r a h l e b i h mudah d a n l e b i h
i n t e n s i f d i l a k s a n a k a n s e h i n g g a s e t i a p a d a k a s u s mudah d a n c e p a t d i t a n g a n i
.
C . Aspek Bakteriologik B r u c e l l a a k r t u s
H r u c e L l a abortrc-<s a d a l a h s a l a h s a t u d a r i k e 6 s p e s i e s y a n g m e m b e n t u k g e n u s B r u c e l l a d a r i . f a n i l i P a r v o b a c t e r i a c e a e d a n d i k e n a l s e b a g a i p e n y e b a b B r u c e l l o s i s p a d a s a p i . L i m a s p e s i e s l a i n n y a a d a l a h Rrrtcel1 a i ( b a b i ) , Brrtcel i me1 i tens25 ( k a m b i n g )
,
t e r s e b u t d i d a s a r k a n a t a s s i f a t n y a y a i t u n o r f o l o g i k o l o -
n i , k e b u t u h a n s e r u m , lisis o l e h B r u c e l l a p h a g e T b i l i s i , o k s i d a s e d a n u r e a s e < T a b e l 1) ( A l t o n et a l . , 1 9 8 8 ) .
T a b e l 1. P e r b e d a a n s i f a t a n t a r s p e s i e s B r u c e l l a ( A l t o n et d l . , 1 9 8 8 )
llorfolgi Kcbutuhan Oksi Lisis lnduk semang Speries koloni serum dasc Urease Brucella yang disukai
phage Tb
...
8. abortus halus
-
+
+I-+
sapi8. eelitensis halus
-
+
4 taabing8. suis halus
-
+
+
-
babiB. ovis karar
+
-
-
domba8. canis kasrr
-
+
+
-
anj ingB. neotomae halus
-
t+
-
tikusC i r i d a n m o r f o l o g i kuman R - a b o r t u s a d a l a h g r a m n e g a t i f , b e r b e n t u k b a t a n g h a l u s p e n d e k ( k o k k o b a s i l l u s ) .
p a n j a n g 0 , 6 - 1 , 5 m i k r o n d a n t e b a l 0 . 5 - 0 . 7 m i k r o n . t i d a k
b e r s p o r a , t i d a k b e r g e r a k , t i d a k b e r k a p s u l , t e r t a t a t u n g g a l a t a u membentuk r a n t a i p e n d e k t a p i j a r a n g ,
k h e m o o r g a n o t r o p , m e t a b o l i s m e d e n g a n r e s p o n a e r o b i k ,
p a r a s i t p a d a hewan d a n m a n u s i a , k a n d u n g a n G { G u a n i n )
+
C ( C i t o s i n ) DNA b e r k i s a r a n t a r a 5 6 s a m p a i 5 8 molX( P e l c z a r d a n C h a n , 1988).
S i f a t d a n m o r f o l o g i k o l o n i a d a l a h : h a l u s , b u l a t ,
l i c i n , b e r t e p i r a t a , p e r n u k a a n cembung, b e r d i a n e t e r
2
-
4 mm, d i b a w a h s t e r e o m i k r o s k o p p a d a m e d i a DSA b e r - w a r n a s e p e r t i s e t e t e s n a d u ( C o r b e l , 1 9 8 9 ; A l t o n et a l . ,1 6 S i f a t - s i f a t b i o k i m i a n y a a d a l a h m e r e d u k s i n i t r a t m e n j a d i n i t r i t , m e n g h i d r o l i s i s u r e a , m e m b e n t u k k a t a l a - s e , t i d a k m e n c a i r k a n g e l a t i n , t i d a k m e m b e n t u k i n d o l , n e g a t i f t e r h a d a p m e r a h m e t i l d a n n e g a t i f V o g e s P r o s - k a u e r . U n t u k p e r t u m b u h a n n y a d i p e r l u k a n s u h u a n t a r a 2 0 ° s a m p a i 4 0 ° c , s u h u o p t i m a l 3 7 O ~ d a n pH o p t i m a l 6 . 6 - 7 . 4 . W a l a u p u n kuman i n i b e r s i f a t a e r o b , p a d a i s o l a s i p e r t a m a m e m b u t u h k a n 5 - 1 0 % C02 ( C o r b e l , 1 9 8 9 ) . U n t u k m e m b i a k k a n kuman d i p e r l u k a n m e d i a k h u s u s y a n g m e n g a n d u n g v i t a m i n ( t h i a m i n , n i a s i n d a n b i o t i n ) , k a l s i u m p a n t o t e n a t d a n a n t i b i o t i k ( a k t i d i o n , b a c i t r a s i n , p o l i m i k s i n B , n i s t a - t i n ) . P e r t u m b u h a n kuman p a l i n g b a i k p a d a m e d i a y a n g d i p e r k a y a s e p e r t i s a r i h a t i t r y p t o s e a g a r , t r i p t i k a s e s o y , a l b i m i d a n d e x t r o s e s e r u m agar ( D S A ) < R e n e r a n d McMahon, 1 9 8 5 ) .
R. a h t i r t t : ~ m e m i l i k i 9 b i o t i p e ( b i o t i p e 1 s a m p a i b i o t i p e 9 ) . P e r b e d a a n a n t a r b i o t i p e t e r s e b u t d i d a s a r - k a n a t a s , b e b e r a p a s i f a t b i o k i m i a d a n s e r o l o g i k n y a , a n t a r a l a i n k e b u t u h a n C 0 2 , p e m b e n t u k a n H2S, k e p e k a a n t e r h a d a p z a t w a r n a t h i o n i n d a n b a s i c f u c h s i n , a g l u t i n a - s i t e r h a d a p a n t i s e r u m m o n o s p e s i f i k A b o r t u s d a n M e l i t e n - s i s s e r t a d i l i s i s o l e h B r u c e l l a p h a g e T b i l i s i ( A l t o n et a l . , 1 9 8 8 ) ( T a b e l 2 ) .
T a b e l 2 . P e r b e d a a n S i f a t B i o k i n i a d a n S e r o l o g i k d n t a r B i o t i p e H. a b o r t u s CAlton et a l . , 1 9 8 8 ) .
