i
SKRIPSI
RISA PUSPITA ISWANDARI
UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI N-HEKSAN AKAR
Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER
SERVIKS (SEL HeLa) DENGAN METODE MTT ASSAY
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2017
iv
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh
Alhamdulillahirrobbil’alamin, segala puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat, nikmat dan pertolonganNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul UJI SITOTOKSISITAS FRAKSI
N-HEKSAN AKAR Jatropha gossypifolia L. TERHADAP SEL KANKER SERVIKS (SEL HeLa) DENGAN METODE MTT ASSAY.
Skripsi ini dikerjakan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:
1. ALLAH SWT yang selalu senantiasa memberikan rahmat dan kasih sayangNya yang berlimpah.
2. Yoyok Bekti P, S.Kep. Ns, M.Kep, Sp.Kom., selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan penulis menuntut ilmu di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
3. Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing I dan Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P. selaku dosen pembimbing II yang dengan sabar meluangkan waktu, tenaga, memberi bimbingan, saran, ilmu dan motivasi kepada penulis sehingga dapat terselesaikannya skripsi ini.
4. Engrid Juni Astuti, S.Farm., M.Farm., Apt dan Andri Tilaqza, M.Farm., Apt selaku Dosen Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan demi kesempurnaan skripsi ini.
5. Nailis Syifa, S.Farm., M.Sc., Apt., selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan dan
v
kemudahan penulis menuntut ilmu di Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.
6. Agustin Rafikayanti S.Farm selaku dosen wali yang telah memberikan nasihat, motivasi, dan kemudahan penulis dari mahasiswa baru sampai mahasiswa tingkat akhir.
7. Bu Rumbi dan Prof. Supargiyono yang telah membantu dan mengarahkan selama proses penelitian di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran UGM.
8. Dosen - dosen yang mengajar di Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang, terimakasih atas ilmu dan pengalamannya yang dibagikan kepada penulis selama menjadi mahasiswa.
9. Keluarga kecilku tercinta dan tersayang Ayah (Sugeng), Ibu (Titik/Rokemah), adik ku (Moh. Azam Nurdiansyah), Masku (Rudi Purwanto) serta Abah & Umi ku (H. Rokim & Hj. Laseh). Terimakasih atas semua yang telah diberikan, dukungan moril dan materi serta doa kalian yang tiada henti selama ini yang membuat kuliah dan skripsi ini Alhamdulillah berjalan lancar.
10. Saudara yang menemani diwaktu pengerjaan skripsi di lamongan (Novita puspita S.H, Sinta A, Isnaini F.W.F, Niken A.) terimakasih atas dukungan dan riwa-riwi nya.
11. Sahabat skripsi seperjuanganku Tria, Irul, Nikmah, Tutut, Fatma. Terimakasih atas bantuan, kerja keras dan kebersamaan yang tercipta diantara kita selama ini. Tak akan terlupakan, sayang dan rindu kalian semua selalu.
12. Sahabat 7S (Apher, Widia, Palah, Zuhro, Imam, Arvad). Terimakasi masih memberikan semangat dan dukungan ketika kita sudah menempuh jalan masing-masing.
13. Sanggar 2B, Bapak Wanta dan Ibu susi. Terimakasih atas bantuan, support, do’a dan dukungannya selama ini.
14. Teman-teman Kelas Farmacy E dan semua angkatan 2013. Terimakasih sudah menjadi teman yang baik selama masa perkuliahan.
