Institutional Repository | Satya Wacana Christian University: Optimalisasi Proses Produksi Sirup Stevia Secara Fermentasi dengan Starter Madu Sebagai Minuman Anti Diabetes

(1)

Lampiran 1.

Optimasi Larutan Starter

Waktu

Absorban, λ = 675 nm

pengenceran 10x

T-0; 2.5%

-

T-0; 5%

0,575

T-0; 7.5%

0,140

T-0; 10%

0,077

T-1; 2.5%

0,413

T-1; 5%

0,269

T-1; 7.5%

0,178

T-1; 10%

0,158

T-2; 2.5%

0,570

T-2; 5%

0,441

T-2; 7.5%

0,359

T-2; 10%

0,509

T-3; 2.5%

0,738

T-3; 5%

0,609

T-3; 7.5%

0,528

T-3; 10%

0,389

T-4; 2.5%

0,773

T-4; 5%

0,608

T-4; 7.5%

0,682

T-4; 10%

0,439

T-5; 2.5%

0,779

T-5; 5%

0,721

T-5; 7.5%

0,804

T-5; 10%

0,802

T-6; 2.5%

0,834

T-6; 5%

0,708

T-6; 7.5%

0,795

T-6; 10%

0,742

T-7; 2.5%

0,870

T-7; 5%

0,697

T-7; 7.5%

0,852

T-7; 10%

0,837

T-8; 2.5%

0,871

T-8; 5%

0,756

T-8; 7.5%

0,836

T-8; 10%

0,902

Waktu

Absorban, λ = 675 nm

pengenceran 25x

T-9; 2.5%

0,418

T-9; 5%

0,389

T-9; 7.5%

0,420

T-9; 10%

0,497

T-10; 2.5%

0,480

T-10; 5%

0,288

T-10; 7.5%

0,468

T-10; 10%

0,698

T-11; 2.5%

0,565

T-11; 5%

0,493

T-11; 7.5%

0,590

T-11; 10%

0,680

T-12; 2.5%

0,484

T-12; 5%

0,517

(2)

Lampiran 2.

Hasil Kadar Steviosida Secara HPLC

Massa; Waktu Fermentasi

y

x

Kadar Steviosida (%)

H-0; 50 gr

235738

4508,08

0,45

H-2; 100 gr

568013

10259,77

0,51

H-4; 50 gr

547766

9909,30

0,99

H-4; 200 gr

567465

10250,29

0,26

H-6; 300 gr

782263

13968,44

0,23

Minuman Stevia Optimal

40445

1127,75

4,51

a.

Perhitungan Kadar Steviosida (H-0; 50 gram) :

y

= 577,7x – 24694

235738

= 577,7x – 24694

x

= 450,808

x

= 450,808 x faktor pengenceran

x

= 450,808 x 10

x

= 4508,08 µg/mL

massa

xvolume

kadar



4508

,

08

g

mL

x

kadar

4508

,

08



50

08

,

4508



6

10

08

,

4508





x

kadar

(3)

b.

y

= 577,7x – 24694

568013

= 577,7x – 24694

x

= 1025,977

x

= 1025,977 x 10

x

= 10259,77 µ g/mL

massa

xvolume

kadar



10259

,

77

g

mL

x

kadar

5129

,

88



100

50

77

,

10259



6

10

88

,

5129





x

kadar

%

51

,

0

(%)

kadar



c.

y

= 577,7x – 24694

547766

= 577,7x – 24694

x

= 990,930

x

= 990,930 x 10

x

= 9909,30 µg/mL

massa

xvolume

kadar



9909

,

30

g

mL

x

kadar

9909

,

30



50

30

,

9909



6

10

30

,

9909





x

kadar

(4)

d.

y

= 577,7x – 24694

567465

= 577,7x – 24694

x

= 1025,029

x

= 1025,029 x 10

x

= 10250,29 µ g/mL

massa

xvolume

kadar



10250

,

29

g

mL

x

kadar

2562

,

25



200

50

29

,

10250



6

10

25

,

2562





x

kadar

%

26

,

0

(%)

kadar



e.