Pertwnbuhan pada Ag lutinasi terhadap
1) 2 ) antiswccm 3 )
B i o t i p e F ' b u - Pro- T h i m i n Etasic F c t c k i n --if i k 8. z t 6 3 r - t ~ ~ t u M ' d u k s i
%
H;?S A B C B C A M1) K o n s e n t r a s i T h i o n i n :
A
=
1: 2 5 . 0 0 0 ; B=
1 : 5 0 . 0 0 0 d a n C=
1 : 1 0 0 . 0 0 02 ) K o n s e n t r a s i B a s i c F u c h s i n : B
=
1: 5 0 . 0 0 0 d a n C=
1 : 1 0 0 . 0 0 03 ) A g l u t i n a s i t e r h a d a p : A
=
a b o r t u s d a nM
=
m e l i t e n s i s+ ( - >
=
b i a s a n y a p o s i t i f ;- / +
= b i a s a n y a n e g a t i fs a m p a i 150 h a r i . D e n g a n m e m u t u s s i k l u s kuman d i l u a r t u b u h i n d u k s e m a n g m e l a l u i u p a y a s a n i t a s i d a n h i g i e n e d a p a t m e n c e g a h d a n m e m b a t a s i p e n u l a r a n p e n y a k i t .
T a b e l 3 . D a y a t a h a n h i d u p kuman B r u c e l l a d i l u a r t u b u h i n d u k s e m a n g ( C r a w f o r d et a:., 1 9 9 0 )
...
T e m p a t S u h u W a k t u
...
S i n a r m a t a h a r i l a n g s u n g T a n a h k e r i n g
T a n a h b a s a h A i r k e r a n A i r s u s u U r i n e F e s e s
C a i r a n a l a t k e l a m i n F o e t u s
E s k r i m M e n t e g a K e j u
. . .
4 . 5 s u h u k a m a r 1 - 2 s u h u k a m a r 2
-
3 s u h u k a m a r 2 - 3 s u h u k a m a r 2 - 4 s u h u k a m a r 2 - 4 s u h u k a m a r 3 - 4k o t a k e s 3 - 4
6 - 8
o O c
18 OC 1 - 2
s u h u k a m a r 2 J a m b u l a n b u l a n b u l a n h a r i h a r i b u l a n b u l a n b u l a n b u l a n b u l a n b u l a n - -
-
- - - -D . P a t o g e n i t a s Bruce1 l a a b o r t u s
19 s e c a r a a l a m j a r a n g a t a u s u l i t t e r j a d i . M a n u s i a t e r i n -
f e k s i kuman B r u c e l l a s e t e l a h minum s u s u s a p i a t a u s u s u
k a m b i n g y a n g t e r i n f e k s i s e b e l u m s u s u t e r s e b u t d i p a s t e u -
r i s a s i t e r l e b i h d a h u l u .
P e n y e b a r a n kuman B r u c e l l a d i d a l a m t u b u h . S e t e l a h
kuman m a s u k k e d a l a m t u b u h m e l a l u i s a l u r a n m a k a n a n k e -
m u d i a n m e n j a l a r m e l a l u i s a l u r a n l i m f e k e l i m f o g l a n d u l a
r e g i o n a l k e n u d i a n k e d u k t u s t h o r a c i c u s d a n a l i r a n
d a r a h . A k h i r n y a kuman m e n y e b a r k e s e l u r u h t u b u h t e r -
u t a m a k e o r g a n r e p r o d u k s i d i b a n t u o l e h z a t a t a u p e -
numbuh y a n g d i s e b u t e r i t r i t o l . D i d a l a m l i m f o g l a n d u l a , h a t i , l i m p a , sumsum t u l a n g d a n b a g i a n l a i n d p r i s i s t e m r e t i k u l o e n d o t e l i a l membentuk b e n j o l a n ( n o d u l g r a n u -
l o m a t o s a ) y a n g d i k e n a l d e n g a n b r u c e r k e l d a n d a l a m
k e a d a a n y a n g l e b i h b u r u k m e n j a d i a b s e s ( H u n g e r f o r d ,
1 9 7 5 ) . S e c a r a h i s t o l o g i k b r u c e r k e l t e r d i r i d a r i s e l -
s e l e p i t e l i o i d d a n s e l - s e l r a k s a s a d e n g a n n e k r o s i s s e n - t r a l d a n f i b r o s i s j a r i n g a n ( J a w e t z et a j . , 1 9 8 0 ) .
J a l a n k e l u a r kuman B r u c e l l a . P a d a b e n t u k i n f e k s i
y a n g a k u t p a d a s a p i b e t i n a s e d a n g b u n t i n g , kuman B r u -
c e l l a b e r s a r a n g d i d a l a m k h o r i o n p l a s e n t a , s a l u r a n p e n - c e r n a a n d a n p a r u - p a r u f o e t u s , maka kuman d a p a t d i k e -
l u a r k a n b e r s a m a - s a m a f o e t u s d a n c a i r a n u t e r u s s e w a k t u
t e r j a d i a b o r t u s . P a d a b e n t u k i n f e k s i menahun p a d a s a p i
2 0 k e l e n j a r s u s u , 1g1. s u p r a m a m a e , 181. r e t r o p h a r i n g e a l i s , l g l . i l i a c a i n t e r n a d a n e x t e r n a . O l e h k a r e n a i t u kuman B r u c e l l a d a p a t d i k e l u a r k a n b e r s a m a a i r s u s u . P a d a s a p i j a n t a n kuman B r u c e l l a b e r s a r a n g d i d a l a m t e s t i s , e p i d i - d i m i s , v a s a d i f e r e n s i a d a n k e l e n j a r v e s i k u l a r i s , s e - h i n g g a kuman d i k e l u a r k a n b e r s a m a s e m e n w a k t u e j a k u l a s i ( B r u n e r d a n G i l l e s p i e , 1977).
F a k t o r - f a k t o r v i r u l e n s i kuman B r u c e l l a . V i r u l e n s i m e r u p a k a n kemampuan kuman u n t u k m e n i m b u l k a n p e n y a k i t a t a u m e n y e b a b k a n t i m b u l n y a k e r u s a k a n j a r i n g a n y a n g p r o g r e s i f . T e r m a s u k k e d a l a m v i r u l e n s i a d a l a h t o k s i - g e n i s i t a s , y a i t u kemampuan m e n g h a s i l k a n t o k s i n d a n d a y a
i n v a s i , y a i t u kemampuan u n t u k m a s u k k e d a l a m j a r i n g a n i n d u k s e m a n g b e r k e m b a n g b i a k d a n m e n y e b a r ( P e l c z a r a n d C h a n , 1 9 8 8 ; B r u b a k e r , 1 9 8 5 ) .