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
LEMBAR PENGESAHAN ... ii
LEMBAR PENGUJIAN ... iii
KATA PENGANTAR ... iv
RINGKASAN ... vii
ABSTRAK ... ix
ABSTRACT ... x
DAFTAR TABEL ... xiv
DAFTAR GAMBAR ... xv
DAFTAR LAMPIRAN ... xvi
DAFTAR SINGKATAN ... xvii
BAB I PENDAHULUAN ... 1
1.1 Latar Belakang Masalah ... 1
1.2 Rumusan Masalah Penelitian ... 5
1.3 Tujuan Penelitian ... 5
1.4 Manfaat Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ... 6
2.1 Tinjauan tentang Jarak Merah (Jatropha gossypifolia L.) ... 6
2.1.1 Klasifikasi Tanaman ... 6
2.1.2 Sinonim ... 6
2.1.3 Nama Daerah ... 7
2.1.4 Morfologi Jarak Merah ... 7
2.1.5 Daerah Asal dan Penyebaran Tanaman ... 7
2.1.6 Khasiat ... 8
2.1.7 Kandungan ... 9
2.2 Tinjauan tentang metode Ekstraksi ... 10
2.3 Tinjauan tentang metode Fraksinasi ... 12
2.4 Tinjauan tentang Kanker ... 12
2.4.1 Definisi Kanker ... 12
xii
2.4.3 Proses Karsinogenesis ... 14
2.4.4 Siklus Sel ... 16
2.5 Tinjauan tentang Kanker Leher Rahim (Serviks) ... 17
2.5.1 Definisi ... 17
2.5.2 Anatomi Serviks ... 18
2.5.3 Etiologi ... 18
2.5.4 Faktor Resiko ... 19
2.5.5 Gejala ... 19
2.5.6 Stadium Kanker Serviks ... 20
2.6 Sel HeLa ... 21
2.7 Sel Vero ... 22
2.8 Tinjauan tentang Kultur Sel ... 22
2.9 Tinjauan tentang Terapi Antikanker ... 23
2.9.1 Obat Antikanker yang Diisolasi dari Tanaman ... 24
2.9.2 Tinjauan tentang Doxorubicin... 25
2.9.3 Tinjauan Senyawa Metabolit Sekunder sebagai Antikanker ... 26
2.10 Tinjauan tentang Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay ... 30
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL. ... 32
BAB IV METODE PENELITIAN ... 35
4.1 Bahan Uji ... 35
4.2 Objek Penelitian dan Lokasi Penelitian ... 35
4.3 Bahan Penelitian... 35
4.3.1 Bahan untuk Kontrol Positif ... 35
4.3.2 Bahan untuk Pembuatan Media ... 35
4.4 Alat-Alat Penelitian ... 36
4.4.1 Alat yang digunakan untuk uji sitotoksisitas ... 36
4.5 Variabel Penelitian ... 36 4.5.1 Variabel Bebas ... 36 4.5.2 Variabel Tergantung ... 36 4.6 Metode Penelitian... 37 4.6.1 Rancangan Penelitian ... 37 4.6.2 Kerangka Operasional ... 38 4.7 Pembuatan Media ... 39
xiii
4.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji ... 42
4.8.1 Pembuatan Larutan Induk ... 42
4.8.2 Pembuatan Larutan Uji untuk Sel HeLa ... 43
4.8.3 Pembuatan Larutan Uji untuk Sel Vero ... 43
4.9 Pembuatan Larutan Uji Kontrol Positif (Doxorubicin) ... 44
4.10 Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT ... 44
4.11 Analisis Data ... 46
BAB V HASIL PENELITIAN ... 47
5.1 Persiapan Sel HeLa ... 47
5.1.1 Perhitungan Hasil Kultur Sel HeLa dan Kebutuhan Sel HeLa untuk Pengujian MTT Assay ... 47
5.1.2 Hasil Sitotoksisitas Fraksi N-heksan Akar Jatropha gossypifolia L. Terhadap sel HeLa dengan Metode MTT Assay ... 48
5.2 Persiapan Sel HeLa untuk Doxorubicin ... 48
5.2.1 Perhitungan Hasil Kultur Sel HeLa untuk Doxorubicin Kebutuhan Sel HeLa Pada Doxorubicin untuk Pengujian MTT Assay ... 48
5.2.2 Hasil Sitotoksisitas Doxorubicin Terhadap Sel HeLa dengan Metode MTT Assay ... 49
5.3 Persiapan Sel Vero ... 49
5.3.1 Perhitungan Hasil Kultur Sel Vero dan Kebutuhan Sel Vero untuk Pengujian MTT Assay ... 49
5.3.2 Hasil Sitotoksisitas Fraksi N-heksan Terhadap Vero dengan Metode MTT Assay ... 50
5.4 Data Hasil Uji Sitotoksisitas Fraksi N-heksan Akar Jatropha gossypifolia L., Doxorubicin Terhadap % Viabilitas Sel dan Fraksi Etanol Terhadap Sel Vero ... 50
5.5 Analisis Data ... 52
BAB VI PEMBAHASAN ... 53
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ... 59
7.1 Kesimpulan ... 59
7.2 Saran ... 59
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
II.1 Indeks Polaritas Pelarut ... 11 II.2 Penentuan Stadium Kanker Serviks menurut FIGO ... 20 IV.1Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Serviks HeLa dalam Tiap Percobaan..43 V.1 Data Hasil Uji Sitotoksisitas Fraksi Etanol Akar Jatropha gossypifolia L.,
Doxorubicin Terhadap % Viabilitas Sel dan Fraksi N-heksan Terhadap Sel Vero dengan Metode MTT Assay. ... 51