Perhitungan Kadar Steviosida (H-6; 300 gram):

y

= 577,7x – 24694

782263

= 577,7x – 24694

x

= 1396,844

x

= 1396,844 x 10

x

= 13968,44 µ g/mL

massa

xvolume

kadar



13968

,

44

g

mL

x

kadar

2328

,

07



300

50

44

,

13968



6

10

07

,

2328





x

kadar

(5)

f.

Perhitungan Kadar Steviosida Minuman Stevia Optimal:

y

= 577,7x – 24694

40445

= 577,7x – 24694

x

= 112,773

x

= 112,773 x 10

x

= 1127,73 µg/mL

massa

xvolume

kadar



1127

,

75

g

mL

x

kadar

45109

,

2



50

2000

73

,

1127



6

10

2

,

45109





x

kadar

(6)

Lampiran 3.

Data Hasil Uji in vivo Perhitungan AUC

-45-180

Pengulangan 1 :

Dosis pemberian (massa rata-rata = 20 gram)

Standar :

max

Mencit 1 : 31,34 g

→

, 0,5 = 0,78

(Akuabides)

Mencit 2 : 32,76 g

→

, 0,5 = 0,82

(Sirup”X”)

Mencit 3 : 36,98 g

→

, 0,5 = 0,92

(Minuman Stevia 5%)

Mencit 4 : 37,74 g

→

, 0,5 = 0,94

(Minuman Stevia 12,5%)

Mencit 5 : 36,96 g

→

, 0,5 = 0,92

(Minuman Stevia 20%)

Kadar sirup stevia :

a.

Sirup stevia 12,5%

12,5 mL dalam 1000 g BB

0,47 mL / 37,74 g BB

0,47 mL / 0,94 mL

5 mL / 10 mL (5 mL sirup stevia dalam 10 mL akuades)

b.

Sirup stevia 5%

5 mL dalam 1000 g BB

0,19 mL / 36,98 g BB

0,19 mL / 0,94 mL

2,02 mL / 10 mL (2,02 mL sirup stevia dalam 10 mL akuades)

c.

Sirup stevia 20%

20 ml dalam 1000 g BB

0,74 mL / 36,96 g BB

0,74 mL / 0,94 mL

(7)

Hasil Spektrofotometri -45

Waktu (menit)

Absorban (λ = 546 nm)

Mencit 1

Mencit 2 Mencit 3 Mencit 4 Mencit 5

Standar

0'

0,011

0,008

0,01

0,009

0,085

0,102

10'

0,021

0,016

0,017

0,127

0,115

20'

0,035

0,023

0,024

0,021

0,138

0,119

30'

0,048

0,026

0,039

0,026

0,149

0,139

40'

0,119

0,076

0,098

0,067

0,175

0,158

50'

0,114

0,145

0,103

0,121

0,218

0,219

60'

0,122

0,132

0,112

0,203

0,246

Hasil Spektrofotometri 45

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

0,006

0,005

0,011

0,008

0,002

0,149

10'

0,013

0,010

0,021

0,013

0,009

0,158

20'

0,023

0,017

0,022

0,019

0,003

0,165

30'

0,059

0,071

0,030

0,037

0,017

0,181

40'

0,115

0,110

0,067

0,089

0,055

0,230

50'

0,145

0,139

0,114

0,126

0,145

0,253

60'

0,183

0,159

0,142

0,149

0,172

0,297

Waktu (menit)

(8)

Waktu (menit)

Mencit 1

Mencit 2 Mencit 3 Mencit 4 Mencit 5 Standar

0'

0,003

0,006

0,009

0,004

0,110

0,136

10'

0,008

0,015

0,020

0,008

0,111

0,146

20'

0,016

0,020

0,019

0,010

0,123

0,145

30'

0,023

0,033

0,036

0,013

0,135

0,160

40'

0,044

0,060

0,097

0,037

0,153

0,196

50'

0,088

0,105

0,132

0,049

0,150

0,237

60'