2 1 Kemampuan u n t u k tumbuh d a n b e r k e m b a n g d i d a l a m s e l f a g o s i t ( n e t r o p i l d a n m a k r o f a g ) d i m u n g k i n k a n k a r e n a ku- man i n i d a p a t mengganggu f u s i f a g o s o m l i s o s o m m e l a l u i d e g r a n u l a s i a z u r o f i l d a n g r a n u l a s p e s i f i k s e l n e t r o f i l ( C a n n i n g c:t a l . , 1 9 8 5 ; B e r t r a m e i - I . , 1 9 8 6 ; T i z a r d , 1 9 8 2 ) .
M e k a n i s n e l a i n g a n g g u a n f u s i f a g n s o m l i s o s o m o l e h kuman B r u c e l l a a d a l a h menghambat m e t a b o l i s m e f a g o s i t o - s i s d e n g a n j a l a n mengganggu a k t i f i t a s e n z i m m i e l o p e r o k - s i d a s e s e l n e t r o f i l y a n g b e r f u n g s i d a l a m p r o s e s b i o k i - m i a u n t u k p e n g h a n c u r a n p a r t i k e l , s e h i n g g a d a y a h i d u p kuman d i d a l a m s e l f a g o s i t t i d a k t e r g a n g g u ( F r i e n c h i c k
r t ir l
.
,
1 9 8 5 ; T i z a r d , 1 9 8 2 ) .Kemampuan m e n g g a n g g u f u s i f a g o s o m l i s o s o m d a n t i n g k a t v i r u l e n s i g e n u s B r u c e l l a a n t a r a l a i n d i t e n t u k a n o l e h komponen d i n d i n g s e l y a i t u l i p o p o l i s a k h a r i d a ( L P S ) y a n g d i k e n a l d e n g a n nama k e t o d e o k s i o k t u l o n a t (KDO).
L i p o p o l i s a k h a r i d a I.<- c t f * c > r i .-.5 g a l u r h a l u s l e b i h p a -
t o g e n d a n i m u n o g e n d a r i p a d a LPS
s =
i*i:?r.ri;.:!s g a l u r k a s a r ( K r i s t o v o r o v , 1975; K r e u t z e r et a:., 1 9 7 9 ; R i l e y a n d R o b e r t s o n , 1 9 8 4 ) .2 2 a n t a r a 1 0 0 0 0 0 s a m p a i S O 0 000 ( T a b a t a b a i et a l . , 1 9 7 9 ) . E f e k p a t o f i s i o l o g i k y a n g d i h a s i l k a n o l e h e n d o t o k s i n a d a l a h p l a s e n t i t i s d a n a b o r t u s ( E n r i g h t . 1 9 9 0 ) . E f e k i n i j e l a s t e r l i h a t p a d a hewan p e r c o b a a n m a r m o t y a n g d i - i n o k u l a s i d e n g a n e n d o t o k s i n B r u c e l l a , t e r j a d i k e r u s a k a n pembu l u h d a r a h p a d a p l a s e n t a d a n i s k e m i a , s e h i n g g a t i - d a k d a p a t m e m p e r t a h a n k a n d a n m e m e l i h a r a k e b u n t i n g a n d e - n g a n b a i k . E n d o t o k s i n k a s a r ( e n d o a n t i g e n ) kuman B r u - c e l l a m e n y e b a b k a n a b o r t u s p a d a m a r m o t s e t e l a h 24 s a m p a i 36 j a m d i i n o k u l a s i . D e m i k i a n j u g a p a d a s a p i d a r a y a n g b u n t i n g d a p a t n e n y e b a b k a n a b o r t u s p a d a h a r i k e t i g a s e - t e l a h d i i n o k u l a s i ( E n r i g h t , 1 9 9 0 ) . E n d o t o k s i n j u g a m e m p e n g a r u h i l e u k o s i t u n t u k m e l e p a s k a n p i r o g e n e n d o g e n d a n s e l a n j u t n y a m e r a n g s a n g p u s a t p a n a s d i h i p o t a l a m u s , s e h i n g g a t e r j a d i demam u n d u l a n p a d a o r a n g y a n g t e r - i n f e k s i o l e h kuman B r u c e l l a (demam M a l t a ) ( S t e v e n s o n d a n H u g h e s , 1 9 8 0 ) .
2 3 kuman B r u c e l l a d a n m e n i n g k a t n y a v i r u l e n s i kuman B r u c e l - l a d i d a l a m p l a s e n t a s a n g a t d i d u k u n g o l e h t e r d a p a t n y a e r i t r i t o l d i t e m p a t t e r s e b u t ( M a d k o u r , 1 9 8 9 ) . P a d a s a p i j a n t a n e r i t r i t o l d i t e m u k a n p a d a k e l e n j a r t e s t i s d a n v e - s i k u l a s e m i n a l i s s e h i n g g a kuman B r u c e l l a b a n y a k d i t e m u - k a n p a d a o r g a n t e r s e b u t d a n a k a n d i k e l u a r k a n b e r s a m a s p e r m a w a k t u e j a k u l a s i ( N i c o l e t t i , 1 9 8 0 ) . T i d a k s e m u a g a l u r kuman B r u c e l l a m e n g g u n a k a n e r i t r i t o l , s e p e r t i
5-4- a b c ? r t : . t r = g a l u r 19 t i d a k d a p a t m e m e t a b o l i s m e e r i t r i - t o l , s e h i n g g a k u n a n i n i t e r g o l o n g a v i r u l e n d a n d i g u n a - k a n s e b a g a i b i b i t v a k s i n ( M e y e r , 1 9 8 5 ; P i e t e r s o n et ai
.
,
1987).E. R e s p o n imun t e r h a d a p infeksi R - abortus
K e k e b a l a n a t a u i m u n i t a s a d a l a h s u a t u p r o s e s r u m i t y a n g t e r j a d i d i d a l a m t u b u h a k i b a t r a n g s a n g a n a l a m i a h k a r e n a i n f e k s i kuman p a t o g e n a t a u t e r j a d i s e c a r a b u a t a n s e b a g a i r e s p o n t e r h a d a p v a k s i n a s i ( S y a m s u d i n , 1 9 8 8 ) . K e k e b a l a n m e l i p u t i s u a t u m e k a n i s m e d a l a m t u b u h s e h i n g g a mampu m e n a n g k a l p e m a s u k a n , p e m b i a k a n d a n d a y a p e r u s a k a n d a r i kuman p a t o g e n .