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Jatropha gossypifolia L. dan Akar Jatropha gossypifolia L. ... 6
2.2 Proses Karsinogenesis ... 15
2.3 Siklus Sel ... 16
2.4 Serviks ... 17
2.9 Struktur Kimia Doxorubicin ... 25
3.1 Skema Kerangka Konseptual ... 32
4.1 Skema Kerangka Operasional ... 38
4.2 Perhitungan Sel ... 42
5.1 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi Fraksi N-heksan Akar Jatropha gossypifolia L., Doxorubicin Terhadap % Viabilitas Sel HeLa, dan Sel Vero ... 52
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Daftar Riwayat Hidup ... 69
2. Surat Pernyataan... 70
3. Surat Determinasi ... 71
4. Sertifikat Kultur Jaringan ... 72
5. Proses Ekstraksi Pembuatan Fraksi N-Heksan Akar Jarak Merah (Jatropha Gossypifolia L.) ... 73
6. Hasil Identifikasi Klt Golongan Senyawa Ekstrak N-Heksana Akar Jatropha Gossypifolia L. (Rahmaniyah,2016) ... 74
7. Data Hasil Pembacaan Elisa Reader ... 76
8. Gambar Kondisi Sel Setelah Penambahan Larutan Uji Dan Reagen MTT ... 77
9. Hasil Perhitungan Konsentrasi Fraksi N-Heksan Akar Jatropha Gossypifolia L. Dan Doxorubixin. ... 80
10. Hasil Perhitungan Sitotoksisitas Fraksi N-Heksan Akar Jatropha Gossypifolia L. Dan Doxorubicin Terhadap Sel Hela Dan Sel Vero ... 82
11. Analisa Probit Fraksi N-Heksan Akar Jatropha Gossypifolia L. Terhadap Sel Vero ... 84
12. Analisa Probit Fraksi N-Heksan Akar Jatropha Gossypifolia L. Terhadap Sel Hela ... 85
13. Analisa Probit Kontrol Positif Doxorubicin ... 86
xvii
DAFTAR SINGKATAN
ACS = American Cancer Society
AIDS = Acquired Immunodeficiency Syndrom ATCC = American Type Culture Collection
C = Celcius
CCRC = Cancer Chemoprevention Research Center
CO2 = Karbon Dioksida
CRUK = Cancer Research United Kingdom DCIS = Ductal Carcinoma In Situ
Depkes RI = Departemen Kesehatan Republik indonesia DMSO = Dimethyl Sulfoxide
DNA = Deoxyribose Nucleic Acid EDTA = Ethylene Diamine Tetra Acid
ELISA = Enzyme-linked Immunosorbent Assay FBS = Fetal Bovine Serum
FeCl3 = Besi (III) Klorida
FHAJG = Fraksi N-heksan Akar Jatropha gossypifolia L.
FIGO = International Federation of Gynecologists and Obstetricians
G1 = Gap 1
G2 = Gap 2
HCL = Asam Klorida HeLa = Henrietta Lacks
HPV = Human Papilloma Virus IC50 = Inhibitory Concentration 50 KLT = Kromatografi Lapis Tipis KOH = Kalium Hidroksida LAF = Laminar Air Flow
M = Mitosis
MCF-7 = Michigan Cancer Foundation – 7
xviii
MK = Media Kultur
ml = Mililiter
mm = Milimeter
MTT = Microculture Tetrazolium Salt
NaHCO3 = Natrium Bikarbonat
NaOH = Natriom Hidroksida
NCI = National Cancer Institute PBS = Phospat Buffer Salin Riskesdas = Riset Kesehatan Dasar
S = Sintesis
SDS = Sodium Dedosil Sulfat
SPSS = Statistic Program for Social Science WHO = World Health Organization
60
DAFTAR PUSTAKA
ACS (American Cancer Society). 2014. Cancer Facts and Figure 2014. Atlanta : American Cancer Society Inc.
Adams, T., Anwar, R., Mfarej, M., Rundatz, T., Coyle, M., Jacqueline, S., Mclaughlin., 2015. Nutritional Stress of Cultured Vero Cells Causes
Altered Growth and Morphology as Seen in Neoplastic Transformation.
American Journal of Undergraduate Research.
Aggarwal, R.M., Ahanger y, M.A., Tomar, N.S., 2014. Jatropha Curcas : An Overview, In : P. Plants Under Changing Environment. Springer. NY. p. 361-383.
Aiyelaagbe, O. O., Hamid, A. A., Fattorusso, E., Taglialatela-Scafati, O., 2011. Cytotoxic Activity of Crude Extracts as well as of Pure Components fromJatropha Species, Plants Used Extensively in African Traditional Medicine. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine,
Volume 2011 Hal. 1 – 7.
Akter, S., D’Ambra, J., & Ray, P., 2013. Development and validation of an
instrument to measure user perceived service quality of mHealth. Information & Management, 50(4), 181-195.
Anggorowati, L., 2013. Faktor Risiko Kanker Payudara Wanita. Jurnal Kesehatan
Masyarakat. Vol. 8 No. 2. P. 121-126.