0,123

0,137

0,135

0,095

0,133

0,279

Kadar Glukosa

Waktu (menit)

Mencit 1

Mencit 2 Mencit 3

Mencit 4 Mencit 5

-45'

77,08

95,14

84,72

77,78

92,36

45'

119,59

104,05

88,51

92,27

114,86

90

77,44

87,22

78,19

45,85

57,89

180

83,92

91,61

88,11

57,89

30,07

Perhitungan AUC

-45-180

menggunakan program Graph 4.3 :

Akuabides

: 2,0553 x 10

4

Sirup “X”

: 2,1322 x 10

4

Minuman stevia 5%

: 1,9036 x 10

4

Minuman stevia 12,5%

: 1,5693 x 10

4

Minuman stevia 20%

: 1,7177 x 10

4

Perhitungan % PKGD :

Sirup “X”

=

100

%

3

,

74

%

10

0553

,

2

10

1322

,

2

10

0553

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 5%

=

100

%

7

,

38

%

10

0553

,

2

10

9036

,

1

10

0553

,

2

4 4 4





x

=

100

%

23

,

65

%

10

0553

,

2

10

5693

,

1

10

0553

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 20%

=

100

%

16

,

43

%

10

0553

,

2

10

7177

,

1

10

0553

,

2

4 4 4





x

Pengulangan 2 :

(9)

Mencit 1 : 42,15 g

→

, 0,5 = 1,05

(Akuabides)

Mencit 2 : 38,86 g

→

, 0,5 = 0,97

(Sirup”X”)

Mencit 3 : 36,88 g

→

, 0,5 = 0,92

(Minuman Stevia 5%)

Mencit 4 : 36,14 g

→

, 0,5 = 0,90

Mencit 5 : 34,54 g

→

, 0,5 = 0,86

a.

Sirup stevia 12,5%

b.

Sirup stevia 5%

c.

Sirup stevia 20%

(10)

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

-0,001

-0,007

-0,002

0,093

0,102

10'

0,009

-0,002

0,001

0,002

0,112

0,106

20'

0,012

0,001

0,005

0,010

0,122

0,111

30'

0,017

0,020

0,030

0,008

0,124

0,140

40'

0,053

0,026

0,050

0,021

0,129

0,170

50'

0,099

0,094

0,086

0,049

0,135

0,205

60'

0,118

0,113

0,121

0,105

0,131

0,223

Hasil Spektrofotometri 45

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

0,007

0,002

0,096

0,003

0,085

0,100

10'

0,016

0,009

0,123

0,004

0,107

0,108

20'

0,015

0,007

0,130

0,006

0,119

0,120

30'

0,035

0,013

0,132

0,018

0,130

0,143

40'

0,049

0,023

0,135

0,049

0,127

0,190

50'

0,066

0,054

0,133

0,082

0,130

0,214

60'

0,140

0,125

0,236

0,136

0,131

0,223

Waktu (menit)

(11)

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

0,009

0,007

0,002

0,011

0,108

0,210

10'

0,012

0,013

0,006

0,013

0,118

0,207

20'

0,016

0,018

0,011

0,024

0,129

0,227

30'

0,036

0,029

0,025

0,037

0,132

0,246

40'

0,091

0,059

0,030

0,137

0,275

50'

0,104

0,078

0,062

0,091

0,131

0,309

60'

0,135

0,105

0,109

0,125

0,130

0,318

Kadar Glukosa

Waktu (menit)

Mencit 1

Mencit 2 Mencit 3

Mencit 4 Mencit 5

-45'

98,35

99,17

101,65

88,43

34,17

45'

108,13

100

115,45

108,13

37,40

90

113,39

115,45

104,46

94,64

16,07

180

116,67

90,74

99,07

105,56

26,85

Perhitungan AUC

-45-180

Akuabides

: 2,4683 x 10

4

Sirup “X”