S a p i y a n g t e r i n f e k s i o l e h kuman Z d - a b o r t u s a k a n m e m b e r i k a n r e s p o n imun s e b a g a i u p a y a t u b u h u n t u k meng- a t a s i a t a u m e m p e r t a h a n k a n d i r i d a r i s e r a n g a n kuman t e r - s e b u t . Ada d u a nacam r e s p o n imun y a n g t e r j a d i y a i t u
Respon imun h u r o r a l . Imun i t a s h u m o r a l a d a l a h i n u - n i t a s v a n % d i p e r a n k a n o l e h a n t i b o d i y a n g d i b e n t u k o l e h s e l p l a s m a a t a s r a n g s a n g a n a n t i g e n kuman B r u c e l l a . S e l p l a s m a b e r a s a l d a r i l i m f o s i t B a t a u s e l B y a n g t e r b e n - t u k d a r i s e l p o k o k ( s t e m c e l l ) d i d a l a m sumsum t u l a n g y a n g k e m u d i a n b e r m i g r a s i k e j a r i n g a n l i m f o i d p e r i f e r . P a d a u n g g a s s e l p o k o k a k a n b e r d i f f e r e n s i a s i m e n j a d i s e l B d i d a l a m b u r s a F a b r i c i u s y a n g t e r l e t a k d e k a t k l o a k a . T e r m a s u k j a r i n g a n l i n f o i d p e r i f e r a d a l a h l i m p a , l i m f o - g l a n d u l a p a d a u s u s h a l u s ( p e y e r P s p a t c h e s ) , l i m f o g l a n - d u l a p a d a a p e n d i k s d a n t o n s i l ( R o i t t , 1988).
S e l B p e n u h d e n g a n i m u n o g l o b u l i n p a d a s e l a p u t n y a d a n b e r f u n g s i s e b a g a i r e s e p t o r d a n p e n e r i m a F r a c t i o n c o n s t a n { F c ) y a n g m e r u p a k a n b a g i a n d a r i i m u n o g l o b u l i n . P e n g g a b u n g a n a n t i g e n p a d a i m u n o g l o b u l i n a t a u p e n g g a - b u n g a n k o m p l e k s a n t i g e n a n t i b o d i m e r u p a k a n r a n g s a n g a n u n t u k b e r p r o l i f e r a s i s e l B m e n j a d i s e l p l a s m a , s e l a n - j u t n y a m e m b e n t u k a n t i b o d i ( R o i t t , 1888; S u t h e r l a n d a n d S e a r s o n . 1 9 9 0 ) . A n t i b o d i y a n g d i l e p a s a t a u d i b e n t u k d a p a t d i t e m u k a n d i d a l a n s e r u m . F u n g s i u t a m a n y a a d a l a h p e r t a h a n a n t e r h a d a p i n f e k s i kuman B r u c e l l a ( y a n g e k s - t r a s e l u l e r ) d a n m e n e t r a l i s a s i t o k s i n n y a .
Ada d u a t e o r i p e m b e n t u k a n a n t i b o d i y a i t u (1) t e o r i i n s t r u k t i f d a n (2) t e o r i s e l e k s i k l o n a l .
2 5 a m i n o n y a , t e t a p i o l e h b e n t u k l e k u k a n r a n t a i p o l i p e p t i d a y a n g m e n g e l i l i n g i p e n e n t u a n t i g e n i k d a n a n t i g e n d i p e r - l u k a n s e b a g a i c e t a k a n . T e o r i i n i a k h i r n y a g u g u r s e t e l a h d i k e t a h u i b a h w a s e l - s e l p e m b e n t u k a n t i b o d i t i d a k m e - n g a n d u n g a n t i g e n d a n k e k h u s u s a n n y a d i t e n t u k a n d a r i u r u - t a n a s a m a m i n o n y a ( R o i t t , 1 9 8 8 ; Q u t t e r i d g e . 1 9 8 8 ) .
T e o r i s e l e k s i k l o n n e n g e m u k a k a n b a h w a s e t i a p i n d i - v i d u m e m p u n y a i s e j u m l a h l i m f o s i t y a n g m a s i n g - m a s i n g s a n g g u p b e r e a k s i d e n g a n s a t u j e n i s a n t i g e n . B i l a a d a a n t i g e n m a s u k a k a n m e m i l i h s e l B y a n g m e m i l i k i r e s e p t o r y a n g c o c o k m e l e k a t d a n m e r a n g s a n g s e l B s e h i n g g a b e r d i - f e r e n s i a s i d a n b e r p r o l i f e r a s i m e m b e n t u k k l o n s e l p l a s m a y a n g a k h i r n y a m e m b e n t u k a n t i b o d i s e s u a i d e n g a n a n t i g e n y a n g m e r a n g s a n g n y a ( B u r n e t t , 1 9 5 9 y a n g d i k u t i p o l e h
R o i t t . 1 9 8 8 ) .
A n t i b o d i b e k e r j a t e r h a d a p a n t i g e n D r < r r e : i=.r a t , , . ? i 1 . 1 : ~
m e l a l u i b e b e r a p a j a l u r a t a u f u n g s i y a i t u ( 1 ) m e n e t r a l i - s a s i t o k s i n a t a u h a s i l - h a s i l kuman, ( 2 ) b e r s a m a - s a m a k o m p l e m e n m e n g h a n c u r k a n s e l k u m a n , ( 3 ) m e n a h a n kemampuan i n f e k s i k u m a n . < 4 ) m e n g a g l u t i n a s i kuman s e h i n g g a d a p a t d i f a g o s i t d a n (5) n e n g o p s o n i s a s i kuman s e h i n g g a mudah d i t a n g k a p o l e h s e l f a g o s i t .
2 6
p e n g i n g a t ( m e m o r i e s c e l l ) y a n g j u n l a h n y a b a n y a k d a n
l e b i h p e k a d a n t e r b e n t u k d e t e l a h r e s p o n p r i m e r ( R o i t t .
1 9 8 8 ; S y a n s u d i n , 1 9 8 8 ; T i z a r d , 1 9 8 2 ; Q u t t e r i d g e . 1988). P a d a r e s p o n p r i m e r umumnya k a n d u n g a n I m u n o g l o b u l i n
( 1 s )
M
l e b i h b a n y a k d a r i p a d a I g G . I S M l e b i h cepat m e - n u r u n k o n s e n t r a s i n y a d a r i p a d a IgG k a r e n a b i a s a n y a I g Md a n I g A l e b i h c e p a t d i k a t a b o l i s m e d a r i p a d a I g G .