Arifah, I. S., Khasanah, K., Lidy, D., & Pandapotan, H., 2015. Kombinasi Ekstrak Temu Putih (Curcuma Zedoaria) Dan Bawang Putih (Allium Sativum L.) Terhadap Aktivitas Sel Limfoma Dengan Metode Mtt Assay. Khazanah:
Jurnal Mahasiswa, 7(2).
Arisusilo cahyawati. 2012. Kanker Leher Rahim (Cancer Cervix) Sebagai
Pembunuh Wanita Terbanyak Di Negara Berkembang. Malang. Vol.1 no.1,
p. 112.
Aryanti., 2004. Isolasi Senyawa Antikanker Dari Tanaman Keladi Tikus (Typhonium
Divaricatum L. Decne). Jurnal Bahan Alam Indonesia. Vol. 3 No. 2,
pp.1412-2855.
ATCC (American Type Culture Collection). 2011. MTT Cell Proliferation Assay
Intruction Guide. USA.
Basmal, J., Amini, S., Sugiyono, Murniyati,, 2009. Jakarta: Seminar Nasional
61
Boik, John., 2001 Natural coumpound In Cancer therapy, Avenue North: Oregon Medical pree, LCC. Hal 16-17
Bowles, E.J., Wellman, R., Feigelson, H.S., Onitilo, A.A., Freedman, A.N., Delate, T., Allen, L.A., Nekhlyudov, L., Goddard, K.A., Davis, R.L., Habel, L.A., Yood, M.U., McCarty, C., Magid, D.J. and Wagner, E.H. 2012. Risk of heart failure in breast cancer patients after anthracycline and trastuzumab treatment: a retrospective cohort study. Journal of the National Cancer Institute. Vol. 104 No.17. pp.1293-1305.
Campbell MK, Farrell SO. 2003. Biochemistry. 4th ed. UK, London: Thomson Learning Inc.,; Hal 272-3.
Cancer Research UK., 2014. Cervical cancer risk factors. London: Cancer Research UK. Diakses melalui http://www.cancerresearchuk.org/health- professional/cancer-statistics/statistics-by-cancer-type/cervical-cancer/risk-factors#heading-Six pada tanggal 16 januari 2017
Cancer Research Uk., 2014. What is cervical cancer. London: Cancer Research UK. Diakses melalui http://www.cancerresearchuk.org/about-cancer/type/cervical-cancer/about/the-cervix pada tanggal 16 januari 2017.
Cavalli, Franco., Kaye, S.B., Hansen, H.H., Armitage, J.O., Piccart-Gebhart, M.J., 2009. Textbook of Medical Oncology Fourth Edition. United Kingdom : Informa Healthcare Ltd.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Prosedur Tetap Uji
Sitotoksik Metode MTT. Yogyakarta:Fakultas Farmasi, UGM.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2014. Kanker. Yogyakarta :
Fakultas Farnasi Universitas Gadjah Mada.
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/kanker/. Diakses tanggal 15 januari 2017 CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2014. Protokol. Yogyakarta :
Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada. http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id/wp-content/uploads/03.010.02-uji-sitotoksik-MTT.pdf. Diakses pada tanggal 15 januari 2017
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2014. Sel HeLa. Farmasi UGM. Diakses melalui http://ccrc.farmasi.ugm.ac.id/?page_id=1224 pada tanggal 14 januari 2017
Chen, M., Zhao, Z., Yu, S., 2016. Cytotoxity and Apoptosis Effects of Polyphenols from Sugar Beet Molasses on Colon Carcinoma Cells in Vitro. International
62
Chrestella, Dr. Jessy. 2009. Neoplasma. Departemen Patologi Anatomi. Medan:
Fakultas kedokteran Universitas Sumatera Utara.
Dalimartha., Setiawan, 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker. Jakarta: Penebar Swadaya. Hal : 1-6
DEPKES RI (Departemen Kesehatan Republik Indonesia). 2000. Parameter
Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Direktorat Jenderal
Pengawasan Obat dan Makanan Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. Dewi, Amalia., 2013. Peranan Reactive Oxygen Species (ROS) dari Mitokondria
Pada Resistensi Silang (Cross-Resistance) Antara Radiasi dan Docetaxel.
Program Studi Magister IKM Universitas Padjajaran.
Diananda, Rama. 2007. Mengenal Seluk-Beluk Kanker. Jogjkarta: Katahati. Hal 19, 65-108.
Djajanegara, I., Wahyudi, P., 2009. Pemakaian Sel Hela Dalam Uji Sitotoksisitas
Fraksi Kloroform Dan Etanol Ekstrak Daun Annona Squamosal. Jakarta
pusat. Vol 7 (1) : 7-11.