: 2,2657 x 10

4

Minuman stevia 5%

: 2,3885 x 10

4

Minuman stevia 12,5%

: 2,2425 x 10

4

Minuman stevia 20%

: 0,6319 x 10

4

Perhitungan % PKGD :

Sirup “X”

=

100

%

8

,

04

%

10

4683

,

2

10

2657

,

2

10

4683

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 5%

=

100

%

3

,

06

%

10

4683

,

2

10

3885

,

2

10

4683

,

2

4 4 4





x

=

100

%

8

,

99

%

10

4683

,

2

10

2425

,

2

10

4683

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 20%

=

100

%

74

,

35

%

(12)

Pengulangan 3 :

Standar :

max

Mencit 1 : 43,73 g

→

, 0,5 = 1,09

(Akuabides)

Mencit 2 : 41,11 g

→

, 0,5 = 1,03

(Sirup”X”)

Mencit 3 : 39,08 g

→

, 0,5 = 0,98

(Minuman Stevia 5%)

Mencit 4 : 37,62 g

→

, 0,5 = 0,94

Mencit 5 : 32,81 g

→

, 0,5 = 0,82

a.

Sirup stevia 12,5%

2,02 mL / 10 mL (2 mL sirup stevia dalam 10 mL akuades)

b.

Sirup stevia 5%

c.

Sirup stevia 20%

7,98 mL / 10 mL (8 mL sirup stevia dalam 10 mL akuades)

(13)

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

-0,002

0,002

0,003

-0,008

0,090

0,073

10'

0,001

0,004

-0,006

0,110

0,074

20'

0,023

0,002

0,007

-0,005

0,118

0,117

30'

0,070

0,019

0,029

0,002

0,119

0,136

40'

0,102

0,043

0,087

0,032

0,122

0,172

50'

0,121

0,081

0,122

0,073

0,126

0,187

60'

0,128

0,121

0,133

0,119

0,124

0,193

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

0,013

0,010

0,009

0,006

0,100

0,166

10'

0,016

0,011

0,013

0,123

0,206

20'

0,022

0,033

0,016

0,030

0,131

0,246

30'

0,041

0,085

0,036

0,047

0,132

0,274

40'

0,089

0,122

0,066

0,075

0,134

0,260

50'

0,128

0,137

0,104

0,095

0,134

0,231

60'

0,146

0,142

0,131

0,123

0,136

0,208

Waktu (menit)

(14)

Waktu (menit)

Mencit 1

Standar

0'

0,014

0,004

0,011

0,016

0,121

0,131

10'

0,025

0,007

0,021

0,023

0,136

0,192

20'

0,029

0,012

0,022

0,021

0,131

0,254

30'

0,040

0,017

0,039

0,027

0,136

0,253

40'

0,062

0,015

0,060

0,033

0,134

0,288

50'

0,095

0,046

0,092

0,061

0,139

0,284

60'

0,151

0,133

0,138

0,129

0,139

0,276

Kadar Glukosa

Waktu (menit)

Mencit 1

Mencit 2 Mencit 3

Mencit 4 Mencit 5

-45'

108,33

100,00

108,33

105,83

30,00

45'

123,15

122,22

112,96

108,33

33,33

90

119,64

108,04

111,61

101,79

31,25

180

87,26

82,16

80,89

71,97

11,47

Perhitungan AUC

-45-180

Akuabides

: 2,5200 x 10

4

Sirup “X”

: 2,3750 x 10

4

Minuman stevia 5%

: 2,3683 x 10

4

: 2,2191 x 10

4

Minuman stevia 20%

: 0,6228 x 10

4

Perhitungan % PKGD :

Sirup “X”

=

100

%

5

,

75

%

10

45200

,

2

10

3750

,

2

10

5200

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 5%

=

100

%

6

,

02

%

10

45200

,

2

10

3683

,

2

10

5200

,

2

4 4 4





x

=

100

%

11

,

93

%

10

4683

,

2

10

2191

,

2

10

4683

,

2

4 4 4





x

Minuman stevia 20%

=

100

%

75

,

29

%

(15)

Rata-rata % PKGD dari 3 ulangan :