R e s p o n imun s e l u l e r . I m u n i t a s s e l u l e r a d a l a h imu-
n i t a s y a n g d i p e r a n k a n o l e h s e l - s e l l i m f o s i t T ( s e l T )
s e c a r a k o l e k t i f s e t e l a h m e n d a p a t r a n g s a n g a n a n t i g e n ( B - a b o r t u s ) . D i d a l a m p e r k e m b a n g a n n y a sel T s e n d i r i b e r a - s a l . d a r i s e l p o k o k ( s t e m c e l l ) d i d a l a m sumsum t u l a n g . k e m u d i a n b e r m i g r a s i m e l a l u i d a r a h k e k e l e n j a r t i n u s d a n b e r d i f e r e n s i a s i m e n j a d i l i m f o s i t t i m u s . S e t e l a h m e n j a d i
l i m f o s i t t i m u s b e r m i g r a s i k e d a l a m j a r i n g a n l i m f o i d
p e r i f e r a k h i r n y a m e n j a d i l i m f o s i t T ( s e l
T)
( F u n d e n b e r p e t al.. 1 9 8 2 : W o o l c o c k , 1 9 7 9 ; N i c o l e t t i a n d W i n t e r .1 9 9 0
>
.
Dalam h u b u n g a n n y a d e n g a n k e k e b a l a n s e l u l e r , s e l T b e r e s p o n t e r h a d a p r a n g s a n g a n a n t i g e n (kuman r i r - a b o r t ~ c s ) . S e l T y a n g b e l u m p e k a ( v i r g i n c e l l
T)
a p a b i l a n e n d a p a t r a n g s a n g a n a n t i g e n , a k a n membelah d a n b e r d i f e r e n s i a s in e n j a d i s e l T e f e k t o r . S e l T e f e k t o r b e r p e r a n a k t i f
d a l a m k e k e b a l a n s e l u l e r m e l a l u i t i g a ~ a l u r f u n g s i .
m a s u k k e d a l a m s e l , ( 2 ) m e m b a n t u s e l T l a i n n y a a t a u s e l B b e r e a k s i d e n g a n a n t i g e n , m e n g a k t i f k a n b e b e r a p a j e n i s s e l l i m f o s i t s e p e r t i m a k r o f a g d a n ( 3 ) m e n e k a n r e a k s i s e l T d a n s e l B s e c a r a s p e s i f i k ( B a s t e n d a n M i t c h e l , 1 9 7 6 ; D r u t z d a n M i l l s , 1 9 8 2 ) . K e t i g a f u n g s i t e r s e b u t d i a t a s d i l a k u k a n o l e h t i g a s u b p o p u l a s i s e l T b e r t u r u t - t u r u t
< I )
s e l T s i t o t o k s i k , ( 2 ) s e l T p e n o l o n g a t a u s e l T i n d u k t o r d a n ( 3 ) s e l T s u p r e s o r . S e l T p e n o l o n g d a n s e l T s u p r e s o r d i s e b u t j u g a s e l T p e n g a t u r ( r e g u l a t o r ) k a r e n a b e r f u n g s i m e n g a t u r k e s e i m b a n g a n k e k e b a l a n .S e l T s i t o t o k s i k b i l a b e r h u b u n g a n d e n g a n a n t i g e n a k a n t e r a k t i f a s i m e n j a d i s e l T e f e k t o r , s e l a n j u t n y a a k a n m e l i s i s a n t i g e n s e c a r a s p e s i f i k . P a d a p r o s e s i n i b i a s a n y a s e l s a s a r a n y a n g d i d a l a m n y a a d a a n t i g e n j u g a
i k u t h a n c u r
S e l T p e n o l o n g m e m p u n y a i f u n g s i a n t a r a l a i n ( 1 ) m e n o l o n g s e l B m e n s i n t e s i s a n t i b o d i s e h i n g g a d a p a t b e - r e a k s i d e n g a n a n t i g e n , ( 2 ) m e n o l o n g s e l T s i t o t o k s i k a g a r m e n g e n a l s e l y a n g d i i n f e k s i o l e h kuman B r u c e l l a d a n m e n g a k t i f a s i s u b p o p u l a s i s e l T l a i n . ( 3 ) b e r e a k s i d e n g a n a n t i g e n d e n g a n m e n g h a s i l k a n z a t a t a u f a k t o r p e r - a n t a r a y a n g m e n g a k t i f k a n l e u k o s i t y a n g d i s e b u t l i m f o k i n ( B a s t e n d a n H i t c h e l , 1 9 7 6 ) .
28 b e r l e b i h a n . Ada r e a k s i umpan b a l i k a n t a r a s e l T p e n o -
l o n g d e n g a n s e l T s u p r e s o r s e b a g a i c a r a p e n g a t u r a n i n - t e r a k s i s e l B d a n s e l T .
Peran l i m f o k i n pada i n f s k s i B r u c e l l a . L i m f o k i n a d a l a h z a t a t a u f a k t o r p e r a n t a r a y a n g d i h a s i l k a n s e l T p e n o l o n g b e r u p a p r o t e i n y a n g d a p a t m e n g a k t i f k a n m a k r o f a g s e h i n g g a b e r p e r a n d i d a l a m k e k e b a l a n s e l u l e r . B e b e r a p a j e n i s l i m f o k i n y a n g p e n t i n g a d a l a h ( 1 ) f a k t o r p e n g a k t i f m a k r o f a g ( m a c r o p h a g e a c t i v a t i o n f a c t o r ) y a i t u l i m f o k i n y a n g d a p a t m e n g a k t i f k a n m e t a b o l i s m e m a k r o f a g s e h i n g g a l e b i h g a n a s d a l a m m e m f a g o s i t o s i s a n t i g e n , ( 2 )
f a k t o r p e n g h a m b a t m i g r a s i m a k r o f a g ( m a c r o p h a g e i n h i b i - t i o n f a c t o r ) a d a l a h l i m f o k i n y a n g d a p a t m e n g h a m b a t m i g r a s i m a k r o f a g d a r i t e m p a t i n f e k s i b e r l a n g s u n g y a n g d i p e r l u k a n u n t u k p e r g e r a k a n m a k r o f a g p a d a r e s p o n imun s e l u l e r , ( 3 ) f a k t o r p e r s e n j a t a a n k h u s u s m a k r o f a g ( s p e - c i f i c m a c r o p h a g e a r m i n g f a c t o r ) , a d a l a h l i m f o k i n y a n g d a p a t m e m p e r s e n j a t a i m a k r o f a g s e h i n g g a d a p a t b e r e a k s i d e n g a n a n t i g e n s p e s i f i k d a n ( 4 ) f a k t o r k e m o t a k t i k m a k r o f a g ( m a c r o p h a g e c h e m o t a c t i c f a c t o r ) , a d a l a h l i m - f o k i n y a n g d a p a t m e n a r i k m a k r o f a g k e t e m p a t i n f e k s i b e r l a n g s u n g ( N i c o l e t t i a n d W i n t e r , 1 9 9 0 ) .