Djoronga, M.I., Pandingan,D., Kandou, F.E.F., Tangapo, A.M.,2014. Penapisan Alkaloid Pada Tumbuhan Paku dari Halmahera Utara. Jurnal Mipa Unsrat
Online. Vol 3, pp 102-107
Falodun, A., Xiang, Q. S., Parkinson, G., Gibbons, S., 2012. Isolation and Characterization of A New Anticancer Diterpenoid from Jatropha gossypifolia.
Pharmaceutical Chemistry Journal, Vol. 45 No. 10 hal. 636 – 639.
Febriansah, R., Bintang, D., Hardika, D. S., Prabaningrum, D., Hadi, D. B., & Oktafiyani, N.(2012). Kajian secara In Vitro Ekstrak Etanolik Buah Morinda citrifolia L. sebagai Agen Khemopreventif Kanker Payudara yang Potensial. Jurnal Mutiara Medika. Vol.12 No.3 pp.155-162.
Felix – Silva, J., Giordani, R. B.., da Silva-Jr, A. A., Zucolotto, S. M., 2014. Jatropha
gossypiifolia L. (Euphorbiaceae): A Review of Traditional Uses,
Phytochemistry, Pharmacology, and Toxicology of This Medicinal Plant: Review Article. Hindawi Publishing Corporation: Evidence-Based
Complementary and Alternative Medicine Volume 2014 p. 1- 32.
Fessenden, R. J., Fessenden, J., 1997. Dasar – dasar Kimia Organik. Alloysius Hadyana Pudjaatmaka (Penerjemah). Jakarta: Bina Aksara.
Fitriana, N. A., Ambarini, T. K., 2012. Kualitas Hidup pada Penderita Kanker Serviks yang Menjalani Pengobatan Radioterapi. Jurnal Psikologi Klinis dan Mental.
63
Vol.1 No. 02, Departemen Psikologi Klinis dan Kesehatan Mental Fakultas Psikologi Universitas Airlangga.
GLOBOCAN, 2012. Cancer Incidence, mortality and prevalence worldwide http://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_cancer.aspx. Diakses tanggal 8 November 2014.
Gopalakrishnan, G., 2015. Anti-Proliferative and cytotoxic effects of Azima tetracantha Lam. On cervical cancer cell line (HeLa) and human peripheral lymphocyte (HPL). Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. Vol. 4, No. 4, p.161-164.
Gunawan. 2011. Farmakologi dan Terapi, Edisi 5. Jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
Hanahan, D., Weinberg, R.A., 2000. The Hallmarks of Cancer : Cell. Cell, Vol.
100, 57–70, January 7, 2000, Cell Press Elsevier Inc.
Haryoto., Indrayudha, P., Azizah, T., Suhendi, A., 2013. Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Tumbuhan Sala (Cynometra ramiflora Linn) Terhadap Sel HeLa, T47D, dan WiDr. Jurnal Penelitian Saintek. Vol. 18 No. 2 p.21-28.
Hassan, S.M., 2008. Antimicrobial Activity of Saponin-Rich Guar Meal Extract.
Texas: Texas A&M University.
Huang, M., Lu, J. J., Huang, M. Q., Bao, J. L., Chen, X. P., & Wang, Y. T., 2012. Terpenoids: natural products for cancer therapy. Expert opinion on
investigational drugs. Vol. 21 No. 12. pp.1801-1818.
IARC (International Agency for Research on Cancer)., 2005. IARC Handbooks of
Cancer Preevention Volume 10: Cervix Cancer Screening. IARC Press.
Lyon.
Inthe, M.G., Tarman, Kustriariyah., Safitrhri, Mega., 2014. Fraksinasi Protein Kapang Laut Xylaria psidii KT30 dan Sitotoksisitasnya Terhadap Sel HeLa.
Jurnal Teknologi dan Industri Pangan Vol. 25 No. 1.
Jain, Sachin., Choudhary, G,P., Jain, D.K., 2013. Pharmacological Evaluation and Antifertility Activity of Jatropha gossypifolia in Rats. Hindawi Publishing
Corporation : BioMed Research International Volume 2013 p. 1-5.
Juanda, D., & Kesuma, H., 2015. Pemeriksaan Metode IVA (Inspeksi Visual Asam Asetat) untuk Pencegahan Kanker Serviks. Jurnal Kedokteran dan
64
Katzung., Bertram, G., 1997. Farmakologi Dasar dan Klinik, Edisi Ke 6. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta : 737-741.
KEMENKES RI (Kementrian Kesehatan Republik Indonesia)., 2015. Panduan
Pelayanan Klinis Kanker Serviks. Cetakan pertama. Jakarta : Komite
Nasional Penanggulangan Kanker.
