LAMPIRAN B. Komposisi Media Pertumbuhan, Media Uji dan Larutan yang Digunakan dalam Penelitan
Isolasi Bakteri Proteolitik
Karakterisasi Morfologi Koloni dan Sel
Uji Aktivitas Protease
Optimasi pH dan Suhu
1. Komposisi media agar susu skim (Widhyastuti dan Dewi, 2001) yang
dimodifikasi.
Media agar susu skim (pH 6,5) mengandung 20 g susu skim dan 24 g agar per
liter. 20 g susu skim dilarutkan dalam 400 ml aquadest kemudian dipasteurisasi.
Sebanyak 24 g agar ditambah 600 ml aquadest, disterilkan dan dicampur dengan
larutan susu pada waktu masih panas.
2. Pembuatan pereaksi Lowry
a) Pereaksi Lowry A
Larutan 1: Sebanyak2 g Na2CO3
Larutan 2: Sebanyak 0,5 g CuSO
dilarutkan dalam 100 ml NaOH 0,1N.
4.5H2
Sebanyak 50 ml larutan 1 dicampurkan dengan 1 ml larutan 2.
O dilarutkan dalam 100 ml
K-Na-tartrat 1%.
b) Pereaksi Lowry B
Pereaksi Folin Ciocalteu dilarutkan dalam akuades (1:1).
3. Komposisi media produksi menurut Fitri et al.(2005) yang dimodifikasi.
Komposisi media modifikasi yaitu: Nutrient Broth (pepton dari daging 0,5% dan
ekstrak daging 0,3%) 0,8 %, Tripton 1 %, glukosa 0,5 % dan CaCl2 0,1 %.
1. Desa Penen, Kecamatan Sibiru-Biru, Kabupaten Deli Serdang
2. Desa Semangat Gunung, Kecamatan Merdeka, Kabupaten Karo
4. Kondisi Suhu dan pH Lokasi Pengambilan Sampel
Lokasi Suhu air (o C) pH
Desa Penen 53,0-53,4 6,2-6,4
Desa Semangat Gunung 48,2-48,5 4,5-5,1
Desa Sipoholon 53,8-54 6,3-6,5
Isolat
Ulangan I Ulangan II Ulangan III
Rata-Rata DH : Diameter Hidrolisis
Lampiran E. Kurva Standar Bouvin Serum Albumin
Konsentrasi BSA Absorbansi
0.06 0.28760
Diperoleh persamaan : Y= 0,2135 + 1,29558X y = 1.2965x + 0.2114
Lampiran F. Aktivitas Enzim Pada Berbagai pH dan Suhu
Tabel 4.5.1 Aktivitas protease kasar isolat terpilih pada berbagai interval pH
Isolat Aktivitas (Unit/ml) pada Interval pH
4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0
Bacillus sp. KW05 4.09 6.21 7.23 9.56 12.67 15.5 13.78 10.43 7.09
Bacillus sp. SQ01 7.65 10.28 13.51 11.25 8.67 6.86 3.48 2.54 1.65
Bacillus sp. WR02 3.09 9.72 12.34 14.59 16.75 38.01 25.76 21.15 7.45
Tabel 4.6.1 Aktivitas protease kasar isolat terpilih pada berbagai interval suhu
Isolat
Aktivitas (Unit/ml)