2 9 d a n m e l e p a s l i m f o k i n ( s e j e n i s f a k t o r p e n g a k t i f m a k r o f a g d a n f a k t o r p e r s e n j a t a a n k h u s u s m a k r o f a g ) . K e d u a f a k t o r t e r s e b u t a k a n m e n i n g k a t k a n a k t i f i t a s m e t a b o l i s m e s e l m a k r o f a g . L i s o s o n m e m b e s a r , e n z i m h i d r o l i t i k ( l i s o s i m ) m e n i n g k a t j u m l a h n y a s e h i n g g a m a k r o f a g l e b i h g a n a s m e m - f a g o s i t o s i s a n t i g e n . D e n g a n d e m i k i a n t e r j a d i p e n g h a n - c u r a n k u n a n P - a L > n r t u ~ : s e c a r a i n t r a s e l u l e r ( T i z a r d , 1 9 8 2 ; S m i t h a n d P i c h t , 1 9 9 0 ; E n r i g h t , 1 9 9 0 ) .
P . H e w a n P e r c o b a a n M a r m o t
M a r m o t ( C a i , - i a p c : t r - i - P I . J L ! ~ ) t e l a h l a m a d i g u n a k a n s e b a g a i h e w a n p e r c o b a a n s e t i d a k n y a s e j a k t a h u n 1780 ( W a g n e r , 1 9 7 6 ) . Hewan p e c o b a a n i n i m e m p u n y a i b e b e r a p a s i f a t y a n g t i d a k d i m i l i k i o l e h h e w a n p e r c o b a a n l a i n y a i t u t i d a k m e m p u n y a i e k o r m e n o n j o l d a n p a d a w a k t u l a - h i r a n a k m a r m o t n i r i p d e n g a n y a n g d e w a s a y a i t u s u d a h b e r b u l u d a n m a t a s u d a h m e m b u k a . B e b e r a p a k e l e b i h a n
l a i n a d a l a h b e r b a d a n k e c i l , j i n a k d a n m u d a h d i p e l i h a r a , b e r b u l u l i c i n , m e n g k i l a p d a n b e r s i h .
30
b e b e r a p a s i f a t b i o l o g i k kuman B r u c e l l a , s e p e r t i s i f a t p a t o g e n i t a s d a n i m u n o g e n i t a s s e t e l a h d i i n f e k s i d a n d i v a k s i n a s i s e c a r a b u a t a n ( U a l o l e d a n P r a m o n o , 1989; W a g n e r d a n M a n n i n g , 1976).
D i I n d o n e s i a h a n y a a d a s a t u g a l u r m a r m o t , yaitu g a l u r l o k a l , b e r a m b u t p e n d e k d e n g a n t i g a macam w a r n a y a i t u p u t i h , h i t a m d a n c o k l a t . D a t a r e p r o d u k s i m a r m o t b e t i n a a d a l a h d e w a s a k e l a m i n u m u r l i m a s a m p a i e n a m m i n g g u , s i k l u s b i r a h i 15 s a m p a i 1 7 h a r i , l a m a b i r a h i 24 s a m p a i 48 j a m , j u m l a h a n a k p e r k e l a h i r a n d u a s a m p a i l i m a e k o r d a n u m u r s a p i h 2 8 h a r i . D a t a r e p r o d u k s i m a r m o t j a n t a n a d a l a h d e w a s a k e l a m i n d e l a p a n m i n g g u d a n s a t u e k o r p e j a n t a n d a p a t m e n g a w l n i 10 e k o r b e t i n a ( S m i t h d a n M a n g k o e w i d j o j o , 1 9 8 8 ; M a l o l e d a n P r a m o n o , 1 9 8 9 ) .
M a k a n a n m a r m o t b i a s a n y a s a y u r - s a y u r a n , t e t a p i a d a p e r b e d a a n k h u s u s d i b a n d i n g k a n d e n g a n h e w a n p e r c o b a a n l a i n , y a i t u s a n g a t m e m e r l u k a n v i t a m i n C d a n s e r a t k a s a r d a l a m m a k a n a n n y a ( S m i t h d a n M a n g k o e w i d j o j o , 1988).
S e e k o r m a r m o t d e n g a n b e r a t b a d a n 2 5 0 g r a m m e m e r l u k a n t i g a m i l i g r a m v i t a m i n C s e t i a p h a r i d a n s e t e l a h d e w a s a m e m e r l u k a n 8 s a m p a i 10 m g s e t i a p h a r i . S e r a t k a s a r d i b e r i k a n s e b a n y a k 30 s a m p a i 3 5 % . b e r a s a l d a r i p e l l e t k e r i n g , r u m p u t segar a t a u j e r a m i .
BAHAN
DAN CARA
A . Bahan P e n e r i k s a a n < s p e s i m e n )
U n t u k t u j u a n i s o l a s i d i p e r l u k a n b a h a n p e m e r i k s a a n ( s p e s i m e n ) . L o k a s i p e n g a m b i l a n s p e s i m e n d i k a i t k a n d e - n g a n k e g i a t a n s u r v e i a t a u p e n e l i t i a n l a p a n g a n B r u c e l l o - s i s s a p i . T e r b a n y a k d i a m b i l d a r i Rumah P e m o t o n g a n H e - wan ( R P H ) d i J a k a r t a , B o g o r , S u r a b a y a , M a l a n g , B a n j a r M a s i n d a n U j u n g P a n d a n g j u g a d a r i s a p i p o t o n g d a n s a p i p e r a h m i l i k r a k y a t d i d a e r a h J a w a B a r a t , J a w a T i m u r , S u l a w e s i S e l a t a n , K a l i m a n t a n S e l a t a n d a n D K I J a k a r t a .