Kinho, julianu s., Arini, D., Tabba, supratman., Kama, H., Kafiar, Y., Shabri, S., & Karundeng, M. C., 2011. Tumbuhan Obat Tradisional Di Sulawesi Utara Jilid I. Manado: Balai Penelitian Kehutanan Manado Badan Penelitian dan
Pengembangan Kehutanan Kementrian Kehutanan.
Kintzios, S. E., Barberaki, M. G., 2004 Plants and Cancer in Plants that Fight Cancer. Editor : Spiridon E. Kinzios dan Maria G Barberaki. Florida, AS:
CRC press LCC.
Kumar, A., Sharma, S., 2008. An evaluation of multipurpose oil seed crop for industrial uses (Jatropha curcas L. ): a review. Industrial Crops and Products No. 28, p. 1–10.
Lasut, E., Rarung, M., Suparman, E., 2015. Karakteristik Penderita Kanker
Serviks Di Blu Rsup Prof. Dr. R. D. Kandou. Manado. Vol 3 (1) : 84.
Levy, S. A., Carley, Kay-Shanna., 2012. Cytotoxic Activity of Hexana Extracts of Psidium Guajava L. (Myrtaceae) and Cassia Alata L (Caesalpineaceae) in Kasumi-1 and OV2008 Cancer Cell Lines. Tropical Journal of
Pharmaceutical Research. Vol. 11, No. 2, p. 201-201.
Lisdawati,Vivi., Sumali, Wiryowidagdo, L., dan Broto, S. Kardono., 2007. “Isolasi dan Elusidasi Struktur Senyawa Lignan dan Asam Lemak Dari Ekstrak Daging Buah Phaleria Macrocarpa”. Jurnal dan Buletin Penelitian Kesehatan;
Puslitbang Biomedis dan Farmasi Badan Litbangkes. Vol. 35.
Lumongga, F., 2008, Invasi Sel Kanker. Medan: Departemen Patologi Anatomi,
Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.
Ma’at, Suprapto., 2011. Teknik Dasar Kultur Sel. Surabaya : Airlangga University Press.
Mardiyaningsih, Ana., Ismiyati, N., 2014. Cytotoxic Activity of Ethanolic Extract of
Persea americana Mill. Leaves On HeLa Cervical Cancer Cell. Traditional
Medicine Journal. Vol. 19, No. 1. P. 24-28.
Marraskuranto, E., Fajarningsih, N. D., Januar, H. I., & Wikanta, T., 2008. Aktivitas antitumor (HeLa dan T47D) dan antioksidan ekstrak makroalga hijau Ulva
65
fasciata. Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan. Vol. 3 No. 2, p. 107-112.
Masithoh, S., Mirani, Erna., Sumarawati, T., 2011. Pengaruh Ekstrak Daun Mimba (Azadirachita indica) Terhadap Pertumbuhan Sel HeLa Penelitian In vitro Pada Sel HeLa Kanker Serviks. Semarang : Universitas Islam Sultan Agung. Maulidyah, T., 2015. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanol Akar Jarak Merah (Jatropha
gossypifolia L) terhadap Kanker Serviks (Sel HeLa) dan Sel Vero dengan Metode MTT Assay. Malang : Skripsi Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Medicinenet, 2016. Cervical cancer. Diakses melalui http://www.medicinenet.com /cervical_cancer/page2.htm. Diakses pada tanggal 16 januari 2017.
Melannisa, R., 2004. Pengaruh PGV-1 Pada Sel Kanker Payudara T47D yang Di induksi 17ᵦ-Estradiol: Kajian Antiproliferasi, Pemacuan Apoptosis dan Antiangiogenesis, (Tesis). Program Pasca Sarjana Universitas Gadjah
Mada, Yogyakarta.
Meskin, M.S., Bidlack, W.R., Davies, A.J., Omaye, S.T., 2002. Phytochemicals in nutrition and health. CRC Press LLC. Boca Raton, Florida. p. 46-60.
Minotti, G., Menna, P., Salvatorelli, E., Cairo,G., and Gianni, L., 2004. Anthracyclins: Molecular Advances and Pharmacologic Developments in Antitumor Activity and Cardiotoxicity. Pharmacol Rev. Vol. 56, p.185-228. Misgiyanto., Susilowati, D., Hubungan Antara Dukungan Keluarga Dengan Tingkat
Kecemasan Penderita Kanker Serviks Paliatif. Jurnal Keperawatan, Vol.5, No. 1, p. 01 – 15.
Mukhriani., 2014. Ekstraksi, Pemisahan Senyawa, dan Identifikasi Senyawa Aktif.
Jurnal Kesehatan. Vol. 7 No. 2, hal. 361-367.
Munandar, A., Mustopa, Z.A., Tarman, K., Nurhayati, T., 2015. Aktivitas
Antikanker Protein Kapang Xylaria Psidii Kt30. Serang Banten. Vol. 5 No. 1
: 65-70.
Muti, P,. Agnoli, C., Berrino, F., Abagnato, C. A., Panico, S., Crosignani, P., & Krogh, V., 2010. Metabolic syndrome and postmenopausal breast cancer in the ORDET cohort: a nested case–control study. Nutrition, Metabolism and
Cardiovascular Diseases. Vol. 20 No. 1, p.41-48.
Nafrialdi, dan Ganiswara, S., 2007, Antikanker, dalam Ganiswara, S., Setiabudy R., Suyatna, F.D., Purwantyastuti, Nafrialdi, (Eds), Farmakologi dan Terapi, edisi ke-5, Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran UI, Jakarta, 732.
66
NCI (National Cancer Institute). 201. What you Need to Know About Cervical
Cancer. US: Departement of Health and Human Service.
Novita, D., 2013. Eksplorasi Senyawa Metabolit Sekunder dari Ascidian Didemnum sp. untuk Senyawa Antikanker. Jatinagor: Skripsi Program Studi Ilmu
Kelautan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran.
Nugroho A.E., Ikawati M., PutriD.D.P., Meiyanto E., 2011. Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract Fraction of Indonesia Plant Ficus septic Burm. F. on Human Breast Cancer T47D cell lines. International Journal of Phytomedicine No;3 page 216-226.
Nurlaila, Ika dan Hadi, Miftachul., 2008. Kanker : Pertumbuhan, Terapi, dan
Nanomedis. (www.nano.lipi.go.id/artikel).
Nwodo, U et al., 2010. Effects of Fractionation on Antibacterial Acitivity of Crude Extratc of Tamarindus Indica. African Journal of Biotechnology. Vol. 9. No.24. P. 7108-7113.
Pubchem, 2016. Doxorubicin. Diakses melalui https:// pubchem .ncbi. nlm.nih.gov/compound/443939#section=Top. Diakses pada tanggal 16 januari 2017
Puspitasari dkk, 2015Syaifuddin, M., 2007. “Gen Penekan Tumor p53, Kanker dan Radiasi Pengion”. Bulletin Alara. Vol. 8 (3) : 119-128.
Puspitasari, R.L., Sardjono, C.T., Setiawan, Boenjamin., Sandra, Ferry., 2008. Kultur Menjadi Sel Neuron Dengan Medium Bebas Serum Embryonic Stem Cell.
Stem Cell Division, Stem Cell and Cancer Institute Vol. 35. No. 6. Jakarta.
Rahman, P.K.S.M. Greenwell, M. 2016 Medicinal Plants : Their Use in Anticancer Treatment. Europe PMC Funders Group.
Rahmawati, E., Sukardiman, S., & Muti, A. F. (2013). Aktivitas Antikanker Ekstrak N-Heksana Dan Ekstrak Metanol Herba Pacar Air (Impatiens Balsamina Linn) Terhadap Sel Kanker Payudara T47d. Media Farmasi, 10(2).
Rai, Kranti., Tiwari, ela., 2012. Epidermal Studies in Identification of Jatropha
Species. Vol. 2. PP 41-51. India.
Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M. and Moore, P.K., 2003. Pharmacology. 5th Ed.
Sydney : Churchill Livingstone.
Rasjidi, I Dr. dr. SpOG(K). Onk., 2009. Epidemiologi Kanker Serviks. Indonesia
67
Riss, T.L., Minor, L., Moravec, R.A., Niles, A.L., 2013. Cell Viability Assays. Assay
Guidance Manual. Promega Corporation.
Santos, R.V.T., Caperuto, E.C., de Mello, M.T. and Rosa, L.F. 2010. Effect of doxorubicin on cytokine production by lymphocytes and the Th1/Th2 balance.
Biomedicine and Pharmacotherapy 64: 579–581.
Sarker SD, Latif Z, & Gray AI. 2006. Natural products isolation. In: Sarker SD, Latif Z, & Gray AI, editors. Natural Products Isolation. 2nd ed. Totowa (New Jersey). Humana Press Inc. hal. 6-10, 18.
Sarker, S.D., Latif, Z., Gray, A.I., 2006. Natural Products Isolation. Edisi ke-2. Humana Press.
Septiana, A. T., & Asnani, A. (2012). Kajian sifat fisikokimia ekstrak rumput laut coklat Sargassum duplicatum menggunakan berbagai pelarut dan metode ekstraksi. Jurnal Agrointek. 6(1).