J e n i s s p e s i m e n y a n g d i p i l i h d a n d i a m b i l a d a l a h l i m f o g l a n d u l a ( l g l . ) t e r u t a m a 1 g 1 . s u p r a m a m m a r i a d a n 1 g 1 . r e t r o f a r i n g e a l i s , a i r s u s u d a n d a r a h .
S e t e l a h s a m p a i d i l a b o r a t o r i u m s p e s i m e n t e r s e b u t d i p r o s e s d a n s e l a n j u t n y a d i b i a k k a n p a d a m e d i a a t a u d i - i n o k u l a s i k a n p a d a m a r m o t u n t u k i s o l a s i d a n i d e n t i f i k a s i i s o l a t m e n u r u t c a r a ( A l t o n , J o n e s , A n g u s a n d V e r g e r , 1 9 8 8 ; C o r b e l , 1 9 8 9 ) .
3. H e d i a
3 3 B.1. M e d i a d e k t r o s e s e r u m agar ( D S A )
D e k s t r o s e s e r u m a g a r s e b a g a i m e d i a b a s a l d i g u n a k a n u n t u k m e m e l i h a r a d a n s u b k u l t u r u n t u k p e n g u j i a n s i f a t b i o k i m i a kuman B r u c e l l a . M e d i a i n i t i d a k d i a n j u r k a n u n t u k m e n g i s o l a s i s p e s i m e n y a n g d i d u g a t e r k o n t a m i n a s i , s e p e r t i d a r i s u s u , p l a s e n t a , l e n d i r v a g i n a d a n s e m e n . K o m p o s i s i d a s a r m e d i a i n i m e n u r u t A l t o n e.:: ~ 1
,
.(1988), t e r d i r i d a r i : A g a r d a r a h b a s e n o . 2 , s e r u m k u d a a t a u s e r u m s a p i , g l u k o s e d a n a i r s u l i n g . C a r a m e m b u a t m e d i a i n i d i s a j i k a n d a l a m L a m p i r a n 4 .8 . 2 . M e d i a a n t i b i o t i k F a r r e l l .
M e d i a i n i m e r u p a k a n m e d i a s e l e k t i f , t e r d i r i d a r i DSA d i t a m b a h b e b e r a p a j e n i s a n t i b i o t l k . P e r t a m a k a l i d i k e m b a n g k a n o l e h F a r e l l , s e h i n g g a d i s e b u t j u g a m e d i a F a r r e l l ( C o r b e l , 1 9 8 9 ; R o b e r t s o n E ' S ~ J . , 1 9 7 7 ) . C a r a
m e m b u a t n y a d i s a j i k a n d a l a m L a m p i r a n 5 . M e d i a i n i d i g u - n a k a n u n t u k i s o l a s i kuman ~ ~? = I ~d a r ~i -s p e s i m e n 1 y a n g t e r k o n t a m i n a s i s e p e r t i : s p e s i m e n d a r i r u m a h p e m o t o n g a n h e w a n . K o m p o s i s i m e d i a i n i t e r d i r i d a r i m e d i a D S A d i - t a m b a h b e b e r a p a a n t i b i o t i k b e r i k u t :
34
B.3.
M e d i a d e k t r o s e g l i s e r o l a g a r (DGA)M e d i a i n i m e r u p a k a n m e d i a d i f e r e n s i a l y a n g d i g u n a - k a n u n t u k n e m b e d a k a n g e n u s B r u c e l l a d e n g a n kuman l a i n . K o n p o a i s i n y a t e r d i r i d a r i :
A g a r d a r a h base No. 2 { O x o i d ) , 40 g r a m G l u k o s e 2 5 % d a l a m g l i s e r o l a i r s u l i n g .
C . B a h a n P e l a r u t dan P e n y a n g g a < B u f f e r )
B a h a n p e l a r u t y a n g d i g u n a k a n a d a l a h NaCl f i s i o l o - g i k s t e r i l u n t u k p e l a r u t s p e s i m e n , m e l e g a s a t a u m e n c u c i kuman B r u c e l l a d a r i m e d i a DSA, p e l a r u t v a k s i n a k t i f H. a b o r t u s g a l u r 1 9 , d a n u n t u k p l a c e b o p a d a p e r c o b a a n i n - f e k s i d a n v a k s i n a s i . N a C l f i s i o l o g i k d i b u a t d e n g a n c a - r a m e l a r u t k a n 8 , s g r a m N a C l d a l a m 1 l i t e r a i r s u l i n g , S e l a n j u t n y a d i t e t a p k a n pH 7 , 2 d a n d i s t e r i l k a n d a l a m a u t o k l a f p a d a s u h u 1 2 0 ~ ~ s e l a m a 15 m e n i t .
N a C l f i s i o l o g i k y a n g m e n g a n d u n g f e n o l ( f e n o l s a - l i n e ) d i b u a t d e n g a n c a r a m e l a r u t k a n 0 , 0 5 % f e n o l d a l a m N a C l f i s i o l o g i k 0 , 8 5 % d i g u n a k a n u n t u k membunuh kuman B r u c e l l a y a n g a k a n d i p a k a i s e b a g a i v a k s i n i n a k t i f , u n - t u k membunuh a n t i g e n d a n p e n g e n c e r s e r u m p a d a p e m e r i k - s a a n s e r o l o g i k s e c a r a SAT d a n C F T .
m e n i t . P B S d i g u n a k a n u n t u k p e l a r u t d a n p e n g e n c e r i s o - l a t , v a k s i n d a n p e r h i t u n g a n k u m a n .