Sharma, Veena., Paliwal 1, R., Janmeda, P., Sharma, S., 2012. Chemopreventive Efficacy of MoringaOleifera Pods Againts 7, 12-Dimethylbenz[a]anthrance induced Hepatic Carcinogenesis in Mice. Asian Pacific Journal of Cancer
Prevention. Vol.13. Hal 2563 – 2569.
Singh, Harneet., Sharma, Kr. Surendra., 2013. Antidiabetic Activity of Jatropha
gossypifolia Linn Root Extracts In Alloxan Induced Diabetic Mice. Moksha
Publishing House. ISSN 2230-8407. p. 211.
Siswandono, Soekardjo,B., 2000. Kimia Medisinal Edisi ke-2. Surabaya; Airlangga University Press, hal 163-183.
Sudewo, B., 2012. Basmi Kanker dengan Herbal. Jakarta:Visimedia.
Susilowati, Sri., Claresa, Anggun., Arifin, Ibrahim., 2012. Uji Sitotoksisitas Fraksi N-Heksana Ekstrak Etanol Herba Alfalfa (Medicago sativa L.) Pada Sel T47D dan Sel Hela Serta Identifikasi Kandungan Senyawa Kimianya. Jurnal Ilmu
Farmasi & Farmasi Klinik. Vol.9 No.2 P. 1693-7899.
Suwiyoga, I.K., 2003. Penanganan nyeri pada kanker serviks stadium lanjut. Jurnal
Studi Jender SRIKANDI. Vol. 3(1).
Syaifuddin, M., 2007. “Gen Penekan Tumor p53, Kanker dan Radiasi Pengion”.
Bulletin Alara. Vol. 8 (3) : 119-128.
Syata, I.Y., Thaha, I.L.M., & Ansar, J. 2014. Pola Pencarian Pengobatan Pada Penderita Kanker Serviks Di Rumah Sakit Labuang Baji Dan Rumah Sakit Ibnu Sina Kota Makasssar.
68
Tacar, O., Pornsak, S., Dass, R.C., 2012. Doxorubicin : An Update On Anticancer Moleculer Action Toxicity and Novel Drug Delivery Systems. Journal of
Pharmacy and Pharmacology. Vol. 65, p. 157-170.
Thorn, C.F., Oshiro, C., Marsh, S., Boussard-Hernandez, T., McLoed, H., Klein, E.T., Altman, B.R., 2011. Doxorubicin Pathways : Pharmacodyanamics and Adverse Effects. Published : Pharmacogenet Genomics. Vol. 21 No. 7, p. 440-446.
Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007. Obat-Obat Penting ; Kasiat, Penggunaan, dan
Efek-Efek Sampingnya. Edisi Keenam. Cetakan Pertama. Jakarta : PT. Elex
Media Komputindo. Hal. 225.
Triwulanningsih, Endang., Toelihere, M.R., . Rutledge, J.J., T.L.Yusuf., Purwantara, B., Diwyanto, K., 2001. Oosit, Hormon Gonadotropin Selama Pematangan. Produksi Embrio In Vitro Dengan Modifikasi Waktu Dan. Jurnal Ilmu Ternak
Dan Veteriner. Vol.6 No.3 P. 171-177.
Turalely, R., Hadanu, R., Mahulete, F., 2012. Uji Aktivitas Sitotoksik dan Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Kapur (Harmsiopanax aculeatus harms). Prosiding
InSINas. Hal. 98 – 103.
Vignesvaran, V., 2015. Tingkat Pengetahuan Dengan Perilaku Deteksi Dini Kanker Serviks Pada Wanita Usia Subur di Puskesmas Padang Bulan. Medan. Karya
Tulis Ilmiah. Universitas Sumatera Utara.
Wahyuni S.F., Firnando. E., Husni. E., 2013. Kajian Efek Sitotoksik Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Asam Kandis (Garcinia cowa Roxb.) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D Dengan Metode Microtetrazolium (MTT). Prosiding
Seminar Nasional Perkembangan Terkini Sains Farmasi dan Klinik III 2013, ISSN: 2339-2592. Hal.78-81.
WHO., 2015. Traditional Medicine. Diakses melalui
http://www.who.int/dg/speeches/2015/traditional-medicine/en/ pada tanggal 15 januari 2017.
Winarno, E. 2011. Uji Sitotoksisitas Ekstrak Kapang Aspergillus sp. Terhadap
Sel Kanker Payudara T47D. Depok : Skripsi Program Studi Sarjana Biologi
Universitas Indonesia.
Witantri, R.G., Ruspendi, E.C.A., Saputro, D.S., 2015. Keanekaragaman Pohon Berpotensi Obat Antikanker di Kawasan Kampus Kentingan Universitas Sebelas Maret, Surakarta, Jawa Tengah. PROS SEM NAS MASY BIODIV