D . A n t i s e r u m Mono S p e s i f i k A dan PI
A n t i s e r u m m o n o s p e s i f i k R.. a b c - i r i . < . ( . : : : d a n IIi- m e 1 1 t + r . - - -
c:.xs d i g u n a k a n u n t u k i d e n t i f i k a s i y a i t u m e m e r i k s a a p a k a h
k o l o n i y a n g t u m b u h p a d a m e d i a D S A k o l o n i kuman r+ - - t , , f -
t c r ' - a t a u b u k a n , d e n g a n m e l i h a t r e a k s i a g l u t i n a s i n y a ,
s e h i n g g a d a l a m w a k t u y a n g s i n g k a t s u d a h d a p a t d i t e n t u k a n . P a d a p e n e n t u a n b i o t i p e j u g a d i g u n a k a n s e - b a g a i s a l a h s a t u u ~ u n t u k m e n e n t u k a n b i o t i p e i Is- 3 ' , : *
f i t c - y a n g d i i s o l a s i ( A l t o n e,t i i . , 1 9 8 8 ) . U n t u k m e n d a -
p a t k a n a n t i s e r u m m o n o s p e s i f i k 5 .:;i;c.;!- tc-ir: d a n E ,TI. .
t ~ 1 - i " i s : d i p e r o l e h d a r
i
L e m b a g a a t a u B a d a n I n t e r n a s i o n a ly a n g m e m p r o d u k s i a n t i s e r u m m o n o s p e s i f i k s e p e r t i Con- n o n w e a l t h S e r u m L a b o r a t o r y < C S L ) d i g u n a k a n s e b a g a i p e r - b a n d i n g a n t e r h a d a p a n t i s e r u m b u a t a n s e n d i r i . A n t i s e r u m t e r s e b u t d i h a s i l k a n d a r i k e l i n c i , s e t e l a h d i i n f e k s i d e -
n g a n ?:i* .-;-t!c:?~i.;.r::. a t a u H - ! n + i i t * = ? - : , ? . d a l a m d o s i s b e r t i n g - k a t . S e r u m d a r i k e l i n c i y a n g m e n g a n d u n g a n t i b o d i R .
cib;?r-tr-<s d i a b s o r b s i d e n g a n s e l B . m ~ i z i i r . i ! k ; i s y a n g t e l a h d i b u n u h d a n d i p a d a t k a n . S e b a l i k n y a s e r u m k e l i n c i y a n g m e n g a n d u n g a n t i b o d i E l . m e l . i t e n s i - : d i a b s o r b s i d e n g a n 23-
3 6
E.
Brucella fage T b i l i e iU n t u k p e n e n t u a n b i o t i p e H. a b o r t u s i s o l a t l a p a n g d i l a k u k a n p e n g u j i a n k e p e k a a n i s o l a t ( l i s i s ) t e r h a d a p B r u c e l l a f a g e T b i l i s i . F a p e i n i d i p e r o l e h d a r i C e n t r a l V e t e r i n a r y L a b o r a t o r y N e w Haw W e y b r i d g e S u r r e y ,
UR.
S e b e l u m n y a f a g e d i p e r b a n y a k p a d a m e d i a d e k s t r o s e s e r u m c a i r y a n g s u d a h n e n g a n d u n g b i a k k a n 33. a b o r t u s s e b a g a i i n d u k s e m a n g . Kemudian d i e n c e r k a n u n t u k menen t u k a n 1 x RTD ( R o u t i n e T e s t D i l u t i o n ) y a i t u p e n g e n c e r a n t e r - a k h i r y a n g m a s i h d a p a t n e l i s i s p e r t u m b u h a n H. a b o r t u sp a d a m e d i a DSA. N i l a i 10 000 x
RTD
d i p e r o l e h d e n g a n c a r a m e n g h i t u n g k e a w a l p e n p e n c e r a n . A p a b i l a 1 x RTD a d a l a h maka n i l a i 10 000 x RTD a d a l a h p a d a a n c e r a nS e l a n j u t n y a u n t u k n e l i h a t s i f a t l i s i s i s o l a t . B r u c e l l a f a g e T b i l i s i 1 x RTD d a n 10 000 x RTD d i t e t e s - k a n p a d a l e n p e n g a g a r b i a k a n H . a b o r t u s .
F. Penentuan Kandungan K u m a n <dosis> untuk Inokulur
B i a k a n s e g a r R - a b o r t c t - s i s o l a t l a p a n g d i g u n a k a n s e b a g a i i n o k u l u n p a d a p e r c o b a a n u n t u k m e n e n t u k a n s i f a t p a t o g e n i t a s d a n s e b a g a i t a n t a n g a n t e r h a d a p m a r m o t y a n g d i b e r i k a n v a k s i n B r u c e l l a . B i a k a n segar H - a b o r t u s i s o -
37
m i r i n g , s u h u d a n l a m a i n k u b a s i s e p e r t i d i a t a s . Kemu- d i a n d i s u s p e n s i d e n g a n 5 m l PBS pH 6 . 4 d a n d i s t a n d a r i -
s a s i a t a u d i s e s u a i k a n k e k e r u h a n n y a d e n g a n t a b u n g BOT ( B r o w n ' s O p a c i t y T u b e ) . D a r i s i n i s u d a h d a p a t d i p e r k i - r a k a n k a n d u n g a n k u m a n n y a . m i s a l n y a BOT No. 1 m e n g a n d u n g kuman 2 x 1 C I 9 / m l d a n m e r u p a k a n l a r u t a n s t o k . S e l a n j u t - n y a d i l a k u k a n p e n g e n c e r a n s u s p e n s i i n o k u l u m d a r i 10-I s a m p a i d e n g a n
lo-'.
P a d a p e n g e n c e r a n 1 0 - I d i p e r k i r a k a n k a n d n n g a n k u m a n n y al o 8
d a n s e t e r u s n y a s a m p a i p e n g e n c e - r a n 1 0 - I . S e t i a p e n c e r a n d i b i a k k a n p a d a m e d i a DSA l e m p e n g d e n g a n m e n e t e s k a n s u s p e n s i kuman d e n g a n m i k r o - p i p e t s e b a n y a k 50 u l , d i d i a m k a n s e h i n g g a s u s p e n s i m e r e - s a p k e d a l a m m e d i a . S e t e l a h d i i n k u b a s i s e l a m a 4 8 j a m , p e r t u m b u h a n kuman d i h i t u n g d e n g a n m e n g h i t u n g k o l o n i y a n g t u m b u h p a d a p e n g e n c e r a n t e r a k h i r d i k a l i k a n d e n g a n f a k t o r p e n g e n c e r ( A l t o n 6sb.? .-:t 7 . , 1 9 8 8 ) . K a n d u n g a n a t a u d o s i s i n o k u l u m i.:. , a h c 3 r - ! - c ; < m . i s o l a t l a p a n g d e n g a n m e l i h a t j u m l a h k o l o n i y a n g t u n b u h ( C o l o n y F o r m i n g U n i t ) p a d a p e n g e n c e r a n a k h i r d i p e r o l e h 4 0 x 10' kuman h i d u p /
